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脑表面三维重建联合神经电生理监测在中央区药物难治性癫痫术中的应用价值

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中华神经外科杂志 2024年第3期40卷 236-241页

作者：李冬智郑重杨晓丽周峰宋杉葛留锁马延山桑林李敬军北京丰台医院神经外科北京100070 首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070

目的探讨脑表面三维重建联合神经电生理监测在中央区药物难治性癫痫术中的应用价值.方法回顾性分析2019年1月至2022年1月北京丰台医院神经外科行手术切除中央区致痫灶的21例药物难治性癫痫患者的临床资料.术前通过影像学检查进行三维... 详细信息

目的探讨脑表面三维重建联合神经电生理监测在中央区药物难治性癫痫术中的应用价值.方法回顾性分析2019年1月至2022年1月北京丰台医院神经外科行手术切除中央区致痫灶的21例药物难治性癫痫患者的临床资料.术前通过影像学检查进行三维脑表面成像、血管成像及锥体束成像重建,并进行图像融合,以评估致痫灶与中央区的位置关系;通过术中神经电生理监测确定中央沟的位置,并与三维脑表面成像所确定的中央沟位置进行对比,确定中央前回、中央后回的位置.术后2周,3、6、12个月及术后每年对患者进行电话或门诊随访,通过Engel分级评估癫痫控制情况;通过改良Rankin量表评分(mRS)评估患者的神经功能障碍程度.结果 21例患者中,18例(85.7%)患者均成功定位中央沟,且术中神经电生理监测与脑表面三维重建定位的中央沟位置相符;2例(9.5%)中央沟位置不相符;1例(4.8%)未成功确定中央沟.21例患者的手术均顺利完成,其中12例(57.1%)患者的手术切除范围局限于中央区,9例(42.9%)涉及中央区或其边缘.致痫灶切除部位位于左侧13例,右侧8例.术后经病理学证实为局灶性皮质发育不良(FCD)10例,其中FCD Ⅱa型6例,FCD Ⅱb型4例;胚胎发育不良性肿瘤4例,节细胞胶质瘤1例,颅内海绵状血管畸形1例,瘢痕脑回1例,结节性硬化1例,FCD Ⅱb型和节细胞胶质瘤双重病理1例,胶质母细胞瘤1例,未明确1例.术后6例(28.6%)患者新增神经功能障碍(mRS 2分1例,4分5例),其中4例患者术后2周仍存在神经功能障碍(mRS 2分2例,3分2例),但较前均有不同程度的改善.21例患者均获得临床随访,随访时间为(3.1±0.7)年,末次随访显示,Engel分级Ⅰ级18例,Ⅱ级2例,Ⅲ级1例;20例(95.2%)患者的神经功能良好(mRS 1分4例,0分16例),1例(4.8%)为神经功能轻度障碍(mRS为2分).结论脑表面三维重建联合神经电生理监测有助于在保护神经功能的前提下充分切除致痫区,提高手术疗效及安全性,患者预后良好.

关键词：耐药性癫痫监测,手术中治疗结果脑表面三维重建

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神经稳态理论在脑胶质瘤治疗中的实践

中华口腔医学杂志 2024年第2期59卷 145-148页

作者：江涛北京市神经外科研究所分子病理室北京100070 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科北京100070

脑胶质瘤是成人最常见的颅内原发恶性肿瘤,常侵犯重要脑功能区,对传统治疗不敏感,现有手段治疗后致死致残率高,亟需新疗法新理念的探索和应用。神经稳态对于机体正常生理功能的维持至关重要,神经稳态的失衡将导致脑胶质瘤的发生和进展... 详细信息

脑胶质瘤是成人最常见的颅内原发恶性肿瘤,常侵犯重要脑功能区,对传统治疗不敏感,现有手段治疗后致死致残率高,亟需新疗法新理念的探索和应用。神经稳态对于机体正常生理功能的维持至关重要,神经稳态的失衡将导致脑胶质瘤的发生和进展。在脑胶质瘤的临床诊疗过程中,除对肿瘤进行处理外,还应识别神经稳态的失衡,并在术前、术中和术后的治疗中进行充分干预,以达到最佳的治疗效果。神经稳态理论在脑胶质瘤治疗中的探索、发展和应用,将有望改变现有诊疗模式,为脑胶质瘤的临床治疗提供全新的思路。

关键词：神经胶质瘤稳态应变康复预后肿瘤治疗方案

二氢嘧啶脱氢酶在抑郁小鼠脑胶质瘤中的表达及其在胶质瘤恶性进展中的作用

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中华神经外科杂志 2024年第5期40卷 505-511页

作者：李雪静杨静尘刘幸李桂林首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070

目的探讨二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)在抑郁状态小鼠脑胶质瘤中的表达及其在脑胶质瘤恶性进展中的作用。方法采用慢性社会挫败应激实验(由10只14周龄CD-1小鼠轮流攻击C57BL/6J小鼠10 d)构建C57BL/6J小鼠(6周龄)抑郁模型(抑郁组,n=5),采用社会... 详细信息

目的探讨二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)在抑郁状态小鼠脑胶质瘤中的表达及其在脑胶质瘤恶性进展中的作用。方法采用慢性社会挫败应激实验(由10只14周龄CD-1小鼠轮流攻击C57BL/6J小鼠10 d)构建C57BL/6J小鼠(6周龄)抑郁模型(抑郁组,n=5),采用社会交互实验、糖水偏好实验和悬尾实验评价抑郁组与对照组(n=5)C57BL/6J小鼠,判断抑郁模型是否构建成功。采用立体定向技术将GL-261鼠源性胶质瘤细胞注射于两组小鼠尾状核头(各组n=5),构建脑胶质瘤原位模型,并通过7.0 T MRI观察肿瘤原位生长情况。通过RNA测序检测两组小鼠肿瘤的差异表达基因,将表达上调的差异基因匹配至中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)(325例)和癌症基因组图谱(TCGA)(699例)数据库中,通过比较其在高级别胶质母细胞瘤与低级别脑胶质瘤中的表达差异确定目标基因。采用免疫组织化学染色法验证目标基因在小鼠脑胶质瘤组织中的表达情况。通过转染siRNA分别敲低LN229和HG9细胞株中目标基因的表达;根据转染的siRNA定义为敲低#1、#2、#3组及其对照组,并采用蛋白质免疫印迹实验检测各组目标基因的表达量。在LN229和HG9细胞株中应用CCK-8增殖实验、Transwell侵袭实验和划痕修复实验分别验证敲低目标基因对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响(n=3)。结果行为学实验结果显示,与无CD-1小鼠时比较,有CD-1小鼠时抑郁组小鼠在角落区域的停留时间延长,抑郁组较对照组糖水摄入比率下降、悬尾体位时静止时间延长(均P<0.05),提示抑郁模型构建成功。种瘤后第20天的头颅MRI显示抑郁组脑胶质瘤体积[(292.41±8.88)cm^(3)]较对照组[(223.22±41.44)cm^(3)]明显增大(t=2.79,P=0.026)。两组鼠脑组织转录组测序结果显示,1528个差异表达的基因中DPYD(差异倍数为14.51,P=0.012)等670个基因表达上调;经生物信息学分析,将DPYD作为目标基因。免疫组织化学染色结果显示,DPYD蛋白在抑郁组小鼠肿瘤中的阳性表达率高于对照组(t=4.44,P=0.016)。在LN229和HG9细胞株中,与对照组比较,DPYD敲低#1、#2、#3组的DPYD表达量均下降(均P<0.001),其中敲低#1组最为显著。在LN229和HG9细胞株中,与对照组相比,敲低#1组的划痕修复率均下降、60 h时的吸光度值均较低、穿膜细胞数量均减少(均P<0.05)。结论脑胶质瘤进展可能与抑郁情绪相关,抑郁状态下DPYD的表达增高,敲低DPYD可显著降低胶质瘤细胞的侵袭、增殖和迁移能力。

关键词：神经胶质瘤模型,动物抑郁小鼠二氢嘧啶脱氢酶

Hsa-miR-650通过靶向RAC1抑制NF2阴性脑膜瘤的生长

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生物化学与生物物理进展 2024年第7期51卷 1687-1696页

作者：张超李朋王博汪颖刘丕楠首都医科大学附属北京天坛医院神经外科北京100070 首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070

目的本文旨在确定NF2表达阴性脑膜瘤中潜在的miRNA-mRNA轴,研究它们的靶向关系,并确定它们的生物学功能。方法从基因表达数据库(GEO)下载包含与NF2阴性脑膜瘤相关数据的GSE17792数据集。使用R软件中的limma包确定差异表达的mi RNA(De Mi... 详细信息

目的本文旨在确定NF2表达阴性脑膜瘤中潜在的miRNA-mRNA轴,研究它们的靶向关系,并确定它们的生物学功能。方法从基因表达数据库(GEO)下载包含与NF2阴性脑膜瘤相关数据的GSE17792数据集。使用R软件中的limma包确定差异表达的mi RNA(De MiRNAs)。应用miRWalk 2.0数据库获取De MiRNAs的靶基因。利用相互作用基因检索工具(STRING)数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过Cytoscape软件确定核心基因。对筛选出的miRNA进一步验证其表达和生物学作用。结果在NF2阴性脑膜瘤肿瘤样本与蛛网膜组织对照组比较中发现了86个差异mi RNA,其中包括52个上调的mi RNAs和34个下调的miRNAs。在这些差异miRNA中鉴定出与274个靶基因相关的14个mi RNAs,并基于这些数据构建miRNA-靶基因网络。通过cyto Hubba分析显示,在PPI网络中有两个mi RNAs(hsa-miR-650和hsa-miR-623)位于前20个关键核心基因之中。进一步的定量逆转录PCR(q RT-PCR)实验证实,相对于正常脑组织,hsa-miR-650在NF2阴性脑膜瘤中的表达显著增高。下调hsa-miR-650抑制了NF2阴性脑膜瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡。最后,确定RAC1是hsa-miR-650的靶基因。结论Hsa-miR-650作为肿瘤促进剂,可能作为治疗NF2阴性脑膜瘤患者的治疗靶点。

关键词： 2型神经纤维瘤病(NF2) 脑膜瘤 hsa-miR-650 RAC1 生物信息学

髓母细胞瘤分子亚型中CD8+T淋巴细胞浸润的临床病理特点

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北京大学学报（医学版） 2024年第3期56卷 512-518页

作者：柴晓东孙子文李海爽朱靓怡刘小旦刘延涛裴斐常青北京大学第三医院病理科北京100191 北京大学基础医学院病理学系北京100191 北京市神经外科研究所神经病理中心北京100070

目的:研究CD8+T细胞在髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)各个分子亚型中的浸润特点,分析CD8+T细胞浸润与患者预后的关系,以及C-X-C基序趋化因子11(C-X-C motif chemokine ligand 11)的表达及其受体CXCR3在CD8+T细胞中的表达情况,为进一步... 详细信息

目的:研究CD8+T细胞在髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)各个分子亚型中的浸润特点,分析CD8+T细胞浸润与患者预后的关系,以及C-X-C基序趋化因子11(C-X-C motif chemokine ligand 11)的表达及其受体CXCR3在CD8+T细胞中的表达情况,为进一步探索MB中CD8+T细胞浸润可能的调节机制提供临床病理依据。方法:筛选2012—2019年间来自多所医学中心、具有完整临床资料的MB患者共48例(4个分子亚型各12例),利用NanoString PanCancer IO360 TM基因表达检测平台对48例MB患者的肿瘤标本进行转录组学分析,对患者肿瘤组织的石蜡切片进行CD8免疫组织化学染色分析,验证各亚型MB中CD8+T细胞数量的差异。通过数据库生物信息学分析,探讨CD8+T细胞浸润与患者预后的关系及各种趋化因子在各亚型MB中的表达差异,并采用双重免疫荧光染色验证MB中CD8+T细胞表面CXCR3受体的表达情况,探讨CD8+T细胞浸润至肿瘤内的可能分子机制。结果:MB的WNT亚型中的CD8+T细胞特征指数相对较高,提示WNT亚型中的CD8+T细胞数量显著高于其他三个亚型,这一现象通过CD8免疫组织化学染色方法以及R2在线数据分析平台对美国基因表达数据库Gene Expression Omnibus(GEO)进行数据挖掘得到了证实,且CD8+T细胞增多与患者的生存期呈正相关。数据库分析显示,CXCL11在WNT亚型MB中的表达量明显高于其他三个亚型。免疫荧光染色结果显示,CD8+T细胞表面存在CXCL11的受体CXCR3,提示CD8+T细胞可能通过表面受体CXCR3受CXCL11趋化至MB的微环境中。结论:CD8+T细胞在WNT亚型MB中的浸润相对多于其他亚型,其机制可能与CXCL11-CXCR3趋化因子系统的激活相关,且肿瘤内CD8+T细胞浸润较多的患者预后较好,此结果可能为MB中CD8+T细胞浸润调节机制提供有益的临床病理依据,为未来MB的免疫治疗提供新的潜在治疗靶点。

关键词：髓母细胞瘤肿瘤微环境 CD8阳性T淋巴细胞趋化因子CXCL11

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药物难治性癫痫患者杏仁核电刺激的功能反应及其在致痫灶定位中的作用

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中华神经外科杂志 2024年第2期40卷 126-131页

作者：高颖周晓霞张晓华遇涛首都医科大学宣武医院功能神经外科北京功能神经外科研究所北京100053

目的通过分析药物难治性癫痫患者杏仁核电刺激后产生的症状,探讨杏仁核的生理学功能及其在致痫灶定位中的作用.方法回顾性分析2017年1月至2023年4月于首都医科大学宣武医院功能神经外科行杏仁核立体脑电图(SEEG)电极置入的49例药物难... 详细信息

目的通过分析药物难治性癫痫患者杏仁核电刺激后产生的症状,探讨杏仁核的生理学功能及其在致痫灶定位中的作用.方法回顾性分析2017年1月至2023年4月于首都医科大学宣武医院功能神经外科行杏仁核立体脑电图(SEEG)电极置入的49例药物难治性癫痫患者的电刺激相关资料.按照受试者报告和临床观察分类统计电刺激杏仁核产生的临床症状,对刺激出先兆症状患者的致痫区进行统计分析.结果 49例患者中,杏仁核内置入电极55根,杏仁核内的触点192个.电刺激后44例患者产生174例次临床症状,其中情绪反应40例次(23.0%)、植物神经症状52例次(29.9%)、躯体感觉症状33例次(19.0%)、头部感觉症状32例次(18.4%)、视觉症状10例次(5.7%)、嗅觉症状3例次(1.7%)、运动症状4例次(2.3%).44例患者的174例次临床症状中,22例(50.0%)患者的82例次(47.1%)临床症状为先兆症状.82例次的先兆症状中,39例次(47.6%,9例)的发作起始区为杏仁核和海马,9例次(11.0%,1例)为杏仁核,17例次(20.7%,7例)为海马,13例次(15.9%,3例)为额叶,4例次(4.9%,2例)为岛叶.结论电刺激药物难治性癫痫患者的杏仁核可以诱发多种功能反应,部分可能为杏仁核自身激活的反应,部分可能为癫痫发作的先兆症状.提示杏仁核参与机体多项生理功能,并在癫痫发作网络中起到关键节点的作用.

关键词：耐药性癫痫杏仁核电刺激神经病学表现

PMA-ddPCR法检测活的非可培养状态高产乙醇肺炎克雷伯菌

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中华预防医学杂志 2024年第7期58卷 998-1003页

作者：赵硕窦晨镤张建袁静首都儿科研究所细菌学研究室北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院神经外科北京100020

目的建立活的非可培养(VBNC)状态高产乙醇肺炎克雷伯菌的绝对定量方法。方法诱导高产乙醇肺炎克雷伯菌进入VBNC状态,评价乙醇产量。建立PMA-ddPCR方法通过单拷贝基因来计数高产乙醇肺炎克雷伯菌VBNC状态的活细胞基因拷贝数。进一步在VBN... 详细信息

目的建立活的非可培养(VBNC)状态高产乙醇肺炎克雷伯菌的绝对定量方法。方法诱导高产乙醇肺炎克雷伯菌进入VBNC状态,评价乙醇产量。建立PMA-ddPCR方法通过单拷贝基因来计数高产乙醇肺炎克雷伯菌VBNC状态的活细胞基因拷贝数。进一步在VBNC状态粪便模拟中,评价ddPCR对低浓度样品检测的灵敏度和适应性。结果对高产乙醇肺炎克雷伯菌梯度稀释液进行定量时ddPCR的检测下限是qPCR的10倍。在低温、低营养状态,高产乙醇肺炎克雷伯菌第45天进入VBNC状态,通过PMA-ddPCR对VBNC状态细胞进行定量结果为(5.46±0.05)log10 DNA 拷贝数/ml。VBNC状态的乙醇产量为<2.2 mmol/L,复苏后恢复产乙醇能力。VBNC状态粪便模拟样品中ddPCR最低检测下限为3.2 log10 DNA拷贝数/ml。结论建立VBNC状态高产乙醇肺炎克雷伯菌的ddPCR检测方法灵敏度和适应性良好,可用于临床样品中VBNC状态细胞的检测。

关键词：叠氮溴化丙锭-微液滴数字聚合酶链反应活的非可培养状态高产乙醇肺炎克雷伯菌

BRAF V600E突变的儿童型弥漫性低级别胶质瘤的临床病理特征分析

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神经疾病与精神卫生 2024年第5期24卷 313-318页

作者：崔云刘朝霞熊志霞陈慧媛北京市神经外科研究所神经病理室 100070

目的探讨BRAF V600E突变的儿童型弥漫性低级别胶质瘤(DLGG)的临床病理学特征。方法选取2021年12月—2023年6月于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科接受手术治疗,且术后病理学整合诊断为BRAF V600E突变的15例儿童型DLGG患者为研究对... 详细信息

目的探讨BRAF V600E突变的儿童型弥漫性低级别胶质瘤(DLGG)的临床病理学特征。方法选取2021年12月—2023年6月于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科接受手术治疗,且术后病理学整合诊断为BRAF V600E突变的15例儿童型DLGG患者为研究对象。根据WHO第5版神经系统肿瘤分类进行诊断。分析患者的一般资料,行苏木精-伊红及免疫组织化学染色、二代测序方法分析肿瘤的组织病理学及分子病理学特征。结果15例患者中,2例患者≤6岁,9例为7~14岁,4例≥15岁;女性6例,男性9例;5例肿瘤在小脑幕上,10例在小脑幕下;4例无临床症状,6例临床症状为头痛、恶心,3例临床症状为癫痫发作,2例存在视觉或听觉异常。二代测序结果显示,15例患者肿瘤均携带BRAF V600E突变,并排除了IDH基因及组蛋白H3的基因突变。二代测序结合免疫组织化学染色方法排除了CDKN2A/2B的纯合性缺失。形态学分析显示,13例肿瘤呈弥漫性星形细胞肿瘤的形态学特点,2例肿瘤镜下呈少突星形细胞瘤形态。结论BRAF V600E突变的儿童型DLGG较为罕见,主要累及儿童及年轻成人,常需与颅内其他类型胶质瘤相鉴别。在临床工作中,需将镜下形态学特征与患者临床表现、分子病理学特征结合综合考虑诊断。

关键词：胶质瘤儿童型弥漫性低级别胶质瘤病理学免疫组织化学 BRAF V600E突变

胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力影响的实验研究

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中华神经外科杂志 2024年第5期40卷 512-518页

作者：胡跃东王佩文张梦梦周贤喆刘福生米蕊芳首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科学中心北京100070

目的通过建立胶质瘤细胞与巨噬细胞的融合细胞模型,探究胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响。方法应用小鼠来源的胶质瘤细胞GL261和巨噬细胞RAW264.7构建并筛选GL261xRAW264.7融合细胞。分别培... 详细信息

目的通过建立胶质瘤细胞与巨噬细胞的融合细胞模型,探究胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响。方法应用小鼠来源的胶质瘤细胞GL261和巨噬细胞RAW264.7构建并筛选GL261xRAW264.7融合细胞。分别培养GL261、RAW264.7、GL261xRAW264.7融合细胞,收集细胞上清获得相应的条件培养基(CM,即GL261-CM、RAW264.7-CM、GL261xRAW264.7-CM)。采用流式细胞术检测GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量及其与RAW264.7细胞的巨噬细胞标志物CD86、CD206的表达量;通过CCK-8、Transwell或划痕实验评估GL261xRAW264.7融合细胞与亲代细胞(即GL261、RAW264.7细胞)增殖、迁移能力的差异,以及GL261xRAW264.7-CM与亲代细胞CM培养的GL261细胞增殖、迁移、侵袭能力的差异;通过免疫磁珠-流式细胞术检测RAW264.7与RAW264.7xGL261融合细胞分泌巨噬细胞M1型细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-23及M2型细胞因子IL-10、转化生长因子β1(TGF-β)的差异。结果成功构建了GL261xRAW264.7融合细胞,且经流式细胞术证实GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量明显增加(G_(1)和G_(2)/M峰均较亲代细胞右移)。CCK-8增殖实验结果显示,GL261xRAW264.7融合细胞的增殖能力较GL261细胞强,但较RAW264.7细胞弱,差异均有统计学意义(均P0.05]。免疫磁珠-流式细胞术检测结果显示,GL261xRAW264.7融合细胞与RAW264.7相比,IL-10、TGF-β表达增多,TNF-α、IL-1β减少,差异均有统计学意义(均P0.05)。CCK-8、Transwell及划痕实验均显示,GL261xRAW264.7-CM较亲代细胞CM培养的GL261细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论体外构建的GL261xRAW264.7融合细胞具有M2型巨噬细胞的免疫特征,且可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

关键词：神经胶质瘤细胞融合细胞增殖肿瘤相关巨噬细胞细胞侵袭