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人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程

经直肠彩色多普勒超声对前列腺增生和前列腺癌的血流动力学研究

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中国超声医学杂志 2001年第2期17卷 66-69页

作者：王玲董昌元贺 姚启盛王晓康石小红易建华杜莲霞十堰市太和医院病理科十堰市太和医院超声科十堰市太和医院泌尿外科

目的 :探讨前列腺增生和前列腺癌时前列腺内血流动力学变化特征及其临床应用价值。方法 :经直肠彩超对 30例正常人 ,5 5例前列腺增生 ,13例前列腺癌患者彩色多普勒 (CDFI)参数进行对比分析。结果 :病变组前列腺内血流信号较对照组明显增... 详细信息

目的 :探讨前列腺增生和前列腺癌时前列腺内血流动力学变化特征及其临床应用价值。方法 :经直肠彩超对 30例正常人 ,5 5例前列腺增生 ,13例前列腺癌患者彩色多普勒 (CDFI)参数进行对比分析。结果 :病变组前列腺内血流信号较对照组明显增多 ,以前列腺癌组更为显著。病变组前列腺内动脉收缩期峰值 (PS)、阻力指数 (RI)、加速指数 (AI)均有相应变化 ,其中 RI、AI最明显。对照组、增生组、癌组 RI、AI平均值分别为 0 .5 9、0 .6 7、0 .80 ;0 .6 1/s、1.0 7/s、1.93/s。三组间 RI、AI均有极显著差异 (P<0 .0 1)。结论 :前列腺增生和前列腺癌时前列腺内血供丰富 ,RI、AI增高 ,前列腺癌组 RI、AI显著大于增生组。前列腺内动脉 RI、AI可作为前列腺癌早期诊断的一项指标。

关键词：经直肠彩色多普勒超声前列腺增生前列腺癌

小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4907-4914页

作者：王丹朱小军李志成李娜内蒙古医科大学附属医院泌尿外科内蒙古自治区呼和浩特市010050

背景:小肠黏膜下层脱细胞基质已被临床与基础研究证实可用于尿道的修复重建,但其单独应用时存在宿主细胞生长缓慢、支架血管化不足而成活困难、重建尿道狭窄梗阻等问题,仅适用于较短的尿道狭窄。目的:探讨应用小肠黏膜下层脱细胞基质复... 详细信息

背景:小肠黏膜下层脱细胞基质已被临床与基础研究证实可用于尿道的修复重建,但其单独应用时存在宿主细胞生长缓慢、支架血管化不足而成活困难、重建尿道狭窄梗阻等问题,仅适用于较短的尿道狭窄。目的:探讨应用小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道的可行性。方法:从新西兰大白兔骨髓间充质干细胞中分离提取外泌体;制备猪小肠黏膜下层脱细胞基质,将外泌体负载于小肠黏膜下层脱细胞基质上。将小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体(PKH26染料标记)复合物与脐静脉内皮细胞共培养12 h,观察细胞摄取外泌体情况。选取生长状态良好的脐静脉内皮细胞,分3组培养:空白组常规培养,对照组加入小肠黏膜下层脱细胞基质,实验组加入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,通过划痕实验、成管实验、血管生成因子分泌检测评估血管生成情况。取30只新西兰大白兔,建立长段(3 cm)尿道缺损模型,采用随机数字表法分3组干预(n=10):单独材料组植入小肠黏膜下层脱细胞基质,对照组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-骨髓间充质干细胞复合物,实验组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,植入后12周进行尿道造影、尿动力学检查及重建尿道切片病理观察。结果与结论:(1)荧光显微镜下可见小肠黏膜下层脱细胞基质中的外泌体可被脐静脉内皮细胞摄取。(2)与空白组、对照组相比,实验组材料可促进脐静脉内皮细胞的迁移、成血管能力以及成血管因子血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素8的分泌(P <0.05)。(3)尿道造影结果显示,单独材料组10只兔均出现尿道狭窄,对照组10只兔中2只出现尿道狭窄,实验组10只兔均未出现尿道狭窄。尿动力检查结果显示,单独材料组兔材料植入后12周的最大尿道压高于术前(P <0.05),对照组、实验组兔植入后12周的最大尿道压均低于空白组(P <0.05)。苏木精-伊红、Masson与免疫组化染色显示,单独材料组可见明显的再生上皮层、少量的皮下平滑肌与血管,以纤维组织增生为主,伴有明显炎性细胞浸润;对照组可见较完整的再生上皮与少量胶原,可见大量的皮下血管与平滑肌,伴有炎性细胞浸润;实验组可见完整的再生上皮层与大量的皮下血管、平滑肌,未见明显炎性细胞浸润,实验组AE1/AE3、ɑ-平滑肌肌动蛋白、CD31阳性表达均高于单独材料组、对照组(P <0.05)。(4)结果表明,小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体组织工程尿道可通过促进血管生成来修复尿道缺损。

关键词：尿道损伤尿道狭窄小肠黏膜下层脱细胞基质细胞外基质外泌体组织工程尿道

彩色多普勒超声对肾积水肾功能可复性预测的价值

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临床泌尿外科杂志 1996年第2期11卷 106-107页

作者：姚启盛李一明王晓康易建华马明刚黄菊芬湖北省十堰市太和医院泌尿外科十堰市太和医院病理科十堰市太和医院B超室

为探寻一种预测肾积水肾功能恢复的方法，应用一侧可复性输尿管部分梗阻模型，利用高分辨彩色多普勒显像（ＣＤＦＩ）测定肾动脉血流频谱，分析阻力指数（ＲＩ）在肾积水肾功能可复性预测中的价值。结果显示：ＲＩ对预测肾功能的可复性... 详细信息

为探寻一种预测肾积水肾功能恢复的方法，应用一侧可复性输尿管部分梗阻模型，利用高分辨彩色多普勒显像（ＣＤＦＩ）测定肾动脉血流频谱，分析阻力指数（ＲＩ）在肾积水肾功能可复性预测中的价值。结果显示：ＲＩ对预测肾功能的可复性有较好的指导作用，当ＲＩ＜０．７，肾功能正常；０．７＜ＲＩ＜０．８，肾功能可部分或完全恢复；当ＲＩ＞０．８，肾功能不能恢复。ＲＩ还可用于肾积水的术后随访。认为ＣＤＦＩ可预测肾积水肾功能恢复情况，为临床选择治疗方法提供可靠依据。

关键词：肾积水肾功能可复性预测超声波诊断 CDFI

彩色多普勒超声在肾积水肾功能可复性预测中的价值

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中国超声医学杂志 1996年第10期12卷 5-7页

作者：姚启盛王晓康李一明马明刚易建华黄菊芬湖北省十堰市太和医院病理科湖北省十堰市太和医院Ｂ超室湖北省十堰市太和医院泌尿外科

本文采用一侧可复性输尿管部分梗阻模型，利用高分辨彩色多普勒显像（ＣＤＦＩ）根据肾动脉血流频谱，分析阻力指数（ＲＩ），探讨其在肾积水患者肾功能可复性预测中的价值。结果显示：根据肾动脉ＲＩ的变化可以较准确地预测肾积水肾功... 详细信息

本文采用一侧可复性输尿管部分梗阻模型，利用高分辨彩色多普勒显像（ＣＤＦＩ）根据肾动脉血流频谱，分析阻力指数（ＲＩ），探讨其在肾积水患者肾功能可复性预测中的价值。结果显示：根据肾动脉ＲＩ的变化可以较准确地预测肾积水肾功能的恢复情况。当ＲＩ＜０．７，肾功能正常；当０．７＜ＲＩ＜０．８时，肾功能可能部分或完全得以恢复；当ＲＩ＞０．８时，肾功能不能恢复。在以上实验的基础上，经过对２３例ＩＶＰ不显影的肾积水患者进行检测研究，亦获相同结论。我们认为，ＣＤＦＩ可以较准确地预测肾积水患者肾功能的可复性，为临床治疗方法的选择提供理论依据。

关键词：肾积水肾功能彩色多普勒超声

经额侧脑室脉络膜裂入路在丘脑胶质瘤切除术中的应用分析

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中华神经外科杂志 2024年第11期40卷 1136-1141页

作者：牟磊秦军雷军荣陈志明冯驰刘俊十堰市太和医院神经外科十堰442000

目的探讨经额侧脑室脉络膜裂入路在丘脑胶质瘤切除手术中的应用效果。方法回顾性分析2017年1月至2023年10月十堰市太和医院神经外科采用经额侧脑室脉络膜裂入路切除术治疗的21例丘脑胶质瘤患者的临床资料。手术通过额中回进入侧脑室体... 详细信息

目的探讨经额侧脑室脉络膜裂入路在丘脑胶质瘤切除手术中的应用效果。方法回顾性分析2017年1月至2023年10月十堰市太和医院神经外科采用经额侧脑室脉络膜裂入路切除术治疗的21例丘脑胶质瘤患者的临床资料。手术通过额中回进入侧脑室体部, 术中4例通过脉络膜裂内侧进入第三脑室切除肿瘤, 17例通过脉络膜裂外侧切除丘脑肿瘤, 肿瘤切除过程在黄荧光染色技术辅助下进行。根据术后头颅MRI评估肿瘤切除率。患者出院后, 通过电话等追踪其后续治疗方案和预后情况。结果 21例患者中, 肿瘤全切除11例(52.4%), 次全切除4例(19.0%), 大部切除5例(23.8%), 活组织检查1例(4.8%)。术前存在梗阻性脑积水的11例患者中, 8例术后脑积水明显缓解, 相关的头痛及记忆力障碍明显改善;3例术前一侧肢体轻偏瘫的患者中, 2例术后短期内症状较前改善。术后电解质紊乱3例;新发不同程度肢体瘫痪3例。2例患者在术后因脑积水行脑室钻孔+Ommaya囊置入术, 3例患者在术后1~2个月行脑室-腹腔分流术。21例患者术后的随访时间[M(范围)]为11个月(6周至73个月)。至末次随访, 患者死亡15例, 其生存期[M(范围)]为10个月(6周至24个月);6例存活。存活患者中, 弥漫性星形细胞瘤2例, 分别于术后6、10个月复发, 均再次行手术后规律放、化疗且肿瘤未复发;胶质母细胞瘤1例, 于术后7个月复发, 未行进一步治疗;间变少突星形细胞瘤2例, 术后规律放、化疗, 随访均未见肿瘤复发;毛细胞型星形细胞瘤1例, 随访73个月未见肿瘤复发。结论采用经额侧脑室脉络膜裂入路可切除侵犯整个丘脑、第三脑室、以及双侧丘脑的胶质瘤, 肿瘤切除率较高、并发症较少, 可有效缓解患者部分短期症状。

关键词：丘脑神经胶质瘤显微外科手术脉络膜

经扩大颅中窝硬膜外入路手术治疗颅内外沟通型三叉神经鞘瘤的临床疗效

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中华神经外科杂志 2021年第3期37卷 265-269页

作者：牟磊秦军雷军荣陈志明冯驰杨青平付锐十堰市太和医院神经外科湖北442000

目的初步探讨经扩大颅中窝硬膜外入路手术治疗颅内外沟通型三叉神经鞘瘤的临床疗效。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月十堰市太和医院神经外科收治的10例颅内外沟通型三叉神经鞘瘤患者的临床资料。10例患者的肿瘤最大直径为3.0~7.5 ... 详细信息

目的初步探讨经扩大颅中窝硬膜外入路手术治疗颅内外沟通型三叉神经鞘瘤的临床疗效。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月十堰市太和医院神经外科收治的10例颅内外沟通型三叉神经鞘瘤患者的临床资料。10例患者的肿瘤最大直径为3.0~7.5 cm,7例肿瘤突破中颅底向颞下窝生长,3例肿瘤突入翼颚窝,2例肿瘤向颅后窝侵犯;10例患者的颅中窝、岩尖区骨质均有不同程度的破坏;2例肿瘤包裹颈内动脉岩骨段,3例肿瘤包裹颈内动脉海绵窦段。所有患者均采用经扩大颅中窝硬膜外入路手术治疗,术后1周内复查头颅CT和MRI。MRI显示肿瘤切除率100%为全切除,肿瘤切除率≥90%但<100%为次全切除,肿瘤切除率<90%为部分切除。定期门诊和电话随访患者,随访内容包括询问术后症状改善情况、复查头颅MRI评估肿瘤有无复发。结果10例患者中,肿瘤全切除8例,次全切除1例,部分切除1例。术后皮下积液2例,颅内感染1例,均在出院前治愈;术后新发手术同侧面部麻木感6例,动眼神经麻痹2例,不同程度的手术同侧咬合无力6例。无一例出现颅内出血或脑脊液漏。10例患者的随访时间为(24.7±4.3)个月(6~50个月);至末次随访,8例肿瘤全切除患者均未见肿瘤复发,另2例患者肿瘤复发;术后出现新发症状的患者,神经功能障碍均有不同程度好转。结论初步观察发现,经扩大颅中窝硬膜外入路手术切除颅内外沟通型三叉神经鞘瘤的肿瘤全切除比例较高,临床疗效较好。

关键词：神经鞘瘤三叉神经颅底治疗结果扩大颅中窝硬膜外入路

丝素蛋白/纳米羟基磷灰石/淫羊藿苷可促进移植骨髓间充质干细胞增殖分化为髓核样细胞

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中国组织工程研究 2022年第22期26卷 3528-3534页

作者：郭晓鹏刘莹松尚晖十堰市太和医院湖北省十堰市442000

背景:近年来利用组织工程技术修复椎间盘退变成为脊柱外科领域的研究热点。目的:对比丝素蛋白/纳米羟基磷灰石/淫羊藿苷与丝素蛋白/纳米羟基磷灰石复合材料在椎间盘退变修复中的效果。方法:采用物理共混法与致孔剂制备丝素蛋白/纳米羟... 详细信息

背景:近年来利用组织工程技术修复椎间盘退变成为脊柱外科领域的研究热点。目的:对比丝素蛋白/纳米羟基磷灰石/淫羊藿苷与丝素蛋白/纳米羟基磷灰石复合材料在椎间盘退变修复中的效果。方法:采用物理共混法与致孔剂制备丝素蛋白/纳米羟基磷灰石水凝胶,将水凝胶直接与淫羊藿苷物理混合制备含淫羊藿苷(10 mmol/L)的水凝胶。采用髓核抽吸法建立新西兰大白兔椎间盘退变动物模型,将造模成功的36只兔随机分3组,每组12只:模型组采用微量注射器向椎间盘内注射PBS,对照组注射丝素蛋白/羟基磷灰石水凝胶与骨髓间充质干细胞悬液,实验组注射丝素蛋白/羟基磷灰石水/淫羊藿苷凝胶与骨髓间充质干细胞悬液。正常组(n=12)不建模也不进行任何处理。术后4,8,12周进行X射线片、MRI检查,术后12周进行组织学(苏木精-伊红染色与甲苯胺蓝染色)、RT-PCR检测(Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9 mRNA的表达)与Western blotting检测(Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9蛋白的表达)。结果与结论:(1)X射线片显示,术后4,8,12周时,模型组椎间盘高度逐渐下降,对照组、实验组椎间盘高度逐渐增加,其中实验组兔椎间盘高度的恢复好于对照组;(2)MRI检查显示,术后4,8,12周时,模型组兔椎间盘T2加权像信号值呈逐渐降低趋势,对照组与实验组逐渐升高,其中以实验组升高更明显;(3)苏木精-伊红染色显示,模型组髓核组织破坏较明显,髓核细胞显著减少;对照组髓核组织欠完整,中央髓核区可见少量髓核样细胞增生;实验组髓核组织较完整,中央髓核区可见大量髓核样细胞增生;(4)甲苯胺蓝染色显示,模型组髓核无着色,对照组中度染色,实验组髓深染;(5)RT-PCR与Western blotting检测显示,模型组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平低于正常组(P<0.05),对照组与实验组的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平高于模型组(P<0.05),实验组的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、Sox9的mRNA及蛋白表达水平高于对照组(P<0.05);(6)结果表明,丝素蛋白/羟基磷灰石水凝胶联合淫羊藿苷可促进移植骨髓间充质干细胞增殖并分化为髓核样细胞,增加细胞基质的合成,促进退变椎间盘的修复。

关键词：材料丝素蛋白纳米羟基磷灰石水凝胶椎间盘退变淫羊藿苷实验动物

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全内脏反位合并先天性多发畸形一例

中华小儿外科杂志 2021年第9期42卷 830-832页

作者：慕晓龙屈振繁十堰市太和医院小儿外科 442000

患儿男,出生2 h。因"生后发现无肛门"于2019年4月10日就诊于本院小儿外科。患儿系第2胎第2产,出生体重3000 g,出生1 min Apgar评分10分。产妇外院孕检超声未提示明显异常,孕39周剖腹产娩出。入院体检:呼吸45次/min,未吸氧状态下,血氧饱... 详细信息

患儿男,出生2 h。因"生后发现无肛门"于2019年4月10日就诊于本院小儿外科。患儿系第2胎第2产,出生体重3000 g,出生1 min Apgar评分10分。产妇外院孕检超声未提示明显异常,孕39周剖腹产娩出。入院体检:呼吸45次/min,未吸氧状态下,血氧饱和度波动在96%左右;心电图提示窦性心动过速,安静状态心率波动在130~150次/min。

关键词：窦性心动过速小儿外科安静状态 Apgar评分全内脏反位血氧饱和度出生体重孕检