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基础研究VEGF对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：张智慧高鸿霞王国庆侯巍邹畅芦小单北华大学医学技术学院吉林省人民医院精准分子医学中心

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法　利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型，采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型，通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(D... 详细信息

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法　利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型，采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型，通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(Dox+)与VEGF表达抑制组(Dox-)(n=10)。采用Western blotting检测卵巢组织中VEGF蛋白的表达情况；荧光定量PCR检测VEGF、KDR及已知在卵泡发育中发挥作用的基因促卵泡激素(FSH)、抑制素B(INHBB) mRNA的表达情况。HE染色观察卵巢组织的变化。取小鼠卵巢组织提取总RNA进行转录组测序，并通过FPKM、log2FC值分析相关差异基因。结果　与Dox+组比较，Dox-组VEGF mRNA和蛋白水平明显降低，KDR mRNA水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示，与Dox+组比较，Dox-组卵泡发育障碍，并出现闭锁卵泡。根据测序结果分析筛选出两组小鼠的卵泡发育相关基因、类固醇合成相关基因具有明显差异(P<0.05)；富集分析发现小鼠卵巢中VEGF主要参与调控卵巢类固醇生成等通路。荧光定量PCR结果显示，与Dox+组相比，Dox-组小鼠卵巢组织中卵泡发育相关基因(INHBB、FSHR)明显上调(P<0.05)，类固醇合成的关键基因(StAR、CYP11A1、3β-HSD)明显下调(P<0.05)，定量结果与测序结果基本一致。结论　VEGF抑制的小鼠可能通过卵泡发育调控因子FSH、INHBB的相互作用，导致卵巢类固醇激素合成相关基因下调引发胆固醇代谢受阻，从而引起卵泡发育障碍。

关键词：血管内皮生长因子卵泡发育性类固醇激素转录组测序

基于网络药理学及实验验证探究葛根素治疗溃疡性结肠炎的作用机制

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中国免疫学杂志 2024年第5期40卷 1055-1063页

作者：但文利赵鑫鲁星妤郭紫婵秦琪李娟唐康张慧媛施京红陈丽华陕西中医药大学医学技术学院咸阳712046 空军军医大学基础医学院西安710032

目的:探索葛根素(PUE)对溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果及作用机制。方法:利用网络药理学和分子对接技术对PUE调控UC的靶点进行筛选和分析。C57BL/6小鼠自由饮用2.5%DSS水溶液7 d后,观测PUE对小鼠体质量变化及疾病活动指数(DAI)评分的影响... 详细信息

目的:探索葛根素(PUE)对溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果及作用机制。方法:利用网络药理学和分子对接技术对PUE调控UC的靶点进行筛选和分析。C57BL/6小鼠自由饮用2.5%DSS水溶液7 d后,观测PUE对小鼠体质量变化及疾病活动指数(DAI)评分的影响。HE染色观察小鼠结肠组织病理变化;阿利新蓝染色观察小鼠结肠组织杯状细胞变化;qRT-PCR和ELISA检测小鼠结肠组织炎症细胞因子表达。CCK-8检测PUE对MODE-K细胞活力的影响;流式细胞术检测PUE对MODE-K细胞凋亡的影响。结果:筛选得到AKT1、TNF、STAT3、CASP3、HIF1A等38个PUE调节UC的靶点,主要涉及TNF、IL-17和PI3K-Akt等信号通路。体内实验结果显示,与DSS组相比,DSS+PUE组小鼠结肠缩短程度、体质量减轻程度和DAI评分降低,结肠组织炎症细胞浸润减少,结肠组织TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白表达降低。体外实验证实PUE减轻DSS诱导的上皮细胞凋亡。结论:PUE可减轻DSS诱导的小鼠UC发生发展。

关键词：葛根素溃疡性结肠炎网络药理学上皮细胞凋亡

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炎症性肠病中肠道微生物与细胞因子的相互作用研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：鹿欣雨张淑莉李小峰李海燕西安医学院医学技术学院

肠道微生物和宿主免疫系统之间相互作用的紊乱会引发慢性炎症，例如炎症性肠病（IBD），包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）。研究表明IBD宿主肠道微生物可以直接或间接地影响免疫系统稳态，而促炎和抗炎细胞因子之间的平衡又能参... 详细信息

肠道微生物和宿主免疫系统之间相互作用的紊乱会引发慢性炎症，例如炎症性肠病（IBD），包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）。研究表明IBD宿主肠道微生物可以直接或间接地影响免疫系统稳态，而促炎和抗炎细胞因子之间的平衡又能参与维持健康的微生物群落并加强肠上皮屏障功能。IBD中肠道微生物与白细胞介素10（IL-10）、IL-17、IL-18、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的相互作用对于了解IBD 的发病机制具有特别重要的意义。

关键词：炎症性肠病(IBD) 肠道微生物细胞因子相互作用综述

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普鲁士蓝纳米粒子在生物医学诊疗中的应用

中国医学物理学杂志 2023年第9期40卷 1161-1166页

作者：顾亚龙朱静雨熊加宝努尔尼沙·阿力甫新疆医科大学医学工程技术学院新疆乌鲁木齐830017

普鲁士蓝纳米粒子(PBNPs)由于其尺寸可调、易于合成和表面修饰、具有良好的光热稳定性和生物相容性,近年来引起广泛关注。因其中空介孔的结构和离子交换的特性,PBNPs可作为理想的药物载体和放射性铯或铊中毒的解毒剂;用作MRI和光声成像... 详细信息

普鲁士蓝纳米粒子(PBNPs)由于其尺寸可调、易于合成和表面修饰、具有良好的光热稳定性和生物相容性,近年来引起广泛关注。因其中空介孔的结构和离子交换的特性,PBNPs可作为理想的药物载体和放射性铯或铊中毒的解毒剂;用作MRI和光声成像的对比剂时,可以显著提高图像的成像质量;PBNPs在光热治疗和纳米酶的催化治疗方面也取得令人满意的疗效。本研究对近年来PBNPs在生物医学中成像与治疗方面的应用进行综述,旨在为PBNPs的相关研究提供参考。

关键词：普鲁士蓝纳米粒子生物医学成像综述

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正常男性听性脑干反应潜伏期与耳优势的研究

听力学及言语疾病杂志 2019年第5期27卷 503-506页

作者：林文欣胡旭君浙江中医药大学医学技术学院

目的探讨正常男青年的中枢传导时间与语言偏侧化之间的相互关系。方法对20例正常青年男性进行click声、短纯音和言语声诱发的听性脑干反应(ABR)测试,并进行以辅音-元音(CV)单音节为刺激组的英文分听测试,分听测试分别在无被迫注意模式(n... 详细信息

目的探讨正常男青年的中枢传导时间与语言偏侧化之间的相互关系。方法对20例正常青年男性进行click声、短纯音和言语声诱发的听性脑干反应(ABR)测试,并进行以辅音-元音(CV)单音节为刺激组的英文分听测试,分听测试分别在无被迫注意模式(non-forced attention,NF)、右耳被迫注意模式(forced-right attention,FR)和左耳被迫注意模式(forced-left attention,LR)下进行;用听性脑干反应的潜伏期表示中枢传导时间,语言偏侧化以耳优势右耳的得分减左耳得分的形式表示,分析ABR潜伏期与耳优势之间的相关性。结果在NF和LR模式下,中枢传导时间(ABR潜伏期)与耳优势之间无相关性,相关系数r0.05),但在FR模式下,中枢传导时间与耳优势之间显著相关,相关系数r>0.5(P<0.05)。结论正常青年男性中枢传导时间与耳优势之间互不影响,但是,在注意力影响下,耳优势与中枢传导时间之间存在一定关联。

关键词：中枢传导时间听性脑干反应潜伏期双耳分听耳优势

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梅花鹿鞭与马鹿鞭PCR-RFLP鉴别研究

吉林医药学院学报 2023年第2期44卷 81-86页

作者：周童吴楠孟媛姜菲菲李佩瑶张英裴笑仙艾金霞北华大学医学技术学院吉林吉林132013

目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭的方法。方法根据梅花鹿与马鹿的细胞色素b基因序列的差异,设计并选取DNA限制性内切酶MseI来区分梅花鹿鞭和马鹿鞭。采用改良SDS法提取样本基因... 详细信息

目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭的方法。方法根据梅花鹿与马鹿的细胞色素b基因序列的差异,设计并选取DNA限制性内切酶MseI来区分梅花鹿鞭和马鹿鞭。采用改良SDS法提取样本基因组DNA,经PCR扩增后进行RFLP分析,并优化PCR-RFLP反应体系及反应条件,用优化的PCR-RFLP体系对市售鹿鞭样本进行鉴定。结果经PCR-RFLP分析,MseI可切割梅花鹿与马鹿Cyt b片段,前者被切成2个片段,后者被切成3个片段,从而将两者进行鉴别。结论本实验建立的PCR-RFLP方法可准确鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭。

关键词：鹿鞭聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术梅花鹿鞭马鹿鞭

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北华大学学报（自然科学版） 2023年第3期24卷 306-314页

作者：刘冰清刘丹伶奕沙梦瑶万红夏薇刘畅北华大学医学技术学院吉林吉林132013

目的通过网络药理学方法探究黄芩治疗主动脉夹层(AD)的作用机制及其调控的mRNA-miRNA-lncRNA网络构建.方法采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)挖掘黄芩活性成分及预测靶点,通过挖掘GEO数据库,使用GEO2R分析筛选AD差异表达的mRN... 详细信息

目的通过网络药理学方法探究黄芩治疗主动脉夹层(AD)的作用机制及其调控的mRNA-miRNA-lncRNA网络构建.方法采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)挖掘黄芩活性成分及预测靶点,通过挖掘GEO数据库,使用GEO2R分析筛选AD差异表达的mRNAs,运用StarBase v2.0、miRTarBase、Mircode在线分析软件进行mRNA-miRNA-lncRNA调控网络整合分析.借助Cytoscape 3.8.0软件与STRING数据库构建活性成分-靶点网络、三元转录网络及蛋白互作网络,并行GO功能及KEGG通路富集分析,最后予以分子对接评估.结果筛选出黄芩活性成分32个,其中23个靶点与AD相关.得到由11个关键mRNAs、27个关键miRNAs及340个关键lncRNAs构成的三元转录网络.富集分析结果显示,这些靶点主要通过IL-17、p53、TNF、FoxO和NOD样受体等信号通路发挥细胞增殖凋亡调控、转录调节、炎症反应和抗氧化活性作用.分子对接结果显示,汉黄芩素、β-谷甾醇、黄芩素和豆甾醇等主要活性成分均能与核心靶点IL6、MAPK14较好地结合.结论黄芩可能通过多组分、多靶点、多途径协同治疗AD,此结果可为进一步研究主动脉夹层作用机制提供理论依据.

关键词：黄芩主动脉夹层生物信息学分子对接

GSDMD介导的细胞焦亡在感染性疾病中的研究进展

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微生物学报 2019年第11期59卷 2083-2093页

作者：刘瑞卿李胜玉申艳娜天津医科大学医学检验学院天津医科大学医学技术学院

细胞焦亡是细胞感染时由炎症小体介导,以裂解细胞为特点的程序性死亡形式。其激活途径分为依赖半胱氨酸蛋白酶-1或半胱氨酸蛋白酶-4/5/11活化的经典与非经典途径。目前的研究表明细胞焦亡过程中主要效应蛋白是具有膜成孔活性的gasdermin... 详细信息

细胞焦亡是细胞感染时由炎症小体介导,以裂解细胞为特点的程序性死亡形式。其激活途径分为依赖半胱氨酸蛋白酶-1或半胱氨酸蛋白酶-4/5/11活化的经典与非经典途径。目前的研究表明细胞焦亡过程中主要效应蛋白是具有膜成孔活性的gasdermin(也作GSDM)家族成员。因此,细胞焦亡也被称为gasdermin介导的程序性坏死。当宿主受到感染时,细胞焦亡与宿主自身其他免疫防御机制存在互相调节机制,保证宿主在清除感染的同时降低自身损伤程度。本文笔者将从研究最为广泛的GSDMD在细胞焦亡途径中的作用机制、细胞焦亡在感染性疾病中的研究进展以及细胞焦亡与其他程序性死亡在感染性疾病中的相互作用这三个方面作系统叙述,期望为今后研究如何通过细胞焦亡途径治疗感染性疾病提供理论基础。

关键词：细胞焦亡 gasderminD 成孔活性半胱氨酸蛋白酶-1

实时荧光定量PCR快速检测细菌对抗菌素敏感性与耐药性表型的方法建立

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现代预防医学 2019年第9期46卷 1684-1688页

作者：谢思露向瑶杨朝国成都中医药大学医学技术学院

目的建立快速检测细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型的实时荧光定量PCR(qPCR)方法。方法用基于细菌16S rRNA基因通用引物和通用探针的qPCR检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌临床分离菌株基因组DNA,绘制生长曲线以确定细菌... 详细信息

目的建立快速检测细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型的实时荧光定量PCR(qPCR)方法。方法用基于细菌16S rRNA基因通用引物和通用探针的qPCR检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌临床分离菌株基因组DNA,绘制生长曲线以确定细菌显著生长的最短培养时间。计算细菌在含和不含抗菌素的M-H肉汤中的相对生长率,以VITEK 2 Compact全自动细菌分析系统的药敏结果为金标准,对细菌相对生长率进行ROC曲线分析,确定区分细菌对抗菌素敏感与耐药的相对生长率分界值。用20株肠杆菌科细菌和10株革兰阳性球菌临床分离菌株验证方法的可靠性。结果细菌显著生长的最短培养时间为3小时。区分大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌对抗菌素敏感与耐药的相对生长率分界值分别为0.44、0.40和0.48本方法检测30株大肠埃希菌对3种抗菌素的敏感性和耐药性的准确度分别为98.4%和100.0%,30株金黄色葡萄球菌对3种抗菌素的敏感性和耐药性的准确度均为100.0%,30株铜绿假单胞菌对3种抗菌素敏感性和耐药性的准确度分别为60.0%和64.0%。20株肠杆菌科细菌和10株革兰阳性球菌对抗菌素的敏感性与耐药性结果的总准确度分别为92.7%和93.3%。结论本方法能快速准确为临床提供肠杆菌科细菌和革兰阳性球菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型,但对非发酵菌药敏结果的准确性不能满足临床要求。

关键词：实时荧光定量聚合酶链反应细菌 16S rRNA基因抗菌素敏感性