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低温对不同早园竹抗寒性和糖类物质含量的影响

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中南林业科技大学学报 2024年第9期44卷 161-169页

作者：陈雷王金革李姗裴男才李娟高健国际竹藤中心北京100102 国家植物园(北园) 北京100093 北京农学院园林学院北京100096 中国林业科学研究院热带林业研究所广东广州510520

【目的】探讨低温胁迫下不同冻害形态表现的早园竹Phyllostachys propinqua叶片中相对电导率和糖类物质含量的变异,有助于系统了解不同形态早园竹抗寒能力以及解糖类物质对植物抗寒性的影响,为华北地区早园竹引种和应用提供技术支撑。... 详细信息

【目的】探讨低温胁迫下不同冻害形态表现的早园竹Phyllostachys propinqua叶片中相对电导率和糖类物质含量的变异,有助于系统了解不同形态早园竹抗寒能力以及解糖类物质对植物抗寒性的影响,为华北地区早园竹引种和应用提供技术支撑。【方法】以北京市城市公园中冬季不同形态的早园竹Phyllostachys propinqua为研究对象,冬季记录并采集不同形态早园竹叶片,测定不同低温梯度处理下叶片的相对电导率和糖类物质含量。【结果】1)随着处理温度的下降,不同早园竹叶片的相对电导率及可溶性糖、果糖和蔗糖含量显著上升,而淀粉含量呈现下降趋势。2)在低温环境下,干枯叶片中相对电导率显著高于其他类型叶片,绿色叶片中可溶性糖、蔗糖和果糖含量普遍较高,但是在-25℃下,轻微发黄叶片中蔗糖含量达到了21.11 mg‧g-1,显著高于其他模式。3)低温半致死温度最低的为轻微发黄叶片,达到了-26.07℃;其次为绿色叶片和发黄叶片,分别为-25.19℃和-24.30℃;轻微干枯叶片为-24.08℃,而干枯叶片仅为-22.09℃。4)在所有糖类指标中,低温环境下蔗糖能够反映植物的抗寒性,而果糖指标相对较差。【结论】低温是导致北京早园竹冬季普遍存在叶片发黄和干枯的主要环境因素,轻微发黄的早园竹抗寒性最强,其次为绿色和轻微干枯早园竹。低温环境下蔗糖能够反映早园竹的抗寒性。

关键词：早园竹抗寒性糖类物质蔗糖低温

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微生物检测技术在动物细菌性疫病诊断中的研究进展

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微生物学杂志 2024年第4期44卷 111-118页

作者：孙志刚刘静王奕凯任晓敏司晓慧吕若一张倩董虹孙英健刘晓晔北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206 北京农学院动物科学技术学院北京102206

动物细菌性疾病一直是困扰我国兽医临床和畜禽健康养殖的一大难题,细菌性疾病的传播能力及耐药性变异能力使临床用药举步维艰,而不合理用药导致的药物残留问题,不仅危害动物和人类健康,也给养殖户造成巨大经济损失。动物细菌性疫病的快... 详细信息

动物细菌性疾病一直是困扰我国兽医临床和畜禽健康养殖的一大难题,细菌性疾病的传播能力及耐药性变异能力使临床用药举步维艰,而不合理用药导致的药物残留问题,不仅危害动物和人类健康,也给养殖户造成巨大经济损失。动物细菌性疫病的快速诊断是阻断细菌传播的先决条件之一,也是制定合理用药方案的基础。微生物检测方法是动物细菌性疫病快速诊断的主要技术手段。传统的微生物检测技术仍是现阶段的主流方法。然而,随着细菌不断变异,生存环境不断变化,传统方法不足以应对细菌变异多样、抗菌药物匮乏的当下。不断革新的微生物检测技术也随科技发展产生了许多满足临床需求的新兴技术,不仅可以快速诊断动物细菌性疾病,区分活死细菌数量,也能直观的反应细菌与药物的相互作用。本文从传统的检测手段到基于核酸、蛋白质、细菌光谱特性等更加快速、精确的检测技术进行了系统总结,同时也拓展并提出了宿主导向用药方案的临床微生物检测需求,对于微生物检测技术的综述为临床诊断动物细菌性疫病提供了方法,为兽医临床精准用药提供最佳方案。

关键词：微生物检测技术药物残留动物细菌性疫病临床诊断精准用药

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酵母培养物调控瘤胃功能的研究进展

动物营养学报 2024年第3期36卷 1463-1472页

作者：谭健赵慧颖蒋林树赵玉超北京农学院动物科学技术学院奶牛营养学北京市重点实验室北京102206

酵母培养物是一种独特的微生态制品,在特定工艺条件控制下由酵母在特定的培养基上经过充分的发酵后形成。酵母培养物富含蛋白质、小肽、低聚糖、维生素、矿物质、酶和许多未知生长因子,对反刍动物生长性能、免疫功能和瘤胃发酵有着显著... 详细信息

酵母培养物是一种独特的微生态制品,在特定工艺条件控制下由酵母在特定的培养基上经过充分的发酵后形成。酵母培养物富含蛋白质、小肽、低聚糖、维生素、矿物质、酶和许多未知生长因子,对反刍动物生长性能、免疫功能和瘤胃发酵有着显著的改善作用。本文综述了酵母培养物对反刍动物瘤胃发酵和瘤胃微生物的影响和作用机制,以期为酵母培养物调控反刍动物瘤胃功能的研究提供理论依据,为酵母培养物在反刍动物生产中的应用提供参考。

关键词：酵母培养物瘤胃发酵瘤胃微生物作用机制

纳米载体介导的乙酰胆碱酯酶RNA干扰对朱砂叶螨生长发育的影响

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应用与环境生物学报 2024年

作者：王谦稳卜春亚陈耔霖马雪晶任争光北京农学院农业农村部华北都市农业重点实验室北京农学院生物与资源环境学院

通过NCBI上获取朱砂叶螨的ace 1基因，利用RT-qPCR技术对ace 1基因在朱砂叶螨各个时期的表达水平进行检测，并利用纳米递呈dsRNA-ace 1的RNAi技术，检测其对朱砂叶螨的影响。结果显示，乙酰胆碱酯酶基因在朱砂叶螨4个时期均有表达，其... 详细信息

通过NCBI上获取朱砂叶螨的ace 1基因，利用RT-qPCR技术对ace 1基因在朱砂叶螨各个时期的表达水平进行检测，并利用纳米递呈dsRNA-ace 1的RNAi技术，检测其对朱砂叶螨的影响。结果显示，乙酰胆碱酯酶基因在朱砂叶螨4个时期均有表达，其中以成螨期表达量最高，其次是卵、若螨和幼螨。通过叶碟饲喂dsRNA-ace 1能够有效抑制朱砂叶螨ace 1的表达，ace 1基因表达水平下降57%，72 h致死率达到41.77%，同时对朱砂叶螨的产卵、孵育造成显著的影响。通过纳米递呈dsRNA-ace 1能够显著提高对乙酰胆碱酯酶基因表达的抑制，抑制率同比未纳米递呈dsRNA-ace 1提高24%，致死率同比增幅32.08%，产卵率与孵化率也均有显著降低。同时进行微滴法施用dsRNA-ace 1/SPc复合物，对朱砂叶螨ace 1的RNA 干扰效果，和叶碟饲喂法差异不显著。研究表明纳米载体递呈dsRNA-ace 1能够提高对ace 1基因表达的抑制，提高对朱砂叶螨的致死效果，可为后期以纳米载体介导的RNAi技术对害虫开展生物防治提供理论基础。

关键词：朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶基因克隆纳米载体 RNA干扰

柑橘黄酮谱-构-量-效关系及在奶牛上的应用研究进展

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4145-4155页

作者：杨硕高鹏翔蒋林树方洛云北京农学院动物科学技术学院奶牛营养学北京市重点实验室北京102206

柑橘黄酮是一类重要的天然多酚化合物,具有抗炎、抗氧化、抗微生物、调节机体免疫以及抗肿瘤细胞等生物活性,在畜牧行业中具有广阔的应用前景。但在研究开发过程中,柑橘黄酮由于成分众多,代谢途径复杂,代谢产物多样,不利于阐明其活性功... 详细信息

柑橘黄酮是一类重要的天然多酚化合物,具有抗炎、抗氧化、抗微生物、调节机体免疫以及抗肿瘤细胞等生物活性,在畜牧行业中具有广阔的应用前景。但在研究开发过程中,柑橘黄酮由于成分众多,代谢途径复杂,代谢产物多样,不利于阐明其活性功能以及发掘利用特定的代谢产物。因此,本文对柑橘黄酮的谱-构-量-效关系和代谢途径及对奶牛的应用等方面进行了系统的综述,以期为柑橘黄酮在动物生产中的进一步开发利用提供理论依据。

关键词：柑橘黄酮生物活性构效关系谱效关系量效关系奶牛

竹叶黄酮通过调节抗氧化通路和自噬缓解奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的作用机制

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4677-4692页

作者：牛浩羽詹经纬谭健赵玉超蒋林树北京农学院动物科学技术学院奶牛营养学北京市重点实验室北京102206

本试验旨在探究竹叶黄酮(BLF)对氧化应激的奶牛乳腺上皮细胞自噬和抗氧化通路的影响,并通过添加自噬抑制剂Mdivi-1探究自噬与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的关联性。以奶牛乳腺上皮细胞MAC-T细... 详细信息

本试验旨在探究竹叶黄酮(BLF)对氧化应激的奶牛乳腺上皮细胞自噬和抗氧化通路的影响,并通过添加自噬抑制剂Mdivi-1探究自噬与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的关联性。以奶牛乳腺上皮细胞MAC-T细胞系为研究对象,将维持培养基中处理的MAC-T设为对照组,经含BLF(80μg/mL)的维持培养基处理的MAC-T设为BLF组,经含过氧化氢(H_(2)O_(2),800μmol/L)的维持培养基处理的MAC-T设为H_(2)O_(2)组(诱导氧化应激),经含BLF(80μg/mL)的维持培养基和含H_(2)O_(2)(800μmol/L)的维持培养基处理的MAC-T设为BLF+H_(2)O_(2)组,经含BLF(80μg/mL)的维持培养基、含Mdivi-1(1μmol/L)的维持培养基以及含H_(2)O_(2)(800μmol/L)的维持培养基处理的MAC-T设为BLF+H_(2)O_(2)+Midiv组,经含Mdivi-1(1μmol/L)的维持培养基处理的MAC-T设为Midiv组。培养结束后,采用实时荧光定量PCR检测自噬和Keap1-Nrf2信号通路相关基因的相对表达量,免疫印迹法检测自噬及Keap1-Nrf2、胞外信号调节激酶(MAPK)信号通路相关蛋白的表达量,免疫荧光技术检测转录因子EB(TFEB)、Nrf2蛋白表达及核移位情况。结果显示:1)BLF预处理能显著增加氧化损伤细胞中自噬标志物Beclin1、Parkin蛋白的表达量(P<0.05),显著增加溶酶体功能相关蛋白组织蛋白酶D(CTSD)和溶酶体关联膜蛋白1(LAMP1)蛋白的表达量(P<0.05),显著增加腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)蛋白的磷酸化程度和TFEB蛋白的表达量(P<0.05),并促进TFEB核转位,显著升高溶酶体相关基因囊泡型ATP酶H亚基(ATP6V1H)、组织蛋白酶B(CTSB)、三肽基肽酶1(TPP1)和自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)的相对表达量(P<0.05)。2)BLF预处理能显著减少氧化损伤细胞中Keap1蛋白的表达量(P<0.05),导致Nrf2蛋白在细胞质内稳定并大量转移到细胞核内,激活下游Nrf2靶基因血红素加氧酶-1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)的转录与翻译。但是,通过Mdivi-1抑制自噬将抑制BLF对Keap1-Nrf2信号通路的促进作用。综上所述,本研究发现BLF通过促进细胞自噬和溶酶体功能,激活Keap1-Nrf2信号通路来缓解奶牛乳腺上皮细胞的氧化应激,并且自噬与抗氧化信号通路之间存在相互串扰。

关键词：竹叶黄酮氧化应激自噬奶牛乳腺上皮细胞

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响应面法优化苦荞鲜湿面工艺研究

粮食与油脂 2024年第5期37卷 98-103页

作者：张馨月张梦然马挺军北京农学院食品科学与工程学院北京102206

以挤压熟化苦荞粉和小麦粉为原料,以吸水率和蒸煮损失率为指标,分别考察苦荞粉添加量、醒发时间、加水量、水温、和面时间对苦荞鲜湿面品质的影响。在单因素试验的基础上,通过响应面法优化苦荞鲜湿面的加工工艺。结果表明:苦荞鲜湿面的... 详细信息

以挤压熟化苦荞粉和小麦粉为原料,以吸水率和蒸煮损失率为指标,分别考察苦荞粉添加量、醒发时间、加水量、水温、和面时间对苦荞鲜湿面品质的影响。在单因素试验的基础上,通过响应面法优化苦荞鲜湿面的加工工艺。结果表明:苦荞鲜湿面的最佳工艺为以小麦与苦荞混合粉质量为基准,苦荞粉添加量51%、醒发时间20 min、加水量101%。在此条件下制得的苦荞鲜湿面吸水率为52.66%±0.75%、蒸煮损失率为1.00%±0.06%,口感爽滑黏弹,具有苦荞特有的香气,感官评价接近小麦鲜面条。

关键词：苦荞挤压熟化鲜湿面加工工艺响应面法

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内化菌耐受性Tr值评估方法研究

中国畜牧兽医 2024年第5期51卷 2245-2252页

作者：孙志刚王潇司晓慧吕若一宋连宇刘晓晔北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206 北京农学院动物科学技术学院北京102206

【目的】建立一种全面考虑宿主细胞、内化菌、抗菌药物三者互作的评估方法来精准比较内化菌介导的抗菌药物耐受情况。【方法】以IEC-6、RIMVECs和RAW264.7细胞为宿主细胞,以金黄色葡萄球菌和沙门菌作为内化菌,以氨苄西林、环丙沙星、四... 详细信息

【目的】建立一种全面考虑宿主细胞、内化菌、抗菌药物三者互作的评估方法来精准比较内化菌介导的抗菌药物耐受情况。【方法】以IEC-6、RIMVECs和RAW264.7细胞为宿主细胞,以金黄色葡萄球菌和沙门菌作为内化菌,以氨苄西林、环丙沙星、四环素等7种化学药品及槲皮素和山柰酚等4种中药标准品为抗菌药物,检测抗菌药物细胞外最小杀菌浓度(MBC EX),建立细菌-细胞感染互作模型,利用细菌菌落计数检测抗菌药物细胞内最小杀菌浓度(MBC IN)。测定内化菌感染细胞的百分比(N)及药物治疗后内化菌感染细胞的百分比(N D)。通过计算得到内化菌耐受值(Tr),对内化菌的抗菌药物耐受性进行评估。【结果】金黄色葡萄球菌对氨苄西林、环丙沙星、红霉素、多黏菌素、利福平、四环素、万古霉素7种化学药品和中药标准品黄芩苷均产生了耐受性(Tr值>1),其中,对环丙沙星耐受性Tr值最高,耐受程度最严重;对槲皮素、山奈酚和儿茶素不产生耐受性(Tr值≤1)。不同内化菌对四环素的耐受性结果显示,金黄色葡萄球菌对四环素产生的耐受性Tr值大于沙门菌。不同宿主细胞对内化菌介导的抗菌药物耐受性的影响显示,IEC-6细胞中金黄色葡萄球菌对四环素的耐受性最高。【结论】耐受性Tr值评估方法不仅可有效评估内化菌对不同抗菌药物的耐受程度,还可比较不同宿主细胞对内化菌介导的抗菌药物耐受性的影响,将内化菌对抗菌药物产生的耐受性可视化和数据化地呈现出来,为临床精准用药提供指导。

关键词：内化菌抗菌药物耐受性耐受值评估方法

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党参皂苷对跨H9N2 AIV感染肺微血管内皮侵袭细胞功能的影响

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中国兽医学报 2024年第8期44卷 1800-1806页

作者：乔畅刘翔冯波穆祥张涛董虹胡格张倩北京农学院动物科学技术学院北京102206 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206

为探讨党参皂苷对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染引起机体免疫抑制的调控作用,首先应用不同质量浓度(5、10、20 mg/L)党参皂苷孵育大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs),采用RT-PCR和流式细胞术检测PD-L1表达水平变化,并以ELISA试剂盒检测上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-10含量及空斑法检测上清液中H9N2 AIV的滴度。然后利用8μm孔径Transwell板建立RPMECs和T细胞共培养体系,以模仿循环T细胞跨过微血管迁移到病毒感染部位的过程。在Transwell上室中培养RPMECs,用H9N2 AIV接种RPMECs,1 h后加入含20 mg/L党参皂苷的培养基,36 h后加入T细胞。作用8 h后,收集下室中的T细胞,用流式细胞仪检测CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞的比例,用ELISA试剂盒检测上清液中IL-2、IFN-γ和Granzyme B的表达水平,流式细胞分选技术检测Perforin-1阳性T细胞的比例,MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测T细胞的增殖活性,Annexin V-FITC/PI对T细胞染色后用流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果显示,党参皂苷可显著降低H9N2 AIV感染诱导的RPMECs中PD-L1的表达水平、IL-10及TNF-α表达量,降低T细胞凋亡率,但可显著提高跨内皮迁移T细胞中IL-2、IFN-γ、Perforin-1和Granzyme B的表达量及T细胞的增殖活性。结果表明,党参皂苷可显著抑制RPMECs中H9N2 AIV诱导的PD-L1的表达,增强跨内皮细胞层迁移T细胞的抗病毒功能,有利于增强宿主对H9N2 AIV抵抗能力。

关键词：党参皂苷微血管内皮细胞 PD-L1 T细胞 H9N2 AIV