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异甘草素改善2型糖尿病所致异常内质网应激机制研究

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药学学报 2025年第1期 130-140页

作者：赖恺怡丁文文张佳瑜杨晓雪高文博肖瑶刘颖北京中医药大学生命科学学院北京中医药大学中药学院

异甘草素(isoliquiritigenin, ISL)是甘草中提取的查尔酮类化合物,具有抗糖尿病、抗癌及抗氧化等多种生物活性。课题组前期研究发现, ISL可降低2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)小鼠的血糖水平,改善T2DM引起的糖脂代谢和能量... 详细信息

异甘草素(isoliquiritigenin, ISL)是甘草中提取的查尔酮类化合物,具有抗糖尿病、抗癌及抗氧化等多种生物活性。课题组前期研究发现, ISL可降低2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)小鼠的血糖水平,改善T2DM引起的糖脂代谢和能量代谢紊乱,本文拟进一步探究ISL缓解T2DM所致异常内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的效果并解析其分子机制。体内实验采用8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠,通过饲喂高脂高糖饮食结合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)构建T2DM动物模型,动物福利和实验过程均遵循北京中医药大学实验动物伦理委员会规定(批准号:BUCM-2022021503-1134);体外实验采用人肝癌HepG2细胞,以衣霉素(tunicamycin, TM)诱导ERS细胞模型。利用转录组测序分析ISL对T2DM小鼠肝脏基因转录水平的影响;采用实时荧光定量PCR (real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测ISL对ERS关键基因的调控作用;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、蛋白质印迹法(Western blot, WB)以及免疫荧光技术检测ISL对ERS关键蛋白的调控作用。实验结果表明:ISL可显著下调ERS关键基因的表达,降低葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78, GRP78)的水平,并抑制蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)的磷酸化,从而缓解T2DM所致异常ERS;同时, ISL可提高胰岛素受体底物(insulin receptor substrate, IRS) 1和IRS2的蛋白水平,促进蛋白激酶B (protein kinase B, Akt)的磷酸化,改善胰岛素敏感性。综上, ISL可通过改善ERS和胰岛素敏感性,缓解T2DM相关症状。

关键词：异甘草素 2型糖尿病内质网应激胰岛素敏感性糖代谢

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复方喜树颗粒调控铁死亡抑制肝细胞癌增殖的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期 37-45页

作者：田源王宇僖刘震马筠程朱泓宇王筱竺李倩高健王伟玲徐文慧王停北京中医药大学中药学院北京中医药大学生命科学学院北京中医药大学北京中医药研究院

目的：探讨复方喜树颗粒调控铁死亡途径抑制肝细胞癌增殖的作用机制。方法：建立人肝癌Huh7裸鼠移植瘤模型，随机分为模型组，复方斑蝥组(0.21 g·kg-1)，复方喜树颗粒低(1.87 g·kg-1)、中(3.74 g·kg-1)、高剂量组(7.49 g·kg-1)，模... 详细信息

目的：探讨复方喜树颗粒调控铁死亡途径抑制肝细胞癌增殖的作用机制。方法：建立人肝癌Huh7裸鼠移植瘤模型，随机分为模型组，复方斑蝥组(0.21 g·kg-1)，复方喜树颗粒低(1.87 g·kg-1)、中(3.74 g·kg-1)、高剂量组(7.49 g·kg-1)，模型组予以饮用水，各给药组给予相应药物，连续灌胃28 d，每4 d测量裸鼠体质量和肿瘤体积，苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织病理学变化。细胞实验采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测24、48 h复方喜树颗粒（0、31.25、62.5、125、250、500、1 000 mg·L-1）对人肝癌Huh7细胞增殖能力的影响；采用铁离子荧光探针（CA-AM）、活性氧荧光探针（DCFH-DA）和脂质过氧化物荧光探针(C11-BODIPY581/591)分别检测细胞内二价铁离子（Fe2+）、活性氧（ROS）和细胞内脂质过氧化物（LPO）水平；比色法检测细胞内谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），转铁蛋白受体1（TFR1）、铁蛋白重链1（FTH1）的蛋白表达情况。结果：在裸鼠移植瘤实验中，给药期间，与模型组比较，第12天开始，各给药组的移植瘤体积明显减小（P<0.05,P<0.01），给药结束后，与模型组比较，复方斑蝥组和复方喜树颗粒低、中、高剂量组移植瘤体积、相对肿瘤体积、移植瘤重量明显减小（P<0.05），抑瘤率分别为48.99%、79.93%、91.38%、97.36%，且与复方斑蝥组比较，复方喜树颗粒低、中、高剂量组移植瘤体积，相对肿瘤体积均明显减小（P<0.05），中、高剂量组移植瘤重量明显减小（P<0.05）;HE染色发现，与模型组比较，各给药组癌细胞数量减少，可见坏死病灶，出现细胞核固缩、核碎裂、核溶解，高剂量组可见间质纤维细胞比例增加。细胞水平上，与空白组比较，复方喜树颗粒组孵育24、48 h后可明显降低Huh7细胞存活率，呈剂量依赖性（P<0.05）；与空白组比较，RSL3组和复方喜树颗粒低、中、高剂量组CA-AM相对荧光强度显著下降，说明Fe2+含量显著上升（P<0.01）；与空白组比较，RSL3组和复方喜树颗粒低、中、高剂量组的DCFH-DA的荧光强度明显升高，说明ROS含量明显上升（P<0.05）；与空白组比较，RSL3组和复方喜树颗粒低、中、高剂量组的C11-BODIPY581/591荧光比值显著升高，说明LPO水平显著升高（P<0.01）。与空白组比较，RSL3组和复方喜树颗粒低、中、高剂量组内GSH、SOD水平明显下降（P<0.05）；与空白组比较，RSL3组和复方喜树颗粒中、高剂量组GPX4、FTH1蛋白表达明显下降（P<0.05）；与空白组比较，复方喜树颗粒低、高剂量TFR1蛋白表达明显上升（P<0.05）。结论：复方喜树颗粒可能通过下调GSH-GPX4信号轴使抗氧化系统失衡，提高细胞内Fe2+和脂质过氧化物水平，诱导肝癌细胞铁死亡，从而发挥抗肝细胞癌增殖的作用。

关键词：复方喜树颗粒肝细胞癌铁死亡增殖中药

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基于下丘脑代谢组学的益肾强身丸、防衰益寿丸改善睡眠作用及机制研究

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中国现代中药 2025年

作者：耿杨冯倩倩张磊赵子阳史浩男贺润铖贾占红张硕峰孙建宁董世芬北京中医药大学中药学院中药药理系

目的：基于代谢组学技术探究益肾强身丸、防衰益寿丸对小鼠睡眠的改善作用及其机制。方法：77只8月龄C57BL/6J小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、益肾强身丸0.25 g·kg–1组（YSL组）、防衰益寿丸0.25 g·kg–1组（FSL组）、益肾强身... 详细信息

目的：基于代谢组学技术探究益肾强身丸、防衰益寿丸对小鼠睡眠的改善作用及其机制。方法：77只8月龄C57BL/6J小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、益肾强身丸0.25 g·kg–1组（YSL组）、防衰益寿丸0.25 g·kg–1组（FSL组）、益肾强身丸0.25 g·kg–1+防衰益寿丸0.25 g·kg–1组（YSFSL组）、益肾强身丸0.5 g·kg–1+防衰益寿丸0.5 g·kg–1组（YSFSH组）、艾司唑仑0.16 mg·kg–1组。采用不可预知性应激刺激方法制备拟中老年失眠小鼠模型，造模同时各给药组给予药物干预，连续干预8周。观察药物在阈下剂量及阈剂量戊巴比妥钠协同作用下对小鼠睡眠的影响；高架十字迷宫实验检测抗焦虑作用；超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）检测脑组织中神经递质水平；超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱法（UHPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS）非靶向代谢组学方法对下丘脑进行检测分析；进一步采用Western blotting检测牛磺酸和亚牛磺酸代谢途径中关键代谢酶谷氨酸脱羧酶1（GAD1）和谷氨酸脱羧酶2（GAD2）的表达水平。结果：与模型组比较，YSL组、FSL组、YSFSL组和YSFSH组小鼠在阈剂量戊巴比妥钠协同作用下入睡潜伏期缩短、睡眠时间延长（P<0.05、0.01）；YSFSL组和YSFSH组小鼠进入开放臂的次数显著增加（P<0.01）；YSL组、FSL组、YSFSL组和YSFSH组小鼠脑组织中γ-氨基丁酸（GABA）水平显著升高（P<0.001），谷氨酸（Glu）含量和Glu/GABA比值显著降低（P < 0.05、0.01）。代谢组学结果显示：给药后可明显改善失眠小鼠的下丘脑代谢轮廓，并筛选出12个与睡眠相关的差异代谢物。其中，YSL组可回调6个差异代谢物，主要涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢，嘌呤代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢通路；FSL组可回调6个差异代谢物，主要涉及嘌呤代谢，牛磺酸和亚牛磺酸代谢等代谢通路；YSFS组可回调8种差异代谢物，主要涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，柠檬酸循环（TCA循环）和嘌呤代谢等代谢通路。其中GAD1、GAD2是牛磺酸和亚牛磺酸代谢途径中关键的代谢酶，Western blotting结果显示，给药后可显著降低GAD1和GAD2的表达水平。结论：益肾强身丸、防衰益寿丸具有改善睡眠作用，其作用机制与调节脑组织神经递质水平和下丘脑内源性代谢物有关，通过调控下丘脑氨基酸代谢、嘌呤代谢和能量代谢等途径，从而发挥镇静、催眠作用。

关键词：益肾强身丸防衰益寿丸镇静催眠代谢组学

丹参SmIAA7基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

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药学学报 2025年

作者：黄钰莹陈颖王宝纬关范圆郑语嫣范菁王金铃胡秀华王晓晖北京中医药大学北京中医药研究院中药现代研究中心安徽科技学院生物医学与健康学院北京中医药大学中药学院北京中医药大学生命科学学院

Auxin/indole-3-acetic acid (Aux/IAA) 是植物中一个重要的基因家族，在生长素信号传导中扮演着关键的角色，参与了植物的生长、发育以及对逆境胁迫的响应和调节过程。本研究通过分析丹参 (Salvia miltiorrhiza) 不同羽状复叶的转录... 详细信息

Auxin/indole-3-acetic acid (Aux/IAA) 是植物中一个重要的基因家族，在生长素信号传导中扮演着关键的角色，参与了植物的生长、发育以及对逆境胁迫的响应和调节过程。本研究通过分析丹参 (Salvia miltiorrhiza) 不同羽状复叶的转录组数据筛选了潜在的与叶片发育相关的基因SmIAA7，设计特异引物成功从丹参中克隆了SmIAA7，并进行生物信息学分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、生长素及非生物胁迫下的诱导表达分析。SmIAA7基因全长684 bp，编码227个氨基酸，蛋白分子质量25.3 kD。保守结构域分析表明SmIAA7含有超家族保守结构域Aux＿IAA (pfam02309)，序列分析及系统进化树结果表明SmIAA7和其他植物中的IAA7以及IAA14同源性较高，可能参与植物的生长发育并响应逆境胁迫。构建原核表达载体pET28a-SmIAA7并在大肠杆菌Rosetta (DE3) 菌株中成功表达SmIAA7重组蛋白，纯化得到可溶性重组蛋白。亚细胞定位实验结果表明SmIAA7定位于植物细胞的细胞核中。实时荧光定量PCR结果表明， SmIAA7基因能够响应生长素的诱导导致表达水平升高。干旱、低温以及盐胁迫均能够显著提高SmIAA7基因的表达水平。本研究为进一步揭示SmIAA7在丹参叶片发育、信号传递及逆境防御中的作用奠定基础。

关键词：丹参 SmIAA7 原核表达亚细胞定位表达分析

巴马汀与头孢哌酮联用对产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的抗菌协同作用研究

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天然产物研究与开发 2025年

作者：王辉梁迪赵元静徐浩然樊如意陈思敏成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

探究巴马汀（palmatine，PA）联合头孢哌酮（cefoperazone，CPZ）对产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta- lactamases，ESBLs）耐药大肠埃希菌体内外抗菌协同作用，通过药效学及药动学探讨两药联用的可能机制。纸片扩散法（K-... 详细信息

探究巴马汀（palmatine，PA）联合头孢哌酮（cefoperazone，CPZ）对产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta- lactamases，ESBLs）耐药大肠埃希菌体内外抗菌协同作用，通过药效学及药动学探讨两药联用的可能机制。纸片扩散法（K-B法）及聚合酶链式反应技术筛选多药耐药产ESBLs大肠埃希菌并确定基因型；K-B法、棋盘法量化PA体外协同抗菌强度；分子对接，头孢硝噻吩水解试验，三相水解分析PA对酶活性的影响；构建大鼠细菌感染性肺炎模型考察PA联合CPZ体内保护作用及药物代谢动力学的相互影响。试验筛选出一株CTX-M型多药耐药产ESBLs大肠埃希菌（Escherichia coli 2022-72）；联用后，CPZ最小抑菌浓度（minimal inhibit concentration，MIC）由32 μg/mL降至8 μg/mL，PA的MIC由256 μg/mL降至32 μg/mL；分级抑菌浓度为0.375，表明二者联用发挥抗菌协同作用；分子对接结果显示PA与CTX-M型ESBLs具有良好的结合活性，结合能为-7.2 kcal/mol；头孢硝噻吩水解试验，三相水解试验均显示，PA通过抑制ESBLs活性表现出抗菌协调增效；两药联用可明显改善细菌感染性肺炎模型动物血清中炎症因子含量，其中C反应蛋白显著下降（P理学改变抑制效果最强；药代动力学实验结果显示联合用药不会改变各单药的药物代谢动力学参数。综上，PA可通过降低ESBLs活性增强CPZ体内外抗菌作用，并有效提高体内抗感染保护作用，协同增效作用与药代动力学无明显关联。

关键词：巴马汀大肠埃希菌协同抗菌超广谱β-内酰胺酶分子对接

从RAGE-ROS-PI3K-AKT-NF-κB-NLRP3信号轴研究火把花根片干预糖尿病肾病的作用机制

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中国中药杂志 2025年

作者：胥明珠马兆臣肖自青高双荣杨怡新沈佳韵张楚黄丰王江瑞蔡蓓蕾林娜张彦琼中国中医科学院中药研究所云南中医药大学中药学院福建中医药大学药学院重庆市药研院制药有限公司江苏知原药业股份有限公司

采用生物分子网络挖掘与动物实验验证相整合的研究策略，探讨火把花根片治疗糖尿病肾病的作用机制。通过分析临床转录组学数据，构建方药候选靶标-疾病相关基因相互作用网络，并基于网络节点的拓扑特征值筛选出101个火把花根片干预糖尿... 详细信息

采用生物分子网络挖掘与动物实验验证相整合的研究策略，探讨火把花根片治疗糖尿病肾病的作用机制。通过分析临床转录组学数据，构建方药候选靶标-疾病相关基因相互作用网络，并基于网络节点的拓扑特征值筛选出101个火把花根片干预糖尿病肾病的核心网络靶标，其生物学功能与多条2型糖尿病、免疫、代谢重编程途径密切相关。鉴于代谢重编程驱动的免疫-炎症失衡是糖尿病肾病的重要致病机制之一，且火把花根片的多个核心网络靶标均参与此病理过程，本研究选择晚期糖基化终末产物受体（the receptor for advanced glycation end products，RAGE）-活性氧（reactive oxygen species，ROS）-磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）-核转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）-NOD样受体蛋白3（NOD like receptor family pyrin domain containing 3，NLRP3）信号轴作为候选作用靶标进行深入研究。进一步，制备高糖高脂饮食/链脲佐菌素诱导型糖尿病肾病大鼠模型，客观评价了火把花根片的药效，并验证了相关靶标的表达情况。结果表明，火把花根片可通过抑制RAGE-ROS-PI3K-AKT-NF-κB-NLRP3信号轴的激活，有效纠正糖尿病肾病中的代谢紊乱，调节免疫-炎症失衡，改善肾脏功能及其病理学改变。综上，该研究揭示了火把花根片通过调节代谢重编程与免疫-炎症反应的双重调控作用，有效缓解糖尿病肾病的进展，为其在糖尿病肾病中的临床应用提供了充分的实验依据。

关键词：火把花根片糖尿病肾病代谢重编程免疫-炎症 RAGE-ROS-PI3K-AKT-NF-κB-NLRP3信号轴

黄芩苷与苦参碱分子间相互作用的量子化学计算与验证

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原子与分子物理学报 2025年第4期42卷 8-14页

作者：董志舒启江田爽王皎侯安国王文苹云南中医药大学中药学院云南省南药可持续利用重点实验室昆明650500

为探究苦参碱能极大增强黄芩苷在水中的溶解度的原因,采用量子计算对二者反应过程及共存状态进行分析,并使用单晶衍射和红外图谱验证计算结果.本研究表明,黄芩苷和苦参碱并非简单的以非共价作用相结合,二者存在质子转移现象,反应生成黄... 详细信息

为探究苦参碱能极大增强黄芩苷在水中的溶解度的原因,采用量子计算对二者反应过程及共存状态进行分析,并使用单晶衍射和红外图谱验证计算结果.本研究表明,黄芩苷和苦参碱并非简单的以非共价作用相结合,二者存在质子转移现象,反应生成黄芩苷阴离子和苦参碱阳离子,以静电作用为主导形成共无定型物,导致水溶性极大增加.

关键词：苦参碱黄芩苷质子转移离子共无定型物

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桑寄生的研究进展及其质量标志物的预测分析

中药新药与临床药理 2025年

作者：李华莹陈霏帆崔官炜张维琦秦哲郭家庚王晓东覃文慧广西中药药效研究重点实验室/广西中医湿病方药理论与转化重点实验室/中药资源循环利用广西高校工程研究中心广西中医药大学药学院

桑寄生为我国传统中药材，始载于《神农本草经》，具有祛风湿、止痹痛、补肝肾、强筋骨、安胎元等功效，主要包括黄酮类、甾醇类、萜类、酚酸类、苯丙素类、木脂素类、挥发油类等化学成分，具有抗肿瘤、降血压、降血糖、降血脂、抗炎、... 详细信息

桑寄生为我国传统中药材，始载于《神农本草经》，具有祛风湿、止痹痛、补肝肾、强筋骨、安胎元等功效，主要包括黄酮类、甾醇类、萜类、酚酸类、苯丙素类、木脂素类、挥发油类等化学成分，具有抗肿瘤、降血压、降血糖、降血脂、抗炎、镇痛、抗菌、抗病毒、抗骨质疏松、利尿、强心、保护神经、增强记忆等药理作用。通过对桑寄生化学成分及药理作用进行系统的总结归纳，在中药质量标志物(Q-marker)理论基础上，根据植物亲缘及其特有性成分、传统药效及药性、药物代谢动力学及体内过程、化学成分可测性、采收时期及产地、新的药效等多层面对桑寄生的Q-marker进行了预测分析，发现黄酮类、萜类、甾体类、苷类、挥发油类化学成分可作为桑寄生Q-marker的物质种类，槲皮苷、槲皮素、广寄生苷、萹蓄苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、(+)-儿茶素、β-谷甾醇、山柰酚等可作为桑寄生Q-marker的候选化学成分，可为桑寄生质量评价体系的建立以及药材质量控制提供科学依据和理论参考。

关键词：桑寄生质量标志物药理作用化学成分

基于cAMP/PKA/CREB通路的神牡安神胶囊延长深度睡眠作用机制探讨

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中国现代中药 2025年

作者：尤诗晴徐畅陈静婷肖驿泽刘莹杨晓菲吴嘉怡王金朝褚福浩张薇北京中医药大学中药学院瀚天生物(北京)科技有限公司

目的：探讨神牡安神胶囊对对氯苯丙氨酸（PCPA）致失眠小鼠睡眠的改善作用。方法：通过腹腔注射PCPA制备C57雄性小鼠失眠模型，随机分为对照组，模型组，阳性药地西泮组，神牡安神胶囊低、中、高剂量(0.41、1.23、3.69 g·kg–1)组，造... 详细信息

目的：探讨神牡安神胶囊对对氯苯丙氨酸（PCPA）致失眠小鼠睡眠的改善作用。方法：通过腹腔注射PCPA制备C57雄性小鼠失眠模型，随机分为对照组，模型组，阳性药地西泮组，神牡安神胶囊低、中、高剂量(0.41、1.23、3.69 g·kg–1)组，造模后连续给药7 d，观察小鼠精神状态、体质量等指标，通过旷场实验和高架十字迷宫实验观察各组小鼠自发活动情况，反映其焦虑状态；苏木素-伊红（HE）染色法观察各组小鼠海马区神经元形态变化；酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组小鼠脑组织中γ-氨基丁酸（GABA）、多巴胺（DA）、皮质醇（Cort）、褪黑素（MT）、环磷酸腺苷（cAMP）、脑源性神经营养因子（BDNF）含量；蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测各组小鼠脑组织中γ-氨基丁酸A型受体亚基β3（GABRA3）、蛋白激酶A（PKA）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）蛋白质表达水平；通过脑电图（EEG）协同肌电图（EMG）监测和分析失眠小鼠给药后8 h内的睡眠结构，分别记录各组小鼠的苏醒时长、非快眼动睡眠时长（NREM）和快眼动睡眠（REM）时长。结果：造模成功后失眠小鼠出现暴躁易怒、昼夜节律紊乱的表现。与对照组比较，旷场实验中模型组小鼠穿格数减少（P实验中模型组小鼠进入开放臂次数占比和开臂时间占比显著降低（P实验中神牡安神胶囊各剂量组及地西泮组小鼠穿格数增加（P实验中地西泮组及神牡安神胶囊各剂量组小鼠进入开放臂次数占比和开臂时间占比均升高（P<0.05，P<0.01）；神牡安神胶囊中、高剂量组均可使失眠小鼠脑组织中GABA、MT、BDNF与cAMP的表达水平升高（P<0.01），Cort、DA的表达水平降低（P<0.01）；神牡安神胶囊中、高剂量组小鼠脑组织中GABRA3、PKA、CREB蛋白质表达水平升高（P<0.05，P<0.01）；神牡安神胶囊高剂量组小鼠的苏醒时长缩短（P<0.01），NREM和REM时长延长（P<0.01），睡眠结构更加完整。结论：神牡安神胶囊对PCPA诱导的失眠小鼠具有良好的镇静催眠作用，可缓解失眠所致的紧张焦虑情绪，调节内源性物质Cort、MT、GABA、DA、BDNF的分泌及影响cAMP/PKA/CREB通路，延长睡眠总时长、非快眼动睡眠时长及快眼动睡眠时长，从而改善小鼠睡眠结构来发挥改善睡眠、镇静催眠和延长深度睡眠的作用。

关键词：神牡安神胶囊失眠神经衰弱镇静催眠深度睡眠环磷酸腺苷/蛋白激酶A/cAMP反应元件结合蛋白信号通路