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牛传染性鼻气管炎病毒gG iELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医学报 2018年第8期38卷 1504-1512页

作者：张芳陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业部兽用诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

为了建立有效鉴别牛传染性鼻气管炎病毒（BoHV-1）gg-／tk-基因缺失疫苗人工免疫和BoHV-1野毒株自然感染的鉴别诊断方法，以BoHV-1gG蛋白为抗原建立了间接ELISA（iELISA）抗体检测方法。根据编码BoHV1gG蛋白的基因序列设计特异性扩增引... 详细信息

为了建立有效鉴别牛传染性鼻气管炎病毒（BoHV-1）gg-／tk-基因缺失疫苗人工免疫和BoHV-1野毒株自然感染的鉴别诊断方法，以BoHV-1gG蛋白为抗原建立了间接ELISA（iELISA）抗体检测方法。根据编码BoHV1gG蛋白的基因序列设计特异性扩增引物，以BoHV1基因组DNA为模板扩增gg基因截短片段，克隆至原核表达载体pGEX-6p-1并进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明，gg基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体2种形式表达，纯化的gG蛋白具有良好的反应原性。将可溶性gG蛋白纯化后作为包被抗原，建立了BoHV-1gGiELISA抗体检测方法，并优化了各反应条件。使用该方法与商业化试剂盒BoHV-1gE和gB阻断ELIsA进行比较检测，并与其他5种牛常见病原体的阳性血清进行交叉反应检测，同时进行了该方法的重复性试验、保存期试验及消长规律试验；最后使用该方法对临床1031份牛血清进行了检测，血清流行率为83．71%,4（95%CI：81．30％～85．90％）。结果显示，该方法的阴、阳性血清检测的临界值（S／P值）为0．398，与进口试剂盒比较显示该方法具有良好的诊断敏感性和特异性，且本试剂盒可在1：50倍样本稀释下进行检测，而商业化试剂盒是1：1倍样本稀释检测。此外，该方法分析特异性良好，与其他非相关病原体的阳性血清无交叉反应；检测重复性良好；在4℃条件下可保存6个月。该方法在人工感染BoHV～1野毒株和人工免疫BoHv-1gg-／tk-疫苗株20d后可以明显区分疫苗株免疫和野毒株感染。综上所述，本研究成功建立了BoHV-1 gG iELISA抗体检测方法，敏感性和特异性良好，既可以用于有效鉴别疫苗免疫和自然感染，也可作为BoHV-1的血清学诊断方法。

关键词：牛传染性鼻气管炎牛疱疹病毒1型 gG蛋白 iELISA 鉴别诊断

MicroRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中调控作用的研究进展

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动物医学进展 2019年第7期40卷 92-96页

作者：肖瑶竺婷婷刘晗朱一帆熊学凯郭爱珍陈颖钰华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

microRNAs是广泛存在于真核生物中的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多种生物进程,包括细胞分化和发育、免疫反应、凋亡等。microRNA-155是一个多功能的microRNA,研究发现microRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中发挥着重要的调... 详细信息

microRNAs是广泛存在于真核生物中的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多种生物进程,包括细胞分化和发育、免疫反应、凋亡等。microRNA-155是一个多功能的microRNA,研究发现microRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中发挥着重要的调控作用,巨噬细胞是结核分支杆菌在体内的主要宿主细胞,结核分支杆菌与巨噬细胞互作的结果与结核病的发展密切相关。论文对结核分支杆菌与巨噬细胞互作中microRNA-155调控细胞自噬、细胞凋亡、细胞杀菌能力等作用的研究进展进行综述,以期为结核病的诊断和治疗提供新的思路。

关键词： microRNA-155 结核分支杆菌巨噬细胞

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MicroRNA在结核病诊断中的作用

动物医学进展 2020年第5期41卷 121-124页

作者：王子健竺婷婷陈颖钰郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

MicroRNA(miRNA)是一类进行基因转录后调控的非编码小RNA,它们广泛存在于真核细胞之中,参与机体调节。结核病严重危害人类与其他生物健康,除潜伏期长、胞内寄生以外,还缺少有效的快速的早期诊断方法。尽管已经在结核病诊断的研究中预测... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类进行基因转录后调控的非编码小RNA,它们广泛存在于真核细胞之中,参与机体调节。结核病严重危害人类与其他生物健康,除潜伏期长、胞内寄生以外,还缺少有效的快速的早期诊断方法。尽管已经在结核病诊断的研究中预测并证实了多种miRNA,但miRNA在结核菌感染中的功能及其靶基因的相互作用机制尚不完全清晰。研究表明,结核病的发生、发展及转化过程与miRNA有着密不可分的联系。深入研究miRNA在结核病早期诊断中的应用,阐明结核菌感染过程中miRNA的生物学作用,充分挖掘其在诊断和治疗中的价值,将有助于人类防治结核病。

关键词： MicroRNA 结核病诊断

黑水虻幼虫的耐饥力及饥饿幼虫复食后的生物学特性

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昆虫学报 2019年第4期62卷 461-467页

作者：邓文辉吴家园陈天阳殷玉梦朱芬华中农业大学植物科学技术学院利用昆虫转化有机废弃物湖北省国际科技合作基地武汉430070

【目的】旨在明确黑水虻Hermetia illucens幼虫的耐饥力及饥饿幼虫复食后的发育、生殖力等生物学特性,为评估饥饿对黑水虻后续发育的影响并指导生产实践提供依据。【方法】将不同日龄或不同体重黑水虻幼虫进行不同时长的饥饿处理,测定... 详细信息

【目的】旨在明确黑水虻Hermetia illucens幼虫的耐饥力及饥饿幼虫复食后的发育、生殖力等生物学特性,为评估饥饿对黑水虻后续发育的影响并指导生产实践提供依据。【方法】将不同日龄或不同体重黑水虻幼虫进行不同时长的饥饿处理,测定和分析其耐饥力与日龄、百头重的关系;对7日龄幼虫进行不同时长的饥饿处理后再复喂,测定不同饥饿时长对其预蛹出现时间、总预蛹率、预蛹重、成虫繁殖等的影响。【结果】黑水虻幼虫饥饿后的半数致死时间(LT_(50))与日龄成指数关系,与体重呈线性相关。7日龄幼虫的耐饥力较强,LT_(50)超过了50 d,饥饿30 d时存活率仍然达到了95%。百头重小于0.5 g的个体,其LT_(50)小于30 d;百头重在2～2.5 g的个体,其LT_(50)在45～70 d。幼虫超过8日龄时或百头重超过4.5 g时,多数个体在饥饿5 d时就提前进入了后续发育阶段。7日龄幼虫饥饿40 d内复食,其预蛹率未受到影响,但预蛹重显著增加;短期饥饿(0～10 d)对其成虫产卵量无显著影响,长期饥饿(30～40 d)使其成虫产卵量显著下降;饥饿长达30 d以上时,卵孵化率也显著降低。【结论】本研究明确了不同体重或不同日龄的黑水虻幼虫都具有一定的耐饥力;饥饿幼虫复食后预蛹重显著增加。

关键词：黑水虻饲养幼虫耐饥力复食生物学特性

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轮状病毒为主的混合感染性犊牛腹泻病的诊断

中国兽医学报 2020年第12期40卷 2316-2319页

作者：彭清洁刘心晁金杨莉陈鸣薛凯丽张淏云朱杰朱小洁陈颖钰胡长敏陈曦郭爱珍华中农业大学动物医学学院湖北武汉430070 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复... 详细信息

犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复发。经研究室临床诊断和实验室检测,最终确诊该场犊牛腹泻的主要病原为牛轮状病毒,同时伴有多种其他病毒和大肠杆菌的混合感染。本研究就该病例进行了诊断报告,以及为临床犊牛腹泻的防控提供病例参考和技术资料。

关键词：犊牛腹泻轮状病毒牛冠状病毒牛病毒性腹泻病毒混合感染

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大头金蝇的综合利用研究进展

昆虫学报 2016年第10期59卷 1143-1150页

作者：王小云李逵朱芬雷朝亮华中农业大学植物科学技术学院湖北省利用昆虫转化有机废弃物国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院湖北省昆虫资源利用与害虫可持续治理重点实验室武汉430070

大头金蝇Chrysomya megacephala是重要的法医昆虫、资源昆虫和卫生害虫。大头金蝇的各个发育阶段与人类活动关系密切。本文简要介绍了大头金蝇的分布、分类鉴定及生物学背景,着重从法医学应用、幼虫在有机废弃物转化中的应用、幼虫的活... 详细信息

大头金蝇Chrysomya megacephala是重要的法医昆虫、资源昆虫和卫生害虫。大头金蝇的各个发育阶段与人类活动关系密切。本文简要介绍了大头金蝇的分布、分类鉴定及生物学背景,着重从法医学应用、幼虫在有机废弃物转化中的应用、幼虫的活性物质及成虫传粉应用4个方面总结其在资源综合利用方面的研究进展,并讨论了大头金蝇其幼虫和成虫存在的风险及可能的控制方法。新型法医学手段的开发拓宽了大头金蝇在法医领域的应用范围;大头金蝇幼虫能够有效地转化粪便、餐厨垃圾、污泥等多种有机废弃物创造环境和经济效益;幼虫具有多种活性物质,有利于其高附加值产品的开发;虽然成虫的自然传粉效果好,但是其作为传粉昆虫人工释放仍有局限性,仅适用可控空间内。大头金蝇的病媒特性仍是限制其广泛应用的绊脚石,这一问题的解决,有赖于多种技术的有机结合。

关键词：大头金蝇发育法医学应用有机废弃物转化活性物质传粉

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环状RNA及其研究进展

中国兽医科学 2021年第3期51卷 349-355页

作者：孔德来朱一帆翟文俊郭爱珍陈颖钰华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 国家动物结核病专业实验室(武汉) 湖北武汉430070 农业农村部部兽用诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 农业农村部反刍动物生物制品重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

环状RNA是非编码RNA家族的重要成员之一,广泛存在于真核生物内,并参与多种疾病的发生发展。本文就环状RNA的生物学特征、功能及其在畜牧兽医和人类疾病如结核病领域的研究进展进行综述,并分析了环状RNA的未来研究方向和亟待解决的一些问... 详细信息

环状RNA是非编码RNA家族的重要成员之一,广泛存在于真核生物内,并参与多种疾病的发生发展。本文就环状RNA的生物学特征、功能及其在畜牧兽医和人类疾病如结核病领域的研究进展进行综述,并分析了环状RNA的未来研究方向和亟待解决的一些问题,期望能为相关研究提供有价值的参考。

关键词：环状RNA 非编码RNA 调节疾病转录结核病

一例夏南牛大肠杆菌与链球菌混合感染的病例报告

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中国奶牛 2020年第5期 32-34页

作者：刘心彭清洁郭爱珍陈曦陈颖钰华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070

本文就一例夏南公牛混合感染大肠杆菌O158与链球菌导致死亡的病例进行了报告分析,提出了大肠杆菌O158与链球菌混合感染的诊断、治疗方法以及防范措施。为临床大肠杆菌O158与链球菌混合感染的识别及处置提供参考,为该病的防治提供支持。

关键词：牛大肠杆菌O158 链球菌病例报告

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牛副结核病诊断技术的研究进展

中国奶牛 2018年第9期 38-41页

作者：袁续葛盼侯力月杨莉陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070

牛副结核病是由副结核分枝杆菌引起的以牛慢性增生、顽固性肠炎、进行性消瘦及产奶量下降为特征的人畜共患传染病,可给畜牧业造成巨大的经济损失,目前还没有有效的治疗方案。早期快速、准确的诊断,对于预防和消除副结核病、保护人们的... 详细信息

牛副结核病是由副结核分枝杆菌引起的以牛慢性增生、顽固性肠炎、进行性消瘦及产奶量下降为特征的人畜共患传染病,可给畜牧业造成巨大的经济损失,目前还没有有效的治疗方案。早期快速、准确的诊断,对于预防和消除副结核病、保护人们的身体健康和促进我国畜牧业的健康高效发展具有十分重要的意义。随着研究的深入,针对副结核分枝杆菌的诊断技术不断被开发。本文从病原学、免疫学、分子生物学角度对牛副结核分枝杆菌的诊断技术进行了介绍,以期能够为牛副结核病的快速诊断和深入研究提供参考。

关键词：牛副结核病副结核分枝杆菌诊断技术研究进展