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全骨髓贴壁法培养人骨髓间充质干细胞的改良研究

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 496-502页

作者：王晓庆仲照东陈智超邹萍华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所湖北武汉430022

本研究旨在利用红细胞自然沉降性原理,以传统的全骨髓贴壁法为基础,探讨一种改良后简便而高效的人骨髓间充质干细胞培养方法。采用6孔板培养细胞,将骨髓标本用MSC完全培养液培养48 h,吸取上层无红细胞的上清层,置于新的培养孔以分离获取... 详细信息

本研究旨在利用红细胞自然沉降性原理,以传统的全骨髓贴壁法为基础,探讨一种改良后简便而高效的人骨髓间充质干细胞培养方法。采用6孔板培养细胞,将骨髓标本用MSC完全培养液培养48 h,吸取上层无红细胞的上清层,置于新的培养孔以分离获取MSC。用倒置显微镜观察细胞形态及贴壁情况,记录细胞首次贴壁时间、首次传代时间,并以传统全骨髓贴壁法为对照;应用流式细胞术检测细胞周期、细胞表面标记;用油红O及碱性磷酸酶试剂盒分别对MSC成脂、成骨能力进行鉴定;应用计数板计数法描绘第1代,第3代,第5代MSC增殖曲线。结果表明,用改良法培养的MSC高表达CD90、CD105、CD13、CD44,低表达CD14、CD45、CD34;细胞周期中G0/G1期88.76%,G2/M期3.04%,S期8.2%,符合干细胞周期特征;增殖曲线呈典型"S"型;油红O与碱性磷酸酶染色均为阳性。同时与传统方法相比,改良方法的细胞贴壁率显著高于传统方法(P=0.0004),首次贴壁时间短(P<0.0001)、首次传代时间短(P=0.001)。结论:骨髓标本培养48 h后的上清层中含大量贴壁活性的悬浮MSC,改良方法是一种比传统贴壁法更具有便捷、高效等优点的培养方法。

关键词：骨髓间充质干细胞全骨髓贴壁法改良培养方法

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IgG4相关性疾病

中华风湿病学杂志 2012年第12期16卷 835-838页

作者：孙玮董凌莉高荣芬雷小妹华中科技大学同济医学院附属协和医院口腔科 430022 华中科技大学同济医学院附属同济医院风湿免疫内科

IgG4相关性疾病是一组以血清IgG4水平升高、受累组织IgG4阳性浆细胞浸润及纤维化为特征的、近几年才被人们认识的新疾病体。受累器官因纤维化、慢性炎症等出现增生肿大，从而导致相应的压迫阻塞症状或功能障碍。该病激素治疗效果较好旧... 详细信息

IgG4相关性疾病是一组以血清IgG4水平升高、受累组织IgG4阳性浆细胞浸润及纤维化为特征的、近几年才被人们认识的新疾病体。受累器官因纤维化、慢性炎症等出现增生肿大，从而导致相应的压迫阻塞症状或功能障碍。该病激素治疗效果较好旧。该病自发现至今有不少于10种名称，

关键词：相关性疾病 IgG4 浆细胞浸润慢性炎症功能障碍阻塞症状治疗效果纤维化

Survivin靶向SiRNA重组表达载体的构建和鉴定

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山东医药 2008年第34期48卷 34-36页

作者：蔡明王国斌陶凯雄蔡昌学华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院

目的构建Survivin靶向SiRNA重组表达载体。方法根据GeneBank数据库提供的Survivin基因所有变异体的共同核苷酸序列,选择设计3对带发夹状结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGensil-1中,转化DH5α菌株,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析。结果... 详细信息

目的构建Survivin靶向SiRNA重组表达载体。方法根据GeneBank数据库提供的Survivin基因所有变异体的共同核苷酸序列,选择设计3对带发夹状结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGensil-1中,转化DH5α菌株,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析。结果经酶切鉴定证实Survivin靶向SiRNA重组表达载体测序结果与设计完全一致。结论Survivin靶向SiRNA重组表达载体构建成功。

关键词：存活素 RNA干扰基因治疗

蛋白酶激活受体-1，2在小鼠急性移植物抗宿主病模型中的表达

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中华器官移植杂志 2009年第7期30卷 407-410页

作者：李泉张剑邹萍黎纬明华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所武汉430022 华中科技大学同济医学院附属襄樊医院普外科

目的研究蛋白酶激活受体-1，2（PAR-1，2）在小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型中的表达。方法建立小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后aGVHD模型，并用同基因HSCT小鼠作为对照。观察小鼠aGVHD表现；实时荧光定量聚合酶链反应... 详细信息

目的研究蛋白酶激活受体-1，2（PAR-1，2）在小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型中的表达。方法建立小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后aGVHD模型，并用同基因HSCT小鼠作为对照。观察小鼠aGVHD表现；实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白印迹和免疫组织化学法检测移植小鼠各种组织中PAR-1，2在基因和蛋白水平的表达。结果allo-HSCT小鼠在移植后18-28d出现了典型的aGVHD临床和病理表现。PAR-1基因在allo—HSCT组小鼠的皮肤、肝脏和小肠组织中的相对表达量较对照组显著增高（皮肤：0．039±0．013和0．008±0．002，P〈0．01；肝脏：0．165±0．084和0．017±0．006，P〈0．01；小肠：0．215±0．109和0．016±0．009，P〈0．01）；PAR-2基因在a11o-HSCT组小鼠的肝脏和小肠组织中表达较对照组增高（肝脏：0．010±0．003和0．003±0．002，P〈0．01；小肠：0．006±0．002和0．003±0．002，P〈0．05）；PAR-1，2基因在其余器官组织中的表达与对照组比较，差异无统计学意义。PAR-1，2在蛋白水平的表达与基因表达的检测结果一致。免疫组织化学染色显示PAR-1，2主要在aGVHD靶器官的上皮细胞和内皮细胞中表达增强。结论PAR-1，2表达增高很有可能参与异基因造血干细胞移植后aGVHD的病理生理过程。

关键词：急性移植物抗宿主病蛋白酶激活受体造血干细胞移植

HBV DNA超敏定量检测试剂盒的性能验证

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临床血液学杂志 2021年第2期34卷 81-85页

作者：肖圣达耿帜徐远东陈凤花华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的:验证天隆HBV DNA超敏定量检测试剂盒在cobas?Z480全自动荧光定量PCR分析仪上的检测性能,以评估其是否满足临床应用要求。方法:参考CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》和CNAS-CL02-A009《医学实验室质量和能力认可准则在... 详细信息

目的:验证天隆HBV DNA超敏定量检测试剂盒在cobas?Z480全自动荧光定量PCR分析仪上的检测性能,以评估其是否满足临床应用要求。方法:参考CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》和CNAS-CL02-A009《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》等相关文件,应用临床血清样本和HBV DNA国家标准物质以及WHO国际标准物质,对精密度、正确度、线性范围、定量限、检出限、抗干扰能力、交叉污染、试剂批间差异、核酸室温放置时间等性能进行验证。结果:该系统检测102、103、106 IU/mL混合血清样本的重复性精密度分别为2.60%、2.43%、0.91%,中间精密度分别为4.41%、3.36%、2.48%;HBV DNA国家标准物质GBW(E)090586(200 IU/mL)、GBW(E)090137(1.41×10^(3) IU/mL)和GBW(E)090139(4.60×10^(6) IU/mL)的实测值与靶值差异均在±0.4 Log10IU/mL范围内;该系统在2.32×10^(1)~2.32×10^(9)IU/mL范围内呈线性(线性回归方程为Y=0.993 2X+0.161 2,R2=0.998 9);该系统的定量限为30 IU/mL,检出限为10 IU/mL;干扰物质总胆红素(Tb)浓度≤512μmol/L、血红蛋白(Hb)浓度≤10 g/L、甘油三酯(TG)浓度≤18 mmol/L时,均对检测结果没有明显影响(偏倚<±7.5%);交叉防污染实验中阳性标本检出率为100%,阴性标本检出率为0,全部阴性样本未受污染;不同批次试剂间检测结果差异符合要求(偏倚<±7.5%);磁珠法提取的核酸室温放置2 h,再进行加样扩增,对检测结果没有明显影响(偏倚<±7.5%)。结论:天隆HBV DNA超敏定量检测试剂盒在全自动荧光定量PCR仪cobas?Z480上的检测性能基本符合临床应用要求。

关键词：乙型肝炎病毒DNA定量磁珠法实时荧光定量PCR 性能验证

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重视颞骨恶性肿瘤的规范化诊疗

中华耳科学杂志 2019年第3期17卷 305-310页

作者：王恩浩孙宇华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科

目前我国对颞骨恶性肿瘤未有足够的重视,一方面是因为颞骨恶性肿瘤发病率低且临床表现常无特异性所致的诊疗难度大,更重要的原因是尚未形成规范化的诊疗方案。本文总结了颞骨恶性肿瘤的诸多特点,包括肿瘤生长特点、临床表现、肿瘤分期等... 详细信息

目前我国对颞骨恶性肿瘤未有足够的重视,一方面是因为颞骨恶性肿瘤发病率低且临床表现常无特异性所致的诊疗难度大,更重要的原因是尚未形成规范化的诊疗方案。本文总结了颞骨恶性肿瘤的诸多特点,包括肿瘤生长特点、临床表现、肿瘤分期等,并从诊断和治疗这两方面对颞骨肿瘤进行规范,以期提高业内对颞骨肿瘤规范化诊疗的重视,达到促进颞骨肿瘤诊疗水平的发展及提高患者生存率和生活质量的目的。

关键词：颞骨恶性肿瘤肿瘤分期规范化诊疗

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住院患者出院计划实践工具的范围综述

中华护理杂志 2020年第12期55卷 1876-1883页

作者：柯键汪晖王颖刘于乐霄王冰花胡凯利杨纯子黄海珊华中科技大学同济医学院附属同济医院护理部武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的系统综述国内外住院患者出院计划实践工具相关研究及指南、政府文件。方法聚焦出院计划实践工具,系统检索中英文数据库和相关指南、政府网站,各类工具提取的信息包括:作者/发布机构、年份、国家/地区、工具名称、适用对象、工具内... 详细信息

目的系统综述国内外住院患者出院计划实践工具相关研究及指南、政府文件。方法聚焦出院计划实践工具,系统检索中英文数据库和相关指南、政府网站,各类工具提取的信息包括:作者/发布机构、年份、国家/地区、工具名称、适用对象、工具内容简介和使用时机。结果沿患者入院至出院时间轴,将出院计划实践工具分为入院时-评估、住院期间-实施、出院前24 h-核查、出院时-转介和出院后-随访5个类别、共29个促进出院计划顺利实施的工具。结论建议卫生保健人员在综合和了解国外出院计划实践工具的基础上,制订和发展适合本国国情和医疗环境的出院计划实践工具,以标准化的工具有效推进出院计划的实施,优化患者结局,提升患者医疗护理服务的延续性。

关键词：住院患者出院计划工具范围综述护理评估

多巴胺调控血氧化酶-1对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

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中国医院药学杂志 2009年第11期29卷 900-902页

作者：刘芳杨晓洪梅华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所湖北武汉430000 华中科技大学同济医学院附属协和医院肾病科湖北武汉430022

目的:探讨在大鼠缺血再灌注损伤的动物模型中多巴胺前处理对肾脏的保护作用。方法:♂Lewis大鼠缺血前给予不同浓度多巴胺(2,5,10μ***-1)持续灌注48h,对照组用生理盐水。灌注后夹住左肾动脉1h,取右肾检测血氧化酶(HO-1),5d后取左肾行组... 详细信息

目的:探讨在大鼠缺血再灌注损伤的动物模型中多巴胺前处理对肾脏的保护作用。方法:♂Lewis大鼠缺血前给予不同浓度多巴胺(2,5,10μ***-1)持续灌注48h,对照组用生理盐水。灌注后夹住左肾动脉1h,取右肾检测血氧化酶(HO-1),5d后取左肾行组织学检测。结果:多巴胺治疗组大鼠血肌酐水平明显降低;肾组织病理损害程度和对照组比较明显减轻;肾脏HO-1的含量明显增加。结论:多巴胺的前处理对肾缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与调控HO-1的表达有关。

关键词：缺血再灌注损伤血氧化酶-1 多巴胺

功能性便秘和便秘型肠易激综合征患者的直肠顺应性

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胃肠病学 2006年第8期11卷 488-491页

作者：查慧谢小平侯晓华华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科

背景:直肠顺应性是直肠运动的重要特征,其改变可能是便秘的重要病理生理机制之一。目的:研究不同类型便秘患者直肠感觉和顺应性的差异,了解直肠顺应性的临床意义。方法:应用恒压器(barostat),以500ml聚乙烯球囊对直肠进行快速位相性扩张... 详细信息

背景:直肠顺应性是直肠运动的重要特征,其改变可能是便秘的重要病理生理机制之一。目的:研究不同类型便秘患者直肠感觉和顺应性的差异,了解直肠顺应性的临床意义。方法:应用恒压器(barostat),以500ml聚乙烯球囊对直肠进行快速位相性扩张,检测功能性便秘(FC)和便秘型肠易激综合征(C-IBS)患者的直肠感觉和顺应性,并与正常对照者进行比较。结果:FC和C-IBS组的直肠顺应性较正常对照组显著降低(6.34ml/mmHg±2.26ml/mmHg和6.50ml/mmHg±2.48ml/mmHg对9.57ml/mmHg±2.77ml/mmHg,P<0.05),但两组间差异无显著性。直肠感觉过敏便秘患者的顺应性明显增高,但FC和C-IBS组感觉与顺应性的关系并不完全相同。结论:一些便秘患者对直肠扩张感觉异常可能部分系由直肠顺应性改变所致,根据直肠顺应性结合感觉变化可以更好地区分不同类型的便秘。

关键词：结肠疾病,功能性便秘肠易激综合征直肠顺应性直肠感觉