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骆驼来源单域抗体的研究进展

国际药学研究杂志 2017年第1期44卷 18-23页

作者：于吉军杨光周婷婷冯健男军事医学科学院基础医学研究所北京100850

骆驼科动物的血清中存在一种只含重链的同型二聚体(homodimer)构成的特殊抗体,这类抗体由1个重链可变区和2个恒定区(CH2和CH3)组成,缺少CH1和轻链。由该类抗体重链可变区筛选制备而得到的抗体称为单域抗体。单域抗体较常规抗体具有相对... 详细信息

骆驼科动物的血清中存在一种只含重链的同型二聚体(homodimer)构成的特殊抗体,这类抗体由1个重链可变区和2个恒定区(CH2和CH3)组成,缺少CH1和轻链。由该类抗体重链可变区筛选制备而得到的抗体称为单域抗体。单域抗体较常规抗体具有相对分子质量小、热稳定性强、易通过血脑屏障等优点,越来越多地应用于生物探测、诊断、制药等领域。本文主要阐述了单域抗体的结构特征、理化性质及其在生物医学领域的应用。

关键词：抗体重链抗体骆驼单域抗体

丙型肝炎病毒不同功能区抗体与病毒核糖核酸的相关性

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中华肝脏病杂志 2003年第12期11卷 754-755页

作者：张贺秋王国华陈坤修冰水宋晓国刘荷中凌世淦军事医学科学院基础医学研究所分子病毒学研究室北京100850

目的探讨慢性丙型肝炎患者体内不同功能区抗体的免疫应答及与HCV RNA浓度的关系。方法克隆表达丙型肝炎病毒不同功能区优势表位抗原蛋白(HCV-C、NS_3、NS_4、NS_5和HVR1),建立单片段ELISA法检测抗HCV抗体,并以定量HCV RT—PCR法检测... 详细信息

目的探讨慢性丙型肝炎患者体内不同功能区抗体的免疫应答及与HCV RNA浓度的关系。方法克隆表达丙型肝炎病毒不同功能区优势表位抗原蛋白(HCV-C、NS_3、NS_4、NS_5和HVR1),建立单片段ELISA法检测抗HCV抗体,并以定量HCV RT—PCR法检测患者血清中HCV RNA浓度。结果慢性丙型肝炎患者体内HCV不同功能区抗体检出有较大的差异,HCV-C、HVR1检出最高,其次为NS_3、NS_4和NS_5。结论 HCV—C、NS_3、NS_4、和HVR1抗体滴度与HCV RNA浓度均有较好的相关性。

关键词：丙型肝炎病毒抗体病毒核糖核酸相关性免疫应答 ELISA法 RT-PCR法

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多型别HCV—E1复合表位抗原研究

中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 46-52页

作者：贺锋宋晓国唐丽王国华张贺秋陈坤朱翠侠许立博凌世淦军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的设计多型别HCV—E1表位复合免疫原，通过免疫小鼠，探讨其在丙型肝炎治疗性疫苗与诊断试剂研究中的应用。方法分析比较HCV—E1包膜糖蛋白B细胞表位序列，选取几个代表性基因型的中和性优势抗原表位，再结合泛DR辅助性T细胞表位（PA... 详细信息

目的设计多型别HCV—E1表位复合免疫原，通过免疫小鼠，探讨其在丙型肝炎治疗性疫苗与诊断试剂研究中的应用。方法分析比较HCV—E1包膜糖蛋白B细胞表位序列，选取几个代表性基因型的中和性优势抗原表位，再结合泛DR辅助性T细胞表位（PADRE），构建含有不同HCV型别E1表位抗原基因和通用T辅助细胞表位基因的原核表达质粒。结果成功构建了含有HCV1a、1b、2a、3a、4a和6a等基因型E1中和性表位以及通用T辅助细胞表位的质粒pBVIL1／E1SPADRE，该质粒转化大肠杆菌后获得的工程菌，通过诱导培养可以高效表达重组多型别HCV—E1表位复合抗原，所获得的多型别HCV—E1表位复合免疫原可在BALB／c小鼠体内诱发强烈的体液免疫反应，ELISA检测抗体水平可达到1：12800。结论新构建的HCV-E1表位复合免疫原具有很好的免疫原性，为进一步研究HCV疫苗奠定了基础。

关键词：丙型肝炎病毒多型别复合抗原 B细胞表位

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B细胞激活因子在免疫调节中的作用

中国实验血液学杂志 2006年第3期14卷 631-634页

作者：杜建芳王嘉玺徐东刚军事医学科学院基础医学研究所分子遗传研究室北京100850

B细胞激活因子(BAFF)是调节B淋巴细胞存活和成熟的细胞因子,属于TNF家族成员。BAFF有三个受体,分别为BCMA,TACI和BAFF-R。近几年来的研究表明,BAFF及其受体在抗体类型转换、生发中心维持、T细胞共刺激等方面发挥着重要的免疫调节作用,... 详细信息

B细胞激活因子(BAFF)是调节B淋巴细胞存活和成熟的细胞因子,属于TNF家族成员。BAFF有三个受体,分别为BCMA,TACI和BAFF-R。近几年来的研究表明,BAFF及其受体在抗体类型转换、生发中心维持、T细胞共刺激等方面发挥着重要的免疫调节作用,对自身免疫疾病、淋巴瘤和B细胞免疫缺陷的治疗具有潜在的应用前景。本文就BAFF的结构与表达,BAFF受体,生物学功能及其临床应用作一综述。

关键词： B细胞激活因子 B细胞激活因子受体免疫调节

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LIM同源盒转录因子在发育中的作用机制

生物化学与生物物理进展 2001年第3期28卷 295-298页

作者：刘耀波汪家政范明军事医学科学院基础医学研究所神经生物学研究室北京100850

LIM同源盒转录因子 (LIM homeodomaintranscriptionfactor,LIM HD)通过调控体内一些基因的表达决定脊椎和非脊椎动物发育中组织和细胞的特异性分化 .LIM HD蛋白凭借LIM结构域 ,通过分子内和分子间的相互作用来调节自身的功能状态 .这一... 详细信息

LIM同源盒转录因子 (LIM homeodomaintranscriptionfactor,LIM HD)通过调控体内一些基因的表达决定脊椎和非脊椎动物发育中组织和细胞的特异性分化 .LIM HD蛋白凭借LIM结构域 ,通过分子内和分子间的相互作用来调节自身的功能状态 .这一调节的机制可能是 :LIM结构域通过促进蛋白质之间的作用正性调控LIM HD蛋白的功能 ,使其能够与组织特异性启动子的调控区结合 ;也可能通过阻止HD区与相关DNA的结合来负性调控LIM HD的功能 .LIM结构域与其他蛋白的结合可解除这种负性调控 ,允许DNA分子的结合 ,提示LIM HD的一种新的作用机制 .

关键词： LIM同源盒转录因子 LIM结构域发育调控作用机制

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细胞凋亡的检测技术与方法

中国药理学与毒理学杂志 2005年第6期19卷 466-470页

作者：王嘉宁郭宁军事医学科学院基础医学研究所细胞免疫室北京100850

细胞凋亡在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。根据死亡细胞的形态学、生物化学和分子生物学特征,可以将凋亡细胞与坏死细胞区别开来。本文综述了常用的细胞凋亡检测技术与方法的基本原理,如形态学观察、荧光素染色、DN... 详细信息

细胞凋亡在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。根据死亡细胞的形态学、生物化学和分子生物学特征,可以将凋亡细胞与坏死细胞区别开来。本文综述了常用的细胞凋亡检测技术与方法的基本原理,如形态学观察、荧光素染色、DNA阶梯、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活性的检测等,并对各种方法的优点及局限性做一简要比较。用透射电镜进行超微结构观察仍是鉴定细胞凋亡的金标准。在选择细胞凋亡检测方法时,要充分了解各种方法的原理和应用范围,进行综合考虑。多种检测方法的联合应用常可获得准确的结果。

关键词：细胞凋亡线粒体膜电位荧光染料流式细胞术半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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酶联免疫斑点方法改进及应用

上海免疫学杂志 2001年第6期21卷 355-356,359页

作者：赖春宁黎燕齐春会孙瑛勋沈倍奋军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室北京100850

建立了ELISPOT方法并通过改进 ,应用到抗人CD8杂交瘤细胞及LACA小鼠体外脾细胞分泌IgG量的检测 ,同时观察六味地黄多糖CA4 3在体外对LACA小鼠脾细胞分泌IgG的影响。结果表明 10 μg/mlLPS作用下可明显提高小鼠脾细胞体外产生抗体的量和... 详细信息

建立了ELISPOT方法并通过改进 ,应用到抗人CD8杂交瘤细胞及LACA小鼠体外脾细胞分泌IgG量的检测 ,同时观察六味地黄多糖CA4 3在体外对LACA小鼠脾细胞分泌IgG的影响。结果表明 10 μg/mlLPS作用下可明显提高小鼠脾细胞体外产生抗体的量和提高分泌抗体的细胞数。 5 0 μg/mlCA4 3在体外与LPS具有相似的作用 ,可以刺激小鼠脾细胞分泌IgG的量和分泌抗体的细胞数量增多。

关键词：酶联免疫斑点法 IgG CA4-3 动物实验

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蓖麻毒素快速ELISA检测法的建立

细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 536-538页

作者：郭建巍沈倍奋冯健男孙瑛勋胡美茹于鸣军事医学科学院基础医学研究所分子免疫学实验室

目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,... 详细信息

目的:建立蓖麻毒素快速ELISA检测方法。方法:从8株抗蓖麻毒素的杂交瘤细胞中,筛选亲和力较高的单克隆抗体,用Westernblot和ELISA鉴定、ProteinA纯化、HRP标记,经交叉配伍筛选最佳的抗体组合。结果:建立了蓖麻毒素的快速ELISA检测方法,对蓖麻毒素的最低检出浓度为175ng/L,目视检测最低浓度为625ng/L,整个实验不需仪器可在40min内完成检测。结论:蓖麻毒素快速ELISA检测法为蓖麻毒素生物战剂的快速侦检提供了有效手段。

关键词：蓖麻毒素单克隆抗体快速ELISA

可溶性白细胞介素6受体β亚基拮抗IL-6信号的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 1996年第4期10卷 334-339页

作者：倪长源沈倍奋黎燕赖春宁王建安任蕴芳军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室北京100850

gp130是白细胞介素6(IL-6)受体的β亚基和信号转导子。IL-6介导的信号转导起始于gp130与IL-6、IL-6Ra形成的复合体。为了研究gp130胞外区的结构与功能,我们克隆并表达了其胞外区全长及氨基端304个氨基酸残基的片段,并在白血病R2细胞、... 详细信息

gp130是白细胞介素6(IL-6)受体的β亚基和信号转导子。IL-6介导的信号转导起始于gp130与IL-6、IL-6Ra形成的复合体。为了研究gp130胞外区的结构与功能,我们克隆并表达了其胞外区全长及氨基端304个氨基酸残基的片段,并在白血病R2细胞、杂交瘤细胞和肝癌细胞中观察其生物学效应。结果发现,两个片段均拮抗IL-6信号,从而,证明了含细胞因子结合区的可溶性小片段和大片段都能与膜结合型gp130竞争性结合IL-6、IL-6Ra,拮抗IL-6信号;它们与可溶性IL-6R α的效应正好相反。

关键词： IL-6 gp130 基因克隆受体