检索结果-南通市图书馆

食品与发酵工业 2008年第5期34卷 128-133页

作者：阎金勇闫云君华中科技大学生命科学与技术学院教育部分子生物物理重点实验室

白地霉脂肪酶因具有独特的底物特异性,在油脂改性等领域有着广泛应用。文中概述了白地霉脂肪酶的发酵生产、分离纯化、克隆与表达、底物特异性分子机理及应用等,并展望其未来发展方向,为该工业催化剂的研发与广泛应用提供参考。

关键词：白地霉脂肪酶分离纯化表达底物特异性应用

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量子点成像的新研究进展

分析化学 2006年第10期34卷 1491-1495页

作者：张海丽刘天才王建浩黄振立赵元弟骆清铭华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室湖北省生物信息与分子成像重点实验室生命科学与技术学院武汉430074

量子点(又称纳米荧光颗粒)在生物学研究中特别是在生物医学成像方面的应用,已引起广泛关注。通过荧光成像可观察量子点标记分子与其靶标的相互作用,实时观测其在活细胞及活体中的运行轨迹,实现对细胞水平及在体层次的研究。本文综述了... 详细信息

量子点(又称纳米荧光颗粒)在生物学研究中特别是在生物医学成像方面的应用,已引起广泛关注。通过荧光成像可观察量子点标记分子与其靶标的相互作用,实时观测其在活细胞及活体中的运行轨迹,实现对细胞水平及在体层次的研究。本文综述了近两年量子点在光学成像中应用的新进展,展望了其应用前景。

关键词：量子点纳米荧光颗粒荧光成像评述

双顺反子表达技术在线虫神经元钙成像中的应用(英文)

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生物化学与生物物理进展 2014年第5期41卷 515-519页

作者：张海宁黄文明杨松徐涛华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室武汉430074 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101

在线虫中,钙成像技术已被广泛用于检测不同神经元的活性.然而,对于准确记录爬行中的活体线虫神经元钙信号仍然存在许多挑战,其中一个困难即来自于标记目标神经元。在同一个目标神经元中共同表达基因编码的钙指示蛋白和常量参考值荧光蛋... 详细信息

在线虫中,钙成像技术已被广泛用于检测不同神经元的活性.然而,对于准确记录爬行中的活体线虫神经元钙信号仍然存在许多挑战,其中一个困难即来自于标记目标神经元。在同一个目标神经元中共同表达基因编码的钙指示蛋白和常量参考值荧光蛋白常常具有无法共表达的不确定性.另外,光谱的串扰影响存在于目前最常用的绿色钙指示蛋白系列G-CaMP与其参考值荧光蛋白DsRed系列之间,光谱的串扰有时会给信号记录带来假阳性结果.综上所述,本文首次提出应用双顺反子表达技术用于同一神经元的双蛋白标记,这不仅提高了共表达效率,更简化了线虫神经元标记的工作量.同时,本文还首次采用mKate2,一种与G-CaMP没有串扰的红色荧光蛋白作为参考量.以上改进已在感觉神经元ASH中得到验证.希望本文提出的方法能给线虫神经回路的研究提供一个更为方便、有效的途径.

关键词：双顺反子钙成像秀丽隐杆线虫

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紫杉醇生物合成途径中羟化酶的研究进展

生物工程学报 2016年第5期32卷 554-564页

作者：陈清浦廖卫芳付春华赵春芳余龙江华中科技大学生命科学与技术学院生物技术系湖北武汉430074 华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室湖北武汉430074

紫杉醇是一种从红豆杉植物中提取的具有显著抗癌效果的萜类化合物,但在红豆杉中含量很低,难以满足日益增长的临床需求。近年来,利用合成生物学技术建立新的紫杉醇来源途径已成为研究热点。目前,紫杉醇合成相关酶基因大部分已被克隆和鉴... 详细信息

紫杉醇是一种从红豆杉植物中提取的具有显著抗癌效果的萜类化合物,但在红豆杉中含量很低,难以满足日益增长的临床需求。近年来,利用合成生物学技术建立新的紫杉醇来源途径已成为研究热点。目前,紫杉醇合成相关酶基因大部分已被克隆和鉴定,但其中羟化酶基因的发现与应用仍是目前研究的热点和难点。本文对紫杉醇生物合成途径研究进展进行了综述,对其中羟化酶的克隆及功能研究体系进行了重点深入分析,最后探讨了本领域未来的研究方向并对其前景进行展望,以期为紫杉醇合成途径中未知羟化步骤的羟化酶基因克隆,以及利用合成生物学技术实现紫杉醇的大量生产提供依据。

关键词：紫杉醇生物合成羟化酶研究进展

弱酸性家蝇蛆抗菌肽MD_(7095)的分离纯化及性质研究

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微生物学报 2006年第3期46卷 406-411页

作者：陆婕汪俊汉钟雅赵燕英陈正望柳林华中科技大学生命科学与技术学院生物物理与生物化学研究所武汉430074 华中科技大学附属医院武汉430074

家蝇抗菌肽多是碱性蛋白,目前尚无弱酸性家蝇抗菌肽的报道。通过稀醋酸低温浸提,海藻酸吸附,稀盐酸低温洗脱、盐析、Sephadex G25凝胶过滤和CMC23弱阳离子交换柱层析等方法,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇蛆(Musca domesticalarvae... 详细信息

家蝇抗菌肽多是碱性蛋白,目前尚无弱酸性家蝇抗菌肽的报道。通过稀醋酸低温浸提,海藻酸吸附,稀盐酸低温洗脱、盐析、Sephadex G25凝胶过滤和CMC23弱阳离子交换柱层析等方法,利用灵敏的杀菌活性检测手段,从家蝇蛆(Musca domesticalarvae)中分离纯化出一组弱酸性抗菌肽,对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)等革兰氏阳性菌和几种革兰氏阴性菌有强烈的杀灭作用,有极强的耐热、耐冻融的特性。通过电洗脱方法进一步纯化出抗菌肽MD7095,质谱测定其分子量7095Da,IEF电泳测得其等电点5.59,经肽质量指纹谱(PMF)鉴定为一新肽。扫描电镜超微结构观察表明,弱酸性家蝇蛆抗菌肽对苏云金芽孢杆菌的杀菌机制主要是使细胞膜穿孔,内容物外泄,最终使细菌完全解体死亡。

关键词：家蝇蛆抗菌肽抗菌活性细胞膜穿孔

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Rap信号在神经系统中的功能研究进展

生物物理学报 2012年第7期28卷 593-601页

作者：张宗勇李斌刘剑峰苏莉分子生物物理教育部重点实验室华中科技大学生命科学与技术学院武汉430074

小分子G蛋白Rap属于Ras家族,其结构类似于Ras,结合GTP后处于活性状态(RapGTP),结合GDP后则处于非活性状态(RapGDP)。在细胞内,Rap通过RapGTP与RapGDP之间的动态转换起到分子开关的作用,调控细胞增殖、分化、存活、粘附、迁移等生理过程... 详细信息

小分子G蛋白Rap属于Ras家族,其结构类似于Ras,结合GTP后处于活性状态(RapGTP),结合GDP后则处于非活性状态(RapGDP)。在细胞内,Rap通过RapGTP与RapGDP之间的动态转换起到分子开关的作用,调控细胞增殖、分化、存活、粘附、迁移等生理过程。胞外信号通过特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factors,GEFs)调控Rap与GTP的结合,激活Rap;胞内特异性GTP酶激活蛋白(GTPase activating proteins,GAPs)促进GTP的水解,使Rap失活。活化的Rap信号通过其下游不同的信号分子调控不同的生物学功能。在神经系统中,Rap信号具有多样的生物学功能,Rap信号能促进神经元极性的建立和轴突生长,还能调节神经突生长。Rap信号能够调控神经突触结构和功能的可塑性变化。此外,也有研究报道Rap信号和神经元的迁移具有相关性。本文主要针对Rap信号在神经系统中的功能研究进展进行综述。

关键词： Rap信号小分子G蛋白效应因子神经系统

棕榈酰化修饰对G蛋白偶联受体功能的调节作用

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第2期28卷 99-107页

作者：刘洁 BALOUCOUNE Guillaume A 春雷华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室武汉430074

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)作为跨膜蛋白,其结构和功能同时受相互作用的蛋白质和脂质分子调控.S-棕榈酰化(S-palmitoylation)能够影响GPCRs与信号蛋白及膜脂分子的相互作用,在GPCRs相关的多项生理进程中发挥重... 详细信息

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)作为跨膜蛋白,其结构和功能同时受相互作用的蛋白质和脂质分子调控.S-棕榈酰化(S-palmitoylation)能够影响GPCRs与信号蛋白及膜脂分子的相互作用,在GPCRs相关的多项生理进程中发挥重要调节作用.棕榈酸与GPCRs的半胱氨酸间形成不稳定的硫酯键,其修饰动力学过程受棕榈酰转移酶(protein acly transferases,PATs)与硫酯酶(thioesterases)之间的可逆性双重调控,与受体活性及生理状态密切相关.棕榈酰化修饰多发生在GPCRs的C末端,通过棕榈酸侧链插入到质膜内侧而形成第4和/或第5个胞内环,从而影响GPCRs的构象,促进其正确折叠与成熟,并对GPCRs胞内转运、分选、下游信号转导、失敏、内化、寡聚化等活动产生影响.此外,棕榈酰化还与磷酸化、泛素化及亚硝基化等多种翻译后修饰机制相互作用,共同参与调节GPCRs的功能.GPCRs的棕榈酰化修饰酶学机制以及GPCRs蛋白复合体棕榈酰化修饰胞内动力学过程将是未来的研究热点.

关键词： G蛋白偶联受体棕榈酰化修饰动力学信号转导

多拷贝毕赤酵母重组菌表达GCL摇瓶优化和高密度发酵

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中国生物工程杂志 2012年第2期32卷 82-89页

作者：智晓燕汪小锋孙永川柯锋代敏闫云君分子生物物理教育部重点实验室、华中科技大学生命科学与技术学院武汉430074

目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究。方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115。通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活... 详细信息

目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究。方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115。通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活力的重组菌株,运用基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR法确定其拷贝数,并对菌株进行摇瓶发酵条件优化。在此基础上,研究重组菌在3L发酵罐中的高密度发酵工艺。结果:筛选得到一株具有3个白地霉脂肪酶基因拷贝的菌株GS115/pPIC9K-gcl 78#,初始酶活力为220 U/ml。当摇瓶发酵条件为甲醇诱导96 h,每24 h甲醇添加量1%,接种量2%,培养基初始pH 7.0,500 ml摇瓶装液量50 ml,甲醇诱导温度25℃时酶活力达735 U/ml。3L发酵罐高密度发酵176.5 h,酶活力达到3360 U/ml,总蛋白含量达到4.30 g/L,且发酵过程中细胞活性一直保持在96%以上。结论:基因拷贝数与重组菌株的产酶水平呈正相关,摇瓶优化可显著提高重组菌株的产酶能力,为白地霉脂肪酶的工业化生产奠定了技术基础。

关键词：巴斯德毕赤酵母白地霉脂肪酶基因拷贝数摇瓶优化高密度发酵

长江中游巴河流域胜利河优势种纹石蛾(Hydropsyche sp.)的生产力、营养基础及物质通量

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湖泊科学 2014年第2期26卷 297-304页

作者：邓山邱爽王利肖闫云君华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室武汉430074

为了加强长江中游地区大型无脊椎底栖动物的研究工作,2009年3月至2010年3月,对长江中游巴河支流的胜利河毛翅目优势种的生产力和营养基础进行了为期一年的调查研究.结果表明,胜利河中主要毛翅目优势种纹石蛾的生活史为一年3代.一至四级... 详细信息

为了加强长江中游地区大型无脊椎底栖动物的研究工作,2009年3月至2010年3月,对长江中游巴河支流的胜利河毛翅目优势种的生产力和营养基础进行了为期一年的调查研究.结果表明,胜利河中主要毛翅目优势种纹石蛾的生活史为一年3代.一至四级河流中,其生物量周年平均值分别为1.77、7.80、44.82、51.55 mg/m^2.采用体长频率法测算的年均生产量为7.72 mg/m^2,P/B系数为13.21.利用肠内含物分析法研究了胜利河中纹石蛾的营养结构.比较一至四级河流的营养基础发现,无形态碎屑为纹石蛾最常见的食物,占肠内含物的45.22％～ 62.92％;而对生产量贡献率最高的多是动物组织,达52.86％～68.58％.各季节的营养基础状况也有差异,春季无形态碎屑所占比例和对生产量的贡献率较高,而夏、秋和冬季动物组织则有更高的生产量贡献率.一至四级河流的年均物质通量分别为11.83、34.76、237.52和273.17g/（m^2·a）.由此可见,该优势种在河流生态系统中发挥着重要作用.

关键词：毛翅目纹石蛾物质通量营养基础胜利河长江中游

“异养-胁迫”分段培养对原始小球藻生物量和油脂含量影响研究

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中国生物工程杂志 2013年第3期33卷 99-104页

作者：汪桂林桂小华邓伟赵志良姚杰闫云君华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室武汉430074

在"异养-胁迫"分段培养模式下分析原始小球藻(Chlorella protothecoides)的生物量及油脂含量。结果表明,在500ml摇瓶中,分段培养生物量达5.32g/L,略低于一步异养培养5.45 g/L,油脂含量达34.81%,是一步异养培养的2.26倍,藻渣中微藻多糖... 详细信息

在"异养-胁迫"分段培养模式下分析原始小球藻(Chlorella protothecoides)的生物量及油脂含量。结果表明,在500ml摇瓶中,分段培养生物量达5.32g/L,略低于一步异养培养5.45 g/L,油脂含量达34.81%,是一步异养培养的2.26倍,藻渣中微藻多糖含量由9.57%提高到18.06%。在3L发酵罐中,一步异养培养模式下生物量为14.1 g/L,油脂含量为17.16%,微藻多糖含量为10.16%;而"异养-胁迫"分段培养模式下生物量13.20g/L,油脂含量40.15%,微藻多糖含量24.74%。本研究显示"异养-胁迫"分段培养模式是一种快速获得大量高油脂含量藻细胞的有效方法,可为规模化生产微藻生物柴油和进一步利用微藻奠定了技术基础。

关键词：原始小球藻生物量油脂含量分段培养