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河豚毒素人工抗原的制备及其免疫原性鉴定

食品科技 2019年第3期44卷 313-317页

作者：刘敏慧刘新峰丁向彬李新张林林方淑兵郭宏天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384 北京中检葆泰生物技术公司北京101111

目的:选择血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)分别作为载体蛋白与河豚毒素(TTX)进行偶联制备人工抗原,并对合成结果进行鉴定。方法:通过甲醛法将TTX分别与大分子载体蛋白,即血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联。利用紫外扫描法、... 详细信息

目的:选择血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)分别作为载体蛋白与河豚毒素(TTX)进行偶联制备人工抗原,并对合成结果进行鉴定。方法:通过甲醛法将TTX分别与大分子载体蛋白,即血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联。利用紫外扫描法、电泳法对偶联产物进行鉴定,并对6周龄Balb/c雌性小鼠免疫注射检测其免疫原性。结果:紫外扫描显示偶联抗原较载体蛋白有轻微的红移现象出现,且经过琼脂糖凝胶及SDS-PAGE 2种方法电泳检测后发现,载体蛋白较人工抗原之间迁移率均不相同;对免疫小鼠进行间接酶联免疫吸附试验(iELISA)及间接竞争酶联免疫吸附试验(icELISA)联用检测其多抗血清效价及特异性,经过共计6次免疫后的效价能达到1:40w,且能有效抑制TTX。结论:河豚毒素人工抗原制备成功且具备良好的免疫原性。

关键词：河豚毒素人工抗原载体蛋白抗体酶联免疫吸附试验

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胶体金三线定量法,革新的霉菌毒素检测方法

食品安全导刊 2017年第10期 42-43页

作者：卜庆婧中检柏泰生物技术(北京)有限公司

胶体金技术又称侧流向免疫层析技术，是以胶体金作为示踪标记物应用于样品中待测物检测的一种免疫检测技术，可用于样品中待测物质的快速定性或定量检测，是一种稳定、灵敏的检测方法。该方法操作简单，无需专业培训，几分钟即可完成检... 详细信息

胶体金技术又称侧流向免疫层析技术，是以胶体金作为示踪标记物应用于样品中待测物检测的一种免疫检测技术，可用于样品中待测物质的快速定性或定量检测，是一种稳定、灵敏的检测方法。该方法操作简单，无需专业培训，几分钟即可完成检测，非常适用于现场快速检测。目前，胶体金免疫层析技术在霉菌毒素检测中的应用已经非常广泛，但由于只有一条检测线和一条质控线，通常只能进行定性检测，无法准确定量。针对这一情况，美国Charm公司的科学家对定性霉菌毒素检测条进行了改进，增加了一条检测线，首创三线定量检测条，即包括两条检测线和一条质控线，同时结合读数仪，可实现准确定量。Charm Rosa霉菌毒素定量检测系统采用的就是三线定量法。

关键词：免疫检测技术霉菌毒素胶体金定量法定量检测系统层析技术 arm公司检测线

TaqMan-MGB探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12

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食品安全质量检测学报 2021年第24期12卷 9362-9370页

作者：赵一苹郭益文刘龙飞胡德宝李新张林林丁向彬郭宏天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300384 北京中检葆泰生物技术有限公司北京100000

目的建立一种TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12的分析方法。方法设计动物双歧杆菌BB-12的16SrRNA序列的MGB探针,利用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain ... 详细信息

目的建立一种TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12的分析方法。方法设计动物双歧杆菌BB-12的16SrRNA序列的MGB探针,利用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术,构建目标序列的过表达载体,提取质粒进行标准曲线的绘制,最后进行市售酸奶样品检测,定量酸奶中BB-12菌株的数量。结果所有载体标准品均产生显著的荧光增幅,循环阈值(cycle threshold, Ct)介于16~20之间;而以其他酸奶制品添加菌及大肠杆菌样品DNA为模板则无荧光扩增信号。在检测灵敏度方面,BB-12载体可被稳定检出的质量浓度低至0.0000584 ng/μL, Ct值平均数为28.73,即检测灵敏度低至为0.05 pg。绘制的标准曲线线性良好,扩增效率E为0.39,判定系数R^(2)=0.9999。市售酸奶样品检测特异性好、灵敏度高、定量结果准确。结论本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测法可实现在酸奶中对BB-12菌种的检测及定量。

关键词： TaqMan-MGB探针荧光定量聚合酶链反应动物双歧杆菌BB-12 酸奶制品定量检测

免疫磁珠净化/高效液相色谱检测植物油中黄曲霉毒素含量

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分析测试学报 2024年第6期43卷 921-927页

作者：韩祎陟郑书展罗荪琳果旗赵丹弓全全王雄陈义强盛万里呼和浩特海关技术中心内蒙古呼和浩特010010 动物营养学国家重点实验室北京100193 北京中检维康生物技术有限公司北京100044

采用基于免疫磁珠净化的高效液相色谱技术测定植物油中黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))、黄曲霉毒素B_(2)(AFB_(2))、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G_(2)(AFG_(2))含量。样品以甲醇-水(70∶30,体积比)提取后,经黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂... 详细信息

采用基于免疫磁珠净化的高效液相色谱技术测定植物油中黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))、黄曲霉毒素B_(2)(AFB_(2))、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G_(2)(AFG_(2))含量。样品以甲醇-水(70∶30,体积比)提取后,经黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒净化,并结合免疫磁珠自动工作站,显著提升了净化效率。4种黄曲霉毒素在一定质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r^(2))均大于0.99,AFB_(1)与AFB_(2)、AFG1与AFG_(2)的定量下限分别为0.05μg/kg和0.10μg/kg。4种毒素在5种商品植物油基质中的平均回收率为74.0%~96.0%,日间和日内相对标准偏差(RSD)均小于7.0%。所建立的方法与国标GB 5009.22-2016的免疫亲和柱法无显著性差异,方法准确、灵敏,适用于植物油中4种黄曲霉毒素的同时定量分析。

关键词：植物油黄曲霉毒素免疫磁珠高效液相色谱

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玉米粉中戊唑醇基体标准物质的研制

中国粮油学报 2023年第10期38卷 204-210页

作者：李开瑞刘啸林李奉杰慕建州涂晓慧程婷贾明宏北京农学院生物与资源环境学院北京102206 江苏衡谱分析检测技术有限公司南京210046 北京诺码标准技术有限公司北京102206 天津检通生物技术有限公司天津300457

建立玉米粉中戊唑醇残留基体标准物质的研制方法。选用新鲜玉米籽粒,经过粉碎、初次冷冻干燥、复溶加标、一次混匀、二次冷冻干燥、粉碎、研磨、过筛、二次混匀、均匀性初检、分装,制得一批玉米粉中戊唑醇基体标准物质。采用液相色谱-... 详细信息

建立玉米粉中戊唑醇残留基体标准物质的研制方法。选用新鲜玉米籽粒,经过粉碎、初次冷冻干燥、复溶加标、一次混匀、二次冷冻干燥、粉碎、研磨、过筛、二次混匀、均匀性初检、分装,制得一批玉米粉中戊唑醇基体标准物质。采用液相色谱-串联质谱测定,外标法定量,经均匀性和稳定性检验后,8家应用型实验室对其联合定值,并对不确定度进行评估。通过定值和不确定度评估得到玉米粉中戊唑醇残留基体标准物质的特性量值为0.432 mg/kg。,扩展不确定度为0.0302 mg/kg,该基体标准物质均匀性良好,可稳定保存至少26周。通过该方法制备的基体标准物质具有良好的均匀性与稳定性,为玉米粉中戊唑醇检测的方法开发、质量控制和实验室能力验证提供参考。

关键词：基体标准物质玉米粉戊唑醇均匀性稳定性定值

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粮食及其制品中真菌毒素的检测方法

食品安全导刊 2015年第10期 34-35页

真菌毒素是真菌产生的有毒次级代谢物，它广泛存在于粮油食品和饲料中．对人类和动物有害。一种真菌可能产生多种毒素，多种真菌可能产生同一种毒素。

关键词：真菌毒素检测制品粮食次级代谢物粮油食品

生物荧光酶抑制法快速定性测定粮食中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留

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中国粮油学报 2022年第2期37卷 167-174页

作者：马宏吴宇陈晋莹古艳婷李丽胡莎张震昊叶金王松雪新疆维吾尔自治区粮油产品质量监督检验站乌鲁木齐830000 国家粮食和物资储备局科学研究院北京102629 中储粮成都储藏研究院有限公司成都610000 北京中检葆泰生物技术有限公司北京100176 青岛市粮油质量检测和军队粮油供应中心青岛266042

建立了生物荧光酶抑制法测定粮食及其制品中的有机磷类及氨基甲酸酯类的农药残留快速定性检测方法。样品通过乙酸乙酯∶丙酮(体积比为95∶5)提取离心净化,取50μL上清液45℃氮气吹干,1 mL蒸馏水或去离子水复溶进行检测。结果表明,本方... 详细信息

建立了生物荧光酶抑制法测定粮食及其制品中的有机磷类及氨基甲酸酯类的农药残留快速定性检测方法。样品通过乙酸乙酯∶丙酮(体积比为95∶5)提取离心净化,取50μL上清液45℃氮气吹干,1 mL蒸馏水或去离子水复溶进行检测。结果表明,本方法测定粮食及其制品中的有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留时,最低检测限为0.1μg/kg,提取液与酶溶液的最佳反应时间是10 min,提取液与酶溶液的最佳反应温度为35℃。通过确立不同农药的限量抑制率,可以提高判定的准确度。本方法同时处理7个样品需要20 min,检测时间为15 min,平均每个样品5 min即可出结果,可用于粮食及其制品中有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留的快速筛选。

关键词：生物荧光酶抑制法农药残留有机磷类氨基甲酸酯类限量抑制率

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日粮中添加肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响

饲料工业 2016年第13期37卷 28-30页

作者：孙何军张江刘成宏关静姝北京中农颍泰生物技术有限公司北京100193 中农颖泰林州生物科园有限公司北京456500

为了研究肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响,选取300日龄产蛋率相近、体重均匀、健康的海兰褐蛋鸡5 000只,随机分成2组,即对照组和试验组,每组5个重复,每个重复500只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮的基础上添加肠杆菌肽100 mg... 详细信息

为了研究肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响,选取300日龄产蛋率相近、体重均匀、健康的海兰褐蛋鸡5 000只,随机分成2组,即对照组和试验组,每组5个重复,每个重复500只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮的基础上添加肠杆菌肽100 mg/kg的日粮。结果表明:与对照组相比,试验组产蛋率提高3.88%(P0.05);死淘率降低40%,破蛋率降低14.63%,差异显著(P<0.05)。结果表明,添加肠杆菌肽具有提高蛋鸡生产性能的效果。

关键词：抗菌肽蛋鸡生产性能

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一种血液游离核酸稳定剂的保存效果验证

中国酿造 2022年第5期41卷 164-168页

作者：李晔章宇宁邢丽楠李栋赵小曼刘青山闫磊北京电子科技职业学院生物工程学院北京100176 无锡百泰克生物技术有限公司江苏无锡271000

该研究旨在研究一种新型稳定复合剂的配方,其目标是在全血样本的存储和运输过程中能防止来自细胞破裂释放的基因组脱氧核糖核酸(DNA)污染。使用抗凝剂、醛类、还原剂和猝灭剂为主要保护成分的稳定剂,分别用Qubit定量和Human β-actin实... 详细信息

该研究旨在研究一种新型稳定复合剂的配方,其目标是在全血样本的存储和运输过程中能防止来自细胞破裂释放的基因组脱氧核糖核酸(DNA)污染。使用抗凝剂、醛类、还原剂和猝灭剂为主要保护成分的稳定剂,分别用Qubit定量和Human β-actin实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-FQPCR)检测不同保存温度和模拟运输条件下血细胞基因组DNA释放情况。结果表明,新型的复合稳定剂配方在4~37℃保存温度条件下,至少可以稳定保存14 d,在25℃、220 r/min模拟运输条件下,可以稳定保存14 d。新型的复合保护剂能够维持血液成分的稳定,抑制细胞破裂释放基因组DNA,在偏远地区游离核酸样本采样和运输方面有潜在的应用价值。

关键词：游离核酸血液保存基因组样本采集