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基于肠道菌群探讨补肾益精法治疗少弱精子症的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 170-175页

作者：黄念文李海松毕焕洲王彬冯隽龙孙龙吉王继升王成李北京中医药大学东直门医院北京100700 北京中医药大学深圳医院广州深圳518172 北京中医药大学东方医院北京100078

少弱精子症是引起男性不育的主要原因,其病因复杂多样,目前临床上仍有部分少弱精子症的病因未明,称为特发性少弱精子症。随着高通量测序技术的发展,发现肠道菌群紊乱可能是少弱精子症发病的一个重要促进因素。中医学认为“肾精亏虚”为... 详细信息

少弱精子症是引起男性不育的主要原因,其病因复杂多样,目前临床上仍有部分少弱精子症的病因未明,称为特发性少弱精子症。随着高通量测序技术的发展,发现肠道菌群紊乱可能是少弱精子症发病的一个重要促进因素。中医学认为“肾精亏虚”为少弱精子症的核心病机,临床上采用补肾益精法治疗少弱精子症疗效显著,但其作用机制尚未完全阐明。结合中医基础理论及分子生物学研究发现,“肾精”与肠道菌群具有相似性,在少弱精子症发病过程中,肠道菌群紊乱与中医“肾精亏虚”病机有共通之处,且补肾益精类中药可调节肠道菌群紊乱,这或许是补肾益精法有效治疗少弱精子症的机制之一。基于此,该文从肠道菌群角度探讨中医补肾益精法治疗少弱精子症的作用机制,以期为中医药治疗少弱精子症提供新的思路。

关键词：少弱精子症肠道菌群肾精亏虚补肾益精中医中药

海藻甘草反药组合在海藻玉壶汤中加减应用对甲状腺肿大模型大鼠肝脏氧化应激的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 37-45页

作者：董肖田颐刘晓庆曹灿廖文勇徐向楠吴美晶柳海艳陈绍红于雪范盎然修琳琳钟赣生北京中医药大学北京100029

目的:观察海藻和甘草反药组合在2020年版《中华人民共和国药典》高限2倍剂量条件下于海藻玉壶汤中加减配伍应用对甲状腺肿大模型大鼠肝脏氧化应激的影响。方法:将128只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、优甲乐组(20μg·kg^(-1))... 详细信息

目的:观察海藻和甘草反药组合在2020年版《中华人民共和国药典》高限2倍剂量条件下于海藻玉壶汤中加减配伍应用对甲状腺肿大模型大鼠肝脏氧化应激的影响。方法:将128只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、优甲乐组(20μg·kg^(-1))、海藻玉壶汤(HYT)组(12.06 g·kg^(-1))、HYT去海藻(HYT-H)组(9.90 g·kg^(-1))、HYT去甘草(HYT-G)组(10.26 g·kg^(-1))、HYT去海藻甘草(HYT-HG)组(8.10 g·kg^(-1))、海藻甘草(HG)组(3.96 g·kg^(-1)),空白组给予去离子水灌胃,其余各组灌胃丙硫氧嘧啶(PTU)复制甲状腺肿大病理模型,以优甲乐作为阳性药,其余各中药组给予相应药液灌胃,在末次给药后12 h进行取材。检测各组大鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)水平;肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、p53、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织氧化应激相关信号通路Nrf2、HO-1蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT水平、肝脏组织中MDA和ROS含量明显升高(P<0.05,P<0.01),SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.01),Keap1 mRNA表达显著升高(P<0.01),Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,HYT组大鼠血清AST、ALT、ALP水平明显降低(P<0.05,P<0.01),肝脏组织中MDA和ROS含量显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px活性显著升高(P<0.01),Keap1、p53、Caspase-3 mRNA表达显著降低(P<0.01),Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:在2020年版《中华人民共和国药典》高限2倍剂量条件下,海藻甘草反药组合于HYT中加减配伍应用对甲状腺肿大模型大鼠肝脏氧化应激产生了不同的影响,含有海藻和甘草的HYT对甲状腺肿大模型大鼠肝脏起到了一定的保护作用,效果优于HG组、优甲乐组及各拆方组,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路以减轻肝脏氧化应激,抑制p53/Caspase-3信号通路以减少肝细胞凋亡有关。

关键词：海藻玉壶汤甲状腺肿大肝脏氧化应激核因子E2相关因子2(Nrf2) p53

海藻-甘草含药血清对M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用研究

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中草药 2024年第2期55卷 527-533页

作者：任彧娜刘晓庆曹灿李慕云廖文勇张淑静于雪范盎然修琳琳钟赣生北京中医药大学北京100029

目的探讨海藻-甘草含药血清对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1增殖的作用,为进一步研究海藻与甘草配伍抗甲状腺肿大的作用机制奠定基础。方法体外培养Nthy-ori-3-1细胞,使用不同浓度的促甲状腺激素受体人单克隆抗体M22作用于Nthy-ori-3-... 详细信息

目的探讨海藻-甘草含药血清对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1增殖的作用,为进一步研究海藻与甘草配伍抗甲状腺肿大的作用机制奠定基础。方法体外培养Nthy-ori-3-1细胞,使用不同浓度的促甲状腺激素受体人单克隆抗体M22作用于Nthy-ori-3-1细胞不同时间,观察M22作用的最佳浓度及时间。制备海藻-甘草含药血清,M22刺激细胞24 h后,分别给予5%、10%、15%、20%海藻-甘草含药血清干预24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡情况;透射电镜观察细胞形态;免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain3,LC3)表达情况;Western blotting检测Beclin1蛋白表达。结果 M22明显刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖,0.125μg/mL的M22作用24 h时促增殖作用最佳(P学变化,G0/G1期细胞比例明显升高(P<0.01),G2/M期细胞比例无显著性差异,细胞凋亡率明显上升(P<0.01),LC3平均荧光强度增加,Beclin1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论 M22可刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖,海藻-甘草含药血清抑制M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖,促进其凋亡,可能通过调节自噬来发挥抑制Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用,以达到抗甲状腺肿大的疗效。

关键词：海藻-甘草含药血清甲状腺肿大 Nthy-ori-3-1细胞细胞自噬细胞凋亡

基于转录组和同位素标记相对与绝对定量技术的宽体金线蛭生品和烫制品差异蛋白研究

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中国新药杂志 2024年第3期33卷 292-300页

作者：华羽彤李尹郭秀欢雷艳辛泉诚袁瑞娟北京中医药大学北京102488

目的:通过转录组和蛋白质组技术研究宽体金线蛭生品和炮制品的差异蛋白。方法:以活体宽体金线蛭(Whitmania pigra Whitman)为原料,基于无参转录组进行基因分析,利用转录组信息匹配到Helobdella robusta蛋白质库,然后利用同位素标记相对... 详细信息

目的:通过转录组和蛋白质组技术研究宽体金线蛭生品和炮制品的差异蛋白。方法:以活体宽体金线蛭(Whitmania pigra Whitman)为原料,基于无参转录组进行基因分析,利用转录组信息匹配到Helobdella robusta蛋白质库,然后利用同位素标记相对与绝对定量技术(iTRAQ)蛋白组学技术进行宽体金线蛭的蛋白成分分析,筛选出存在于宽体金线蛭生品及炮制品中的差异蛋白质,并对其进行基因本体(GO)功能聚类分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析以及蛋白质相互作用网络分析(PPI),并结合BIOPEP数据库筛选可能具有抗凝活性的蛋白。结果:本研究筛选到差异表达蛋白共112种,其中78种上调蛋白、34种下调蛋白,并推定出6条可能具有抗凝作用的差异蛋白。GO功能聚类分析结果表明,在细胞过程(cellular process)、代谢过程(metabolic process)条目富集的差异蛋白数量最多。在差异性方面,大分子复合物(macromolecular complex)、结构分子活性(structural molecule activity)条目差异最显著。KEGG富集分析结果表明,差异蛋白在代谢途径(metabolic pathways)富集到的蛋白最多,ECM-受体相互作用(ECM-receptor interaction)、核糖体(ribosome)、氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)差异最显著。结论:本研究结合转录组、蛋白组数据,补充了宽体金线蛭的蛋白质库,筛选出了生品及烫制品的差异蛋白并推定了可能具有抗凝作用的差异蛋白,为宽体金线蛭基因组成、物质基础研究及炮制机制提供参考依据。

关键词：宽体金线蛭炮制转录组同位素标记相对与绝对定量技术蛋白组差异蛋白

UPLC-QE-Orbitrap-MS结合网络药理学探索大黄炒炭前后治疗溃疡性结肠炎的差异成分及其作用机制

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1834-1847页

作者：孙晶徐文娟钟琳瑛陈建波董玲北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488

基于生大黄与大黄炭治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效差异,结合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UPLC-QE-Orbitrap-MS)技术及网络药理学探索生大黄与大黄炭的差异成分及其作用机制。使用葡聚糖硫酸钠(d... 详细信息

基于生大黄与大黄炭治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的药效差异,结合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UPLC-QE-Orbitrap-MS)技术及网络药理学探索生大黄与大黄炭的差异成分及其作用机制。使用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的小鼠模型评价生大黄与大黄炭分别组方的芍药汤(Shaoyao Decoction,SYD)治疗UC的药效,结果表明生大黄与大黄炭分别组方的芍药汤均能在不同程度上改善小鼠UC疾病症状,大黄炭组方在减轻血性腹泻、降低炎症水平方面更具优势。采用UPLC-QE-Orbitrap-MS共鉴定出生大黄与大黄炭水煎液中78种小分子化合物,通过多元统计方法筛选得到炒炭后含量明显升高的7种成分包括5种游离蒽醌、没食子酸、5-羟甲基糠醛,炒炭后含量明显降低的9种成分为结合蒽醌、儿茶素类化合物等。网络药理学与分子对接结果表明游离蒽醌、没食子酸及5-羟甲基糠醛可能作用于B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL2)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、胱天蛋白酶3(caspase-3,CASP3)等核心靶点,干预磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、TNF、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)等信号通路,调控机体炎症、氧化应激及细胞凋亡过程,发挥UC治疗作用。该研究对大黄炒炭后药效及物质基础变化进行了分析,为临床治疗UC的大黄用药选择提供了参考。

关键词：大黄炒炭芍药汤溃疡性结肠炎 UPLC-QE-Orbitrap-MS 网络药理学

气管镜介入治疗肺部手术后发生的支气管胸膜瘘的回顾性分析

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中国肺癌杂志 2024年第3期27卷 187-192页

作者：霍小森李媛董延妍边灵杰安鹏邹珩李磊王洪武北京中医药大学东直门医院呼吸病中心北京101121

背景与目的气管镜介入技术作为近年来发展的新技术,具有创伤小、安全性高及可重复性的优点。本研究旨在探讨肺部恶性肿瘤和良性疾病手术后发生的支气管胸膜瘘(bronchopleural fistula,BPF)的临床特征和气管镜下介入治疗的临床疗效,为BP... 详细信息

背景与目的气管镜介入技术作为近年来发展的新技术,具有创伤小、安全性高及可重复性的优点。本研究旨在探讨肺部恶性肿瘤和良性疾病手术后发生的支气管胸膜瘘(bronchopleural fistula,BPF)的临床特征和气管镜下介入治疗的临床疗效,为BPF的防治提供参考方法。方法收集2020年6月至2023年9月北京中医药大学东直门医院呼吸病中心诊治的BPF患者64例,总结BPF发生部位及瘘口特点,并采用气管镜介入治疗。对瘘口较小者(≤5mm)进行黏膜下注射聚桂醇及氰基丙烯酸异丁酯、医用生物蛋白胶或硅胶假体封堵相结合治疗;对瘘口较大者(>5 mm)分别置入不同类型的气道金属覆膜支架和心脏封堵器;观察术前、术后的卡氏体能状态(Karnofsky performance status,KPS)评分、气促评分(shortbreath scale,SS)、体温、胸腔引流液量和白细胞计数。结果64例患者实施全肺、肺叶或肺段切除96个,发生瘘的部位65处,瘘口74个;右肺瘘口数量(63.5%)明显多于左侧(36.5%),且右下叶支气管瘘最为常见(40.5%)。术后患者的KPS评分明显升高,而SS评分、体温、胸腔引流液量和白细胞计数明显降低,与术前比较均有统计学差异(P<0.05)。电话或住院随访1-38个月,中位生存时间为21个月。完全缓解33例(51.6%),临床完全缓解7例(10.9%),部分缓解18例(28.1%),无效6例(9.4%),总有效率为90.6%。结论肺部手术后发生的BPF临床症状较严重,常危及生命,气管镜下介入治疗BPF是一种快速有效的治疗方法。

关键词：肺部手术支气管胸膜瘘气管镜介入治疗

补肾壮筋汤调控OPG/RANKL/RANK信号通路抗骨质疏松的作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期 44-51页

作者：周世博俞兴仲文庆李文浩赵赫熊洋北京中医药大学北京中医药大学东直门医院

目的：观察补肾壮筋汤（BSZJ）对去卵巢大鼠骨代谢、骨密度（BMD）、骨小梁微结构及对骨保护素/核转录因子-κB受体活化因子配体/核转录因子-κB受体活化因子（OPG/RANKL/RANK）信号通路的影响。探索补肾壮筋汤抗骨质疏松作用机制。方法... 详细信息

目的：观察补肾壮筋汤（BSZJ）对去卵巢大鼠骨代谢、骨密度（BMD）、骨小梁微结构及对骨保护素/核转录因子-κB受体活化因子配体/核转录因子-κB受体活化因子（OPG/RANKL/RANK）信号通路的影响。探索补肾壮筋汤抗骨质疏松作用机制。方法：32只雌性SD大鼠随机分为假手术组（SHAM）、卵巢去势模型组（OVX）、阿仑膦酸钠组(ALN,7.35 g·kg-1)和补肾壮筋汤组(BSZJ,3.2 g·kg-1)。卵巢切除12周后给予对应药物灌胃，共12周。12周后采集血清和骨标本。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清Ⅰ型前胶原氨基端原肽（PINP）和Ⅰ型胶原交联C-末端肽（CTX-Ⅰ），三点弯曲实验测试大鼠胫骨生物力学，微型计算机断层扫描（Micro-CT）分析腰椎BMD及骨小梁微结构。包括骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）及结构模型指数（SMI）。苏木素-伊红（HE）及马松（Masson）染色分析腰椎骨小梁及骨胶原变化。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定腰椎OPG、RANKL、RANK m RNA表达。蛋白免疫印迹法（Western blot）测定腰椎OPG、RANKL、RANK蛋白的表达。结果：与SHAM组比较，OVX组血清PINP及CTX-Ⅰ明显增加（P学载荷（Fracture Load）明显降低（P学载荷增加。与SHAM组比较，OVX组腰椎BMD、BV/TV、Tb.Th及Tb.N明显降低，Tb.Sp及SMI明显增加（P<0.05）；与OVX组比较，BSZJ组腰椎BMD、BV/TV及Tb.N明显增加，Tb.Sp及SMI明显降低（P<0.05）。与SHAM组比较，OVX组骨小梁结构紊乱，骨小梁之间的距离增加；胶原纤维变细，连续性欠佳；与OVX组比较，BSZJ组腰椎骨小梁结构相对完整，骨小梁之间的距离变小，胶原纤维增粗。与SHAM组比较，OVX组腰椎OPG m RNA及蛋白表达明显降低，RANKL、RANK m RNA及蛋白表达明显增加（P<0.05）；与OVX组比较，BSZJ组OPG m RNA及蛋白表达明显增加，RANKL、RANK m RNA及蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论：补肾壮筋汤能够调节去卵巢大鼠骨代谢并发挥抗骨质疏松作用，潜在的作用机制是通过调控OPG/RANKL/RANK信号通路实现的。

关键词：骨质疏松补肾壮筋汤卵巢去势大鼠骨保护素/核转录因子-κB受体活化因子配体/核转录因子-κB受体活化因子(OPG/RANKL/RANK)信号通路

基于CiteSpace的近十年国内外注意缺陷多动障碍认知功能的可视化分析

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中国儿童保健杂志 2024年第6期32卷 661-667+677页

作者：吴泳华于敬龙周康宁王俊宏北京中医药大学东直门医院北京中医药大学东直门医院

目的通过CiteSpace分析近十年国内外对注意缺陷多动障碍(ADHD)认知功能的研究现状、热点及发展趋势，为开展ADHD的后续研究提供借鉴和参考。方法运用CiteSpace软件检索Web Of Science(WOS)和CNKI、万方及维普数据库对近十年ADHD的认... 详细信息

目的通过CiteSpace分析近十年国内外对注意缺陷多动障碍(ADHD)认知功能的研究现状、热点及发展趋势，为开展ADHD的后续研究提供借鉴和参考。方法运用CiteSpace软件检索Web Of Science(WOS)和CNKI、万方及维普数据库对近十年ADHD的认知功能的相关文献，并进行文献计量学分析，对国家、机构和关键词等内容进行可视化展示。结果经筛选，共纳入2013—2022年文献4 673篇，其中WOS文献4 274篇，中文文献去重后共399篇，国际上发文量处于上升趋势，国内处于平稳发展状态；共纳入78个国家/地区、国外391所研究机构，以美国为代表的欧美国家的高等院校和医学中心发挥重要作用；纳入国内182所研究机构，主要以地区专科医院为主。国外关键词形成25个聚类标签；国内关键词形成8个聚类标签；国内分析共出现20个突现词；国外分析共出现25个突现词；关键词和聚类显示国内外该领域均以儿童或青少年为群体，关注ADHD共患病认知功能情况。国际上主要关注执行功能及其检测手段和基础研究方面；国内主要在干预疗效观察方面。研究重点和热点主要以生物学机制和临床研究为主。结论近十年对ADHD认知功能的研究，国际上研究更为全面和深入，国内目前处在平稳发展阶段，研究热点偏向不同，国内可借鉴国外发展经验，加大对神经生理学等基础研究的投入，并结果我国国情推进该领域的发展。

关键词：注意缺陷多动障碍认知功能 CiteSpace 研究热点

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用于评估随机对照试验结果稳健性的脆弱指数

中国循证医学杂志 2024年第2期24卷 243-248页

作者：罗慜婧刘芷含黄菁涵王映乔李一琳刘美君陶耘慈曹蕊王雅琪刘建平张颖费宇彤北京中医药大学循证医学中心北京100029 北京中医药大学国际循证中医药研究院北京100029 北京GRADE中心北京100029 北京中医药大学北京100029

临床试验完成后,其结论一般取决于主要结局的统计分析结果,即假设检验中P值是否小于假设检验的水准α,通常α=0.05。P值的大小说明作出假设判断的理由的充分程度,可解释为某一结论是否具有统计学意义。但不涉及药物效应或其他效应的差... 详细信息

临床试验完成后,其结论一般取决于主要结局的统计分析结果,即假设检验中P值是否小于假设检验的水准α,通常α=0.05。P值的大小说明作出假设判断的理由的充分程度,可解释为某一结论是否具有统计学意义。但不涉及药物效应或其他效应的差异程度。脆弱指数,即将统计上显著的结果变为不显著的结果所需的、由发生目标结局事件变为发生非目标结局事件的最小患者人数,脆弱指数的数值反映的是具有统计学意义的研究结果的稳健性,可用于辅助临床试验统计推断结果的理解,辅助临床决策。本文将对脆弱指数的概念、计算方法和临床应用等方面进行论述,并建议在未来随机对照试验的结果中,考虑将脆弱指数作为敏感性分析的内容之一,以帮助患者、临床医生、政策制定者做出适当和最佳的决策。

关键词：随机对照试验脆弱指数统计学意义临床意义临床决策