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转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白

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重庆医科大学学报 2014年第5期39卷 646-650页

作者：郑勤妮许筱莉姚伟娟田克诚曾柱贵州省贵阳医学院生物技术教研室贵阳550004 北京大学基础医学院血液流变学研究中心北京100083 贵州省疾病预防控制中心传染病防治研究所检验科贵阳550004

目的:探索转化生长因子β1(tansforming growth factor-β1,TGF-β1)对人成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs)骨架丝状肌动蛋白(filament actin,F-actin)及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞(dendritic cells,DCs)的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索。方法:不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化。结果:(1)与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调(P=0.000),在5 ng/ml组上调(P=0.000)。(2)mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短(P=0.001,0.000);数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏(P=0.000);在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义(P=0.114);通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性(R2分别为0.828和0.746,P=0.000)。(3)细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调(P=0.001、0.000);p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调(P=0.000);profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调(P=0.001、0.001、0.013)。结论:TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。

关键词：成熟树突状细胞转化生长因子-β1 细胞骨架

实时定量PCR分析小鼠树突状细胞TLR4 mRNA表达及地塞米松的调节

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第3期24卷 221-224页

作者：张罕吕喆李冬妹何秀娟伍香玲胡永秀首都医科大学基础医学院免疫学系北京100069 北京红十字血液中心北京100088

目的:建立检测小鼠Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验;观察小鼠骨髓源树突状细胞(DC)发育成熟过程中TLR4 mRNA表达水平的动态变化以及地塞米松(DEX)对DCTLR4 mRNA表达的影响。方法:(1)用细胞因子定向诱导的... 详细信息

目的:建立检测小鼠Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验;观察小鼠骨髓源树突状细胞(DC)发育成熟过程中TLR4 mRNA表达水平的动态变化以及地塞米松(DEX)对DCTLR4 mRNA表达的影响。方法:(1)用细胞因子定向诱导的方法将小鼠骨髓细胞培养为DC;(2)构建pUCm-T/TLR4和pUCm-T/β-actin重组质粒,建立检测小鼠TLR4 mRNA水平的实时定量PCR实验;(3)用实时定量PCR技术对体外培养4、6、8、10、12d的DCTLR4 mRNA表达水平进行动态观察;(4)在DC培养体系中加入DEX,与常规培养DCTLR4 mRNA表达水平进行比较。结果:(1)从小鼠骨髓细胞中成功诱导培养了DC,经免疫磁珠纯化后其纯度可达90%以上;(2)建立了能精确分析小鼠TLR4 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ实时定量PCR实验;(3)在DC培养前期TLR4 mRNA表达水平变化不大,后期则明显升高;(4)DEX可使DCTLR4 mRNA表达增强。结论:小鼠骨髓源DCTLR4 mRNA表达水平与其发育成熟阶段密切相关;DEX促进DCTLR4 mRNA表达。

关键词：实时定量PCR 树突状细胞 TLR4 地塞米松

TFAR19基因对MEL细胞在小鼠体内流变学特性和致病性的影响

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中国科学（C辑） 2006年第5期36卷 415-423页

作者：顾黎唐志宇贺东奇喀蔚波孙大公文宗曜山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室济南250100 北京大学医学部学血液流变研究中心北京100083 北京大学医学部应用理学系北京100083

将依托泊甙(etopside,VP16)、MEL细胞和MEL-TF19细胞注射到小鼠体内,观测4周时间内小鼠的血象、肝脏和脾脏的组织学,以及血液流变学指标变化.结果表明:注射MEL细胞使小鼠发生了类似于红白血病的病征,表现为肝脾组织受损、骨髓和脾脏细... 详细信息

将依托泊甙(etopside,VP16)、MEL细胞和MEL-TF19细胞注射到小鼠体内,观测4周时间内小鼠的血象、肝脏和脾脏的组织学,以及血液流变学指标变化.结果表明:注射MEL细胞使小鼠发生了类似于红白血病的病征,表现为肝脾组织受损、骨髓和脾脏细胞涂片出现大量的原红、早幼和中幼红细胞,红细胞的变形和取向能力明显下降;而携带了TFAR19基因的MEL-TF19细胞对小鼠的致病性明显小于MEL细胞,并且在化疗药物诱导凋亡的作用下,MEL-TF19细胞完全失去了原本较弱的致病性.动物实验的结果提示,TFAR19基因可以抑制MEL细胞对小鼠的致病性,并且在化疗药物VP16的协同下可发挥更好的作用.

关键词： TFAR19 MEL细胞生物流变特性

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我们研究中心的流变学进展

中国生物医学工程学报 1994年第2期13卷 97-104页

作者：文宗曜王鸿儒曹实赵玉衡孙大公吕智红北京医科大学基础医学院血液流变学研究中心

本文综述了几年来国内外血液流变学特别是微观血液流变学研究的进展情况，并着重介绍了我血液流变学研究中心近１０年来在血液，血细胞电流变特性及用激光衍射法测量在低粘切变流场中红细胞的取向，小变形等流变特性方面的一些进展。

关键词：血液流变学红细胞变形性电导法

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血管平滑肌细胞收缩的分子机制研究进展

生理科学进展 2021年第3期52卷 217-221页

作者：帕力旦·赛买提姚伟娟北京大学医学部基础医学院生理与病理生理学系血液流变学研究中心北京100191

血管中的平滑肌细胞位于中膜,具有维持血管形态和保持血管张力的重要作用。在正常情况下,血管平滑肌细胞处于一种收缩表型,而当其受到生物化学物质、机械刺激作用后会转变成分泌表型,表现为收缩力下降,迁移、增殖能力增强以及分泌细胞... 详细信息

血管中的平滑肌细胞位于中膜,具有维持血管形态和保持血管张力的重要作用。在正常情况下,血管平滑肌细胞处于一种收缩表型,而当其受到生物化学物质、机械刺激作用后会转变成分泌表型,表现为收缩力下降,迁移、增殖能力增强以及分泌细胞外基质能力增强。这些异常变化会促进血管再狭窄和动脉粥样硬化等疾病的发生与发展,因此研究其分子机制至关重要。本文主要概括论述参与调节血管平滑肌细胞收缩的分子机制研究进展。

关键词：血管平滑肌细胞收缩钙离子 Rho PKC

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白蛋白对红细胞力学性质影响的微观机理研究

北京生物医学工程 1996年第3期15卷 147-153页

作者：马维原文宗曜卢景芬北京医科大学血液流变学研究中心

作者采用激光衍射法、荧光分光光度法及电子顺磁共振法（ＥＳＲ），从生物物理角度研究白蛋白对红细胞力学性质影响的机理。实验结果表明，不同浓度的白蛋白处理红细胞后，可不同程度改善红细胞的变形性。在低浓度白蛋白条件下（白蛋白... 详细信息

作者采用激光衍射法、荧光分光光度法及电子顺磁共振法（ＥＳＲ），从生物物理角度研究白蛋白对红细胞力学性质影响的机理。实验结果表明，不同浓度的白蛋白处理红细胞后，可不同程度改善红细胞的变形性。在低浓度白蛋白条件下（白蛋白浓度小于０．０４ｍｇ／ｍｌ），白蛋白有较好改善红细胞变形性的作用。白蛋白浓度大于０．５ｍｇ／ｍｌ时，红细胞变形性趋于稳定。如果红细胞呈棘形（无白蛋白的血样）变形性稍有减小。光学显微镜观察及荧光分光光度法及电子顺磁共振法测量红细胞膜流动性的实验结果表明，白蛋白对红细胞力学性质的影响主要是通过改善其形态等多种非特异性相互作用，而非通过特异性的生物化学作用。

关键词：红细胞变形性白蛋白微观机制

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫试验S/CO比值与补充试验阳性的相关性研究进展

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中华检验医学杂志 2005年第10期28卷 1096-1099页

作者：任芙蓉庄辉北京市红十字血液中心安全输血研究室 100088 北京大学基础医学院病原生物学系

丙型肝炎病毒(HCV) 是1989年被发现的,1990年美国第一代抗-HCV酶联免疫吸附试剂(EIA)获得美国食品药品管理局(FDA) 批准[1],目前第三代试剂的灵敏度和特异性都有很大提高.我国的抗-HCV诊断试剂自1993年面世以来,经广大科技工作者和生产... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV) 是1989年被发现的,1990年美国第一代抗-HCV酶联免疫吸附试剂(EIA)获得美国食品药品管理局(FDA) 批准[1],目前第三代试剂的灵敏度和特异性都有很大提高.我国的抗-HCV诊断试剂自1993年面世以来,经广大科技工作者和生产单位努力,经过国家"八五"、"九五"攻关,其质量也不断改进[2]。

关键词：丙型肝炎病毒抗体酶联免疫试验补充试验 S/CO 美国食品药品管理局抗-HCV诊断试剂丙型肝炎病毒(HCV) 酶联免疫吸附试剂阳性比值

4.1N蛋白抑制人卵巢透明细胞癌细胞迁移侵袭及其机制初探

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现代妇产科进展 2015年第5期24卷 325-329页

作者：张乐天任彩霞安秀丽刘从容北京大学医学部基础医学院病理系北京100191 北京大学医学部基础医学院解剖与组胚系北京100191 红细胞生理实验室纽约血液中心纽约10065 郑州科技大学生物工程系郑州450051

目的:探讨4.1N蛋白对卵巢透明细胞癌细胞迁移和侵袭能力的调控并初步探讨相关分子机制。方法:应用免疫组化法检测4.1N蛋白在卵巢透明细胞癌组织中的表达缺失状况。建立4.1N稳定转染卵巢透明细胞癌ES-2细胞系,通过划痕实验、Transwell迁... 详细信息

目的:探讨4.1N蛋白对卵巢透明细胞癌细胞迁移和侵袭能力的调控并初步探讨相关分子机制。方法:应用免疫组化法检测4.1N蛋白在卵巢透明细胞癌组织中的表达缺失状况。建立4.1N稳定转染卵巢透明细胞癌ES-2细胞系,通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验观察细胞迁移侵袭能力的改变。利用qRT-PCR和Western blot法检测紧密连接相关分子(Claudin-4和ZO-1)、上皮-间质转化(EMT)标记物(E-cadherin、Ncadherin和Vimentin)和相关转录因子(Twist、Slug和ZEB-2)及基质金属蛋白酶(MMP-2和MMP-3)表达水平的变化。结果:与卵巢异位的子宫内膜组织相比,卵巢透明细胞癌中4.1N蛋白表达水平显著降低甚至缺失(P<0.0001)。过表达4.1N后,ES-2细胞的迁移和侵袭能力显著降低,Claudin-4和ZO-1表达上调,Twist、Slug、ZEB-2、MMP-2和MMP-3表达水平下降。结论:4.1N在卵巢透明细胞癌细胞中可能通过调控紧密连接蛋白、部分上皮-间质转化转录因子和基质金属蛋白酶的表达水平,抑制癌细胞的迁移和侵袭能力,进而参与负性调控卵巢透明细胞癌的演进。

关键词：卵巢透明细胞癌 4.1N 迁移与侵袭

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低强度激光照射对离体人红细胞的影响

中国激光 2008年第6期35卷 957-960页

作者：许锋胡林王现伟刘艳辉曾柱李明贵州大学理学院光电子技术与应用省级重点实验室贵州贵阳520025 北京大学基础医学院生物物理系

通过对低强度激光照射离体人红细胞后的生物物理学指标分析,找出影响红细胞(RBC)生物特性的主要因素。以放置在4℃下48h的变形性下降的正常人血液为样品研究低强度激光对红细胞流变学特性的影响。取2mL标本分成相等两份,其中一份在2mW,4... 详细信息

通过对低强度激光照射离体人红细胞后的生物物理学指标分析,找出影响红细胞(RBC)生物特性的主要因素。以放置在4℃下48h的变形性下降的正常人血液为样品研究低强度激光对红细胞流变学特性的影响。取2mL标本分成相等两份,其中一份在2mW,4mW,8mW的功率下照射30min,另一份离心后取出红细胞放入等渗的PBS液中用同样的方法进行照射。照射后进行对比发现单照红细胞的样品的变形性、取向、膜流动性、微黏度、各向异性和渗透脆性比全血照射下的变化小。表明红细胞膜的生物放大效应对血液的流变学特性的影响是主要的。

关键词：医用光学与生物技术低强度激光红细胞变形性