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野山楂根拮抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖损伤作用的研究

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中国中药杂志 2006年第18期31卷 1521-1525页

作者：胡廉徐惠敏熊锦文田永红明钰熊芬熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心湖北武汉430030

目的:观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响。方法:将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g.kg-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg-1)和蒸馏水(1 mL.kg-1)灌... 详细信息

目的:观察中药野山楂根水煎剂对雷公藤多苷所致雄性不育大鼠生育力的影响。方法:将成年雄性大鼠随机分组,分别给予雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg-1),野山楂根水煎剂(1.8,5.4,18 g.kg-1)+雷公藤多苷片溶液(10 mg.kg-1)和蒸馏水(1 mL.kg-1)灌胃,8周后停用雷公藤多苷,中药组继续行野山楂根灌胃。4周后各组动物与成年雌性大鼠交配,观察交配雌鼠妊娠率和平均胚胎、黄体数。测定雄鼠生殖器官性腺脏器指数、附睾精子计数、活力、存活率,观察各组动物睾丸、附睾组织病理和超微结构改变,放射免疫法测定血清和睾丸组织睾酮(T),血清卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量。结果:与雷公藤多苷模型组比较,野山楂根组交配雌鼠妊娠胎数、雄鼠睾丸、附睾脏器指数以及附睾精子计数、活力均有提高(P生殖损伤作用,提高不育症模型雄鼠的生育力。

关键词：野山楂根雷公藤多苷精子发生下丘脑-垂体-睾丸轴大鼠

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中华男科学杂志 2007年第11期13卷 992-996页

作者：段永刚熊忠明李坚雄朱长虹刘子龙华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心湖北武汉430030

目的:检查c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中的表达差异,研究睾丸和附睾在成熟和衰老过程中特征性分子表达的规律性改变,为研究男性生殖系统衰老提供实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检查6、12、24月龄SD大鼠睾... 详细信息

目的:检查c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中的表达差异,研究睾丸和附睾在成熟和衰老过程中特征性分子表达的规律性改变,为研究男性生殖系统衰老提供实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检查6、12、24月龄SD大鼠睾丸和附睾组织中c-kit、HIWI和波形蛋白抗体免疫反应强度,并对其进行比较分析。结果:c-kit特异性免疫反应阳性主要表达于精原细胞,其他细胞表达水平甚弱,不同月龄差异不显著。附睾上皮、附睾管腔内成分亦有c-kit阳性表达。HIWI在大鼠睾丸和附睾组织中表达也很丰富,6月龄和12月龄大鼠中各级生精细胞,尤其是精原细胞和初级精母细胞为免疫反应强阳性细胞;支持细胞、间质细胞、类肌细胞和血管内皮细胞亦为HIWI阳性细胞。附睾上皮有HIWI阳性表达。但是24月龄大鼠睾丸和附睾组织中HIWI表达下调。波形蛋白在睾丸和附睾组织中表达模式为6月龄大鼠睾丸和附睾组织中低表达,24月龄大鼠睾丸和附睾组织表达明显上调(P<0.01)。结论:c-kit、HIWI在24月龄动物睾丸和附睾组织中表达下调,波形蛋白表达随增龄而明显增强。结果提示,睾丸和附睾组织的衰老与细胞和细胞信号转导异常密切相关。

关键词：年龄相关分子 c-kit HIWI 波形蛋白睾丸附睾大鼠

少弱精子症和正常生育男性精液中尿激酶及其受体含量的研究

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中华男科学杂志 2006年第9期12卷 791-793页

作者：王玲官黄涛田永红熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心湖北武汉430030

目的:通过研究精子正常和异常男性精浆和精子中尿激酶及受体含量差异,以了解尿激酶及受体与男性生育力的关系。方法:采用双抗体夹心ELISA法测定22例正常生育男性和44例少弱精子症男性精浆和精子中尿激酶及受体的含量。结果:①正常男性... 详细信息

目的:通过研究精子正常和异常男性精浆和精子中尿激酶及受体含量差异,以了解尿激酶及受体与男性生育力的关系。方法:采用双抗体夹心ELISA法测定22例正常生育男性和44例少弱精子症男性精浆和精子中尿激酶及受体的含量。结果:①正常男性精浆尿激酶平均含量为(4 803.69±602.78)mU/L,与少弱精子症组[(4 061.35±736.23)mU/L]相比,差异有显著性(P生育男性精子尿激酶平均含量为(30.29±3.16)mU/106个精子,与少弱精子症组[(20.51±4.2)mU/106个精子],差异有显著性(P生育男性精子尿激酶受体平均含量为(12.97±3.11)mU/106个精子相比,与少弱精子症组[(6.09±1.45)mU/106个精子]相比,差异有显著性(P生育力相关,少弱精子症和正常生育男性精液中尿激酶及其受体含量存在差异。

关键词：尿激酶尿激酶受体少弱精子症精浆精子

人脐静脉内皮细胞中肿瘤坏死因子-α诱导NOSTRIN基因表达上调的实验研究

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现代妇产科进展 2010年第7期19卷 514-517,522页

作者：相文佩温子娜水丽君胡廉陈汉平华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)基因表达的诱导作用以及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对此诱导作用的抑制。方法:将培养的内皮细胞分为3组:第1组为无任何处理的HUVEC... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)基因表达的诱导作用以及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对此诱导作用的抑制。方法:将培养的内皮细胞分为3组:第1组为无任何处理的HUVEC,第2组为子痫前期(PE)患者血清作用的HUVEC,第3组为正常晚孕妇女血清作用的HUVEC。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3组细胞中NOSTRIN mR-NA的表达。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测PE患者和正常孕妇血清中TNF-α含量。用1,3,5ng/ml3种浓度的TNF-α分别作用3组细胞6h,以及用浓度3ng/ml的TNF-α作用3组细胞分别达6h、12h、24h,RT-PCR检测NOSTRIN mRNA的表达;将PDTC(5mmol/ml)与TNF-α(3ng/ml)同时作用以及TNF-α(3ng/ml)单独作用3组细胞6h,RT-PCR检测NOSTRIN基因mRNA的表达。结果:3组细胞中都有NOSTRIN表达,第2组表达量显著高于第1组和第3组(P<0.01)。ELISA结果显示,PE患者血清中TNF-α含量显著高于正常晚孕妇女(P<0.01)。TNF-α作用HUVEC细胞后NOSTRIN显著高表达,呈时间和剂量依赖关系(P<0.01)。PDTC和TNF-α同时作用的HUVEC与TNF-α单独作用的HUVEC相比,其NOSTRIN表达显著降低(P<0.01)。结论:TNF-α可上调NOSTRIN在HUVEC中的表达。

关键词：肿瘤坏死因子-α 内皮型一氧化氮合酶运输介导物二硫代氨基甲酸吡咯烷人脐静脉内皮细胞

精子DNA损伤对IVF/ICSI-ET结局影响的回顾性资料分析

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中国计划生育学杂志 2016年第3期24卷 179-182页

作者：邵淑敏李姣邹敏胡廉张玲华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心武汉430030

目的:探讨精子DNA损伤对体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法:回顾性分析了初次行常规IVF和ICSI治疗的192例不孕夫妇的临床资料。分别比较行IVF和ICSI治疗时,精子DNA碎片指数(DFI)≤15%和DFI>15%的受精... 详细信息

目的:探讨精子DNA损伤对体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法:回顾性分析了初次行常规IVF和ICSI治疗的192例不孕夫妇的临床资料。分别比较行IVF和ICSI治疗时,精子DNA碎片指数(DFI)≤15%和DFI>15%的受精率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率和流产率的差异;并比较DFI>15%时,不同受精方式(IVF或ICSI)对受精率、优质胚胎率和临床妊娠率的影响。结果:在IVF或ICSI治疗周期中,精子DNA损伤对受精率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率和流产率均无影响(P>0.05)。在DFI>15%情况下,行IVF治疗的受精率、优质胚胎率、种植率和临床妊娠率与行ICSI治疗比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:精子DNA损伤不影响IVF/ICSI-ET的结局。对于DFI>15%的患者ICSI-ET与IVF-ET的治疗结局相似。

关键词：体外受精-胚胎移植精子DNA损伤流产率

睾丸巨细胞病毒感染对精子存活率影响的实验研究

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中华男科学杂志 2005年第6期11卷 433-437页

作者：熊锦文熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心湖北武汉430030

目的:探讨小鼠睾丸感染鼠巨细胞病毒(MCMV)对附睾尾部成熟精子存活率的影响。方法:运用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出无MCMV感染史的BALB/c小鼠分为2组:对照组40只,睾丸直接接种不含MCMV的细胞培养液;实验组64只,睾丸直接接种MCMV悬液... 详细信息

目的:探讨小鼠睾丸感染鼠巨细胞病毒(MCMV)对附睾尾部成熟精子存活率的影响。方法:运用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出无MCMV感染史的BALB/c小鼠分为2组:对照组40只,睾丸直接接种不含MCMV的细胞培养液;实验组64只,睾丸直接接种MCMV悬液;分别于接种后第1、2、4、6、9、14、21、38d处死小鼠,行睾丸组织病理学检查,同时取附睾尾部成熟精子进行精子存活率的检测。结果:实验组小鼠睾丸间质细胞中出现特异性MCMV嗜碱性包涵体,生精细胞空泡变性、排列紊乱。与对照组比较,实验组精子存活率在接种病毒后的第1d(D1PI)显著降低,存活率由71.42%下降至56.04%(P0.05)。结论:小鼠睾丸MCMV早期感染可造成精子存活率的显著下降,但随感染时间延长,精子存活率恢复正常;提示CMV感染可能短暂性地影响生育。

关键词：睾丸疾病巨细胞病毒睾丸接种精子存活率小鼠

线粒体融合基因2在小鼠卵巢组织中的表达及意义

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现代妇产科进展 2013年第4期22卷 314-316页

作者：相文佩赵娜庞文娟陈文琦徐晓燕华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的:检测小鼠卵巢组织中线粒体融合基因2(Mfn2)的表达、ATP水平以及卵巢组织的超微结构,探讨Mfn2与卵巢功能的相关性。方法:采用Western blot和real-time PCR分别检测年轻组(8～10周龄,20例)和老龄组小鼠(52～54周龄,20例)卵巢组织中M... 详细信息

目的:检测小鼠卵巢组织中线粒体融合基因2(Mfn2)的表达、ATP水平以及卵巢组织的超微结构,探讨Mfn2与卵巢功能的相关性。方法:采用Western blot和real-time PCR分别检测年轻组(8～10周龄,20例)和老龄组小鼠(52～54周龄,20例)卵巢组织中Mfn2蛋白和Mfn2 mRNA的表达;磷钼酸比色法检测小鼠卵巢组织中ATP含量;透射电镜观察卵巢组织的超微结构。结果:老龄组小鼠卵巢组织中Mfn2蛋白的表达水平(0.234±0.120)显著低于年轻组(0.876±0.460),差异有统计学意义(P<0.01)。老龄组小鼠卵巢组织中Mfn2 mRNA相对表达量为(0.0063±0.0034)显著低于年轻组(0.0232±0.0045),差异有统计学意义(P<0.01)。老龄组小鼠卵巢组织中ATP含量[(20.6±7.2)μmol/g]显著低于年轻组[(33.8±11.5)μmol/g]。电镜显示,年轻组小鼠卵巢组织中的线粒体形态规则,轮廓光滑完整,线粒体嵴排列基本规则,老龄组小鼠卵巢组织中线粒体断裂增加,线粒体嵴肿胀,线粒体内出现空泡。结论:老龄组小鼠Mfn2表达水平下降,线粒体出现功能下降和结构损伤。Mfn2表达水平下降可能参与与年龄相关的卵巢功能维持。

关键词：线粒体融合蛋白2 卵巢线粒体三磷酸腺苷

鼠巨细胞病毒感染诱导小鼠精子凋亡及线粒体调控机制研究

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中华医学杂志 2008年第24期88卷 1673-1675页

作者：熊锦文熊承良李丹陈素华李小兰陶德定武警湖北省总队医院妇产科武汉430071 华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心华中科技大学同济医学院附属同济医院

目的研究鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对小鼠精子凋亡的影响，探讨MCMV感染诱导小鼠精子凋亡的线粒体调控机制。方法建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型（n=15），以正常小鼠作为对照（n=15），采用流式细胞术（FCM）与激光扫描共聚焦显微术（L... 详细信息

目的研究鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对小鼠精子凋亡的影响，探讨MCMV感染诱导小鼠精子凋亡的线粒体调控机制。方法建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型（n=15），以正常小鼠作为对照（n=15），采用流式细胞术（FCM）与激光扫描共聚焦显微术（LCSM）对不同感染时段的小鼠附睾尾部成熟精子进行凋亡与线粒体膜电位的检测，同时应用电镜观察不同感染时段的精子线粒体超微结构的改变。结果MCMV感染第2天起精子凋亡率开始升高，第4天达最高值（39．3±1．0）％，随后逐渐下降（F=362．822，P〈0．05）。而感染第1天的精子线粒体膜电位增加至74．0±1．4，第2天开始下降至63．0±2．2，第4天降至最低40．2±2．3，随后缓慢回升（F=32．257，P〈0．05）。MCMV感染可引起精子线粒体超微结构的损伤，以感染第2～6天为重。结论生殖器官MCMV急性感染可诱导附睾尾部成熟精子的凋亡；精子线粒体主动参与并调控了精子的凋亡过程。

关键词：鼠巨细胞病毒属精子凋亡线粒体

妊娠期糖尿病孕妇的外周血线粒体基因组变异分析

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中华妇产科杂志 2023年第5期58卷 378-382页

作者：刘雨晴赵云李一萌杨子逸许松于红松赵凯商学军赵世刚山东大学生殖医学研究中心、山东省生殖医学重点实验室济南250012 华中科技大学同济医学院附属湖北妇幼保健院产科武汉430070 南京大学医学院附属金陵医院、东部战区总医院男科南京210002 遵义医科大学基础医学院、贵州省基因检测与治疗特色重点实验室遵义563000 华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心武汉430030

目的对妊娠期糖尿病(GDM)孕妇的外周血线粒体基因组进行测序, 探讨线粒体DNA(mtDNA)变异与GDM的关系。方法基于国家重点研发计划中国环境与遗传因素出生队列的巢式病例对照研究, 选取2019—2021年间在华中科技大学同济医学院附属湖北妇... 详细信息

目的对妊娠期糖尿病(GDM)孕妇的外周血线粒体基因组进行测序, 探讨线粒体DNA(mtDNA)变异与GDM的关系。方法基于国家重点研发计划中国环境与遗传因素出生队列的巢式病例对照研究, 选取2019—2021年间在华中科技大学同济医学院附属湖北妇幼保健院入组的451例GDM孕妇(GDM组)和同期445例正常妊娠的健康孕妇(对照组), 提取所有受试者的妊娠早期外周血DNA, 应用高通量测序技术检测线粒体基因组的变异情况。采用MitoTool软件对线粒体单倍群分类, 对两组孕妇主要单倍群、mtDNA不同区域基因变异频率进行比较。通过logistic回归分析mtDNA变异与GDM的关系。结果 (1)GDM组和对照组共计896例孕妇中, 共检出mtDNA基因突变2 310个, 其中, D环区438个(18.96%, 438/2 310), 蛋白编码区1 527个(66.10%, 1 527/2 310), 核糖体RNA(rRNA)区175个(7.58%, 175/2 310), 转运RNA(tRNA)区136个(5.89%, 136/2 310), 另有34个(1.47%, 34/2 310)mtDNA变异位于基因间区。(2)GDM组与对照组的主要线粒体单倍群、mtDNA不同区域基因变异频率分别比较, 差异均无统计学意义(P均>0.05)。(3)D环区C456T变异(OR=2.65, 95%CI为1.21~5.81;P=0.015), rRNA区RNR1基因T681C变异(OR=2.44, 95%CI为1.05~5.65;P=0.038)、C1048T变异(OR=2.59, 95%CI为1.12~5.96;P=0.026)与GDM的发生风险增加有关;D环区G16390A变异与GDM的发生风险降低有关(OR=0.40, 95%CI为0.19~0.86;P=0.018)。结论线粒体基因组变异与GDM的发生存在一定的关系, 线粒体基因组特定位点变异的筛查可为GDM提供病因学证据。

关键词：巢式病例对照研究健康孕妇同济医学院正常妊娠国家重点研发计划妊娠早期病因学风险降低