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全球应对流行性感冒大流行的疫苗策略

中华预防医学杂志 2009年第10期43卷 849-851页

作者：尹卫东公雪杰高虹北京科兴生物制品有限公司 100085

2009年4月墨西哥出现一种新的甲型H1N1流行性感冒（简称流感）暴发，并在短短的2个月内传播到全球。6月11日世界卫生组织（WHO）把流感大流行警戒级别提升为最高的6级，表明世界正处在2009年流感大流行的开端。面对这场21世纪的第1次流... 详细信息

2009年4月墨西哥出现一种新的甲型H1N1流行性感冒（简称流感）暴发，并在短短的2个月内传播到全球。6月11日世界卫生组织（WHO）把流感大流行警戒级别提升为最高的6级，表明世界正处在2009年流感大流行的开端。面对这场21世纪的第1次流感大流行，人类历史上首次在流感大流行来临之前进行了充分的政策、技术、物资、药品等各方面的准备。笔者着重介绍WHO与各国政府应对流感大流行的疫苗策略。

关键词：流行性感冒疫苗策略甲型H1N1流感免疫力

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免疫复合物型乙型肝炎疫苗的免疫原性分析

中华微生物学和免疫学杂志 2013年第11期33卷 813-818页

作者：徐静王娟吴刚周嘉琪单璞李计来许丽锋北京生物制品研究所有限责任公司 101111 北京天坛生物制品股份有限公司

目的：分析免疫复合物型乙型肝炎疫苗在小鼠体内和食蟹猴体内的免疫原性。方法免疫复合物型乙型肝炎疫苗单次免疫小鼠，不同时间点采血进行anti-HBs滴度动态检测；不同免疫程序免疫小鼠，进行anti-HBs滴度检测；肌肉注射5μg/只免疫小鼠... 详细信息

目的：分析免疫复合物型乙型肝炎疫苗在小鼠体内和食蟹猴体内的免疫原性。方法免疫复合物型乙型肝炎疫苗单次免疫小鼠，不同时间点采血进行anti-HBs滴度动态检测；不同免疫程序免疫小鼠，进行anti-HBs滴度检测；肌肉注射5μg/只免疫小鼠，ELISPOT方法检测IFN-γ形成斑点数并进行阳转率统计；测定稳定性试验样品的ED50；分别以20μg/只和100μg/只剂量免疫食蟹猴，不同时间点采血检测anti-HBs滴度。结果免疫复合物型乙型肝炎疫苗动态检测anti-HBs滴度均高于重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）；免疫复合物型乙型肝炎免疫2针次anti-HBs滴度可达到重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）免疫3针次水平；免疫复合物型乙型肝炎疫苗细胞免疫检测IFN-γ斑点形成细胞（ SFC）及阳转率高于重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）及酿酒乙型肝炎疫苗国家参考品；免疫复合物型乙型肝炎疫苗长期稳定性优于酿酒酵母乙肝疫苗，ED50值低于后者，高低两种剂量免疫食蟹猴，均可诱导高滴度anti-HBs，且持续性良好。结论免疫复合物型乙型肝炎疫苗有较好的免疫原性，其体液免疫和细胞免疫水平均优于重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）。

关键词：免疫复合物乙型肝炎疫苗免疫原性

重组酵母表达HBsAgP24亚基结合程度对抗原性的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第2期26卷 132-136页

作者：李津苏锦锋张德有星海许毅孙玉杰朱亭玉石男周根喜赵铠北京天坛生物制品股份有限公司 100024 北京生物制品研究所

目的观察HBsAg P24亚基结合紧密程度对其抗原性的影响。方法3批重组酵母表达纯化的P24亚基松弛结合型HBsAg经半转型和转型处理后，成为混合和紧密结合型HBsAg，用HPLC法检测P24亚基结合紧密程度，松弛型和紧密型HBsAg免疫小鼠后，检测N... 详细信息

目的观察HBsAg P24亚基结合紧密程度对其抗原性的影响。方法3批重组酵母表达纯化的P24亚基松弛结合型HBsAg经半转型和转型处理后，成为混合和紧密结合型HBsAg，用HPLC法检测P24亚基结合紧密程度，松弛型和紧密型HBsAg免疫小鼠后，检测NK细胞杀伤活性及抗原特异性脾淋巴细胞增殖活性。将HBsAg吸附于佐剂Al（OH）3凝胶，免疫小鼠后用半数有效剂量法（ED50）检测所诱导的体液免疫应答，用体外相对效力法（RP）检测抗原的反应原性。结果3批松弛型、混合型和紧密型共9组HBsAg P24亚基紧密结合型比率分别在23．00％～32．00％、38．43％～50．98％和39．65％～52．76％之间，混合型组P24亚基紧密结合程度接近紧密型组；3批紧密型HBsAg免疫小鼠后可比松弛型HBsAg诱导更强的NK细胞活性，松弛型HBsAg免后4周内诱导抗原特异性脾淋巴细胞活性高于紧密型HBsAg，但总体上HBsAg仅诱导较弱的特异性脾淋巴细胞应答；紧密型HBsAg组比松弛型组诱导较强的体液免疫应答，1批混合型抗原体液免疫应答低于同批松弛型和紧密型组，2批松弛型组和其同批紧密型组的体液免疫应答程度接近；混合型HBsAg RP平均值显着高于松弛型组（P〈0．01），紧密型组RP平均值小于混合型组。结论重组酵母表达P24亚基结合程度不同的HBsAg均保持一定程度的抗原性。紧密型HBsAg免疫可诱导较强的非特异性NK细胞和体液免疫应答，混合型HBsAg的免疫反应原性较高。

关键词：乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 半数有效剂量(ED50) 体外相对效力(RP)

我国黄热疫苗株病毒结构基因片段遗传特征的分析

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中国生物制品学杂志 2007年第12期20卷 884-886页

作者：董小曼贾峥北京天坛生物制品有限公司北京100024

目的分析中国使用的黄热疫苗株病毒结构基因片段的遗传特征。方法从我国使用的黄热疫苗病毒中提取RNA,对病毒结构基因片段进行扩增及测序,将测序结果与GenBank中黄热病毒Asibi株及黄热病毒疫苗株17D-204和17DD相应的核苷酸序列进行比较... 详细信息

目的分析中国使用的黄热疫苗株病毒结构基因片段的遗传特征。方法从我国使用的黄热疫苗病毒中提取RNA,对病毒结构基因片段进行扩增及测序,将测序结果与GenBank中黄热病毒Asibi株及黄热病毒疫苗株17D-204和17DD相应的核苷酸序列进行比较。结果中国黄热疫苗株在基因分子水平上具有17D疫苗株的基本减毒特征,与17DD株不同,与17D-204株更为相近。结论中国黄热疫苗株源自17D-204株,是安全有效的减毒株,且具有自身特有的遗传特征。

关键词：黄热疫苗病毒株结构基因遗传特征

狂犬病病毒抗体竞争ELISA检测方法的建立及初步应用

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中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1355-1359页

作者：王伟伟王远征张国强马昱北京天坛生物制品有限公司北京100024

目的建立狂犬病病毒抗体竞争ELISA检测方法,用于不同株狂犬病疫苗免疫后抗体水平的检测。方法用市售的不同狂犬病疫苗株抗原免疫NIH小鼠,制备免疫血清,用不同的疫苗株抗原包被酶标板,分别测定小鼠血清抗体效价,并通过不同株抗原抗体的... 详细信息

目的建立狂犬病病毒抗体竞争ELISA检测方法,用于不同株狂犬病疫苗免疫后抗体水平的检测。方法用市售的不同狂犬病疫苗株抗原免疫NIH小鼠,制备免疫血清,用不同的疫苗株抗原包被酶标板,分别测定小鼠血清抗体效价,并通过不同株抗原抗体的交叉中和实验,分析抗原的差异性;在此基础上,将不同毒株抗原按不同比例混合包被酶标板,分别测定阳性血清样本,并与快速免疫荧光抑制试验(RFFIT)检测结果比较,确定包被抗原模式,建立狂犬病病毒抗体竞争ELISA检测方法,绘制标准曲线,确定最佳定量范围及灵敏度,确定Cut-off值;并对其特异性、精密性、准确性及稳定性进行验证;用建立的方法与其他市售狂犬病病毒抗体检测试剂分别检测血清样品,分析检测结果的一致性及相关性。结果狂犬病病毒抗原AG∶CTN-1=4∶1为最适包被抗原模式,试剂经优化后,检测抗体效价范围在535.00～33.44 mIU/ml之间,具有良好的线性关系(r>0.99),最低检出限为8.36 mIU/ml,Cut-off值为0.735 mIU。该方法检测人血清白蛋白、破伤风阳性血清、乙肝表面抗原阳性血清、白喉阳性质控血清均未发生反应;试验内变异系数在6.68%～7.84%之间;回收率在97.25%～104.50%之间;试剂置37℃3 d,与4℃保存试剂测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。该方法检测血清样品与市售狂犬病病毒抗体检测试剂比较,均具有良好的一致性;与RFFIT测定结果比较,二者差异无统计学意义(P>0.05),回归方程为Y=-0.475+3.246 X,相关系数为0.801。结论已建立了狂犬病病毒抗体竞争ELISA检测方法,可用于大规模狂犬病病毒抗体的筛查。

关键词：狂犬病病毒抗体酶联免疫吸附测定快速免疫荧光抑制试验

近红外光谱法对同仁乌鸡白凤丸的定性和定量分析

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红外与毫米波学报 2008年第3期27卷 205-209,218页

作者：聂黎行王钢力李志猛林瑞超中国药品生物制品检定所北京100050 北京同仁堂股份有限公司北京100051

采用近红外漫反射光谱分析技术对同仁乌鸡白凤丸进行定性和定量分析.采集了98份同仁乌鸡白凤丸和58份不同厂家乌鸡白凤丸样品的近红外漫反射光谱.采用判别分析法对同仁乌鸡白凤丸和乌鸡白凤丸进行鉴别.以70份同仁乌鸡白凤丸的近红外光... 详细信息

采用近红外漫反射光谱分析技术对同仁乌鸡白凤丸进行定性和定量分析.采集了98份同仁乌鸡白凤丸和58份不同厂家乌鸡白凤丸样品的近红外漫反射光谱.采用判别分析法对同仁乌鸡白凤丸和乌鸡白凤丸进行鉴别.以70份同仁乌鸡白凤丸的近红外光谱为标准,建立相似度匹配模型,并将其用于计算其余样品的相似度.采用偏最小二乘回归法建立了同仁乌鸡白凤丸总氨基酸、芍药苷、水分含量的定量分析模型,对未知样品进行含量预测.结果判别分析模型的错判数为0.相似度匹配模型能正确区分同仁乌鸡白凤丸和乌鸡白凤丸.校正模型的相关系数分别为0.9614,0.9651,0.9910,验证集均方差分别为0.199%,0.00436%,0.386%.本方法准确可靠,操作简便,快速无损,可推广用于工业现场的原位检测.

关键词：近红外光谱定性分析定量分析同仁乌鸡白凤丸

甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的研制和临床观察初步结果

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第1期30卷 36-40页

作者：张劲峰郭玉芬杨云凯徐程林陈海平柯伟张晋陈美丽丁玲董春明李芙张文璇王辉崔萱林北京天坛生物制品股份有限公司 100024

目的研制甲型H1N1流感疫苗并进行人体安全性和有效性观察。方法用WHO推荐的甲型H1N1流感疫苗毒种按照季节性流感裂解疫苗工艺研制甲型H1N1流感疫苗，成品参照流感病毒裂解疫苗质量标准进行各项指标检定，用2批血凝素含量不同的试制产品... 详细信息

目的研制甲型H1N1流感疫苗并进行人体安全性和有效性观察。方法用WHO推荐的甲型H1N1流感疫苗毒种按照季节性流感裂解疫苗工艺研制甲型H1N1流感疫苗，成品参照流感病毒裂解疫苗质量标准进行各项指标检定，用2批血凝素含量不同的试制产品进行临床验证。结果血凝素含量15μg／剂和30μg／剂各1批试制产品经检定并由中国药品生物制品检定所复检，符合暂定质量标准要求。临床观察显示，960名受试者接种15μg或30μg试验疫苗1针，21d后血清抗体阳性率、保护率均大于70％。3～11岁、12～17岁、18—59岁及≥60岁，15μg组几何平均滴度（GMT）分别较免疫前增长15、39、37和25倍；30μg组GMT分别较免疫前增长26、72、68和36倍。安全性观察结果显示15μg和30μg组总的不良反应发生率为29．38％和43．75％，其中2级反应率为6．25％和15．42％，3级反应率为0．83％和1．46％，未观察到严重不良反应。结论按照季节性流感生产工艺研制的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗具有良好的安全性和有效性。

关键词：甲型H1N1流感疫苗研制临床观察

肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖基团定量检测方法的优化及验证

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中国生物制品学杂志 2017年第5期30卷 525-529,535页

作者：赵喆张颖孙胜军蔡芳高强北京科兴生物制品有限公司北京100085

目的优化肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖基团的定量检测方法,并进行验证。方法对肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖基团定量检测方法的水解条件(盐酸溶液分别为4、8、10 mol/L,时间分别为0.5、1、2、4、4.5、5、6 h)和乙酰化条件(温度分别为80、9... 详细信息

目的优化肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖基团的定量检测方法,并进行验证。方法对肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖基团定量检测方法的水解条件(盐酸溶液分别为4、8、10 mol/L,时间分别为0.5、1、2、4、4.5、5、6 h)和乙酰化条件(温度分别为80、90、100℃,时间分别为30、45、60、90、120 min)进行优化,并验证该方法的专属性、线性、准确性、精密性及耐用性。结果最佳水解条件为10 mol/L盐酸溶液水解2 h;最佳乙酰化条件为90℃水浴45 min。该方法可特异性检测肺炎球菌荚膜多糖中氨基己糖的含量;D-盐酸氨基葡萄糖对照品溶液浓度在100~500μg/ml时,与A_(530)值呈良好的线性关系,R^2均>0.99;3次检测11个血清型肺炎球菌荚膜多糖样品的加标回收率均在90%~110%间;该方法的重复性及中间精密度的变异系数(CV)均<2%;6份D-盐酸氨基葡萄糖对照品溶液乙酰化不同时间的CV值为1.3%~5.2%。结论该方法具有良好的专属性、线性、准确性、精密性及耐用性,可用于肺炎球菌荚膜多糖中氨基已糖含量的检测。

关键词：肺炎球菌荚膜多糖氨基己糖水解乙酰化

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抗肠道病毒71型单克隆抗体的制备及鉴定

中国生物制品学杂志 2009年第12期22卷 1210-1212页

作者：崔文禹徐静李树香刘敬王欣怡赵玉秀陈蕾沈心亮北京生物制品研究所北京100024 北京天坛生物制品股份有限公司北京100024

目的制备肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法将RD细胞和Vero细胞培养的EV71原液通过氯化铯超速离心纯化,分别作为免疫抗原和检测抗原,制备单克隆抗体。通过Westernblot分析、间接免疫荧光试验和ELISA法鉴定单抗的特异... 详细信息

目的制备肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法将RD细胞和Vero细胞培养的EV71原液通过氯化铯超速离心纯化,分别作为免疫抗原和检测抗原,制备单克隆抗体。通过Westernblot分析、间接免疫荧光试验和ELISA法鉴定单抗的特异性。采用间接ELISA法测定单抗的酶标效价,微量细胞培养中和试验测定单抗的中和效价。结果获得1株可稳定分泌抗EV71单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的单抗可与EV71特异性结合,酶标效价为1∶204800,中和效价为1∶28。结论已成功筛选出1株分泌抗EV71的单抗细胞株,为建立EV71疫苗抗原含量测定方法奠定了基础。

关键词：肠道病毒71型单克隆抗体制备鉴定