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基于蒲公英-桑叶治疗急性髓系白血病潜在机制的网络药理学分析

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 1087-1097页

作者：周鑫辰董姝含张卓沈明妹汪香君李迎刘丽梅北华大学医学技术学院微生物学检验教研室吉林吉林132000

目的:应用网络药理学分析蒲公英-桑叶在急性髓系白血病(AML)发生发展过程的作用,阐明其治疗AML的活性成分和作用机制。方法:通过中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选蒲公英-桑叶的活性成分,采用SwissTargetPrediction数据库预测其... 详细信息

目的:应用网络药理学分析蒲公英-桑叶在急性髓系白血病(AML)发生发展过程的作用,阐明其治疗AML的活性成分和作用机制。方法:通过中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选蒲公英-桑叶的活性成分,采用SwissTargetPrediction数据库预测其作用靶点,在症状映射(SymMap)数据库、人类基因数据库(GeneCards)、DisGeNET数据库和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库中检索AML相关基因和蛋白靶点。对AML相关基因和蒲公英-桑叶靶基因进行比较,确定富集基因,并进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用Cytoscape 3.8.0软件根据靶点信息构建药物-有效成分-靶点网络和蛋白-蛋白互作(PPI)网络,采用CytoNCA插件筛选出核心基因,通过AutoDock软件进行分子对接验证。结果:对数据库检索结果进行筛选后得到39种有效成分,收集蒲公英-桑叶与AML的共同靶点148个。GO功能富集分析主要涉及细胞因子介导的信号传导途径、激酶活性正向调节和氧化应激反应等。KEGG信号通路富集分析主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路和Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)信号通路等。拓扑分析得到信号转导和转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B1(AKT1)、重组人表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、原癌基因MYC、肿瘤蛋白P53(TP53)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(CASP3)、肉瘤基因SRC、热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA1)、连环蛋白B1(CTNNB1)、磷酸肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、白细胞介素6(IL-6)、TNF、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和磷酸肌醇3-激酶调节亚基1(PIK3R1)等核心靶点。分子对接,结合亲和力最高的配对结果为蒲公英萜醇(taraxerol)与MYC(-8.74 kcal·mol^(-1)),槲皮素(quercetin)、kaemfprol、木犀草素(luteolin)和artemetin与各个靶点均有很好的结合亲和力。结论:蒲公英-桑叶主要活性成分quercetin、taraxerol、kaemfprol、luteolin和artemetin可能通过调控AKT1、STAT3、HSP90AA1、IL-6和MAPK1发挥抗AML的作用,对PI3K-AKT信号通路的调节是蒲公英-桑叶发挥抗AML作用的重要机制。

关键词：急性髓系白血病蒲公英桑叶网络药理学分子对接

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IL-17信号通路在高原低氧诱导小鼠脾脏炎症反应的作用机制

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 118-124页

作者：永胜郭玉静陈晓晨许玉珍胡英青海大学医学院基础医学部免疫学教研室西宁810016

目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)... 详细信息

目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)高原环境,构建高原低氧动物模型。第30天取脾脏组织检测脾脏指数,HE染色观察小鼠脾脏组织病理学改变,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测小鼠脾脏组织白细胞介素(IL)-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量;使用RNA测序(RNA-sequencing,RNA-seq)技术进行高通量转录组学测序,将差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行KEGG富集分析,对关键通路中的DEGs进行RT-qPCR验证。结果与平原常氧组相比,高原低氧环境下,小鼠脾脏指数降低(P学改变;高原低氧组小鼠脾脏组织IL-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量均上调(P免疫、炎症相关通路中显著富集(P<0.05);其中,IL-17信号通路和下游炎症因子高度上调表达(P<0.05);与平原常氧组相比,高原低氧组小鼠脾脏组织IL-17信号通路中关键基因IL-17、IL-17R、MAPKs(mitogen-activated protein kinase genes)等和下游炎症因子MMP9(matrix metallopeptidase 9)、S100A8(S100 calcium binding protein A8 gene)、S100A9(S100 calcium binding protein A9 gene)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factorα,TNF-α)等基因的mRNA表达量均出现上调或下调差异表达(P<0.05)。经RT-qPCR验证,DEGs的mRNA表达量与RNA-seq结果一致。结论高原低氧环境可通过激活IL-17信号通路,促进下游炎症因子释放,诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生。

关键词：高原低氧转录组学 IL-17信号通路脾脏组织炎症 RNA测序生物信息学

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究马齿苋生物碱对溃疡性结肠炎小鼠的作用及机制

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中国中药杂志 2024年

作者：郑佳慧宋英英张天赐王文婷杨志平艾金霞北华大学医学技术学院北华大学临床医学院北华大学附属医院

旨在研究马齿苋及其化学成分就葡聚糖硫酸钠（DSS）引发的溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠组织Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核因子kappaB（NF-κB）炎症信号通路的功能和调控机制。35只小鼠随机分为空白组、模型组、美沙... 详细信息

旨在研究马齿苋及其化学成分就葡聚糖硫酸钠（DSS）引发的溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠组织Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核因子kappaB（NF-κB）炎症信号通路的功能和调控机制。35只小鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.5 g·kg-1)、马齿苋生物碱低剂量(9 mg·kg-1)组、马齿苋生物碱中剂量(18 mg·kg-1)组、马齿苋生物碱高剂量(36 mg·kg-1)组、联合治疗组，每组5只。空白组小鼠饮用纯净水，其他组连续7 d饮用3% DSS溶液诱导UC模型。从第8天开始，给药组小鼠按照上述设定的剂量经口灌胃给药，持续14 d。每天记录小鼠整体状态、体质量、粪便特征和血便情况；实验完毕后评估各组小鼠的疾病活动指数（DAI），并测量结肠长度；使用苏木精-伊红（HE）染色检查结肠组织的病理变化；采用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术检测血清中促炎因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平；使用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR（qPCR）技术对结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB的蛋白和mRNA表达进行检测。结果显示，与空白组相比，模型组小鼠体质量显著下降；DAI评分显著增加；结肠长度显著缩短，组织病理损害明显；血清中炎症因子TNF-α和IL-1β水平显著增加；结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB的蛋白和mRNA表达显著上调。与模型组相比，马齿苋生物碱给药可显著改善小鼠的症状和体质量下降情况；减少DAI评分；缓解结肠组织的短缩；减轻小鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平，降低结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白与mRNA的表达水平，以及病理学上的损害。综上，研究表明马齿苋生物碱可减轻DSS诱导UC小鼠的肠道炎症损伤，作用机制涉及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路。

关键词：溃疡性结肠炎 TLR4 My D88 NF-κB 马齿苋生物碱

钙敏感受体在心肌损伤中介导的信号通路研究进展

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中国全科医学 2024年

作者：沈明妹吕俞娇张尚博周鑫辰董姝含张卓刘永超北华大学医学技术学院

钙敏感受体（CaSR）是一种G蛋白偶联受体，可以诱导高度扩散的信使以激活各种细胞反应。最近研究认为CaSR介导内质网、线粒体、细胞核之间的信号通讯，且此过程与心肌损伤相关。心肌细胞为永久细胞，不可再生。因此，本文将重点介绍CaS... 详细信息

钙敏感受体（CaSR）是一种G蛋白偶联受体，可以诱导高度扩散的信使以激活各种细胞反应。最近研究认为CaSR介导内质网、线粒体、细胞核之间的信号通讯，且此过程与心肌损伤相关。心肌细胞为永久细胞，不可再生。因此，本文将重点介绍CaSR在心肌损伤中的相关调控机制，梳理其介导的复杂细胞内信号传导网络，为寻找心肌损伤治疗新靶点提供思路。

关键词：心肌损伤心肌肥大心肌纤维化钙敏感受体

G-四链体结构与DNA甲基化修饰的交互影响:当前研究与未来展望

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化学通报 2024年第9期87卷 1098-1106页

作者：周鑫辰张卓董姝含靳茁战星彤王鹤霖杨舒惠刘丽梅北华大学医学技术学院微生物学检验教研室吉林市132013

基因表达调控是生物学中复杂而关键的过程,涉及细胞内外多因素及DNA结构构成。DNA双螺旋是基本形式,但非规范DNA结构如G-四链体(G4)在基因组关键区域中广泛存在,参与调节基因表达、维持染色体稳定性和影响端粒伸长。G4同时存在于DNA和RN... 详细信息

基因表达调控是生物学中复杂而关键的过程,涉及细胞内外多因素及DNA结构构成。DNA双螺旋是基本形式,但非规范DNA结构如G-四链体(G4)在基因组关键区域中广泛存在,参与调节基因表达、维持染色体稳定性和影响端粒伸长。G4同时存在于DNA和RNA中,与基因表达调控密切相关。DNA甲基化是表观遗传标记,近年研究发现其与多种疾病关联,影响细胞功能。本文综述G4与DNA甲基化的关系,特别在CpG(Cytosine-phosphate-Guanine)岛区域的相互影响,为相关疾病的预防和治疗提供新策略。

关键词： G-四链体 DNA甲基化 CpG岛 DNA复制染色质结构状态

基于脂质组学分析揭示高原低氧对小鼠脾组织磷脂代谢的调控机制

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第9期40卷 1289-1299页

作者：王昕郭玉静王嘉阳汪晓筠胡英青海大学医学院基础医学部免疫学教研室西宁810016

脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。... 详细信息

脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。将C57BL/6小鼠分别置于海拔4200 m(高原低氧组,HST组)和400 m(平原常氧组,PSC组),30 d取脾组织。使用超高效液相色谱-Orbitrap质谱系统进行脂质组学分析。30 d时在高原低氧环境下,小鼠脾指数降低,并出现白髓减少,生发中心扩大,边缘模糊,静脉充血等病理学改变。脂质组学分析结果显示,共鉴定到41种脂质亚类和2473种脂质分子,甘油三酯(triacylglycerides,TGs)和磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PCs)为脂质分子鉴别到最多的2种。使用单变量和多变量分析,鉴定到44个差异脂质分子,它们主要集中于磷脂代谢。随后,对磷脂代谢途径中的关键酶进行RT-qPCR检测,发现其mRNA表达量均有差异(P<0.05)。提示高原低氧环境主要影响小鼠脾组织磷脂代谢,并通过减少PC和磷脂酸(phosphatidic acid,PA)含量,促进其转化为磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)和心磷脂(cardiolipin,CL)并通过CDP-乙醇胺(CDP-Ethanolamine,CDP-Etn)途径促进PE生成。该研究为高原低氧环境下脾组织中磷脂代谢异常提供新的实验依据。

关键词：低氧脾脂质组学磷脂酰乙醇胺心磷脂

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有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第5期40卷 428-434页

作者：李洋洋崔琳张宇彤郑佳慧艾金霞北华大学医学技术学院吉林132013

目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试... 详细信息

目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。

关键词：乙酰胆碱酯酶多克隆抗体有机磷农药胶体金试纸条免疫层析法

结肠固有层巨噬细胞在溃疡性结肠炎中的作用研究

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中华炎性肠病杂志(中英文) 2024年第4期08卷 309-313页

作者：赵鑫姜媛但文利张慧媛李娟施京红陈丽华陕西中医药大学医学技术学院咸阳空军军医大学基础医学院免疫学教研室西安

溃疡性结肠炎(UC)是一种与免疫功能紊乱密切相关的肠道慢性复发性炎性疾病。结肠固有层巨噬细胞是肠黏膜中最为丰富的巨噬细胞群体, 能够有效维持和调节肠道内环境的稳定, 其介导的炎症反应在UC发生发展中发挥重要作用。本文围绕两种不... 详细信息

溃疡性结肠炎(UC)是一种与免疫功能紊乱密切相关的肠道慢性复发性炎性疾病。结肠固有层巨噬细胞是肠黏膜中最为丰富的巨噬细胞群体, 能够有效维持和调节肠道内环境的稳定, 其介导的炎症反应在UC发生发展中发挥重要作用。本文围绕两种不同亚型的结肠固有层巨噬细胞在UC中的作用机制进行综述, 以期为UC的临床治疗提供新思路。

关键词：溃疡性结肠炎巨噬细胞结肠固有层细胞因子

穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 645-651页

作者：江涛由涌夏东帅薄思涵王永为高亚贤宋鸿儒承德医学院基础医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学院解剖学教研室河北承德067000 河北北方学院医学检验学院免疫学教研室河北张家口075000

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 详细信息

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。

关键词：穿山龙薯蓣皂苷自噬类风湿性关节炎胶原诱导性关节炎 p62 LC3 Beclin-1