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造血前列腺素D合酶功能及其在过敏性疾病中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第2期40卷 180-187页

作者：樊易简刘羽辰初明北京大学医学部基础医学院免疫学系北京100191

造血前列腺素D合酶(hematopoietic prostaglandin D synthase,HPGDS)是一种谷胱甘肽转移酶,依赖于谷胱甘肽发挥活性作用,在巨核细胞系和多种免疫细胞中多有分布,广泛存在于多种组织,在过敏性疾病中发挥重要生物学功能。研究发现,HPGDS... 详细信息

造血前列腺素D合酶(hematopoietic prostaglandin D synthase,HPGDS)是一种谷胱甘肽转移酶,依赖于谷胱甘肽发挥活性作用,在巨核细胞系和多种免疫细胞中多有分布,广泛存在于多种组织,在过敏性疾病中发挥重要生物学功能。研究发现,HPGDS参与机体过敏反应的调控。HPGDS能够催化前列腺素H2(prostaglandin H2,PGH2)转化为前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2),PGD2和DP2受体结合,促进炎症因子的释放和过敏反应的发生。近年的研究发现,HPGDS在特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)、食物过敏(food allergy)、过敏性鼻炎(allergic rhinitis)、过敏性哮喘(allelgic asthma)、嗜酸性食管炎(eosinophilic esophagitis,EoE)的发病中发挥重要作用,促进过敏反应和炎症性疾病的发生。HPGDS在不同疾病中发挥关键作用的细胞有所不同,HPGDS在特应性皮炎中的Th2细胞、过敏性哮喘中的肥大细胞、过敏性鼻炎和嗜酸性食管炎中的嗜酸性粒细胞中高表达,并在疾病的发生发展中发挥重要功能。值得注意的是,HPGDS可以作为治疗相关疾病的重要靶点,靶向HPGDS的药物,例如HQL-79、TAS-204、TAS-205、TFC-007等能够有效缓解存在HPGDS升高现象的多种过敏性疾病的症状。本文阐述了HPGDS的生物学功能,并综述了HPGDS在过敏性疾病中的重要作用和研究进展,以及HPGDS相关靶向药物研究,指出HPGDS在过敏性疾病发病中的重要性,为研发治疗过敏性疾病的药物提供新的思路。

关键词：造血前列腺素D合酶前列腺素D2 过敏性疾病 HPGDS抑制剂

水通道蛋白9商品化抗体和自制抗体识别位点的分析和应用

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解剖学报 2024年第2期55卷 237-240页

作者：程全成丁慧如王子元方金玉张晓丽张卫光北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100191 北京卫生职业学院医学基础教研室北京102402

目的分析水通道蛋白9(AQP9)商品化抗体和自制抗体的抗原识别位点,并鉴别其应用效果。方法利用Western blotting对比3种商品化抗体与自制AQP9抗体鉴定基因型的效果。分析4种抗体的抗原识别位点,及其在实际应用中的特异性。结果Western bl... 详细信息

目的分析水通道蛋白9(AQP9)商品化抗体和自制抗体的抗原识别位点,并鉴别其应用效果。方法利用Western blotting对比3种商品化抗体与自制AQP9抗体鉴定基因型的效果。分析4种抗体的抗原识别位点,及其在实际应用中的特异性。结果Western blotting结果显示,3种商品化抗体在野生型(WT)和Aqp9^(-/-)小鼠中均可见蛋白条带。3种商品化抗体对应的血蓝蛋白(KLH)共轭合成肽依次为大鼠、人源和人源,与小鼠AQP9氨基酸序列存在一定差异。AQP3/7与AQP9分子量相近,且在肝中均有表达,同源性较高。自制抗体在WT鼠的27 kD位置可见一明显条带,但是Aqp9^(-/-)鼠的相应位置未见条带。结论1号和3号商品化抗体可用于辅助鉴别Aqp9^(-/-)鼠的基因型,自制抗体在蛋白水平上可以准确鉴定基因型。

关键词：水通道蛋白9 肝脏抗体基因敲除免疫印迹法小鼠大鼠人

枸杞多糖通过增强自噬抑制饥饿诱导的施万细胞凋亡

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神经解剖学杂志 2024年第1期40卷 16-24页

作者：刘玉梅王贺颖魏财鸿王进娟李军平贾桦宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004

目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达;采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞... 详细信息

目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达;采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞随机分为正常组(Control)、饥饿组(Starvation)、Starvation+LBP组,Western Blot或免疫荧光染色检测细胞自噬相关蛋白(LC3、p62)以及髓鞘相关蛋白(p75NTR、PMP22、S100β)的表达;采用Annexin V/PI荧光染色检测细胞的凋亡情况;应用流式细胞术分析细胞周期;Western Blot分析通路蛋白Erk1/2、Akt的磷酸化水平。结果:CCK8结果显示,LBP为300μg/ml时受损RSC96细胞活力最佳。与Control组相比,Starvation组LC3-II/LC3-I水平显著增高(P<0.05)。与Starvation组相比,Starvation+LBP组的凋亡和坏死细胞比例显著降低,处于S期和G2/M期的细胞比例升高;LC3-II、p75NTR、PMP22、S100β蛋白表达量增高,自噬底物蛋白p62的表达量降低;通路蛋白p-Erk1/2表达量增高(P<0.05),而p-Akt蛋白表达量略有下降。结论:LBP可通过增强细胞自噬抑制SCs凋亡,促进髓鞘相关蛋白的表达,其机制与Erk1/2激活和/或Akt抑制有关。

关键词：枸杞多糖施万细胞自噬凋亡大鼠

使用新型冻存保护剂进行人源脂肪组织冻存及移植的有效性评估

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中华整形外科杂志 2024年第2期40卷 202-211页

作者：赵润蕾王关卉儿安阳杨丹丽姚明解曹启龙初相伍李东北京大学第三医院成形外科北京100191 北京大学基础医学院病原生物学系北京100191 北京大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100191 青岛海尔生物科技有限公司青岛266041

目的:探索使用新型冻存剂进行人源脂肪组织冻存及移植的有效性。方法:标本来源于2022年1至3月在北京大学第三医院成形外科进行吸脂术的健康成年女性,将获得的脂肪组织离心后随机分为9组,分别采用不同的冻存液[A组、B组、二甲基亚砜(DMSO... 详细信息

目的:探索使用新型冻存剂进行人源脂肪组织冻存及移植的有效性。方法:标本来源于2022年1至3月在北京大学第三医院成形外科进行吸脂术的健康成年女性,将获得的脂肪组织离心后随机分为9组,分别采用不同的冻存液[A组、B组、二甲基亚砜(DMSO)组]及冻存时长(1、2、3个月组)于液氮中冻存。A组冻存液组分为右旋糖苷40(DEX)+氨基酸+维生素+无机盐,B组冻存液组分为DMSO+DEX,DMSO组采用传统冻存液,组分及配比为10%DMSO+20%胎牛血清(FBS)+70%DMEM-12。采用5 ml冻存管,脂肪∶冻存液=3∶2,每组冻存6管。脂肪组织复温后,采用HE染色观察组织学形态,采用免疫组化染色进行脂滴包被蛋白(Perilipin)定量分析,通过阳性细胞数量与总细胞数量的比值计算Perilipin阳性率;采用CCK-8法测定脂肪细胞活性。选择健康无特定病原体级裸鼠38只,根据移植脂肪使用不同的冻存保护剂(A组、B组、DMSO组)分为3组,每组各12只,另外2只作为day 0对照组,各组脂肪冻存时间均为3个月。裸鼠腹腔麻醉后,每侧背部注射复温后的冻存脂肪各0.9 ml,分别于移植后1、2、3个月通过MRI扫描及三维软件计算脂肪组织存留率并进行组间比较;小鼠处死后取移植的脂肪组织,采用HE染色和免疫组化染色进行组织形态学观察及Perilipin定量分析。采用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析,符合正态分布的计量资料以x±s表示,整体多组间比较采用重复测量资料的方差分析,同一时间点组间数据比较采用Tukey多重检验。结果:在液氮中冻存1~3个月后不同冻存液组的脂肪组织形态接近正常新鲜脂肪组织,各组Perilipin阳性率差异无统计学意义(P>0.05);CCK-8法提示冻存1个月和3个月时DMSO组脂肪细胞活性优于A组和B组(P0.05),移植1~3个月后各组脂肪组织出现不同程度局部坏死伴炎症反应,Perilipin阳性率各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:使用新型冻存液冻存脂肪组织的效果与传统冻存液相比未见显著差异,且避免了使用DMSO或FBS作为冻存剂对人体潜在的不良作用,理论上更加安全。

关键词：脂肪组织冷冻保护剂二甲基亚砜胎牛血清右旋糖苷

天麻素通过SOX2/β-catenin通路抑制脂多糖诱导的小胶质细胞活化

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神经解剖学杂志 2024年第3期40卷 365-372页

作者：张幸霖石金沙付宏铭黄俣瑞石浩龙左涵珺郭涛李娟娟昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系昆明650500

目的:研究天麻素(GAS)对脂多糖(LPS)激活的BV2小胶质细胞性别决定区Y框蛋白2(SOX2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路表达的影响。方法:体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组(Control)、LPS刺激组(LPS)、LPS+0.17 mmol/L GAS处理组(LPS+GAS-L)... 详细信息

目的:研究天麻素(GAS)对脂多糖(LPS)激活的BV2小胶质细胞性别决定区Y框蛋白2(SOX2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路表达的影响。方法:体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组(Control)、LPS刺激组(LPS)、LPS+0.17 mmol/L GAS处理组(LPS+GAS-L)、LPS+0.34 mmol/L GAS处理组(LPS+GAS-H)、SOX2抑制剂丙萘洛尔(PR)处理组(PR)、LPS+PR处理组(LPS+PR)、LPS+PR+GAS处理组(LPS+PR+GAS)。通过CCK-8检测PR对BV2小胶质细胞活力的影响,并通过Western Blot和免疫荧光双标染色检测SOX2、β-catenin、甘露糖受体(CD206)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化。结果:PR在0~40μmol/L范围内不会引起显著的BV2小胶质细胞死亡;LPS刺激组中SOX2、β-catenin和TNF-α蛋白表达明显增强,而CD206表达显著降低(P<0.05)。GAS干预后SOX2、β-catenin和TNF-α表达显著减少,而CD206明显升高(P<0.05);与LPS组相比,用PR阻断SOX2后β-catenin和TNF-α蛋白表达显著降低(P<0.05),而PR与GAS联合应用与单纯GAS干预组相比,β-catenin和TNF-α蛋白表达无明显差异。结论:天麻素可能通过抑制SOX2/β-catenin通路减轻小胶质细胞的激活,发挥抗炎作用。

关键词：天麻素脂多糖性别决定区Y框蛋白2 β-连环蛋白小胶质细胞

灯盏乙素对激活的小胶质细胞中PI3K表达和磷酸化水平的影响

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神经解剖学杂志 2024年第3期40卷 320-326页

作者：杨丽芳段兆达杨毓甲徐冬垚吴春云杨力昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系昆明650500

目的:探究灯盏乙素对激活的小胶质细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化PI3K(p-PI3K)水平的影响。方法:用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)法制备脑缺血模型,大鼠随机分成假手术组(Sham)、脑缺血组(MCAO)、脑缺血+灯盏乙素组(MCAO+S)。利用糖氧... 详细信息

目的:探究灯盏乙素对激活的小胶质细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化PI3K(p-PI3K)水平的影响。方法:用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)法制备脑缺血模型,大鼠随机分成假手术组(Sham)、脑缺血组(MCAO)、脑缺血+灯盏乙素组(MCAO+S)。利用糖氧剥夺(OGD)法制备BV2小胶质细胞缺血缺氧损伤模型,随机分成对照组(Control)、OGD组、OGD+灯盏乙素组(OGD+S)。运用免疫荧光双标染色和Western Blot法检测不同组中小胶质细胞PI3K及PI3K磷酸化水平的变化。结果:体内和体外免疫荧光及Western Blot结果均显示,激活的小胶质细胞中PI3K磷酸化水平明显增加(P0.05)。结论:灯盏乙素可能通过上调激活的小胶质细胞中PI3K的磷酸化水平,对脑缺血发挥积极的治疗作用。

关键词：脑缺血灯盏乙素小胶质细胞磷脂酰肌醇3-激酶大鼠

依达拉奉经MAPKs通路对脂多糖激活的小胶质细胞Sirt3表达调控

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中国临床解剖学杂志 2024年第1期42卷 47-53页

作者：祁志杨力贾秋叶陈浩伦段兆达吴春云昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系昆明650500

目的探究依达拉奉对LPS激活的小胶质细胞Sirt3和MAPKs通路相关蛋白的作用及其调控机制。方法采用Western blot和免疫荧光双标染色检测LPS激活的BV2小胶质细胞中Sirt3和MAPKs通路相关蛋白ERK1/2、P38、JNK及p-ERK1/2、p-P38和p-JNK的表达... 详细信息

目的探究依达拉奉对LPS激活的小胶质细胞Sirt3和MAPKs通路相关蛋白的作用及其调控机制。方法采用Western blot和免疫荧光双标染色检测LPS激活的BV2小胶质细胞中Sirt3和MAPKs通路相关蛋白ERK1/2、P38、JNK及p-ERK1/2、p-P38和p-JNK的表达;检测ERK1/2通路抑制剂处理后p-ERK1/2和Sirt3的表达。结果LPS激活的BV细胞中Sirt3、p-ERK1/2、p-P38和p-JNK表达显著增高,依达拉奉能促进Sirt3和p-ERK1/2过表达,并降低p-P38和p-JNK表达;ERK1/2抑制后p-ERK1/2和Sirt3的蛋白表达降低。依达拉奉可促进激活的BV2细胞中Sirt3和p-ERK1/2过表达,并下调过表达的pP38和p-JNK。结论依达拉奉可调节BV2细胞中MAPKs信号通路并促进Sirt3生成,可能经ERK/Sirt3通路发挥抗炎作用。

关键词：依达拉奉 Sirt3 小胶质细胞 MAPKs信号通路

抗苗勒管激素在IVF/ICSI女性中预测价值及其影响因素的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 646-651页

作者：徐诗榕王颖北京大学医学部基础医学院北京100191 北京大学第三医院妇产科北京100191

抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为转化生长因子-β超家族的一员,对接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)女性卵巢储备及卵巢反应性评估、选择合适促排卵方案以及提高临床累积活产... 详细信息

抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为转化生长因子-β超家族的一员,对接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)女性卵巢储备及卵巢反应性评估、选择合适促排卵方案以及提高临床累积活产率有着重要指导价值。本文通过总结AMH影响卵母细胞发育及卵泡闭锁的可能机制,探讨AMH在卵巢中发挥的生理作用及可能影响AMH在血清及卵泡液中浓度的因素,从而阐明AMH用于预测及改善IVF结局潜在的临床价值,重新全面评估AMH尤其是超生理剂量的AMH在女性生殖、多囊卵巢综合征患者以及IVF/卵胞质内单精子注射中的重要地位,并探讨了AMH在女性生殖中的临床治疗作用。

关键词：抗苗勒管激素受精,体外卵母细胞妊娠结局卵巢生理

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国际病毒分类委员会及其在线报告现状及发展

中国生物化学与分子生物学报 2024年第3期40卷 274-280页

作者：熊芮高文轩彭宜红北京大学医学部基础医学院病原生物学系北京100083

面对日益增长的新病毒种类和数量,及其复杂的内在关系,现有的病毒分类方法已凸显出其局限性。2019年,病毒分类和命名的权威机构国际病毒分类委员会(the International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV),基于病毒的系统进化关系... 详细信息

面对日益增长的新病毒种类和数量,及其复杂的内在关系,现有的病毒分类方法已凸显出其局限性。2019年,病毒分类和命名的权威机构国际病毒分类委员会(the International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV),基于病毒的系统进化关系提出了一种全新的、包含15个分类等级或阶元的病毒分类系统,并已经在ICTV的官方网站https://***/上线发布,公众可以在线免费查找动态的病毒分类信息。新的病毒分类系统能更好地揭示病毒错综复杂的内在关系以及群体进化机制,使我们能以更客观及系统的方法对病毒进行分类和命名。本文就ICTV网站有关病毒分类的主要概况,特别是最新的病毒分类和ICTV报告进展作一综述。

关键词：国际病毒分类委员会病毒分类国际病毒分类委员会报告分类学