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雷公藤建立卵巢早衰大鼠模型的实验研究

中国实验动物学报 2023年第3期31卷 355-364页

作者：范雅祺郑燕鹏周子婷崔慕瑶李司琪单雪燕李鑫李莉王尚龙刘自民邹圣灿孙紫薇李玲孺北京中医药大学中医学院北京100020 青岛琛蓝生物科技有限公司山东青岛266200 青岛琛蓝健康产业集团有限公司山东青岛266000 琛蓝研究所山东青岛266000 北京中医药大学国家中医体质与治未病研究院北京100020

目的对比间隔12 h与间隔24 h观察动情周期的方法在评价动情周期紊乱程度中的优缺点,并探究间期取材对于雷公藤诱导的卵巢早衰大鼠模型评价的意义。方法将60只动情周期规律的雌性SD大鼠随机分为空白1、2组,模型1、2组(n=15)。空白组灌胃... 详细信息

目的对比间隔12 h与间隔24 h观察动情周期的方法在评价动情周期紊乱程度中的优缺点,并探究间期取材对于雷公藤诱导的卵巢早衰大鼠模型评价的意义。方法将60只动情周期规律的雌性SD大鼠随机分为空白1、2组,模型1、2组(n=15)。空白组灌胃生理盐水,模型组灌胃雷公藤多苷片(TG)混悬液,连续15 d。空白1组、模型1组每日8.00行阴道脱落细胞学检测;空白2组、模型2组间隔12 h行阴道脱落细胞学检测,每周称量体重。干预后第15~17天于间期处死动情周期正常的大鼠,在第15天处死动情周期紊乱的大鼠。测定血清性激素,计算卵巢、子宫指数,观察卵巢病理改变。结果与空白组比,模型组大鼠动情周期紊乱,间隔24 h观察,正常动情周期数目显著减少、动情期显著缩短、间期显著延长;间隔12 h观察,8.00较20:00观察的结果更能体现两组间的差异性,且综合间隔12 h两次观察的结果在动情周期紊乱水平(I与IV级)上差异具有显著性。于间期取材,TG组血清INHB、E2显著降低,FSH显著升高,全周期取材结果差异无显著性。因血清AMH水平不受动情周期变化而波动,全周期或间期取材的结果均显示TG组血清AMH显著降低。TG组卵巢与子宫指数显著下降,卵泡间结构混乱,总卵泡、原始卵泡、生长卵泡、黄体数显著减少,闭锁与囊状扩张卵泡数显著增多,并出现浆细胞浸润。结论雷公藤可致大鼠卵巢功能明显衰退,卵泡发育障碍,卵巢储备下降。间隔12 h行阴道脱落细胞学检测,有助于捕捉亚周期阶段细胞学变化,反映真实的动情周期变化,较间隔24 h观察结果更能体现模型组动情周期的紊乱程度,但其可行性有待进一步探究。于间期处死,能反映大鼠基础性激素水平,利于评价雷公藤建立卵巢早衰大鼠模型的成功率。亚周期阶段下对比组间卵巢病理变化,客观地体现雷公藤对卵泡发育及黄体功能的不良影响。

关键词：卵巢早衰雷公藤大鼠模型

基于UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术的小儿豉翘清热颗粒化学成分鉴定及网络药理学研究

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中国中药杂志 2021年第23期46卷 6163-6177页

作者：张艳周严严高文雅崔梦瑶边宝林倪理琪王坤王宏洁司南赵海誉中国中医科学院中药研究所北京100700 江西中医药大学江西南昌300043 济川药业集团有限公司江苏泰州225400

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术对小儿豉翘清热颗粒中的化学成分进行定性分析,明确其物质基础,同时结合其入血成分,整合网络药理学研究方法探讨小儿豉翘清热颗粒潜在的作用机制。选用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8.m)色... 详细信息

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术对小儿豉翘清热颗粒中的化学成分进行定性分析,明确其物质基础,同时结合其入血成分,整合网络药理学研究方法探讨小儿豉翘清热颗粒潜在的作用机制。选用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8.m)色谱柱和0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)流动相系统进行梯度洗脱;高分辨液质联用质谱正负离子扫描模式;根据精确相对分子质量数据和多级质谱碎片离子,结合对照品比对以及文献报道,共从小儿豉翘清热颗粒中分析鉴定了124个化学成分,其中有29个化合物经对照品比对完全确定。并借助UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术阐明小儿豉翘清热颗粒的主要入血成分,利用BATMAN-TCM和SwissTargetPrediction数据库对入血成分进行靶点预测,结合Cytoscape 3.8.2绘制关联网络图,对核心靶基因进行GO以及KEGG通路富集分析,构建成分-靶点-通路网络图,得到8.小儿豉翘清热颗粒治疗小儿发热的主要靶点,以及关键的8.入血成分,甘草次酸、橙皮素、大黄素、reticuline、大豆苷元、magnolignanC、magnolignan A、magnaldehyde D。推断小儿豉翘清热颗粒可能通过肿瘤坏死因子、PI3K-AKT等信号通路,改善消化道系统异常、炎症反应,氧化应激和内分泌紊乱等。该研究全面地阐明小儿豉翘清热颗粒中的化学成分,明确了主要入血成分同时整合网络药理学探讨其潜在机制,为小儿豉翘清热颗粒的临床应用提供了一定的理论参考。

关键词：小儿豉翘清热颗粒 UPLC-ESI-Orbitrap-MS/MS 化学成分入血成分网络药理学

经典名方清心莲子饮特征图谱及TLC鉴别方法的建立

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中国实验方剂学杂志 2023年第11期29卷 34-42页

作者：高文雅马秀景高畅赵海誉周严严王宏洁于睿鹏赵依芃闫翠娥高丽芳司南边宝林中国中医科学院中药研究所北京100700 葵花药业集团(冀州)有限公司河北衡水053200 北京市药品检验研究院北京102206

目的:建立清心莲子饮基准样品的特征图谱及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,以阐明其关键质量属性,为该经典名方的质量评价提供参考。方法:建立清心莲子饮基准样品的高效液相色谱法(HPLC)特征图谱检测方法,采用YMC Hydrosphere C18.谱柱(4.6 m... 详细信息

目的:建立清心莲子饮基准样品的特征图谱及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,以阐明其关键质量属性,为该经典名方的质量评价提供参考。方法:建立清心莲子饮基准样品的高效液相色谱法(HPLC)特征图谱检测方法,采用YMC Hydrosphere C18.谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)进行梯度洗脱(0~10 min,5%~20%A;10~20 min,20%A;20~25 min,20%~24%A;25~40 min,24%~30%A;40~55 min,30%~50%A;55~65 min,50%~100%A;65~75 min,100%A;75~75.1 min,100%~5%A;75.1~90 min,5%A),检测波长360 nm。采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱质谱法(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS),检测条件为电喷雾离子源,正、负离子模式检测,根据精确相对分子质量和多级MS碎片离子信息对清心莲子饮基准样品的化学成分进行鉴别。建立清心莲子饮基准样品中麦冬、地骨皮、莲子、茯苓、黄芪及人参的TLC鉴别方法。结果:特征图谱共标定15个特征峰,分别来自于甘草、车前子和黄芩,以8.峰(黄芩苷)为参照峰,15批清心莲子饮基准样品中特征峰1~15相对保留时间的相对标准偏差均≤3%。通过UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析,在清心莲子饮基准样品中共鉴定了100个化合物,包括黄酮、有机酸、皂苷、氨基酸等成分。建立的TLC分离度良好,适用于清心莲子饮中麦冬、地骨皮、莲子、茯苓、黄芪及人参的鉴别。结论:通过MS指认及来源归属,基本明确了清心莲子饮基准样品的物质基础。建立的清心莲子饮特征图谱及TLC简便稳定、重复性好,可为清心莲子饮的开发和质量控制提供参考。

关键词：经典名方清心莲子饮基准样品高效液相色谱法(HPLC)特征图谱质量控制薄层色谱法(TLC) 超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱质谱法(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)

基于黄酮类成分含量差异的子洲黄芪产地判别模式研究

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北京中医药大学学报 2023年第2期46卷 281-288页

作者：连天赐魏胜利冯紫薇于芳赵婷刘芳田文仓刘凤波张媛北京中医药大学北京102488 中药材规范化生产教育部工程研究中心鲁南制药山东新时代药业有限公司北京同仁堂健康药业宁夏有限公司

目的通过对不同产地黄芪中黄酮类成分含量的测定和分析,为黄芪优质药材商品子洲黄芪的精准产地鉴别提供实验依据。方法以陕西子洲及山西浑源、内蒙古自治区、甘肃省的蒙古黄芪为实验材料,采用高效液相色谱-二极管矩阵检测器(HPLC-PDA... 详细信息

目的通过对不同产地黄芪中黄酮类成分含量的测定和分析,为黄芪优质药材商品子洲黄芪的精准产地鉴别提供实验依据。方法以陕西子洲及山西浑源、内蒙古自治区、甘肃省的蒙古黄芪为实验材料,采用高效液相色谱-二极管矩阵检测器(HPLC-PDA)测定黄芪中主要黄酮类成分含量;基于0.7~1.0 cm直径段黄芪的黄酮类成分含量数据,通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)、聚类分析和Fisher判别分析,筛选子洲黄芪与其他产地黄芪的质量差异性标志物,并构建判别模型。结果获得不同产地黄芪中主要黄酮类成分含量;PCA可基于黄酮类成分含量对子洲黄芪与其他产地黄芪进行初步区分,OPLS-DA确定了4种子洲黄芪与其他产地黄芪的质量差异性标志物,基于质量差异性标志物的不同产地黄芪聚类分析正确率为8..9%,以黄芪紫檀烷苷含量/黄芪异黄烷苷含量和4种黄酮苷含量之和所构建的判别模型对于不同产地黄芪的总体判别率为94.4%。结论通过黄酮类成分判别不同产地黄芪的方法切实可行。

关键词：子洲黄芪产地黄酮类成分

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透视中药国际化

销售与市场(管理版) 2003年第5期 79-81页

作者：陈子久龚邦强北京珍友缘医药科技有限公司上海医药集团有限公司

2002年11月6日,由科技部、国家计委、国家经贸委、卫生部、药品监督管理局、知识产权局、中医药局和中科院共同制订了第一部中药现代化发展纲领性文件《中药现代化发展纲要》,经国务院正式批转后颁布。这标志着我国政府对"中药"这个古... 详细信息

2002年11月6日,由科技部、国家计委、国家经贸委、卫生部、药品监督管理局、知识产权局、中医药局和中科院共同制订了第一部中药现代化发展纲领性文件《中药现代化发展纲要》,经国务院正式批转后颁布。这标志着我国政府对"中药"这个古老而又新兴的战略性产业的高度重视。该《纲要》的核心内容是在造福国人的同时,重点要实现"中药国际化"的战略目标。

关键词：国际医药市场出口额美元 FOA 医药本位币中药现代化中药环保认证药品研发

经典名方开心散特征图谱及TLC鉴别方法的建立

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中国实验方剂学杂志 2023年第13期29卷 37-44页

作者：高文雅冯敏高畅赵海誉周严严王宏洁于睿鹏赵依芃张丽丽高彦青肖艳红程翠娜魏晓露司南边宝林中国中医科学院中药研究所北京100700 葵花药业集团(唐山)生物制药有限公司河北唐山064400 北京市药品检验研究院北京102206

目的建立开心散样品的特征图谱及薄层鉴别方法,以阐明其关键质量属性,为该经典名方的质量评价提供参考。方法建立开心散的高效液相色谱法(HPLC)特征图谱分析方法,采用YMC Hydrosphere C18.谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择乙腈(A)... 详细信息

目的建立开心散样品的特征图谱及薄层鉴别方法,以阐明其关键质量属性,为该经典名方的质量评价提供参考。方法建立开心散的高效液相色谱法(HPLC)特征图谱分析方法,采用YMC Hydrosphere C18.谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相选择乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,2%~20%A;15~25 min,20%~25%A;25~30 min,25%~30%A;30~45 min,30%~31%A;45~50 min,31%~44%A;50~65 min,44%~45%A;65~73 min,45%~75%A;73~95 min,75%~100%A;95~105 min,100%A;105~105.1 min,100%~2%A;105.1~120 min,2%A),检测波长320 nm。采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)对开心散样品的化学成分进行鉴定,检测条件为电喷雾离子源,负离子模式检测,扫描范围m/z 50~2000。建立开心散样品中茯苓和人参的薄层色谱法(TLC)鉴别方法。结果开心散特征图谱共标定11个共有峰,归属远志、茯苓和石菖蒲,以9号峰(α-细辛脑)为参照峰,15批开心散样品相对保留时间的相对标准偏差均<0.2%。通过UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析,共鉴定了34个化合物,包括萜类、苯丙素类、寡糖类及酮类化合物。建立的TLC分离度良好,快速可靠、简便易行,适用于开心散中茯苓和人参的鉴别。结论建立的开心散特征图谱及TLC简便稳定、重复性好,通过MS指认及来源归属,基本明确了开心散样品的物质基础,可为该经典名方的复方制剂开发和质量控制提供参考依据。

关键词：经典名方开心散高效液相色谱法(HPLC)特征图谱质量控制薄层色谱法(TLC) 人参茯苓

不同种源黄芩(子代)药用成分含量的地理变异研究

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中国中药杂志 2018年第13期43卷 2664-2669页

作者：李永杰刘容秀田文仓王学森侯志艳孟磊宋国虎张学文魏胜利北京中医药大学中药学院北京102488 国药集团承德药材有限公司河北承德067000

为了研究不同种源黄芩（子代）药用成分含量的遗传差异,该研究通过随机区组设计布置黄芩种源试验,于生长3年后采挖药材,经统一干燥处理后,采用HPLC测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和千层纸素A含量,并对数据进行分析。结... 详细信息

为了研究不同种源黄芩（子代）药用成分含量的遗传差异,该研究通过随机区组设计布置黄芩种源试验,于生长3年后采挖药材,经统一干燥处理后,采用HPLC测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和千层纸素A含量,并对数据进行分析。结果显示：（1）不同种源黄芩（子代）中所含黄芩苷含量具有显著差异（P〈0.05）,而黄芩素的变异达到了极显著水平（P〈0.01）;（2）聚类分析显示：以距离5.0为划分标准,河北承德地区种源可以划分为2个独立的种群,而其他2个种群地域跨度较大,说明黄芩的药用成分存在较为显著的地理变异。该研究为优质黄芩栽培的种源选择奠定了理论基础。

关键词：黄芩地理变异种源选择黄芩苷

玛咖对虚寒及虚热证大鼠环核苷酸及下丘脑-垂体-甲状腺轴水平的影响

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中华中医药杂志 2019年第1期34卷 364-368页

作者：费文婷王子晨王玉杰周雪张建军王林元温霖北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学中药学院北京102488 新时代健康产业(集团)有限公司北京102206

目的:研究玛咖对虚寒及虚热证大鼠环核苷酸及下丘脑-垂体-甲状腺轴水平的影响。方法:SD大鼠分为空白组、虚寒模型组、虚寒肉桂组(30g/kg)、虚寒玛咖高剂量组(2.4g/kg)、虚寒玛咖低剂量组(1.2g/kg)、虚热模型组、虚热黄柏组(5g/kg)、虚... 详细信息

目的:研究玛咖对虚寒及虚热证大鼠环核苷酸及下丘脑-垂体-甲状腺轴水平的影响。方法:SD大鼠分为空白组、虚寒模型组、虚寒肉桂组(30g/kg)、虚寒玛咖高剂量组(2.4g/kg)、虚寒玛咖低剂量组(1.2g/kg)、虚热模型组、虚热黄柏组(5g/kg)、虚热玛咖高剂量组(2.4g/kg)、虚热玛咖低剂量组(1.2g/kg);采用每日分别肌肉注射氢化可的松琥珀酸钠(20mg/kg)、地塞米松磷酸钠注射液(0.35mg/kg)1次,连续21d的方法制备虚寒证、虚热证模型;通过放免法检测环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、促甲状腺激素释放激素(TRH)、促甲状腺激素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)含量变化。结果:与虚寒模型组比较,虚寒肉桂组及虚寒玛咖高、低剂量组cAMP、cAMP/cGMP、T3、T4均明显升高(P<0.05,P<0.01),cGMP、TRH、TSH、rT3均明显降低(P<0.05,P<0.01);而与虚热模型组比较,虚热玛咖高、低剂量组的cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、TRH、TSH、T3、T4、rT3差异均无统计学意义。结论:玛咖对环核苷酸指标及下丘脑-垂体-甲状腺轴的调整与肉桂一致,与黄柏相反,通过同类比较,异类反证验证了玛咖温热药性。

关键词：玛咖虚寒证虚热证中药药性环核苷酸下丘脑垂体甲状腺

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健康人十二经原穴血流量失衡度的初步观察

针刺研究 2017年第5期42卷 439-443页

作者：赵朋娜王燕平古菲菲李朝政魏玉龙王广军张维波新奥集团新绎健康科技有限公司河北廊坊065001 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 中国中医科学院针灸研究所北京100700

目的:测算健康人十二经原穴血流量及左右失衡度(IBD-LRM)、表里失衡度(IBD-EIM)、手足失衡度(IBD-HFM)的正常值范围,为经络诊断奠定基础。方法:使用激光多普勒线扫描仪(LDLS)测量31名受试者的十二经原穴血流量,计算十二经血流量的分布及... 详细信息

目的:测算健康人十二经原穴血流量及左右失衡度(IBD-LRM)、表里失衡度(IBD-EIM)、手足失衡度(IBD-HFM)的正常值范围,为经络诊断奠定基础。方法:使用激光多普勒线扫描仪(LDLS)测量31名受试者的十二经原穴血流量,计算十二经血流量的分布及IBD-LRM、IBD-EIM、IBD-HFM 3种失衡度。结果:(1)十二经原穴左右两侧血流量几乎相等,IBD-LRM总均值为(0.8.7.0)%;IBD-LRM绝对值介于(13.2±12.0)%至(22.9±15.6)%之间,最大绝对失衡度在胆经,总均值为(16.2±4.1)%。(2)6对表里经中有5对里经(阴经)血流量大于表经(阳经),IBD-EIM总均值为(-11.4±10.4)%,IBD-EIM绝对值在(16.6±12.1)%至(36.6±15.6)%之间,最大绝对失衡度为三焦-心包,总均值为(25.2±8.0)%。(3)6对手足同名经手经血流量均大于足经,IBD-HFM均值为(38.8.18.2)%,IBD-HFM绝对值在(34.4±20.9)%到(59.6±12.0)%之间,最大绝对失衡度为手足少阴经,总均值为(43.8.13.3)%。(4)3种失衡度绝对值的大小排列顺序与以往用经皮二氧化碳释放量(TCE)计算的3种失衡度相同,两指标的IBD-LRM绝对值接近,表里和手足失衡度的绝对值有一定差异。结论:健康人十二经原穴血流量的IBD-LRM较小,基本处于平衡状态,IBD-EIM和IBD-HFM较高。

关键词：血流量失衡度十二经原穴健康人