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猴痘病毒蛋白的原核表达及免疫效果评价

病毒学报 2024年第4期40卷 772-778页

作者：王雪琛李涛杨晓岚孙娅坤王慧王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。研发特异性预防和治疗猴痘的疫苗或药物成为目前全球研究重点之一。本研究以猴痘主要抗原蛋白其中的A29L、E8L、M1R为研究基础,加入His标签构建质粒、原核表达、纯化,并对表达蛋白进行SDS⁃PAGE... 详细信息

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。研发特异性预防和治疗猴痘的疫苗或药物成为目前全球研究重点之一。本研究以猴痘主要抗原蛋白其中的A29L、E8L、M1R为研究基础,加入His标签构建质粒、原核表达、纯化,并对表达蛋白进行SDS⁃PAGE及Western blot鉴定其特异性。后续将3种抗原蛋白与CpG⁃ODN 1826单佐剂、铝单佐剂或CpG与铝复合佐剂三次免疫小鼠,通过酶联免疫吸附实验及病毒蚀斑减少中和实验测定三价疫苗的结合抗体和中和抗体能力。结果表明,重组蛋白A29L、E8L、M1R诱导后均可溶性表达且表达量及纯度良好。三价疫苗以CpG⁃ODN 1826佐剂联合铝佐剂施行肌肉注射一组表现出较好的结合抗体和中和抗体能力。本研究为研发特异性针对猴痘的疫苗或药物提供基础。

关键词：猴痘猴痘病毒原核表达蛋白纯化佐剂

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单纯疱疹病毒Ⅰ型呼吸道感染的研究进展

军事医学 2024年第1期48卷 63-67页

作者：王慧瑶廖良宁冯烨姜涛牡丹江医学院公共卫生学院黑龙江牡丹江157000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

人类单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)可感染机体上呼吸道,多为自限性;病毒再激活后可引发下呼吸道感染,但相对少见。HSV-1可与其他病原体一起引发呼吸道的混合感染,并加重病情,甚至引起HSV肺炎,导致急性呼吸窘迫综合征。该文主要综述了HSV-1引... 详细信息

人类单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)可感染机体上呼吸道,多为自限性;病毒再激活后可引发下呼吸道感染,但相对少见。HSV-1可与其他病原体一起引发呼吸道的混合感染,并加重病情,甚至引起HSV肺炎,导致急性呼吸窘迫综合征。该文主要综述了HSV-1引发呼吸道感染的途径、症状与危害、HSV-1与其他病毒引发呼吸道混合感染以及药物治疗和疫苗研究等相关进展。

关键词：人类单纯疱疹病毒Ⅰ型呼吸道感染肺炎

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贝氏柯克斯体耐受渗透脱水研究模型的建立

中国人兽共患病学报 2024年第5期40卷 415-420页

作者：王涛孙静尹白露于永慧何卫平段学章解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部放射治疗科北京100039 解放军总医院第五医学中心感染病医学部国家感染临床医学研究中心北京100039 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的基于无生命培养体系,探索建立贝氏柯克斯体耐受脱水的实验室研究模型。方法梯度调整贝氏柯克斯体无生命培养体系中的渗透压条件,利用qPCR定量测定不同渗透压下贝氏柯克斯体在培养周期内基因组拷贝数变化并描记生长曲线,进一步利用... 详细信息

目的基于无生命培养体系,探索建立贝氏柯克斯体耐受脱水的实验室研究模型。方法梯度调整贝氏柯克斯体无生命培养体系中的渗透压条件,利用qPCR定量测定不同渗透压下贝氏柯克斯体在培养周期内基因组拷贝数变化并描记生长曲线,进一步利用相差显微镜、透射电子显微镜对真核细胞以及无细胞培养方法所得贝氏柯克斯体进行形态学分析,并感染BGMK细胞测定不同渗透压培养所得贝氏柯克斯体的感染性VFU。结果贝氏柯克斯体可在高渗透压条件的无生命培养基中适应性生存7 d以上,经高渗透压培养后的菌体脱水收缩且大小类似于小贝氏体,同时感染后24 h的VFU较对照组降低。结论成功建立了贝氏柯克斯体耐受高渗压脱水的研究模型,为下一步用蛋白质组学等方法研究贝氏柯克斯体在自然环境中耐受干燥脱水的遗传学机制奠定了基础。

关键词：贝氏柯克斯体 Q热渗透压脱水无生命培养

SHERLOCK-HBA检测方法的建立及其在血液鉴别中的应用

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生物化学与生物物理进展 2024年第8期51卷 1971-1982页

作者：姚乾威何红霞胡胜赵一霞罗雨季安全孙启凡山西医科大学法医学院太原030001 公安部鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071

目的基于规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR关联蛋白质系统(Cas)技术建立检测血液特异性血红蛋白α(HBA)mRNA的方法,以准确、快速地鉴定血液样本。方法本研究通过设计和筛选血液特异性HBA mRNA上的CRISPR RNA(crRNA)短片段,基于C... 详细信息

目的基于规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR关联蛋白质系统(Cas)技术建立检测血液特异性血红蛋白α(HBA)mRNA的方法,以准确、快速地鉴定血液样本。方法本研究通过设计和筛选血液特异性HBA mRNA上的CRISPR RNA(crRNA)短片段,基于CRISPR/Cas技术原理建立了SHERLOCK-HBA检测方法,对5种体液(包括外周血、月经血、唾液、阴道分泌液、精液)共79份样本进行检测以评价所建方法鉴别血液的能力,并通过种属特异性实验、灵敏度实验、模拟混合斑检测、模拟降解样本检测、实际案件样本检测等进一步验证实验体系的法医学应用能力。结果该方法检测人源血液的相对荧光单位(RFU)值显著高于非血液(P研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas技术的SHERLOCK-HBA检测体系,能准确、灵敏地鉴定血液,操作简单、快速,为快速识别血液类样本提供了新的思路和参考。

关键词：法医遗传学血液鉴定血红蛋白α CRISPR/Cas SHERLOCK

铜绿假单胞菌成孔毒素ExlA编码基因无痕缺失突变株的构建及其基本特性研究

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军事医学 2024年第2期48卷 108-114页

作者：张再青周媛媛胡凌飞金秀玉周冬生高波杨慧盈军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071 中部战区疾病预防控制中心北京100042 军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850

目的构建铜绿假单胞菌NY8755 exlA基因无痕缺失突变株(NY8755ΔexlA),研究成孔毒素ExlA的基本特性。方法利用二次同源重组的方法构建铜绿假单胞菌exlA基因无痕缺失突变株。选取6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠,经气溶胶肺递送途径分别感染铜绿... 详细信息

目的构建铜绿假单胞菌NY8755 exlA基因无痕缺失突变株(NY8755ΔexlA),研究成孔毒素ExlA的基本特性。方法利用二次同源重组的方法构建铜绿假单胞菌exlA基因无痕缺失突变株。选取6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠,经气溶胶肺递送途径分别感染铜绿假单胞菌NY8755和NY8755ΔexlA,记录感染后7 d小鼠的生存状况和体重变化,检测小鼠肺泡灌洗液中的促炎因子。结果经过测序验证,成功构建铜绿假单胞菌成孔毒素ExlA编码基因无痕缺失突变株。利用气溶胶肺递送途径感染小鼠(1×107 CFU)后,野生株组小鼠48 h内全部死亡,突变株组48 h后开始死亡且7 d后仍有40%存活;突变株组存活小鼠体重先下降,后逐渐恢复;感染12 h后野生株组小鼠肺泡灌洗液明显比突变株组血性渗出物更多(颜色更红),肺泡灌洗液中促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-17A(IL-17A)含量有显著差异。结论铜绿假单胞菌成孔毒素ExlA是exlA阳性的新型铜绿假单胞菌的关键毒力因子,可显著影响小鼠的生存状况,引起小鼠体内明显的炎症反应。当前关于外毒素ExlA的致病机制研究较少,所构建的NY8755ΔexlA突变株及野生株和突变株肺炎小鼠模型,可为进一步探索exlA阳性的铜绿假单胞菌致病机制提供研究基础。

关键词：铜绿假单胞菌基因敲除成孔毒素动物模型

HIV-1整合位点分布机制及检测的研究进展

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中华医院感染学杂志 2024年第11期34卷 1755-1760页

作者：孙孜璇韩婧婉李敬云李韩平王晓林温红玲李林山东大学齐鲁医学院公共卫生学院微生物检验学系新发突发传染病防控与生物安全重点实验室山东济南250012 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起的慢性传染性疾病,对人类的生命健康构成了严重威胁.整合是HIV-1病毒复制生命周期的关键环节,不同于新冠病毒等非整合型病毒,HIV-1自身基因编码的逆转录酶和整合酶,可帮助病毒整合入宿主细胞... 详细信息

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起的慢性传染性疾病,对人类的生命健康构成了严重威胁.整合是HIV-1病毒复制生命周期的关键环节,不同于新冠病毒等非整合型病毒,HIV-1自身基因编码的逆转录酶和整合酶,可帮助病毒整合入宿主细胞基因组,同步复制,确保病毒的遗传信息长期存在于宿主细胞中.然而HIV-1整合位点的选择不是随机的,而是与染色体结构和宿主基因功能等紧密相关.本文综述了有关HIV-1整合位点的检测方法、分布特征及影响其选择的因素等方面的研究进展,旨在为艾滋病的精准防控、治疗,乃至最终治愈提供信息参考.

关键词：人类免疫缺陷病毒1型整合位点分布特征影响因素

2023年贵州省六盘水市部分地区蜱传立克次体调查

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第2期36卷 154-158页

作者：李丹尼李娅于永慧欧阳譞熊小路金山焦俊内蒙古农业大学兽医学院、农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 北京微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵州省六盘水市人民医院肾内科贵州六盘水553000

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式... 详细信息

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式PCR法检测蜱携带的立克次体,包括斑点热群立克次体、柯克斯体属、无形体属、埃立克体属和东方体属,扩增的阳性片段测序后与Gen Bank已知序列进行同源性比对。结果共采集200只蜱,经鉴定均为微小扇头蜱。巢式PCR联合测序鉴定出蜱携带敬信立克次体暂定种(40.50%)、贝氏柯克斯体(1.50%)和柯克斯体共生菌(27.00%),未检测出无形体、埃立克体及东方体。结论贵州省六盘水市部分地区微小扇头蜱携带敬信立克次体暂定种、贝氏柯克斯体和柯克斯体共生菌;当地有关部门需加强家畜和人群蜱传立克次体感染监测,减少蜱传立克次体病危害。

关键词：微小扇头蜱立克次体敬信立克次体暂定种贝氏柯克斯体柯克斯体共生菌六盘水市

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猴痘病毒的研究进展概述

病毒学报 2024年第1期40卷 169-182页

作者：王雪琛李涛王慧王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。猴痘病毒因1958年从带有痘疹的食蟹猴体内分离出而得名。20世纪猴痘病毒多分布于非洲中、西部的热带雨林地区。进入21世纪后,随着世界贸易及人口流通的增加,猴痘在世界范围内日益流行并造成人... 详细信息

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。猴痘病毒因1958年从带有痘疹的食蟹猴体内分离出而得名。20世纪猴痘病毒多分布于非洲中、西部的热带雨林地区。进入21世纪后,随着世界贸易及人口流通的增加,猴痘在世界范围内日益流行并造成人际间快速传播,造成其他非流行猴痘国家迅速暴发猴痘疫情。猴痘对人类生命安全构成重大威胁,更对全球猴痘疫情的防控提出挑战。本文就猴痘病毒的流行病学、生物学特性、将猴痘病毒应用于不同动物模拟研究猴痘病毒学、免疫学与病理学机制而建立的实验动物模型及疫苗和药物的预防的研究现状进行介绍,为积极防范猴痘疫情、加快研发出特异性针对猴痘的疫苗或药物提供帮助。

关键词：猴痘猴痘病毒人兽共患疾病流行病学特征预防措施

武夷山自然保护区蚊虫种类调查与重要蚊种种群遗传结构分析

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中国热带医学 2024年第5期24卷 499-505页

作者：王明谢静文杜雨彤王刚尹紫鸽蔡京虹刘庆张恒端赵彤言史丽内蒙古农业大学园艺与植物保护学院昆虫系统进化与多样性研究室内蒙古呼和浩特010018 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071 杭州国际旅行卫生保健中心浙江杭州310061

目的了解武夷山自然保护区蚊虫种类分布特征和重要蚊种的种群遗传多样性,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法2022—2023年在武夷山自然保护区内选择16个采样点,幼虫采集使用吸管法、成蚊采集使用诱蚊灯法。利用形态特征和基于细... 详细信息

目的了解武夷山自然保护区蚊虫种类分布特征和重要蚊种的种群遗传多样性,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法2022—2023年在武夷山自然保护区内选择16个采样点,幼虫采集使用吸管法、成蚊采集使用诱蚊灯法。利用形态特征和基于细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)和细胞色素氧化酶亚基Ⅱ(cytochrome c oxidase subunitⅡ,COⅡ)的分子鉴定技术相结合鉴定蚊种。利用ClustalX、DnaSP 5.0、Network 4.***.1.0等软件进行日本伊蚊(***)、白纹伊蚊(***)、骚扰阿蚊(***)种群遗传分化程度和基因流的分析。结果经鉴定,本研究在武夷山自然保护区采集的蚊虫隶属于蚊科8属30种。其中伊蚊属10种,库蚊属13种,阿蚊属1种,直角蚊属1种,蓝带蚊属1种,杵蚊亚属1种,按蚊属1种,巨蚊属2种。3种重要蚊虫种群遗传结构分析结果表明,日本伊蚊单倍体多样性指数为0.9947,种群间普遍达到中等分化程度,种群6与种群12之间遗传分化程度较高;白纹伊蚊单倍体多样性指数为0.6340,种群1和2与各种群之间遗传分化程度较大;骚扰阿蚊单倍体多样性指数为0.7033,种群2与种群3、种群4、种群6、种群7之间遗传分化程度较大,基因流较小。结论武夷山自然保护区蚊虫物种丰富。本研究对蚊种组成、分布开展了较为全面的调查,分析了日本伊蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊重要蚊种的种群遗传结构特征,为当地蚊媒生态研究和蚊媒疾病防控等方面提供了科学数据参考。

关键词：蚊武夷山细胞色素氧化酶亚基Ⅰ 细胞色素氧化酶亚基Ⅱ 物种鉴定种群遗传结构