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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

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器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

下调GSK3β通过抑制ITPR1-GRP75-VDAC1复合体功能减轻衰老肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第3期15卷 406-414页

作者：倪海强顾世琦彭宣宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposid... 详细信息

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposide诱导衰老再转染腺病毒阴性对照(AdshNC)后进行H/R处理,Old+Ad-shGSK3β+H/R组即使用Etoposide诱导衰老后再转染靶向沉默GSK3β的短发夹RNA腺病毒(Ad-shGSK3β)后进行H/R处理。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平和线粒体活性氧水平,采用免疫荧光染色法检测各组钙离子水平,采用蛋白质印迹法检测各组GSK3β、线粒体相关的内质网膜(MAM)相关蛋白肌醇1,4,5-三磷酸受体1(ITPR1)、电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)表达及磷酸化水平,采用免疫共沉淀分析GSK3β与MAM相关蛋白的相互作用。结果与Young组比较,Old组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old组比较,Old+AdshNC+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old+Ad-shNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Young组比较,Old组ITPR1、GRP75和GSK3β总蛋白表达增多,ITPR1和GRP75磷酸化水平升高,而VDAC1总蛋白和磷酸化水平均下降;与Old组比较,Old+Ad-shNC+H/R组GSK3β蛋白表达不变,ITPR1和GRP75总蛋白和磷酸化水平升高,VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平增高;与Old+AdshNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组GSK3β蛋白表达减少,ITPR1、GRP75和VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平均下降。免疫共沉淀结果显示,GSK3β能够与ITPR1、GRP75和VDAC1蛋白发生相互作用。结论GSK3β在衰老RTEC中表达升高,抑制GSK3β表达能够降低ITPR1-GRP75-VDAC1复合体磷酸化水平,限制线粒体钙离子超负荷,保护线粒体功能,减少再灌注时细胞损伤。

关键词：糖原合成酶激酶3β 肾移植中老年供者缺血-再灌注损伤线粒体损伤衰老线粒体相关的内质网膜钙超载凋亡

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X盒结合蛋白1与肾移植相关损伤

器官移植 2024年

作者：倪海强宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室

缺血-再灌注损伤（IRI）和排斥反应是影响移植肾远期存活的主要因素。IRI或排斥反应引起内质网应激（ERS）可导致肾损伤，X盒结合蛋白1(XBP1)作为调控细胞稳态主要的ERS相关蛋白，通过肌醇需求酶1α(IRE1α)剪接内含子后生成剪接体XBP1... 详细信息

缺血-再灌注损伤（IRI）和排斥反应是影响移植肾远期存活的主要因素。IRI或排斥反应引起内质网应激（ERS）可导致肾损伤，X盒结合蛋白1(XBP1)作为调控细胞稳态主要的ERS相关蛋白，通过肌醇需求酶1α(IRE1α)剪接内含子后生成剪接体XBP1，进而影响靶基因表达重塑细胞环境。适当的ERS可促进细胞存活，但超过阈值时XBP1表达过多会导致细胞失稳态或死亡，进而引起肾脏内环境失衡，这与肾移植相关损伤的发病机制和疾病进展相关。因此，XBP1的有效激活对应激损伤具有保护作用，有助于维持肾脏系统的活力和功能的完整性。本文评述了ERS通路IRE1α-XBP1、XBP1在肾实质细胞和免疫细胞中的作用、XBP1在肾缺血性损伤和排斥反应中的作用及靶向XBP1的临床检测和潜在疗法，探讨靶向XBP1对肾移植相关损伤的潜在价值，以期为改善肾移植预后提供新靶点和新方向。

关键词： X盒结合蛋白1 肾移植缺血-再灌注损伤排斥反应内质网应激肌醇需求酶1α 肾实质细胞免疫细胞

703例次移植肾穿刺活组织检查的病理诊断分析

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器官移植 2024年第5期15卷 799-804页

作者：涂宇豪郭志良萨如拉朱兰郭晖陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的总结移植肾穿刺活组织检查(活检)的并发症发生情况,分析穿刺指征及病理诊断类型。方法回顾性分析2017年1月1日至2022年12月31日644例肾移植受者的703例次超声引导下移植肾穿刺活检的资料,分析穿刺合格率、并发症、指征性活检的穿刺... 详细信息

目的总结移植肾穿刺活组织检查(活检)的并发症发生情况,分析穿刺指征及病理诊断类型。方法回顾性分析2017年1月1日至2022年12月31日644例肾移植受者的703例次超声引导下移植肾穿刺活检的资料,分析穿刺合格率、并发症、指征性活检的穿刺指征和病理诊断类型。分析监视性活检的应用和病理诊断。结果肾组织穿刺活检合格率为99.9%,穿刺出血并发症包括移植肾周血肿和血尿各1例次。血清肌酐升高(76.8%)和蛋白尿(13.8%)为主要穿刺指征,48例次(6.8%)为评估治疗效果的监视性活检。病理诊断排斥反应共399例次,其中细胞性排斥反应293例次、抗体性排斥反应60例次、混合性排斥反应46例次;原发病复发或新发肾病195例次,主要为IgA肾病144例次和局灶性节段性肾小球硬化42例次;感染相关肾病共57例次,其中BK病毒相关性肾病(BKVAN)56例次;钙调磷酸酶抑制剂(CNI)肾毒性损伤31例次,包括急性CNI肾毒性损伤15例次和慢性CNI肾毒性损伤16例次;其他诊断45例次。结论移植肾穿刺活检的成功率高及安全性好,现阶段细胞性排斥反应仍然是移植肾指征性活检的最主要病理诊断。

关键词：肾移植穿刺活组织检查排斥反应血清肌酐蛋白尿排斥反应感染

肾移植受者对异种移植看法的问卷调查及影响因素分析

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中华器官移植杂志 2024年第7期45卷 460-467页

作者：涂宇豪赵香丽朱兰陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的调查肾移植受者对异种肾移植的看法并探讨其相关影响因素,为后期我国异种肾移植的临床研究提供辅助参考依据。方法提取在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植中心随访的194例肾移植受者对异种移植看法的问卷调查数据。非参... 详细信息

目的调查肾移植受者对异种肾移植的看法并探讨其相关影响因素,为后期我国异种肾移植的临床研究提供辅助参考依据。方法提取在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植中心随访的194例肾移植受者对异种移植看法的问卷调查数据。非参数检验用于比较得分差异,χ^(2)检验用于比较具体问题回答情况。将非参数检验中具有统计学意义的变量纳入多因素线性回归分析以探究受者对异种移植态度的影响因素。结果肾移植受者对异种肾脏移植态度量表得分(百分制)较高(75分);"认知偏好"维度得分最高(85分);"风险担忧"维度得分最低(50分)。单因素分析结果显示:性别(P=0.020)、有无医学背景(P=0.006)和是否了解临床试验案例(P医学背景(P=0.018)和是否了解临床试验案例(P=0.008)是"功效预期"维度得分的影响因素;性别(P=0.010)、有无医学背景(P=0.018)和是否了解临床试验案例(P=0.008)是总分的影响因素。多因素分析结果示:性别(B=-0.821,95%CI:-1.419~-0.223,P=0.007)、有无医学背景(B=0.938,95%CI:0.097~1.779,P=0.029)和是否了解美国异种移植临床试验案例(B=1.498,95%CI:0.887~2.110,P移植临床试验案例(B=1.075,95%CI:0.418~1.731,P=0.001)是"社会心理"维度得分影响因素;是否了解美国异种移植临床试验案例(B=0.710,95%CI:0.063~1.358,P=0.032)是"功效预期"维度得分的影响因素;性别(B=-2.259,95%CI:-4.094~-0.423,P=0.016)、是否有医学背景(B=2.799,95%CI:0.219~5.378,P=0.034)和是否了解美国异种移植临床试验案例(B=3.237,95%CI:1.360~5.114,P=0.001)是总分的影响因素。结论肾移植受者对异种移植的知晓率较高,对异种移植的接受度总体较好,其中男性、有医学背景、了解异种移植临床案例的肾移植受者对异种移植态度更好;肾移植受者更担心感染风险,同时肾移植受者期待异种猪肾脏能达到与同种异体肾脏一样的长期存活。

关键词：异种移植肾移植临床试验问卷调查影响因素

抗CD38单抗治疗肾移植晚期抗体介导排斥反应的临床初步探索

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中华器官移植杂志 2024年第9期45卷 622-627页

作者：郭志良萨如拉赵大强郭晖赵光远涂宇豪李松侠朱兰陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的初步探索达雷妥尤单抗(Daratumumab)在肾移植晚期抗体介导的排斥反应(late antibody-mediated rejection,late AMR)中的疗效与安全性。方法总结2020年12月至2021年12月在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受达雷妥尤单抗治疗肾... 详细信息

目的初步探索达雷妥尤单抗(Daratumumab)在肾移植晚期抗体介导的排斥反应(late antibody-mediated rejection,late AMR)中的疗效与安全性。方法总结2020年12月至2021年12月在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受达雷妥尤单抗治疗肾移植后late AMR的8例受者的临床资料。治疗强化期每周联合血浆置换/静脉注射免疫球蛋白1次加达雷妥尤单抗1次,维持期每2~4周单独静脉滴注达雷妥尤单抗1次。观察治疗前、治疗3个月及治疗12个月时,受者供者特异性抗体(donor-specific antibody,DSA)水平和移植肾功能变化及治疗相关的毒副作用。组间比较采用独立样本T检验。结果8例受者强化期的治疗中位次数为9次,范围在4~17次;维持期治疗时间在5~19个月,其中2例给予5~6次治疗达到抗体清除后停药。8例受者共新生11个位点的DSA。在治疗3个月和12个月时,供者DSA的平均荧光强度分别为6016±4775和6438±3668,均较治疗前的11944±5237明显下降(P=0.012和0.004)。7例受者治疗期间肾功能稳定,1例儿童受者因在治疗期间出现急性排斥反应而在第18个月时恢复血透。7例受者治疗前、治疗3个月、治疗12个月时肾小球滤过率分别为(40.6±20.1)ml·min^(-1)·(1.73m^(2))-1、(53.6±20.9)ml·min^(-1)·(1.73m^(2))-1和(49.0±17.2)ml·min^(-1)·(1.73m^(2))-1,不同时间点比较,差异无统计学意义。有2例受者在输注达雷妥尤单抗早期出现轻微鼻塞症状,余6例在输注过程中无明显不适反应,对药物耐受良好。结论达雷妥尤单抗早期联合血浆置换/静脉输注丙种球蛋白并序贯一定疗程对于降低late AMR受者的抗体具有较好疗效。治疗期间,受者肾功能总体稳定。

关键词：肾移植排斥反应供者特异性抗体达雷妥尤单抗

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器官移植开创者和艺术家罗伊·卡恩

中华器官移植杂志 2024年第3期45卷 131-135页

作者：陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

罗伊·卡恩(Roy Calne)爵士是英国器官移植外科先驱,欧洲肝移植开拓者(图1)。在临床肾移植、心脏移植成功后的早期,人们一直认为肝移植不可能成功。但卡恩最不愿意别人说"这是不可能的",在大西洋的两岸,他与美国匹兹堡大学的托马斯·斯... 详细信息

罗伊·卡恩(Roy Calne)爵士是英国器官移植外科先驱,欧洲肝移植开拓者(图1)。在临床肾移植、心脏移植成功后的早期,人们一直认为肝移植不可能成功。但卡恩最不愿意别人说"这是不可能的",在大西洋的两岸,他与美国匹兹堡大学的托马斯·斯塔兹(Thomas Starzl)教授一起,用不懈的努力与外界对于肝移植手术的质疑和批评抗争,极力设法让终末期肝病患者在接受肝移植后获得新生,直到20世纪80年代初期肝移植被临床所接受。同时,卡恩也是移植免疫抑制剂之父,他参与开发的硫唑嘌呤、环孢素A(cyclosporin A,CsA)等抗排斥药物使移植物得以长期存活。此外,在拥有精湛外科手术技术的同时,卡恩还是一位颇有成就的画家和雕塑家。

关键词：外科手术技术罗伊移植物器官移植心脏移植卡恩肝移植美国匹兹堡大学

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对电针治疗脓毒症的疗效和有效处方初探

世界科学技术-中医药现代化 2024年第7期26卷 1742-1748页

作者：方梦悦李熳李晨楠景向红徐斌马艳陈爱玲(Sulukkana Noiprasert) 余玲玲华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉430030 华中科技大学同济医学院基础医学院武汉430030 中国中医科学院针灸研究所北京100700 南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京210023 华中科技大学同济医学院附属武汉市第一医院武汉430030 泰国皇太后大学整合医学院清莱府57100

脓毒症是临床危重症,病死率高。电针是脓毒症的重要辅助治疗手段,能减轻脓毒症炎症反应、调节患者免疫功能、预防多系统器官损伤,但系统性综述未见报道。本文通过检索PubMed、中国知网等数据库,对电针治疗脓毒症及其并发症的临床研究文... 详细信息

脓毒症是临床危重症,病死率高。电针是脓毒症的重要辅助治疗手段,能减轻脓毒症炎症反应、调节患者免疫功能、预防多系统器官损伤,但系统性综述未见报道。本文通过检索PubMed、中国知网等数据库,对电针治疗脓毒症及其并发症的临床研究文献进行系统性整理,综述电针在脓毒症及其并发症领域的临床应用情况,分析其临床疗效,总结有效的穴位处方。最终确定电针在单纯脓毒症以及脓毒症并发消化道、肺、心肌、脑损伤的应用中获得了有效临床证据,并推荐如下有效穴位处方:①单纯脓毒症推荐“足三里+关元”“足三里+天枢+上巨虚+下巨虚”;②合并消化道损伤,推荐“足三里+上巨虚+天枢”“足三里+天枢+上巨虚+下巨虚”;③合并肺损伤,推荐“足三里+尺泽”;④合并心肌损伤,推荐“内关+足三里+神门+太冲+血海+膈腧+三阴交+合谷”;⑤合并脑损伤,推荐“百会+水沟”。研究结果能为电针应用于脓毒症及其并发症的临床治疗提供初步临床指导。

关键词：电针脓毒症脓毒症并发症疗效取穴规律组方规律

中国肝移植治疗不可切除结直肠癌肝转移临床实践指南(2023版)

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中华器官移植杂志 2024年第8期45卷 503-512页

作者：中华医学会器官移植学分会宫念樵张利民郭晖不详华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院

无法行根治性切除或达到无疾病证据(no evidence of disease, NED)状态的结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases, CRLM)预后极差, 肝移植可能为这些患者带来新的治疗希望。为了推动国内高质量、规范化开展肝移植治疗不可切除的CRL... 详细信息

无法行根治性切除或达到无疾病证据(no evidence of disease, NED)状态的结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases, CRLM)预后极差, 肝移植可能为这些患者带来新的治疗希望。为了推动国内高质量、规范化开展肝移植治疗不可切除的CRLM, 中华医学会器官移植学分会组织多学科专家以循证方法学和德尔菲法为指导, 围绕肝移植治疗策略下CRLM不可切除性的判定、受者筛选、生物侵袭性评估、肿瘤学治疗和免疫抑制方案以及应对供器官短缺和分配限制的策略进行文献检索、综述和证据综合, 经过两次线下会议讨论和两轮专家函询, 制定了《中国肝移植治疗不可切除结直肠癌肝转移临床实践指南(2023版)》, 为行业内医务人员提供借鉴和参考。

关键词：肝移植结直肠肿瘤肿瘤转移肝切除术诊疗指南