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少孢节丛孢菌响应几丁质诱导的m RNA表达谱特征分析

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西北农业学报 2024年

作者：李柠杏孙殿明张慧梅孙焱森李若冰孟庆玲乔军才学鹏石河子大学动物科技学院中国兽医药品监察所

少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora,AO)是一种重要的捕食线虫性真菌,具有防控动物线虫病的潜在应用前景。为了探究AO侵染线虫的分子机制,拟对几丁质诱导的AO和未诱导的AO菌丝进行m RNA转录组学测序和验证,利用GO和KEGG富集方法分析... 详细信息

少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora,AO)是一种重要的捕食线虫性真菌,具有防控动物线虫病的潜在应用前景。为了探究AO侵染线虫的分子机制,拟对几丁质诱导的AO和未诱导的AO菌丝进行m RNA转录组学测序和验证,利用GO和KEGG富集方法分析探究AO差异表达基因(DEGs)及其参与的代谢过程和关键信号通路,分析差异表达基因在AO响应几丁质诱导m RNA表达谱特征。结果显示,AO响应几丁质诱导后,共有2 904个DEGs,其中1 376个上调,1 528个下调;RT-q PCR结果显示,挑选的6个DEGs表达变化趋势与测序结果一致;GO分析发现,细胞代谢过程、碳水化合物代谢过程、氮化合物代谢过程等差异明显;KEGG分析显示,DEGs主要参与真核生物核糖体的生物发生、果糖和甘露糖代谢、几丁质酶基因、C源和N源吸收途径、信号传导、细胞壁合成及捕食器官形成等信号通路。该研究探究AO响应几丁质诱导的m RNA表达谱特征分析,为深入揭示少孢节丛孢侵染线虫的分子机制奠定前期研究基础。

关键词：少孢节丛孢菌转录组学几丁质差异基因

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兽医生物药品厂GMP车间的设计

中国兽药杂志 2002年第6期36卷 14-16页

作者：徐桓北京兽医生物药品厂北京100101

生药厂的技术改造必须从市场实际出发,选准产品,把工艺尽可能做细。本文从企业定位,生产工艺细化,GMP车间的净化厂房设计三个方面论述了兽医生物药品厂GMP车间的硬件设计要点。

关键词：净化厂房兽医生物药品厂 GMP车间设计

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安徽省兽医生物药品厂冻干苗的冻干工艺

中国兽药杂志 1973年第2期 34-35页

我厂自1959年正式投产冻干苗以来,十多年间共生产四千多批。近数年来,由于客观实际的需要和全厂职工的努力,产量逐年增加,对我省畜禽业生产的发展,贡献了一定的力量。但在生产过程中,却曾遇到不少问题,主要是仍有少数批次的质量,不符合... 详细信息

我厂自1959年正式投产冻干苗以来,十多年间共生产四千多批。近数年来,由于客观实际的需要和全厂职工的努力,产量逐年增加,对我省畜禽业生产的发展,贡献了一定的力量。但在生产过程中,却曾遇到不少问题,主要是仍有少数批次的质量,不符合部颁《规程》要求。 1972年,随着批修整风运动的深入开展,

关键词：冻干苗生物制品冻干工艺生物药品厂安徽省兽医

少孢节丛孢菌几丁质酶AO-492对线虫的降解作用研究

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生物技术通报 2024年第5期40卷 261-268页

作者：张嘉华张慧梅马喜喜孙焱森李若冰李柠杏才学鹏乔军孟庆玲石河子大学动物科技学院石河子832003 中国兽医药品监察所北京100081

【目的】为探究捕食线虫真菌少孢节丛孢菌几丁质诱导过程中分泌蛋白AO-492的生物学功能。【方法】对少孢节丛孢菌几丁质酶AO-492主要结构域编码区进行基因克隆及分子特征分析,并在毕赤酵母中进行表达。利用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白Re... 详细信息

【目的】为探究捕食线虫真菌少孢节丛孢菌几丁质诱导过程中分泌蛋白AO-492的生物学功能。【方法】对少孢节丛孢菌几丁质酶AO-492主要结构域编码区进行基因克隆及分子特征分析,并在毕赤酵母中进行表达。利用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白ReAO-Z492,采用NAG检测法分析了该重组蛋白在不同温度、pH及金属离子条件下的酶学活性,并将其作用于秀丽隐杆线虫及虫卵分析其生物学功能。【结果】几丁质酶AO-492有信号肽,无跨膜结构域,含有两个几丁质结合结构域和一个糖苷水解酶18家族结构域,并含有糖苷水解酶18家族几丁质酶高度保守的底物结合位点-SVGGWT-和水解酶活性位点-FDGGDLDWE-,含有典型的TIM桶形分子结构。系统进化分析显示,该蛋白与坚粘孢单顶孢几丁质酶(EPS35099.1)的亲缘关系相对最近。SDS-PAGE和Western Blot分析表明,ReAO-Z492分子量约为59 kD,可与小鼠抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生特异性反应。ReAO-Z492最适温度为40℃,最适pH为7.0;Mg^(2+)对其酶活有促进作用,而Ag^(+)、Cu^(2+)、Fe^(3+)和Zn^(2+)有抑制作用。ReAO-Z492对秀丽隐杆线虫体壁及其虫卵卵壳有较强的降解活性。【结论】少孢节丛孢菌几丁质酶 AO-492 对秀丽隐杆线虫及虫卵具有较强的降解作用。

关键词：少孢节丛孢菌几丁质酶 ReAO-Z492 酶学活性捕食线虫真菌

在猪瘟兔化弱毒细胞培养疫苗生产中解决细胞脱落的对策

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中国兽药杂志 1991年第3期25卷 35-36页

作者：高永锐傅牧闭炳玢王成业江业超陆增荣广西兽医生物药品厂

应用犊牛睾丸细胞生产猪瘟细胞苗最大难点之一,是细胞卷边脱落的问题。尽管按照《规程》生产并建立了各项检测体系,完善了生产工艺,但细胞卷边脱落的现象仍时有发生,我厂前几年,有些批组细胞脱落高达70%。细胞脱落常表现为细胞长不成致... 详细信息

应用犊牛睾丸细胞生产猪瘟细胞苗最大难点之一,是细胞卷边脱落的问题。尽管按照《规程》生产并建立了各项检测体系,完善了生产工艺,但细胞卷边脱落的现象仍时有发生,我厂前几年,有些批组细胞脱落高达70%。细胞脱落常表现为细胞长不成致密单层或很难形成单层。

关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗生产细胞脱落

猪牛巴氏杆菌病(B型菌)灭活疫苗的扩大试产和扩大区域试验

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中国兽药杂志 1992年第4期26卷 22-24页

作者：傅牧吴远松蒋明威广西兽医生物药品厂

猪牛巴氏杆菌病(B 型菌)灭活疫苗(以下简称 B 型苗),是中国兽药监察所研究的新兽医生物制品,在基本完成了实验室的工作后,于1987年—1990年与我厂协作完成了疫苗的试制、免疫期试验、田间试验及区域试验等试验研究的后期工作。各项试验... 详细信息

猪牛巴氏杆菌病(B 型菌)灭活疫苗(以下简称 B 型苗),是中国兽药监察所研究的新兽医生物制品,在基本完成了实验室的工作后,于1987年—1990年与我厂协作完成了疫苗的试制、免疫期试验、田间试验及区域试验等试验研究的后期工作。各项试验均达到设计要求。为了积累数据与完善《试行规程》(草案),经中国兽药监察所和广西畜牧局同意,1991年我厂继续进行了 B 型苗的扩大试产和扩大区域试验。现将结果报告如下。一、B

关键词：猪病牛病巴氏杆菌病疫苗

猪瘟兔化弱毒带毒传代细胞(4—7代)培养活疫苗的免疫原性试验

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中国兽药杂志 1992年第1期26卷 36-37页

作者：傅牧王天甲高永锐闭炳玢王成业江业超广西兽医生物药品厂

目前,我国猪瘟细胞培养活疫苗的生产是采用犊牛睾丸原代细胞的工艺,细胞利用率不高,每批都要宰杀一定数量的犊牛。为了解决犊牛睾丸用量大的问题,保证疫苗生产和供应,从一九八九年开始,我厂采用了细胞带毒传代的生产工艺,用带毒传代细胞... 详细信息

目前,我国猪瘟细胞培养活疫苗的生产是采用犊牛睾丸原代细胞的工艺,细胞利用率不高,每批都要宰杀一定数量的犊牛。为了解决犊牛睾丸用量大的问题,保证疫苗生产和供应,从一九八九年开始,我厂采用了细胞带毒传代的生产工艺,用带毒传代细胞(终止代为第4代)培养猪瘟弱毒,生产猪瘟细胞培养活疫苗,取得了令人满意的结果(见中国兽药杂志1990年第2期)。

关键词：猪瘟细胞培养疫苗免疫

用经钴—60γ射线辐照处理的犊牛血清生产猪瘟细胞苗的初步试验

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中国兽药杂志 1990年第4期24卷 9-11页

作者：傅牧高永锐孙建华吴远松蒋明威广西兽医生物药品厂

犊牛血清是细胞培养不可缺少的重要物质之一,不仅含有多种氨基酸、维生素、微量元素,其中还有些物质直接参与了细胞代谢这一生命现象的全过程,是其他人工合成的培养基难以代替的。因此,在猪瘟兔化弱毒细胞培养苗的生产中。

关键词：猪瘟细胞苗犊牛血清生产辐照

经钴—60γ射线辐照灭菌的裂解全血用于制造多杀性巴氏杆菌苗的试验

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中国兽药杂志 1989年第2期23卷 29-30页

作者：傅牧孙建华吴远松蒋明威张干秀施菊新广西兽医生物药品厂

目前有多种兽医生物制品在培养基中添加健康动物的裂解血球全血,以提高菌数和抗原质量。但采集的血液因污染细菌报废的多达30%以上。为了简化工艺手续,减少不必要的经济损失,我们在已报道(中国兽药杂志1988年4期)用钻—60辐照灭菌试验... 详细信息

目前有多种兽医生物制品在培养基中添加健康动物的裂解血球全血,以提高菌数和抗原质量。但采集的血液因污染细菌报废的多达30%以上。为了简化工艺手续,减少不必要的经济损失,我们在已报道(中国兽药杂志1988年4期)用钻—60辐照灭菌试验的基础上,生产多杀性巴氏杆菌苗添加了经钴—60辐照血的初步试验。一、试验材料1。

关键词：巴氏杆菌疫苗辐照灭菌裂解全血