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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫大鼠Cajal间质细胞的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张惠贞张红李伟赵凯邱雨迪北京中医药大学第三临床医学院北京中医药大学房山医院

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·... 详细信息

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·mL-1的枸橼酸莫沙必利混悬液)以及晚蚕沙提取物高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g·kg-1)，灌胃4周。检测大鼠胃排空率、随机血糖，HE染色观察胃窦部形态变化，免疫组化分析c-Kit基因表达，TUNEL染色观察Cajal间质细胞凋亡，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR的蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组胃排空率大幅降低(P<0.01)，胃窦部腺体结构破坏，c-Kit表达减少(P<0.01)，ICC凋亡增加；与模型组比较，晚蚕沙提取物高、中、低剂量组及莫沙必利组胃排空率均显著升高(P<0.01)，胃窦腺体结构逐渐紧密，ICC凋亡减少，其中晚蚕沙提取物高剂量组c-Kit表达明显升高(P<0.05)。经Western blot检测，与空白组比较，模型组p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K及p-mTOR/mTOR蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比，晚蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.01)；晚蚕沙提取物中剂量组、低剂量组及莫沙必利组p-PI3K/PI3K蛋白表达降低(P<0.01，P<0.05)；晚蚕沙提取物低剂量组p-mTOR/mTOR蛋白表达降低(P<0.05)。在随机血糖方面，与空白组相比，模型组随机血糖明显升高(P<0.01)；与模型组比，晚蚕沙提取物高、中剂量组随机血糖明显降低(P<0.05)。与莫沙必利组比较，晚蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.05)，晚蚕沙提取物高、中、低剂量组p-PI3K/PI3K蛋白表达升高(P<0.05，P<0.01)。结论：晚蚕沙提取物可提高DGP大鼠胃排空率、减轻ICC的凋亡，同时降低随机血糖，其中晚蚕沙提取物高剂量组抑制ICC凋亡疗效显著，其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

关键词：糖尿病胃轻瘫晚蚕沙提取物 Cajal间质细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路

乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞P38MAPK信号转导途径的影响

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山西中医学院学报 2013年第6期14卷 18-20页

作者：李玲李云波李柳叶朱秀娟北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京中医药大学临床学院北京100029

目的:运用血清药理学方法观察乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞P38丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导途径的影响。方法:25只SD大鼠随机分为正常对照组、西药对照组、乌萸汤低、中、高剂量组,给药4 d后采血并分离血清。然后在大鼠卵... 详细信息

目的:运用血清药理学方法观察乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞P38丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导途径的影响。方法:25只SD大鼠随机分为正常对照组、西药对照组、乌萸汤低、中、高剂量组,给药4 d后采血并分离血清。然后在大鼠卵巢颗粒细胞培养体系中加入各组血清,培养48 h后,用Western blot测定颗粒细胞P38 MAPK磷酸化蛋白的相对表达。结果:与空白对照组比较,各给药组颗粒细胞P38 MAPK磷酸化蛋白相对表达量明显增多(P<0.01),乌萸汤中剂量组效果优于西药组(P<0.01)。结论:乌萸汤含药血清通过提高P38 MAPK蛋白磷酸化水平从而促进卵巢颗粒细胞增殖,表明乌萸汤是通过调控P38 MAPK信号转导途径以促进卵泡发育成熟及排出。

关键词：乌萸汤卵巢颗粒细胞

琥珀散通过LncRNA MALAT1/miR-142-3p促进自噬缩小子宫内膜异位症裸鼠异位病灶的机制

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中华中医药杂志 2023年第9期38卷 4142-4147页

作者：张悦健林陶秀何甜甜霍超越高路益杨思晨杨梦萍罗伯茨宋泽马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例... 详细信息

目的:观察琥珀散对子宫内膜异位症(EMT)裸鼠异位病灶的干预作用,并从LncRNA MALAT1/miR-142-3p介导自噬研究其作用机制。方法:将30只7周龄雌性免疫缺陷小鼠随机分为模型组、琥珀散组(29 g/kg)与地诺孕素组(0.001 g/kg),每组10只。从5例寒凝血瘀型EMT患者月经血中提取经血源间充质干细胞(MenSCs)以制备人MenSCs植入式EMT裸鼠模型。采用HE染色法及人类白细胞抗原α(HLAA)免疫荧光法评价模型。造模成功后连续给药21 d。实时荧光定量PCR和免疫印迹法测定各组异位病灶组织中LncRNA MALAT1、miR-142-3p及自噬标志分子(Beclin1和LC3Ⅱ)的表达情况。结果:造模后,3组注射区均有囊泡样组织形成,病理切片见子宫内膜腺体和间质,免疫荧光示HLAA阳性,系造模成功。与模型组比较,琥珀散组异位病灶体积显著缩小(P<0.01),LncRNA MALAT1和Beclin1的RNA水平、Beclin1和LC3Ⅱ蛋白水平均显著升高(P<0.01,P<0.05),miR-142-3p被显著抑制(P<0.01)。结论:琥珀散能明显缩小EMT裸鼠异位病灶体积,其作用机制可能是其促进LncRNA MALAT1诱骗miR-142-3p以上调Beclin1进而增强异位内膜自噬。

关键词：子宫内膜异位症琥珀散竞争性内源RNA LncRNA MALAT1 miR-142-3p 自噬经血源间充质干细胞异位病灶机制

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针灸治疗腰椎间盘突出症作用机制研究进展

针刺研究 2024年第5期49卷 526-533页

作者：邸学士陈江王新茹梁俊杰张重阳潘婷孟言张佳佳冯智伟孙文婷白鹏北京中医药大学第三附属医院北京100029 北京中医药大学东直门医院北京100700

腰椎间盘突出症(LDH)是临床常见病和多发病,是引起腰腿痛的常见原因,研究表明针灸能够改善LDH患者症状,临床疗效确切。本文通过检索近10年来针灸治疗LDH作用机制研究的相关文献,结果显示针刺治疗LDH与延缓椎间盘退变、维持脊柱稳定、调... 详细信息

腰椎间盘突出症(LDH)是临床常见病和多发病,是引起腰腿痛的常见原因,研究表明针灸能够改善LDH患者症状,临床疗效确切。本文通过检索近10年来针灸治疗LDH作用机制研究的相关文献,结果显示针刺治疗LDH与延缓椎间盘退变、维持脊柱稳定、调节炎性反应、调节免疫反应、调节神经结构和功能、镇痛及改善局部微循环等多种作用机制密切相关。本文对以上机制归纳总结,以期为临床应用针灸治疗LDH提供科学依据。

关键词：针灸腰椎间盘突出症椎间盘退变作用机制综述

Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变的因果关系

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中国组织工程研究 2024年

作者：黄仁俊杨敬言马涉王超逸赵余炀于栋北京中医药大学第三附属医院脊柱科北京中医药大学第三临床医学院

背景：观察性研究表明，椎间盘退变会影响久坐和体力活动水平，然而Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变之间的因果关系尚不明确。目的：通过孟德尔随机化方法探讨Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平... 详细信息

背景：观察性研究表明，椎间盘退变会影响久坐和体力活动水平，然而Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变之间的因果关系尚不明确。目的：通过孟德尔随机化方法探讨Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变的因果关系。方法：从大规模人群全基因组关联分析中选择5个与Oswestry功能障碍指数评分中行为学相关的特征：看电视的时间、用电脑的时间、轻度/中度/剧烈体力活动，分别提取这些行为学相关特征的工具变量。结合Finn Gen最新第9版数据库中提取椎间盘退变作为结局，进行孟德尔随机化分析。使用逆方差加权法、MR-Egger回归、简单中位数法、加权中位数法、加权中值法等回归模型OR值和95%CI评估Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变的因果关系。使用Cochran’s Q检验异质性、MR-Egger截距检验多效性、“留一法”检验单核苷酸多态性观察暴露因素和椎间盘退变因果关系的敏感性。结果与结论：孟德尔随机化逆方差加权法结果显示，看电视/用电脑的时间与椎间盘退变发病风险呈正向因果关联(OR=1.775,95%CI:1.418-2.221,P <0.001)/(OR=1.384,95%CI:1.041-1.839,P <0.001)，轻度体力活动与椎间盘退变发病风险呈反向因果关联(OR=1.000,95%CI:0.999-1.000,P=0.020);MR-Egger截距分析轻度体力活动与椎间盘退变存在潜在的水平多效性(P=0.005)，看电视的时间、用电脑的时间与椎间盘退变不存在水平多效性(P=0.521,P=0.851)。Cochran’s Q异质性分析看电视的时间、用电脑的时间与椎间盘退变存在异质性(P=3.33×10-11,P=0.001)，轻度体力活动与椎间盘退变没有观察到显著的异质性(P=0.186)。以上结果表明：Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平与椎间盘退变存在双向因果关系，即不仅椎间盘退变会影响Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平，Oswestry功能障碍指数评分中久坐和体力活动水平也会影响椎间盘退变。补充了轻度体力活动对椎间盘退变积极影响的遗传证据，表明中度/剧烈体力活动与椎间盘退变没有显著的因果关系，并扩大了长时间看电视/用电脑的久坐行为是椎间盘退变危险因素的证据基础。

关键词：椎间盘退变 Oswestry功能障碍指数评分孟德尔随机化因果关系单核苷酸多态性久坐行为体力活动水平

掌跖脓疱病患者80例临床特征及生活质量回顾性分析

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中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：王悦尹丹李卫忠张卓张媛李忱魏淑凤北京中医药大学房山医院风湿科北京中医药大学第三临床医学院北京中医药大学第一临床医学院

目的分析掌跖脓疱病（palmoplantarpustulosis，PPP）临床特征，评估患者生活质量并分析影响因素。方法对80例就诊于北京中医药大学房山医院的PPP患者进行问卷调查，统计其基本信息和临床特征，评估生活质量并分析影响因素。结果 80例... 详细信息

目的分析掌跖脓疱病（palmoplantarpustulosis，PPP）临床特征，评估患者生活质量并分析影响因素。方法对80例就诊于北京中医药大学房山医院的PPP患者进行问卷调查，统计其基本信息和临床特征，评估生活质量并分析影响因素。结果 80例PPP患者男女比为13/67，平均发病年龄为（37±10）岁，75%的患者皮疹同时累及手掌脚掌，81.3%的患者出现甲损害，皮疹和甲损害累及范围与发病年龄显著相关（P临床应注意新发病者和低文化程度人群的生活质量。

关键词：掌跖脓疱病临床特征生活质量

加减通窍活血汤对血管性痴呆大鼠认知功能及ET-1、VEGF血管新生因子的影响

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时珍国医国药 2022年第4期33卷 857-860页

作者：刘江华李胤姜磊杨晶倪涛吴永贵湖北中医药大学附属国医医院和第三临床学院武汉市中医医院湖北武汉430014 沈阳市精神卫生中心辽宁沈阳110000 湖北中医药大学基础医学院湖北武汉430065 北京中医药大学东直门医院北京市重点实验室北京100700

目的探讨加减通窍活血汤对血管性痴呆大鼠认知功能及ET-1、VEGF血管新生因子的影响。方法Morris水迷宫检测大鼠造模前后的认知功能(逃避潜伏期和跨越平台次数)和观察海马病理学结构以评价VD模型,并观察药物干预前后的效应。Elisa法检测... 详细信息

目的探讨加减通窍活血汤对血管性痴呆大鼠认知功能及ET-1、VEGF血管新生因子的影响。方法Morris水迷宫检测大鼠造模前后的认知功能(逃避潜伏期和跨越平台次数)和观察海马病理学结构以评价VD模型,并观察药物干预前后的效应。Elisa法检测血清ET-1、VEGF浓度以观察加减通窍活血汤对VD大鼠的影响。结果造模后7天(灌胃前),较SOG组,MCG组及各药物剂量组的平均逃避潜伏期明显升高(P<0.01)、平均跨越平台次数明显降低(P<0.05);MCG组及各药物剂量组大鼠血清ET-1浓度明显升高(P<0.01)、VEGF浓度明显下降(P<0.01)。灌胃8周,较MCG组,各药物剂量组海马神经细胞一定程度上被修复,平均逃避潜伏期均明显降低(P<0.05)、平均跨越平台次数明显升高(P<0.05);MDG和HDG组ET-1浓度下降(P<0.05)、VEGF浓度升高(P<0.05)。结论加减通窍活血汤改善VD认知功能障碍的作用机制可能与通过下调ET-1、上调VEGF浓度,从而促进治疗性血管新生有关。

关键词：通窍活血汤血管性痴呆治疗性血管新生从瘀论治

经典名方与中成药治疗子宫内膜异位症的临床应用研究进展

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药物评价研究 2023年第7期46卷 1389-1395页

作者：程曦陈晓瑶张悦健马小娜北京中医药大学第三临床医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

子宫内膜异位症的临床表现在中医理论中属于“痛经”“不孕症”“癥瘕”和“月经不调”等病证范畴。经典名方与中成药具有疗效确切、不良反应少等优点,已经被应用于该病的临床治疗中。通过梳理近10年来发表的文献,总结了常用的经典名方... 详细信息

子宫内膜异位症的临床表现在中医理论中属于“痛经”“不孕症”“癥瘕”和“月经不调”等病证范畴。经典名方与中成药具有疗效确切、不良反应少等优点,已经被应用于该病的临床治疗中。通过梳理近10年来发表的文献,总结了常用的经典名方(温经止痛方、少腹逐瘀汤、温经汤、琥珀散)和临床使用频次较高的中成药(散结镇痛胶囊、丹莪妇康煎膏、宫瘤消胶囊、桂枝茯苓丸、小金胶囊)在治疗子宫内膜异位症方面的特点与疗效,为进一步探索中医药治疗子宫内膜异位症的作用机制提供参考。

关键词：子宫内膜异位症中医药经典名方中成药临床应用温经汤桂枝茯苓丸琥珀散

右归丸治疗腰椎间盘突出症:网络药理学分析活性成分及潜在治疗靶点

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中国组织工程研究 2024年第27期28卷 4346-4352页

作者：杨敬言马涉黄仁俊杨骁侠汤笑尘于栋北京中医药大学第三临床医学院北京市100029 北京中医药大学第三附属医院北京市100029

背景:右归丸具有温肾助阳、益精填髓的作用,临床多用于治疗肾阳虚证的腰椎间盘突出症且具有较好的疗效。目的:采用网络药理学、分子对接技术并结合动物实验探讨右归丸治疗腰椎间盘突出症的潜在靶点及作用机制。方法:①网络药理学分析:通... 详细信息

背景:右归丸具有温肾助阳、益精填髓的作用,临床多用于治疗肾阳虚证的腰椎间盘突出症且具有较好的疗效。目的:采用网络药理学、分子对接技术并结合动物实验探讨右归丸治疗腰椎间盘突出症的潜在靶点及作用机制。方法:①网络药理学分析:通过TCMSP等数据库获取经过筛选后的右归丸有效成分与作用基因靶点,在GeneCards等数据库中收集与腰椎间盘突出症相关的基因,取二者交集进行拓扑结构分析,得到主要活性成分及核心治疗靶点。使用R软件对核心治疗靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。②分子对接:运用Autodock和Pymol软件进行中药活性成分与核心治疗靶点分子结合能预测。③动物实验:将18只SD大鼠随机分为对照组、退变组与退变+右归丸组,每组6只。取退变组与退变+右归丸组大鼠,采用纤维穿刺法制备椎间盘退行性变模型,造模后2周,退变+右归丸组大鼠给予右归丸汤剂(1次/d)灌胃,连续给药2周。给药结束后,采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α质量浓度,苏木精-伊红染色后观察椎间盘纤维环及髓核细胞的形态学改变。结果与结论:①筛选出右归丸有90种活性成分和64种靶点,且主要活性成分为槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素、大豆黄素,4′-O-甲基尼亚萨酚。右归丸治疗腰椎间盘突出症的核心靶点为白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、AKT1、白细胞介素1B、血管内皮生长因子A。富集分析发现,交集基因可能通过白细胞介素17、肿瘤坏死因子、MAPK、PI3K-AKT等信号通路改善椎间盘退变。②分子对接实验验证了右归丸中的槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素等与核心靶点有较强的结合能力。③动物实验结果显示,退变组大鼠血清肿瘤坏死因子α质量浓度高于对照组(P<0.05),退变+右归丸组大鼠血清肿瘤坏死因子α质量浓度低于退变组(P<0.05);苏木精-伊红染色显示,退变组大鼠椎间盘纤维环、髓核结构遭到破坏,髓核细胞数量减少;退变+右归丸组大鼠椎间盘纤维环可见重建趋势,髓核细胞数量较退变组增加。④结果表明,右归丸可能通过槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素等主要活性成分作用于肿瘤坏死因子α等核心靶点改善椎间盘退变,进而治疗腰椎间盘突出症。

关键词：右归丸腰椎间盘突出症网络药理学分子对接信号通路炎症因子潜在靶点纤维环穿刺