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《金匮要略》麦门冬汤之“麦门冬七升”辨正

中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2393-2396页

作者：赵京博邱旭东周珍徐爽钟相根北京中医药大学中医学院北京100029 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

麦门冬汤是国家公布的首批“古代经典名方”,考证其剂量、组成等关键信息具有重要意义。综观仲景诸方,麦门冬汤“麦门冬七升”的用量与惯例有所不协,故不得不质疑:“麦门冬七升”是否为仲景原量?文章运用校勘学等方法,结合汉至唐期间诸... 详细信息

麦门冬汤是国家公布的首批“古代经典名方”,考证其剂量、组成等关键信息具有重要意义。综观仲景诸方,麦门冬汤“麦门冬七升”的用量与惯例有所不协,故不得不质疑:“麦门冬七升”是否为仲景原量?文章运用校勘学等方法,结合汉至唐期间诸方的麦冬用量惯例、经方汤剂药水比以及相关古籍记载等依据,得出《金匮要略》麦门冬汤之“麦门冬七升”并非仲景原量,而《外台秘要》所记载的“麦门冬二升”当为仲景原量。本研究有助于正确认识麦冬用量及麦门冬汤;有助于降低医疗风险,提升临床疗效;有助于减少商业开发耗材,食用更加安全。

关键词：麦门冬汤经典名方麦门冬剂量《金匮要略》

汉代经典名方复方制剂开发的用法用量分析与对策

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 1-10页

作者：金艳李兵张卫彭华胜张华敏刘晖晖张林詹志来中国中医科学院道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室中药资源中心北京100700 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 华润三九医药股份有限公司广东深圳518110 北京中医药大学北京102488

笔者拟从不同层面对汉代经典名方用法用量进行分析,并在此基础上给出相应对策,以期为此类复方制剂的开发提供参考依据。通过对仲景用药特点、煎煮方式、服法用量分类统计,历代医家度量衡折算方法和已上市汉代经典名方制剂用法用量的综... 详细信息

笔者拟从不同层面对汉代经典名方用法用量进行分析,并在此基础上给出相应对策,以期为此类复方制剂的开发提供参考依据。通过对仲景用药特点、煎煮方式、服法用量分类统计,历代医家度量衡折算方法和已上市汉代经典名方制剂用法用量的综合分析,发现“将息法”为仲景方服法总则,即基于汉代度量衡一两折算今13.8 g的情况下中病即止、灵活用药,达到用药安全有效的目的。梳理后发现,汉代经典名方虽然单味药用量大,但服法灵活,以每服生药量为基础用量,服用次数则根据病情灵活调整,该用法用量成为经典名方复方制剂合理开发的关键。基于考证结论,建议汉代经典名方复方制剂开发时,尊重仲景原方服法用量,以原方每服生药量作为每日基础服用量,服用次数采取区间表述方式,即每日1~N次(N为原文最大日给药次数),具体服用次数可由临床医生根据病情轻重缓急随证加减,灵活选择;毒理学研究时以每服生药量为基础,观察最大次数下的毒理情况,提示临床安全使用范围;药品说明书建议采用区间表述方式,提示毒理风险区间。

关键词：经典名方汉代方剂用法用量中药复方制剂开发每服生药量基础服用量

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紫丁香中1个新的倍半萜类化合物

中国中药杂志 2024年第9期49卷 2461-2467页

作者：邰巴达拉胡孙天霞代那音台虞慕瑶刘琪黄璐琦郑汉内蒙古民族大学蒙医药学院国家药品监督管理局中药(蒙药)质量控制重点实验室内蒙古通辽028000 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 长春中医药大学吉林省人参科学研究院吉林长春130117

该研究选定紫丁香结香部位乙醇提取物,通过硅胶柱色谱、薄层板制备以及制备液相色谱等进行系统分离与纯化,并结合紫外分析(UV)、红外分析(IR)、核磁共振(NMR)、高分辨质谱(HR-ESI-MS)、X射线衍射等波谱技术及文献理化数据比较等方法进... 详细信息

该研究选定紫丁香结香部位乙醇提取物,通过硅胶柱色谱、薄层板制备以及制备液相色谱等进行系统分离与纯化,并结合紫外分析(UV)、红外分析(IR)、核磁共振(NMR)、高分辨质谱(HR-ESI-MS)、X射线衍射等波谱技术及文献理化数据比较等方法进行结构鉴定,共鉴定出10个化合物,分别为紫丁香倍半萜D(1)、(-)-T-muurolol(2)、紫丁香倍半萜E~G(3~5)、14-noreudesma-3-hydroxy-3-en-2,9-dione(6)、1-isopropyl-2,7-dimethylnaphthalene(7)、异水菖蒲二醇(8)、α-二去氢菖蒲烯(9)、cadin-4-en-1-β-ol(10)。其中化合物1为未见报道的倍半萜类新化合物,其余9个化合物均为首次从紫丁香中分离得到。化合物1对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎性损伤模型具有显著的保护作用。

关键词：紫丁香倍半萜抗炎活性

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基于传统品质评价的移栽与仿野生黄芪比较

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 21-30页

作者：赵佳琛王亚鹏王艺涵钱锦秀邓爱平南铁贵康利平詹志来中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 湖北中医药大学药学院武汉430065

目的:以历代本草所总结的传统品质评价方法为依据,采用现代科技手段从性状、显微结构、化学成分3个层面对移栽和仿野生2种规格黄芪药材进行系统比较。方法:对收集的移栽和仿野生黄芪进行性状特征、横切面显微特征对比分析;对所含纤维素... 详细信息

目的:以历代本草所总结的传统品质评价方法为依据,采用现代科技手段从性状、显微结构、化学成分3个层面对移栽和仿野生2种规格黄芪药材进行系统比较。方法:对收集的移栽和仿野生黄芪进行性状特征、横切面显微特征对比分析;对所含纤维素类、浸出物、糖类、总黄酮、总皂苷等的含量进行对比分析;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)、解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)对移栽及仿野生黄芪木质部与韧皮部所含次生代谢物及其空间分布进行对比分析。结果:在性状方面,移栽黄芪性状变异较大,而仿野生黄芪的外观性状与断面特征均与传统总结优质黄芪“直如箭干、肉白心黄”的特征相符。在显微结构方面,移栽黄芪木栓层薄,切面裂隙多贯穿形成层呈长条形放射状分布,无明显生长轮特征;仿野生黄芪木栓层厚,切面裂隙呈不规则腔状分布于木质部中心及韧皮部外缘,形成层紧密无裂隙,有明显生长轮特征。在化学成分方面,移栽黄芪的水溶性浸出物、80%乙醇浸出物、蔗糖含量明显高于仿野生黄芪,而总皂苷、木质素和半纤维素含量则明显低于仿野生黄芪,二者所含100%乙醇浸出物、总多糖、总黄酮含量总体相近,但仿野生黄芪稍高;仿野生黄芪木质部2个丙二酰基取代的黄酮苷类化合物含量明显高于移栽黄芪,而2个黄酮苷元和1个黄酮苷则相反,韧皮部7个皂苷类化合物含量仿野生明显高于移栽黄芪。结论:移栽及仿野生黄芪在性状、显微结构及化学成分等方面均存在明显差异,其中移栽黄芪生长速度快,种植年限短,初生代谢产物如水溶性浸出物、蔗糖富集较多,是其质地坚实、甜味明显高于仿野生黄芪的原因。而仿野生黄芪木质素、半纤维及部分次生代谢产物含量明显高于移栽黄芪,与传统性状描述接近,品质较优。基于研究结果,建议加强黄芪仿野生生产,提高仿野生黄芪的供给能力,同时逐步提升现行标准,建议增加丙二酰基取代的黄酮苷类化合物、总皂苷等能够表征不同生产方式的含量测定指标,以引导黄芪高品质生产。

关键词：黄芪移栽仿野生传统品质评价性状显微结构化学成分

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瑞香狼毒贝壳杉烷型二萜类合成酶功能表征

中国中药杂志 2024年第9期49卷 2410-2421页

作者：谭洪虎夏梦苏平黄璐琦南京中医药大学药学院江苏南京210023 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

ent-柯巴基焦磷酸合酶(ent-copalyl diphosphate synthase,CPS)与ent-贝壳杉烯合酶(ent-kaurene synthase,KS)的连续催化是植物以香叶基香叶基焦磷酸(geranylgeranyl pyrophosphate,GGPP)为底物开启赤霉素生物合成路径的关键步骤。该研究通过分析与挖掘瑞香狼毒的转录组数据,成功克隆得到赤霉素途径的2个关键二萜合酶基因SchCPS和SchKS。二者完整开放阅读框分别为2595、1701 bp,编码864、566个氨基酸残基,生物信息学分析预测其相对分子质量分别为97.9、64.6 kDa,理论等电点为5.61、6.12,均为亲水性蛋白。序列比对及系统发育树显示,SchCPS蛋白含有CPS基因家族保守的LHS、PNV及DxDD基序,归类于TPS-c亚家族;SchKS蛋白含有KS基因家族保守的DDxxD、NSE/DTE和PIx基序,归类于TPS-e亚家族。功能验证结果表明,SchCPS可催化GGPP质子化并环化成ent-CPP,SchKS则作用于ent-CPP去磷酸化并再次环化生成贝壳杉烯。该文首次从瑞香狼毒中克隆获得SchCPS与SchKS全长基因,并完成功能验证,不仅丰富了现有的CPS和KS基因库,也为瑞香狼毒中更多活性成分基因的克隆与生物合成途径解析奠定了基础。

关键词：瑞香狼毒贝壳衫烷二萜合酶功能鉴定生物信息学

蒙古黄芪、膜荚黄芪及混伪品种子的位点特异性PCR鉴别

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 21-28页

作者：罗丽胡力蒋超陈梓媛李晓琳袁媛广东药科大学中药学院广州510006 安徽中医药大学药学院合肥230012 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

目的:基于特异性聚合酶链式反应(PCR)建立一种可以准确、快速鉴别蒙古黄芪、膜荚黄芪种子的方法。方法:利用叶绿体基因组综合数据库(CGIR)及IdenDSS软件分别获取蒙古黄芪、膜荚黄芪的DNA特征片段,在此基础上筛选获得蒙古黄芪与膜荚黄芪... 详细信息

目的:基于特异性聚合酶链式反应(PCR)建立一种可以准确、快速鉴别蒙古黄芪、膜荚黄芪种子的方法。方法:利用叶绿体基因组综合数据库(CGIR)及IdenDSS软件分别获取蒙古黄芪、膜荚黄芪的DNA特征片段,在此基础上筛选获得蒙古黄芪与膜荚黄芪的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,根据该位点设计蒙古黄芪特异性鉴别引物对MG-F/MG-R和膜荚黄芪特异性鉴别引物对MJ-F/MJ-R。分别建立蒙古黄芪和膜荚黄芪特异性PCR鉴别方法,优化PCR反应体系,并对该方法的专属性和适用性进行考察。结果:蒙古黄芪特异性PCR鉴别方法,采用引物对MG-F/MG-R、退火温度62℃、循环次数28次,经PCR扩增和凝胶电泳后蒙古黄芪在约220 bp处得到特异性条带,而膜荚黄芪和其他混伪品种子无条带;膜荚黄芪特异性PCR鉴别方法,采用引物对MJ-F/MJ-R、退火温度58℃、循环次数28次,经PCR扩增和凝胶电泳后膜荚黄芪扩增得到约150 bp的条带,而蒙古黄芪及混伪品无扩增产物。结论:该研究建立的特异性PCR鉴别方法,可以准确、快速对蒙古黄芪、膜荚黄芪进行种源鉴别,为黄芪种子的分类与准确鉴定提供了一定的科学依据。

关键词：蒙古黄芪膜荚黄芪种子聚合酶链式反应

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基于传统品质评价的淡豆豉质量分析

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 31-42页

作者：王艺涵林王敏张水利俞冰南铁贵康利平李国凤何锡远詹志来黄璐琦中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室北京100700 浙江中医药大学药学院杭州310053 成都宝芎中药材有限公司四川彭州611930

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依... 详细信息

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依据。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对黑豆及淡豆豉的化学成分进行结构鉴定,借助Progenesis QI v2.3软件,采用负离子模式进行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),绘制S-plot图,选取|P|>0.1的化合物作为备选差异性成分。采用UPLC测定淡豆豉发酵期间异黄酮类化合物含量,前酵期间每8 h取样,后酵期间每2 d取样,并分析不同发酵阶段异黄酮含量动态变化。采取异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,利用高效液相色谱法(HPLC)检测淡豆豉不同发酵阶段样品及黑豆中氨基酸和核苷酸的含量,通过味道强度值(TAV值)探讨各呈味物质对淡豆豉“美”味的贡献度。结果:从黑豆和淡豆豉中共筛选出19种差异成分,以大豆皂苷类和异黄酮类成分为主,发酵后含量均显著减少甚至消失。淡豆豉前酵过程主要发生苷键水解反应,黑豆中所含异黄酮苷类物质大量降解转化为对应的苷元类物质,氨基酸等风味物质含量增势较为平缓;后酵过程则主要发生蛋白质降解反应,后酵8 d后异黄酮类化合物含量基本稳定,而各氨基酸总含量平均上升8~40倍,不同的氨基酸形成了淡豆豉特殊的风味,如鲜味物质谷氨酸TAV值始终领先于其他呈味物质,甜味物质如丙氨酸、缬氨酸对淡豆豉的贡献同样较大。结论:基于成分转化规律,结合传统“香美而浓”的评价指标,淡豆豉现有标准较难控制其发酵程度,建议细化淡豆豉性状描述,改为“气香,味鲜,微甘”,同时增加谷氨酸、丙氨酸和缬氨酸等后酵程度指标性化合物为淡豆豉质控指标,以规范淡豆豉制作工艺,提高淡豆豉质量。

关键词：淡豆豉黑豆品质评价超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS) 异黄酮氨基酸呈味物质

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基于传统品质评价的野生与栽培赤芍比较

中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 165-174页

作者：田春芳胡倩南詹志来兰晓燕李翔周利南铁贵邱子栋康利平天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 中国中医科学院中医药健康产业研究所南昌330000

目的:从性状特征、显微特征、初生与次生代谢产物含量测定3个方面,对野生与栽培赤芍进行对比研究。方法:收集17批野生赤芍和9批栽培赤芍,使用游标卡尺及天平测量其性状数据,番红固绿染色法制作石蜡切片并观察显微特征,按照2020年版《中... 详细信息

目的:从性状特征、显微特征、初生与次生代谢产物含量测定3个方面,对野生与栽培赤芍进行对比研究。方法:收集17批野生赤芍和9批栽培赤芍,使用游标卡尺及天平测量其性状数据,番红固绿染色法制作石蜡切片并观察显微特征,按照2020年版《中华人民共和国药典》通则2201浸出物测定法和通则2202鞣质含量测定法,分别测定醇溶性浸出物和总鞣制含量,苯酚-硫酸法测定多糖含量,蒽酮比色法测定淀粉含量,范氏洗涤纤维分析法测定纤维类成分含量,超高效液相色谱-蒸发光散射检测法(UPLC-ELSD)测定果糖、葡萄糖和蔗糖含量,UPLC测定次生代谢物(没食子酸、没食子酸甲酯、儿茶素、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、鞣花酸、1,2,3,6-四没食子酰葡萄糖、没食子酰芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、柚皮素、苯甲酰芍药苷、苯甲酰芍药内酯苷)含量;结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对野生和栽培赤芍的各项含量测定数据进行分析,以变量重要性投影(VIP)值>1、P研究可为赤芍质量标准的提升和引导赤芍高品质生产提供参考。

关键词：赤芍野生栽培传统品质评价性状显微结构化学成分

经典名方五子衍宗丸干预半去势雄性小鼠生精功能的转录组学分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 61-69页

作者：邹迪新张岳阳孟雪丹鹿伟吕爽曾凡俊陈坤刘畅张钟秀段宇代一航王昭懿王智民林瑞超中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院望京医院北京100102 北京中医药大学中药学院中药品质评价中心/北京市重点实验室北京100102 内蒙古医科大学附属医院呼和浩特010050 河北医科大学第一医院石家庄050031 海关总署(北京)国际旅行卫生保健中心北京100013 北京市药品检验研究院北京市疫苗检验中心北京102206 北京体育大学运动人体科学学院北京100084

目的:筛选五子衍宗丸干预半去势雄性小鼠生精功能相关的转录组,探讨其在干预生精功能低下进展中的潜在作用机制。方法:Balb/c小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、丙酸睾丸素组、五子衍宗丸组,每组12只,模型组和给药组摘取右侧睾丸... 详细信息

目的:筛选五子衍宗丸干预半去势雄性小鼠生精功能相关的转录组,探讨其在干预生精功能低下进展中的潜在作用机制。方法:Balb/c小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、丙酸睾丸素组、五子衍宗丸组,每组12只,模型组和给药组摘取右侧睾丸和附睾构建半去势生精功能低下模型,假手术组仅剪开毛皮和右侧阴囊并立即消毒缝合,饲养1周后,五子衍宗丸组每天灌胃五子衍宗丸混悬液1.56 g·kg^(-1),丙酸睾丸素组肌肉注射丙酸睾丸素0.2 mg·kg^(-1),每周2次,假手术组和模型组每天灌胃等体积生理盐水,连续给药3周。干预结束后,苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清睾酮(T)、促黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)含量;小动物精子自动检测仪测定附睾精子数量和活力;利用转录组学芯片技术检测各组睾丸组织mRNA表达水平,筛选五子衍宗丸调控相关基因转录组,并从中任选3条mRNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证转录组数据。验证合格的转录组数据通过基因本体(GO)注释分析及京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,解析五子衍宗丸调控模型动物生精功能相关的生物条目及信号通路。结果:与假手术组比较,模型组小鼠睾丸组织出现生精损伤,生精小管腔收缩、空泡化、各级生精细胞减少、间隙变宽,生精细胞发育阻滞等形态异常;血清T显著降低,LH显著升高(P<0.01),FSH升高但差异无统计学意义;附睾精子数量、活力均显著降低(P<0.01);睾丸组织中有882条差异表达mRNA,其中565条上调,317条下调,聚类分析表明,这些差异表达的mRNA可以很好地区分假手术组与模型组。与模型组比较,五子衍宗丸组小鼠睾丸组织损伤减轻,生精小管腔结构完整、空泡化减少、各级生精细胞明显增加、排列紧密;血清中T显著升高,LH显著下降(P<0.01),FSH下降但差异无统计学意义;附睾中精子数量和活力显著提高(P<0.01);五子衍宗丸可明显调控半去势小鼠睾丸的159条mRNA,其中32条上调,127条下调,经Real-time PCR验证转录组检测数据可靠。GO和KEGG分析显示,五子衍宗丸调控的转录组功能涉及到睾丸内间质细胞的性激素生成,生精细胞的更新、分化、代谢、凋亡、信号传导等精子发育的整个细胞周期过程,并和生精干细胞功能、内质网蛋白处理及代谢程序等信号通路的生物学行为密切相关。结论:五子衍宗丸可有效改善半去势雄性小鼠造成的生精功能低下,其机制可能与五子衍宗丸干预睾丸转录调节网络,调控睾丸间质细胞性激素合成、生精干细胞功能、精子发生的整个细胞周期过程,以及内质网蛋白处理及代谢程序相关基因转录的表达有关。

关键词：经典名方五子衍宗丸半去势生精功能转录组学男性不育实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)