检索结果-南通市图书馆

扩展性无创产前检测应用于孕期产前筛查的临床效果分析

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中华医学遗传学杂志 2021年第11期38卷 1041-1044页

作者：代鹏赵干业郭婉莹郜珊珊孔祥东郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心 450052 北京贝瑞和康生物技术有限公司 100015

目的分析将扩展性无创产前检测(expanded non-invasive prenatal testing,NIPT plus)应用于孕期产前筛查的临床效果。方法回顾2018年9月至2019年12月在本中心自愿接受NIPT-plus检测的3700例孕妇的筛查结果、产前诊断以及妊娠结局。结果... 详细信息

目的分析将扩展性无创产前检测(expanded non-invasive prenatal testing,NIPT plus)应用于孕期产前筛查的临床效果。方法回顾2018年9月至2019年12月在本中心自愿接受NIPT-plus检测的3700例孕妇的筛查结果、产前诊断以及妊娠结局。结果在3700例孕妇中,74例(2.0%)的结果为高风险,其中63例孕妇接受了侵入性产前诊断,确诊19例,阳性预测值为30.2%。NIPT-plus对于常见染色体三体的阳性预测值较高,对性染色体非整倍体和微缺失微重复的阳性预测值为中低水平。结论作为一种新的筛查技术,NIPT-plus较传统的方法具有更广阔的应用前景,可为临床医师和孕妇提供重要的参考。

关键词：扩展性无创产前检测自愿筛查临床效果

蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA检测方法的建立

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食品工业科技 2022年第5期43卷 294-301页

作者：刘河冰秦誉邢维维马立才北京维德维康生物技术有限公司北京100095

目的:旨在建立一种检测蘑菇中鹅膏毒肽(Amanitin,AMA)的间接竞争酶联免疫吸附方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:通过EDC/NHS在α-鹅膏毒肽的羧基位置引入6-氨基己酸得到半抗原,并进一步与不同的载体蛋白偶联制备免疫原和包被原。之后,利用免疫原免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体。基于所获得的抗体,并通过对包被原和抗体工作浓度、包被条件、封闭条件、酶标二抗工作浓度和孵育时间等条件的优化,建立了蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA检测方法,最后对所建立方法的灵敏度、添加回收率、批内及批间变异等参数进行了评价。结果:合成的半抗原分子量为1033.12,经MALDI-TOF鉴定免疫原的偶联比约为10.03。基于杂交瘤技术制备、筛选出鼠单克隆抗体13H4的IC50为1.91μg/L。基于所获得单克隆抗体,所建立蘑菇中鹅膏毒肽间接竞争ELISA方法的检出限为0.88μg/kg,添加回收率为85.66%~113.05%,批内变异系数为5.35%~9.54%,批间变异系数小于15%。结论:本研究所建立的ic-ELISA方法准确度、精密度、灵敏度较高、性能稳定,为突发毒蘑菇中毒事件的毒原分析提供了一种简便、可靠的快速检测方法。

关键词：蘑菇鹅膏毒肽间接竞争酶联免疫吸附测定法

牛奶中喹诺酮类药物残留的AlphaLISA检测方法的研究

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食品工业科技 2023年

作者：马立才邢维维于莹贾良曦秦誉金兴丁亚芳北京维德维康生物技术有限公司

本文旨在建立一种可检测牛奶中喹诺酮类药物（Quinolones， QNS）残留的均相光激化学发光免疫分析方法（AlphaLISA）。采用EDC/NHS活泼酯法在诺氟沙星分子连接6-氨基己酸作为间隔臂，制备生物素修饰诺氟沙星半抗原（Biotin-6AS-NOR），... 详细信息

本文旨在建立一种可检测牛奶中喹诺酮类药物（Quinolones， QNS）残留的均相光激化学发光免疫分析方法（AlphaLISA）。采用EDC/NHS活泼酯法在诺氟沙星分子连接6-氨基己酸作为间隔臂，制备生物素修饰诺氟沙星半抗原（Biotin-6AS-NOR），并在受体微球上偶联QNS单克隆抗体，Biotin-6AS-NOR可与牛奶样品中的QNS竞争结合喹诺酮抗体；通过优化受体微球的QNS抗体偶联量，Biotin-6AS-NOR及供/受体微球的用量等参数，以及牛奶样品的稀释方案，建立了牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法。采用1:5牛奶样品稀释方案，所建立牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法的检出限和定量限分别为0.19 ng/mL和0.46 ng/mL，回收率范围为85.97%～110.11%之间，日内和日间变异系数均小于10%，对诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、达氟沙星和洛美沙星的交叉反应率均高于70%。本研究所建立AlphaLISA检测方法具有灵敏度和准确度高、重复性好等优点，且在整个检测过程中不需要繁琐洗涤操作，具有较高的应用和推广价值。

关键词：喹诺酮类半抗原生物素 AlphaLISA

选择无创产前检测的孕妇是否有必要行NIPT-plus:50例结果的分析

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中华医学遗传学杂志 2021年第9期38卷 895-899页

作者：代鹏赵干业郜珊珊陈绍宁张凤敏郭婉莹孔祥东郑州大学第一附属医院妇产科遗传与产前诊断中心 450052 北京贝瑞和康生物技术有限公司 100015

目的探讨产前筛查的孕妇是否必要选择扩展性无创产前检测(expanded non-invasive prenatal testing,NIPT-plus)。方法对比分析50例孕妇NIPT和NIPT-plus检测的测序数据量、胎儿游离DNA浓度、产前诊断结果和妊娠结局等。结果NIPT-plus与N... 详细信息

目的探讨产前筛查的孕妇是否必要选择扩展性无创产前检测(expanded non-invasive prenatal testing,NIPT-plus)。方法对比分析50例孕妇NIPT和NIPT-plus检测的测序数据量、胎儿游离DNA浓度、产前诊断结果和妊娠结局等。结果NIPT-plus与NIPT相比,胎儿游离DNA浓度相近,测序数据量提高了4.4倍。NIPT能够检测出NIPT-plus提示的4例21-三体、2例18-三体和9例性染色体非整倍体(sex chromosome aneuploidies,SCAs)高风险,漏检1例-18三体,无法检测出罕见染色体非整倍体(rare chromosome aneuploidies,RCAs)和染色体微缺失/重复综合征(microdeletion/microduplication syndrome,MMS)。NIPT-plus对21-三体、18-三体、SCAs、MMS和RCAs的PPVs分别为100%、100%、44.4%、30.4%和0%。NIPT对21-三体、18-三体和SCAs的阳性预测值分别为100%、100%和44.4%。结论孕妇有必要选择NIPT-plus,以提高常见的染色体三体、SCAs和MMS的检出率,降低出生缺陷率。

关键词：无创产前检测染色体病阳性预测值

肺腺癌患者血浆和肿瘤标本中表皮生长因子受体基因T790M位点突变检测一致性研究

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中华肿瘤杂志 2018年第1期40卷 35-39页

作者：杜俊王征杨丽邸婧张建光王天阳刘东戈北京医院病理科国家老年医学中心 100730 北京贝瑞和康生物技术股份有限公司 102206

目的探讨肺腺癌患者血浆和肿瘤标本中表皮生长因子受体（EGFR）基因T790M位点突变检测结果的一致性。方法收集12例可手术切除（I～ⅢA期）及100例进展期（ⅢB～IV期）肺腺癌患者的组织或细胞学肿瘤标本，其中11例标本为吉非替尼获得性... 详细信息

目的探讨肺腺癌患者血浆和肿瘤标本中表皮生长因子受体（EGFR）基因T790M位点突变检测结果的一致性。方法收集12例可手术切除（I～ⅢA期）及100例进展期（ⅢB～IV期）肺腺癌患者的组织或细胞学肿瘤标本，其中11例标本为吉非替尼获得性耐药患者，并配对采集患者外周血标本。同期获得50例健康志愿者外周血标本。肿瘤标本采用扩增受阻突变系统方法检测EGFR基因突变。配对血浆标本采用二代测序环化单分子扩增和重测序技术检测循环肿瘤DNAEGFR基因突变。结果100例进展期肺腺癌患者血浆和肿瘤标本中，EGFR基因T790M位点突变的敏感度、特异度和一致率分别为50．O％、72．9％和72．0％，L858R位点突变的敏感度、特异度和一致率分别为91．7％、100．0％和98．O％，19外显子缺失突变的敏感度、特异度和一致率分别为79．2％、100．0％和95．0％。50例健康志愿者血浆中T790M突变[（1．0±0．0）拷贝]7例（14．0％），未检出L858R突变和19外显子缺失突变。12例可手术切除肺腺癌患者血浆中，T790M突变[（1．2±0．2）拷贝]4例（33-3％）．未检出L858R和19外显子缺失突变。100例进展期肺腺癌患者血浆中，T790M位点突变28例（28．0％），拷贝数为（34．0±22．7）拷贝。11例获得性吉非替尼耐药患者血浆中，T790M突变5例，拷贝数为（268．2±119．9）拷贝。结论进展期肺腺癌患者血浆及肿瘤标本中，检测T790M位点的敏感度、特异度和一致率低。健康志愿者血浆中存在T790M突变，可能提示T790M位点突变为EGFR信号传导路径的调节者，且在健康人群中具有一定的生理功能。

关键词：癌非小细胞肺腺癌受体表皮生长因子点突变 T790M

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无创产前检测技术及其最新进展

无创产前检测技术及其最新进展

一例6q部分三体1q部分单体患儿的分子细胞遗传学分析

2013浙江省医学遗传学学术年会

作者：周代星北京贝瑞和康生物技术有限公司

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关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华医学遗传学杂志 2016年第2期33卷 231-234页

作者：秦凤金路晓燕冯亚佩唐培红牛刚李樊张建海胜利油田中心医院妇产科山东东营257034 北京贝瑞和康生物技术有限责任公司 100015

目的确定1例多发畸形患儿的核型，探讨二代测序技术在其分子遗传学诊断中的应用。方法应用G显带对患儿及其父母进行核型分析，进一步采用二代测序技术对三者进行测序分析，确定其异常染色体片段的大小及来源，并用Mate-pair及PCR确定其... 详细信息

目的确定1例多发畸形患儿的核型，探讨二代测序技术在其分子遗传学诊断中的应用。方法应用G显带对患儿及其父母进行核型分析，进一步采用二代测序技术对三者进行测序分析，确定其异常染色体片段的大小及来源，并用Mate-pair及PCR确定其是否来源于父母。结果G显带染色体分析显示患儿核型为46，XX，add（1）（q44）dn，其父母核型正常；二代测序结果显示患儿存在6q24．3-q27三体，并将断裂位点定位于6q24．3，此外还发现患儿1号染色体存在一约2．5Mb的微缺失，其父母二代测序结果正常；Mate-pair及PCR分析提示上述部分三体为新发畸变。结论患儿的异常表型可能与6q部分三体有关。与传统的细胞遗传学分析方法相比，二代测序具有高分辨率和高精确性的优点。

关键词： 6q部分三体二代测序技术智力低下语言障碍

同时检测猪肉中4种抗菌药物残留的ELISA方法研究

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畜牧与兽医 2022年第11期54卷 57-64页

作者：邢维维荣佳彭庆娟秦誉马立才北京维德维康生物技术有限公司北京100095 新希望六和股份有限公司北京100102

旨在建立一种前处理简单,且能同时检测磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶的定性ELISA方法。磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶抗原分别包被于不同的酶标微孔内,将待测样本与4种药物的单克隆抗体及酶标二抗充分混合,室... 详细信息

旨在建立一种前处理简单,且能同时检测磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶的定性ELISA方法。磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶抗原分别包被于不同的酶标微孔内,将待测样本与4种药物的单克隆抗体及酶标二抗充分混合,室温预反应1 min,取100μL上述混合反应液分别加至4种酶标微孔内进行检测。本研究通过对混合抗体稀释液及酶标二抗稀释液的配方进行筛选,建立了能同时检测猪肉中磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶的ELISA方法,并对所建方法进行了敏感性、特异性、重复性等参数进行了评价。结果表明:本研究所建立ELISA方法对猪肉中磺胺甲噁唑、氟苯尼考、替米考星和甲氧苄啶的检出限为分别为25、10、15及10μg·kg^(-1),日内变异系数为2.52%~3.78%,日间变异系数小于5%。本研究建立的快速ELISA检测方法,具有前处理简单、检测时间短、结果可靠、重复性高等优点,为猪肉中相应抗菌药物残留的快速检测提供了可靠的新方法。

关键词：药残多因子 ELISA 猪肉

耐药蛋白NDM-1的双抗体夹心ELISA检测方法研究

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畜牧与兽医 2021年第12期53卷 76-84页

作者：贾良曦杨柳丁亚芳邢维维马立才北京维德维康生物技术有限公司北京100095

旨在建立一种检测细菌中新德里金属β-内酰胺酶(NDM)耐药蛋白双抗体夹心ELISA方法。采用化学合成的方法获得优化后的NDM-1蛋白基因序列,构建表达载体pET-28a-NDM-1(G29-R270),并在大肠杆菌中进行IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot... 详细信息

旨在建立一种检测细菌中新德里金属β-内酰胺酶(NDM)耐药蛋白双抗体夹心ELISA方法。采用化学合成的方法获得优化后的NDM-1蛋白基因序列,构建表达载体pET-28a-NDM-1(G29-R270),并在大肠杆菌中进行IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot验证重组蛋白。以纯化的NDM-1蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,获得了2株杂交瘤细胞株,分别命名为3H5和4G1,分别作为捕获抗体和检测抗体,通过对包被条件、包被抗体和检测抗体浓度等进行优化,建立双抗体夹心ELISA方法,并对所建立方法的敏感性、特异性等进行了评价。结果表明,经15℃条件下诱导16 h后,SDS-PAGE和Western blot显示目的条带清晰,大小正确。经优化后的双抗体夹心ELISA方法中,捕获抗体和检测抗体的稀释度分别为1∶2 000和1∶5 000,使用0.05 mol/L碳酸盐缓冲液(pH值9.6),4℃过夜包被。该方法对NDM-1阳性大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的最低检出浓度为1×10^(5)CFU/mL,NDM-1阳性鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的最低检出浓度为1×10^(6)CFU/mL。该方法检测NDM-1、NDM-4、NDM-5和NDM-9,与4种阳性对照菌有明显的交叉,但与大肠杆菌ATCC 25922、大肠杆菌ATCC 35150、鲍曼不动杆菌ATCC 19606、肺炎克雷伯菌ATCC 10031和铜绿假单胞菌ATCC 9027均无交叉反应。板内变异系数小于6%,板间变异系数小于10%,说明本方法具有良好的重复性。综上所述,本研究建立了一种高特异性和高灵敏的双抗体夹心ELISA方法,为耐碳青霉烯类细菌中NDM-1耐药蛋白检测提供了一种技术手段。

关键词：新德里金属β-内酰胺酶-1 单克隆抗体双抗体夹心ELISA方法