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慢性心理应激与免疫

中国免疫学杂志 2017年第7期33卷 961-966页

作者：赵敏张纪岩军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室

我国正处于快速发展的转型期,社会心理问题日益突出。尽管目前对慢性心理应激影响免疫的负面效应有了较清楚的认识,但对相关机制仍了解甚少,因而对其危害还缺乏有效的干预手段。近些年来,国内外的研究比较关注慢性心理应激影响免疫的分... 详细信息

我国正处于快速发展的转型期,社会心理问题日益突出。尽管目前对慢性心理应激影响免疫的负面效应有了较清楚的认识,但对相关机制仍了解甚少,因而对其危害还缺乏有效的干预手段。近些年来,国内外的研究比较关注慢性心理应激影响免疫的分子基础、对免疫效应细胞的调控作用和对免疫调节细胞的调控作用,本文对相关进展进行简要综述。

关键词：慢性心理应激糖皮质激素环磷酸腺苷免疫效应细胞免疫调节细胞

人hCGβ真核表达载体的构建及稳定转染B16细胞系的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第7期26卷 623-626页

作者：张亮王宇江乐阎瑾琦王越胡明明于继云军事医学科学院基础医学研究所

目的：构建人hCGβ真核表达载体，稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，建立稳定表达人hCGβ的小鼠黑色素瘤细胞系。方法：采用PCR方法扩增出人hCGβ全长基因的cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES—neo中，并... 详细信息

目的：构建人hCGβ真核表达载体，稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，建立稳定表达人hCGβ的小鼠黑色素瘤细胞系。方法：采用PCR方法扩增出人hCGβ全长基因的cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES—neo中，并加入酶切位点和6×His标签，得到重组表达质粒pIRES—neo—hCGβ-（His）6。利用阳离子脂质体介导法将其稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，经G418加压筛选出阳性克隆。RT—PCR、Western blot及免疫荧光检测人hCGβ在B16细胞中的表达。结果：经限制性内切酶鉴定及序列分析，pIRES—neo—hCGβ一（His）6重组体构建正确，最终建立的表达人hCGβ基因的B16细胞系阳性率高于90％。结论：成功构建了真核表达载体plRES—neo—hCGβ-（His）6，建立的稳定转染人hCGβ小鼠黑色素瘤细胞系能够高效表达hCGβ基因。该稳定转染细胞系的建立为进一步研究人hCGβ抗肿瘤基因疫苗的功能提供了良好的实验基础，为hCGβ在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了研究基础。

关键词： hCGβ 稳定转染小鼠黑色素瘤细胞肿瘤免疫治疗

丙型肝炎病毒核心蛋白寡核苷酸适配子的筛选与鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第5期22卷 578-581页

作者：詹林盛孙红琰彭剑淳邵宁生王全立军事医学科学院输血研究所军事医学科学院基础医学研究所

目的　筛选、鉴定抗HCV核心蛋白 (C蛋白 )的寡核苷酸适配子 (aptamers)。方法　利用systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment (SELEX)技术 ,以HCVC蛋白为靶分子 ,从体外合成的 81bp随机单链DNA文库中筛选与HCVC蛋白特异结... 详细信息

目的　筛选、鉴定抗HCV核心蛋白 (C蛋白 )的寡核苷酸适配子 (aptamers)。方法　利用systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment (SELEX)技术 ,以HCVC蛋白为靶分子 ,从体外合成的 81bp随机单链DNA文库中筛选与HCVC蛋白特异结合的寡核苷酸适配子 ,并进行了解离常数 (Kd)测定和适配子序列测定。再分别利用ClustalW软件包和DNAFoldingSever分析适配子的一级结构和二级结构。结果　经过 9轮循环筛选 ,随机ssDNA库与HCVC蛋白的结合率从 0 .5 %上升到32 .5 %。所有的一级结构没有共同的同源序列 ,但可分 5个家族 ,每个家族具有共同的保守序列。二级结构分析表明 ,适配子形成的茎环、凸环结构可能是与HCVC蛋白结合的结构基础。其中寡核苷酸适配子C4与HCVC蛋白特异结合的亲和力最高 ,Kd值为 6 8nmol L。

关键词：丙型肝炎丙型肝炎病毒核心蛋白 SELEX技术寡核苷酸适配子

高效原核融合表达载体(pBVIL1)的构建及在HCV抗原表达中的应用

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第3期17卷 231-233页

作者：宋晓国凌世淦张贺秋陈坤孙柯儿朱翠侠军事医学科学院基础医学研究所分子病毒室北京100850

在对作为试剂抗原的研究中，为尽量减少抗原中无关片段可能引起的非特异性反应，常需采用以特异性抗原表位为主的小分子肽。但有时为了增加抗原的覆盖面以提高检测的灵敏度，又需用含有多个抗原表位的融合抗原〔１，２〕。用人工合成肽... 详细信息

在对作为试剂抗原的研究中，为尽量减少抗原中无关片段可能引起的非特异性反应，常需采用以特异性抗原表位为主的小分子肽。但有时为了增加抗原的覆盖面以提高检测的灵敏度，又需用含有多个抗原表位的融合抗原〔１，２〕。用人工合成肽成本较高，且肽与肽间的化学连接难以达到定向和得到稳定的产物。若能进行小分子肽基因的重组表达，并进而将其相互连接融合表达最为理想。为实现上述目的，我们构建了表达载体pBVIL１。此载体是我们在以前克隆的表达质粒〔３〕pBV２２０／IL－１β的基础上而构建的。即在相当原质粒中的IL－１β基因中，插入两个酶切位点，使插入的基因片段与IL－１β基因融合获得高效表达。同时，通过对引入的酶切位

关键词：表达载体抗原表位 HCV抗原高效原核融合

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增强树突状细胞抗原呈递功能的新进展

细胞与分子免疫学杂志 2004年第2期20卷 253-256页

作者：钟国成郭宁军事医学科学院基础医学研究所分子免疫学实验室，北京100850

随着分子和细胞生物学技术的不断发展,基于树突状细胞(DC)的肿瘤疫苗在恶性肿瘤的临床治疗中已获得越来越广泛的应用.DC是功能最强的专职抗原呈递细胞(APC),具有独特的刺激T细胞增殖的能力,是机体免疫应答的始动者,一种天然的"免疫佐剂"... 详细信息

随着分子和细胞生物学技术的不断发展,基于树突状细胞(DC)的肿瘤疫苗在恶性肿瘤的临床治疗中已获得越来越广泛的应用.DC是功能最强的专职抗原呈递细胞(APC),具有独特的刺激T细胞增殖的能力,是机体免疫应答的始动者,一种天然的"免疫佐剂".通过DC可诱导特异性抗肿瘤免疫应答,调动患者的免疫系统清除肿瘤或预防微小残留病灶的复发,是基础及临床研究追求的共同目标.为实现免疫介导的肿瘤治疗,需要重新启动机体抗肿瘤免疫的机制,构筑强大的肿瘤抗原递呈平台,并克服肿瘤产生的特异性免疫抑制作用.本文重点介绍了肿瘤免疫治疗中有关增强DC抗原呈递能力的研究新进展.

关键词：树突状细胞肿瘤抗原呈递疫苗

SCIRR 10截短体真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

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吉林大学学报（医学版） 2011年第2期37卷 226-230,I0002页

作者：蔺宇刘少君军事医学科学院基础医学研究所一室北京100850

目的:构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,探讨SCIRR 10蛋白的功能位点。方法:PCR扩增出SCIRR 10蛋白的3个功能截短体表达DNA序列,构建3种真核表达质粒载体pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-145aa)、pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-90aa)和pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-70aa)。将3个表达载体质粒转染到COS-7细胞中,应用Western blotting方法检测3个蛋白截短体的表达情况。结果:3个被截短的SCIRR 10蛋白相对分子质量分别为18 800、12 800和10 700。在COS-7细胞中可以成功表达3个SCIRR 10蛋白截短体。相对3个SCIRR 10截短体蛋白的表达量,β-tubulin蛋白无明显变化。结论:成功构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,通过此系统获得有生物活性的3个SCIRR10截短体蛋白。

关键词：脊髓损伤修复相关10号基因截短构建蛋白表达

神经细胞黏附分子NB-3在调节胚胎来源神经干细胞分化和迁移中的作用

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中国康复医学杂志 2012年第7期27卷 590-593,604页

作者：赵彤黄欣赵华吴奎武朱玲玲范明军事医学科学院基础医学研究所认知科学研究室北京100850 军事医学科学院基础医学研究所

目的:探讨NB3基因在调节小鼠探讨神经干细胞分化和迁移中的作用。方法:分离培养来源于E14.5dNB3缺失和野生型小鼠海马的神经前体细胞,通过免疫荧光染色方法检测NB3缺失对神经干细胞(NSCs)诱导分化后神经元分化和迁移的影响。结果:①NB3... 详细信息

目的:探讨NB3基因在调节小鼠探讨神经干细胞分化和迁移中的作用。方法:分离培养来源于E14.5dNB3缺失和野生型小鼠海马的神经前体细胞,通过免疫荧光染色方法检测NB3缺失对神经干细胞(NSCs)诱导分化后神经元分化和迁移的影响。结果:①NB3在体外培养的神经干细胞中表达,并和干细胞的标记分子Nestin共定位;②NB3基因缺失后对神经干细胞的体外增殖能力无明显影响,但在用1%胎牛血清诱导分化后,NB3缺失的神经干细胞产生更多的神经元;③与对照组相比,从NB3基因缺失的神经干细胞分化而来的神经元表现为相互聚集而不向神经球外迁移。结论:NB3在神经元的再生和迁移中具有一定的调节作用。

关键词：神经黏附分子神经干细胞迁移分化

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抗体信息数据库

中国生物化学与分子生物学报 2017年第8期33卷 750-755页

作者：周婷婷冯健男军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室北京100850

抗体是介导体液免疫的重要效应分子。近年来,随着治疗性抗体药物不断上市及其临床应用范围不断拓宽,治疗性抗体已成为生物制药的产业支柱。另一方面,随着抗体相关的基础研究日益深入和抗体序列、结构、功能表位等相关数据大量涌现,作为... 详细信息

抗体是介导体液免疫的重要效应分子。近年来,随着治疗性抗体药物不断上市及其临床应用范围不断拓宽,治疗性抗体已成为生物制药的产业支柱。另一方面,随着抗体相关的基础研究日益深入和抗体序列、结构、功能表位等相关数据大量涌现,作为抗体数据管理、搜索与利用的重要工具,抗体资源库也层出不穷并得到长足发展,在相关的研究、开发、生产与销售中发挥日益重要的作用。本文对包括Kabat、IMGT、ab Ysis等在内抗体信息数据库进行介绍。

关键词：抗体数据库 Kabat IMGT ab Ysis

人类冠状病毒调节宿主抗病毒天然免疫分子机制

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生物化学与生物物理进展 2010年第3期37卷 239-244页

作者：孙莉刘殿波杨宇东邢雅玲陈晓娟陈忠斌军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

SARS冠状病毒和正在全球流行的猪源H1N1型流感病毒等人类新发呼吸道病毒对人类生命健康构成严重威胁.人类重要呼吸道病毒与宿主抗病毒天然免疫的关系是近年来研究热点.SARS冠状病毒等很多RNA病毒能够编码某种蛋白质,抑制干扰素表达以及... 详细信息

SARS冠状病毒和正在全球流行的猪源H1N1型流感病毒等人类新发呼吸道病毒对人类生命健康构成严重威胁.人类重要呼吸道病毒与宿主抗病毒天然免疫的关系是近年来研究热点.SARS冠状病毒等很多RNA病毒能够编码某种蛋白质,抑制干扰素表达以及干扰素介导的抗病毒信号通路.人类冠状病毒木瓜样蛋白酶(papain-like protease,PLP)利用其自身去泛素化酶(DUB)活性,使干扰素表达通路中重要调节蛋白发生去泛素化,从而抑制干扰素信号传导.同时,PLP蛋白酶通过阻碍干扰素表达信号通路中最新发现的重要调节蛋白ERIS(也称MITA/STING)二聚化,使其失活并丧失激活干扰素通路的功能,这些发现对于阐明人类重要呼吸道病毒对宿主细胞抗病毒天然免疫反应的调节作用及其机制具有重要意义,为人类新发病毒致病机理、免疫防治以及抗病毒药物研究提供新的思路.

关键词：冠状病毒木瓜样蛋白酶干扰素 MITA/ERIS 抗病毒天然免疫反应