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基于网络药理学和动物实验研究麝香通心滴丸防治糖尿病心肌病的作用机制

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1905-1914页

作者：白亚利崔鑫钰袁悦莹张雨婷王伟刘天华吴晏北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学证候与方剂基础研究教育部重点实验室北京100029 证候与方剂基础研究北京市重点实验室北京100029 北京中医药大学中医药研究院北京100029

通过网络药理学、分子对接及动物实验探究麝香通心滴丸(Shexiang Tongxin Dropping Pills,STDP)防治糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的作用机制。借助BATMAN、TCMSP、GeneCards等数据库筛选STDP防治DCM的活性成分及作用靶点,利用STRING数据库及Cytoscape软件构建STDP防治DCM作用靶点的蛋白-蛋白相互作用(protein-protein inte-raction,PPI)网络及“药物-活性成分-靶点”网络,通过DAVID数据库对作用靶点进行GO和KEGG富集分析,采用AutoDock Vina软件对关键信号通路核心受体蛋白与其对应活性成分进行分子对接验证。采用高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DCM大鼠模型,分为对照组、模型组、STDP低剂量组(20 mg·kg^(-1))、STDP高剂量组(40 mg·kg^(-1))、二甲双胍组(200 mg·kg^(-1));连续给药8周后超声心动图检测各组大鼠心功能,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察各组大鼠心肌病理改变,天狼猩红染色检测各组大鼠心肌胶原纤维沉积,WGA染色检测心肌肥大程度,蛋白免疫印迹法检测各组大鼠心肌组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38)、磷酸化p38(phosphorylation-p38,p-p38)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phosphorylation-JNK,p-JNK)、caspase-3及C-caspase-3蛋白的表达。网络药理学筛选得到STDP活性成分199种,对应靶点1655个,与463个DCM疾病靶点取交集,得到134个STDP防治DCM的潜在作用靶点,并筛选出糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路;分子对接结果显示miltirone、dehydromiltirone和tryptanthrin与RAGE均有较好的结合力。动物实验结果证实,STDP可有效保护DCM大鼠心功能,与模型组比较,STDP低、高剂量组p-p38、p-JNK、C-caspase-3蛋白表达水平均显著降低。综上,SDTP可能通过影响AGE-RAGE信号通路发挥对DCM大鼠心功能的保护作用。

关键词：麝香通心滴丸糖尿病心肌病网络药理学分子对接动物实验 AGE-RAGE信号通路心功能

中医面部色诊中医理论基础及客观化研究进展与展望

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1908-1913页

作者：杨倮乐娜芦煜马雪玲刘红霞北京中医药大学北京102401 中国中医科学院中医药信息研究所北京100700 证候与方剂基础研究北京市重点实验室北京102401 证候与方剂基础研究教育部重点实验室(北京中医药大学) 北京102401

色诊是中医诊疗的重要手段,有着丰富的理论基础和临床经验。随着中医学科的进步以及计算机技术等信息处理科学的发展,色诊客观化研究取得了一定的成果和进展,初步实现了色诊的数字化、客观化,为中医色诊的临床应用提供了较为精确的量化... 详细信息

色诊是中医诊疗的重要手段,有着丰富的理论基础和临床经验。随着中医学科的进步以及计算机技术等信息处理科学的发展,色诊客观化研究取得了一定的成果和进展,初步实现了色诊的数字化、客观化,为中医色诊的临床应用提供了较为精确的量化指标。文章对色诊的中医理论基础以及相关客观化研究进行了梳理以及阐述,在此基础上进一步分析现有研究中的问题,展望未来研究方向,以期能为后续相关研究提供参考。

关键词：中医色诊色部客观化临床应用

1 049例寻常型银屑病发展转化过程证候、证素演变规律的回顾性研究

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北京中医药大学学报 2024年

作者：王家悦李萍白彦萍段行武蓝海冰赵一丁赵京霞王燕底婷婷蒙玉娇陈朝霞北京中医药大学首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所银屑病中医临床基础研究北京市重点实验室中日友好医院北京中医药大学东直门医院北京市鼓楼中医医院陕西省中医医院

目的分析寻常型银屑病慢性病程不同阶段的中医证候及证素演变规律。方法基于2019年7月—2024年3月1049例寻常型银屑病患者的电子病历数据建立数据库。使用桑基图和网络关联图分析初诊，进行期（第2、3周），进行期（第4、5周），皮损... 详细信息

目的分析寻常型银屑病慢性病程不同阶段的中医证候及证素演变规律。方法基于2019年7月—2024年3月1049例寻常型银屑病患者的电子病历数据建立数据库。使用桑基图和网络关联图分析初诊，进行期（第2、3周），进行期（第4、5周），皮损改善期（第6、7周）及缓解期患者的证候及证素演变规律。通过社区检测算法构建证素网络，并以热图形式展示局部皮损辨证与整体辨证的关联规则。结果 ①初诊：局部皮损辨证，以血热证最多（79.79%）；病位证素中，肝最多（35.62%）；病性证素中，火（热）最多（75.48%）。②进行期（第2、3周）：局部皮损辨证，仍以血热证最多（73.13%）；病位证素中，肝最多（31.71%）；病性证素中，仍是火（热）最多（82.11%），湿（22.26%）及气滞（8.39%）开始增加。③进行期（第4、5周）：局部皮损辨证以血热证（45.91%）及血燥证（37.19%）为主；病位证素中，里最多（15.25%）；病性证素中，火（热）最多（50.66%），阴虚增加（34.26%）。④皮损改善期（第6、7周）：局部皮损辨证，血燥证（49.44%）及血瘀证（33.33%）均增多；经络及血瘀分别为病位证素及病性证素中增加最明显并成为占比最多者（13.44%，28.20%）。⑤缓解期：局部皮损辨证，血瘀证成为主要皮损辨证类型（55.69%），血燥证数量减少（21.16%）；经络及血瘀仍是病位证素及病性证素中最主要的证素（25.71%，62.34%）。结论寻常型银屑病的证候整体呈现由实到虚的演变规律，初诊至进行期（第2、3周）证素、证型以热证为主，进行期（第4、5周）证素、证候类型以热证兼有湿证或阴虚证为主，皮损改善期证素网络的变化最为显著，此时血瘀表现逐渐增多，至缓解期达到峰值。血瘀、湿、气滞证贯穿寻常型银屑病全程；气滞、血瘀可能是导致寻常型银屑病进行期患者病情进一步恶化、病程迁延不愈的主要因素。

关键词：寻常型银屑病真实世界研究演变规律关联网络证素回顾性研究

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蛋白质修饰组学-中药作用机制研究的新途径

中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 211-219页

作者：王砺寒侯静怡张晶晶杨洪军中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京100700 中国中医科学院中药研究所北京100700

中医药作为我国宝贵的科学遗产与文化瑰宝,承载着中华民族数千年智慧的结晶,其深厚的医学理论和丰富的实践经验在我国卫生保健事业中占据着不可替代的核心地位。面对现代医学挑战与健康需求,深入探究中药作用机制显得尤为迫切和必要。... 详细信息

中医药作为我国宝贵的科学遗产与文化瑰宝,承载着中华民族数千年智慧的结晶,其深厚的医学理论和丰富的实践经验在我国卫生保健事业中占据着不可替代的核心地位。面对现代医学挑战与健康需求,深入探究中药作用机制显得尤为迫切和必要。蛋白质翻译后修饰(PTM),作为调控蛋白质功能复杂性和多样性的核心机制,是连接内外环境刺激与机体内在生理反应的关键桥梁。同时,不同类型PTM之间可相互作用形成复杂的调控网络,符合中药多成分、多靶点的作用特点。尽管蛋白质修饰组学作为探究PTM的有效工具,近些年已经被应用于一些中药作用机制研究,但总体而言,这一领域的研究在中药学领域尚处于初步发展阶段。为此,该文首先概述了PTM的基础理论和蛋白质修饰组学的基本研究流程,继而系统回顾了蛋白质修饰组学在中药作用机制研究领域的应用现状,并针对现存研究局限性进行了深入剖析。该文旨在探寻一种基于PTM视角解析中药作用机制的创新研究范式,为未来深化理解中药作用机理提供理论依据与实践指导。

关键词：蛋白质翻译后修饰蛋白质修饰组学中药研究策略复杂作用机制解析

基于单细胞测序技术分析安宫牛黄丸减轻创伤性颅脑损伤的分子机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：殷志如田良良曹光昭张晶晶杨洪军中国中医科学院中药研究所中国中医科学院中医药健康产业研究所中药药理江西省重点实验室中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京脑科学与类脑研究所

目的：基于单细胞测序技术揭示安宫牛黄丸（AGNH）改善创伤性颅脑损伤（TBI）分子作用机制。方法：将75只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡拉西坦组(3.6 g·kg-1)、AGNH低、高剂量组(0.09、0.27 g·kg-1)，每组15只。除假手术组... 详细信息

目的：基于单细胞测序技术揭示安宫牛黄丸（AGNH）改善创伤性颅脑损伤（TBI）分子作用机制。方法：将75只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡拉西坦组(3.6 g·kg-1)、AGNH低、高剂量组(0.09、0.27 g·kg-1)，每组15只。除假手术组外，其余4组采用改良Feeney自由落体撞击法制备TBI模型，造模后立刻灌胃给药，24 h后进行改良神经功能缺损评分（mNSS），并分离脑组织。采用脑含水量检测法测定脑水肿程度；苏木素-伊红（HE）染色观察皮层、CA1区、CA3区脑组织损伤程度；免疫荧光染色（IF）观察损伤部位环氧合酶-2（COX-2）、干扰素调节因子-1（IRF1）、Janus激酶-2（JAK2）和细胞因子信号传导抑制因子-3（SOCS3）的表达情况；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定脑组织白细胞介素（IL）-6、IL-18、IL-1β、IL-17A、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）和NOD样受体热蛋白结构域蛋白3（NLRP3）炎症小体含量；单细胞测序分析AGNH对各细胞群调控情况；GO与KEGG进行通路富集分析；String数据库构建小胶质细胞差异表达基因网络，寻找关键靶点，并通过ELISA与IF进行验证。结果：与假手术组比较，模型组mNSS评分与脑含水量显著增加，表明造模成功（P脑含水量（P脑损伤（P脑组织Caspase-1、IL-17A、TNF-α、NLRP3及COX-2的水平（P脑水肿与脑损伤程度，减少炎症因子表达，抑制NLRP3，以及其下游Caspase1的表达，可能通过作用于小胶质细胞中的IL-6、IL-1β、JAK2、IRF1、SOCS3靶点发挥作用。

关键词：安宫牛黄丸创伤性颅脑损伤单细胞测序炎症反应小胶质细胞中医药

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重楼总皂苷的现代研究进展与展望

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 232-243页

作者：张艺博张慧中付京阮意丹姚爱娜张萍芝尹兴斌曲昌海倪健董晓旭北京中医药大学中药学院北京102488 首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所北京100010

重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的作用,重楼皂苷是重楼的主要活性成分。研究表明,重楼总皂苷抗肿瘤作用显著,对乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等实体瘤和白血病等非实体瘤有明显的抑制作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,调... 详细信息

重楼具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的作用,重楼皂苷是重楼的主要活性成分。研究表明,重楼总皂苷抗肿瘤作用显著,对乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等实体瘤和白血病等非实体瘤有明显的抑制作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,调控细胞周期,诱导凋亡和非凋亡的死亡途径,调节机体代谢与肿瘤微环境等密切相关。此外,重楼总皂苷在抗炎、抗氧化、抑菌、止血、缩宫等方面也表现出很好的药理活性。与此同时,重楼总皂苷可能诱导正常细胞凋亡、诱发炎症反应与氧化应激、导致机体代谢紊乱,近年来其肝损伤、生殖损伤、胃肠损伤、溶血等不良反应报道逐渐增多。药代动力学研究显示,不同给药方式的重楼总皂苷在机体内代谢存在着较大的差异,注射给药清除速度较快,口服则可能存在肝肠循环,同时由于溶解度低、并能激活P-糖蛋白(P-gp),导致其原型吸收差、在肠道渗透率和回收率低,影响重楼总皂苷的生物利用度,借助现代技术制备新剂型或新型载药系统一定程度上可提高其生物利用度。基于上述研究,该文将“重楼总皂苷”“Rhizoma Paridis Total Saponins”作为关键词,通过检索中国知网、维普、Web of Science等国内外中英文数据库,对重楼总皂苷的药理作用、药代动力学及不良反应展开综述,以期能为重楼总皂苷的研究开发及临床应用提供参考。

关键词：重楼总皂苷抗肿瘤药理作用药代动力学不良反应

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中药活性成分诱导肿瘤细胞铁死亡的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 245-253页

作者：张慧中张艺博付京黄华婷阮意丹尹兴斌曲昌海倪健董晓旭北京中医药大学中药学院北京102488 首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所北京100010

铁死亡是一种不同于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型细胞程序性死亡方式,与多种生理和病理过程有密切的联系。铁介导的活性氧积累是铁死亡发生的主要原因,铁死亡的发生机制与细胞内脂质代谢、铁代谢和抗氧化防御系统途径相关,多条... 详细信息

铁死亡是一种不同于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型细胞程序性死亡方式,与多种生理和病理过程有密切的联系。铁介导的活性氧积累是铁死亡发生的主要原因,铁死亡的发生机制与细胞内脂质代谢、铁代谢和抗氧化防御系统途径相关,多条信号轴和众多调节因子联合调控铁死亡的发生和中断。研究发现铁死亡对肿瘤细胞的生长和增殖具有一定的调节作用,诱导肿瘤细胞铁死亡能够有效抑制肿瘤的生长、转移及多药耐药等,因此铁死亡针对各类肿瘤细胞的作用效果和机制途径成为抗癌研究的热点话题。与此同时,铁死亡诱导剂的研究迅速发展,已有多种铁死亡诱导剂应用于临床癌症化疗阶段,且疗效显著,因此铁死亡类抗癌药物的研究成为肿瘤治疗发展的新路线。中药活性成分如石蒜碱、齐墩果酸、双氢青蒿素、土槿皮乙酸、麦冬皂苷B等,能通过脂质代谢、铁代谢、胱氨酸/谷氨酸转运体系统或谷胱甘肽过氧化酶4/谷胱甘肽等途径诱导肿瘤细胞铁死亡,调控肿瘤疾病的发展进程,展现出巨大的临床治疗潜力。该文从信号通路和调节因子及作用特点等方面介绍铁死亡的代谢调控网络,并结合铁死亡发生机制的理论基础,对中药活性成分诱导肿瘤细胞铁死亡的研究进展进行综述,为中药活性成分抗肿瘤应用提供新策略。

关键词：铁死亡中药活性成分肿瘤细胞铁代谢作用机制

生姜通过TLR4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 64-70页

作者：于清源杜阳陈潇潇高云霄任钧国刘建勋北京中医药大学西苑临床医学院北京100029 中国中医科学院西苑医院基础医学研究所中药药理北京市重点实验室北京100091

目的:探讨生姜醇提液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及作用机制。方法:将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、生姜低、高剂量组,每组10只,正常组小鼠经鼻滴入生理盐水,其余各组经鼻滴入含LPS(50μg)的... 详细信息

目的:探讨生姜醇提液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及作用机制。方法:将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、生姜低、高剂量组,每组10只,正常组小鼠经鼻滴入生理盐水,其余各组经鼻滴入含LPS(50μg)的生理盐水。造模30 min后,地塞米松组灌胃5 mg·kg^(-1)醋酸地塞米松溶液,生姜低、高剂量组分别灌胃不同剂量(7、14 g·kg^(-1))的生姜醇提液,正常组及模型组灌胃等体积纯水。造模24 h后取材,细胞计数仪检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组肺组织病理学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化(p)-NF-κB p65及Toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠BALF白细胞计数、TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO水平升高(P<0.01),SOD水平降低(P<0.05),肺组织病理损伤明显,NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,给药组小鼠BALF白细胞计数、TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO水平降低(P<0.05,P<0.01),SOD水平升高(P<0.05,P<0.01),肺组织损伤均减轻,NF-κB p65、p-NF-κB p65及TLR4蛋白表达降低(P<0.01)。结论:生姜醇提液可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路发挥对LPS诱导小鼠ALI的保护作用。

关键词：生姜脂多糖急性肺损伤 Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路

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丹参酮ⅡA通过抑制炎症因子的表达保护视网膜神经节细胞

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辽宁中医杂志 2024年

作者：牛艺婷季青璇马盼彭美中徐艺宸杨美美刘卓容韩静北京中医药大学中医学院证候与方剂基础研究北京市重点实验室证候与方剂基础研究教育部重点实验室(北京中医药大学) 北京中医药大学中医药研究院

目的研究丹参酮ⅡA对高糖（HG）或LPS刺激的视?膜神经节细胞（RGC-5）的保护作用，并探讨其潜在的分子机制。方法将RGC-5细胞分为正常组、模型组、丹参酮ⅡA不同剂量组，CCK-8法检测各组细胞活力，DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞活性... 详细信息

目的研究丹参酮ⅡA对高糖（HG）或LPS刺激的视?膜神经节细胞（RGC-5）的保护作用，并探讨其潜在的分子机制。方法将RGC-5细胞分为正常组、模型组、丹参酮ⅡA不同剂量组，CCK-8法检测各组细胞活力，DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞活性氧，免疫荧光检测各组细胞Tuj-1和Brn3α的表达，PCR检测各组炎症因子及NFκBmRNA的表达，酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组细胞培养上清液中TNF-α的含量。结果 CCK-8结果显示，HG刺激后RGC-5细胞活力增强，在HG条件下丹参酮ⅡA3.20 μmol/L可以抑制细胞活?（P<0.001）。ROS检测结果显示，丹参酮ⅡA各剂量组可以抑制HG条件下细胞ROS的积累（P<0.01或P<0.001）。免疫荧光结果显示，与正常组比较，HG和LPS组Tuj-1和Brn3α的表达显著降低（P<0.05或P<0.001），与HG或LPS组比较，丹参酮Ⅱ可以增强Tuj-1和Brn3α的表达（P<0.01或P<0.001）。PCR结果显示，与正常组比较，HG组细胞内IL-6、IL-18、IL-1β、NFκBmRNA表达显著增高（P<0.001），与HG组相比，丹参酮ⅡA可以抑制细胞内IL-6、IL-18、IL-1β、NFκBmRNA的表达（P<0.05、P<0.01或P<0.001）。与正常组相比，LPS组细胞内促炎因子NFκBmRNA（P<0.05）表达显著增高，抑炎因子IL-10表达显著降低（P<0.01）；与LPS组相比，丹参酮ⅡA可以抑制细胞内NFκBmRNA的表达（P<0.05），并使抑炎因子IL-10表达增加（P<0.001）。ELISA检测显示，与正常组比较，HG组和LPS组细胞上清中TNF-α显著上升（P<0.001）；与HG或LPS组相比，丹参酮ⅡA各剂量组细胞上清中TNF-α含量均下降（P<0.001）。结论丹参酮ⅡA可以保护视网膜神经节细胞，其机制可能与通过核因子-κB(NF-κB)通路抑制炎症因子的表达密切相关。

关键词：丹参酮ⅡA 视网膜神经节细胞炎症