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基于血浆代谢组学探究三七总皂苷对2型糖尿病小鼠的降糖作用

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药学学报 2024年第4期59卷 1028-1039页

作者：张金花刘汉湘刘雨轩吴敏常晋霞刘文虎川北医学院药学院四川南充637100 川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100

基于血浆代谢组学结合实验验证研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠的降糖作用。将40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组,对照组常规饲养,实验组高脂饲料喂养12周后,经... 详细信息

基于血浆代谢组学结合实验验证研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠的降糖作用。将40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组,对照组常规饲养,实验组高脂饲料喂养12周后,经腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立T2DM模型,所有动物实验经川北医学院实验动物伦理委员会批准(批准号:NSMC2022023)。造模成功小鼠随机分为模型组(T2DM)、低剂量[200 mg·kg^(-1)·d^(-1)]和高剂量[300 mg·kg^(-1)·d^(-1)]三七总皂苷组,灌胃6周,每周监测小鼠体重、摄食量、进水量和空腹血糖值(fasting blood glucose,FBG),灌胃第5周进行口服糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT)。摘眼球采血检测肝脏功能及血脂;试剂盒检测血液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平及肝脏中抗氧化系统谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。基于代谢组学研究血浆中内源性代谢物变化;使用KEGG数据库通路富集分析;Western blot检测肝脏NF-κB通路及TNF-α和IL-6的表达。结果显示,T2DM小鼠构建成功;高剂量三七总皂苷(high Panax notoginseng saponins,HPNS)能够降低T2DM小鼠的空腹血糖,低剂量三七总皂苷(low Panax notoginseng saponins,LPNS)对空腹血糖无显著影响。HPNS能够改善T2DM小鼠肝脏功能,降低血脂及血液TNF-α和IL-6的水平,增加肝脏GSH-Px、CAT和SOD的活性。代谢组学结果显示,模型组血浆中45种代谢物变化显著,HPNS治疗后20种代谢物显著变化且向正常组转归。通路富集表明,花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、谷胱甘肽代谢及肉碱合成在T2DM小鼠血液中改变,HPNS可改善T2DM小鼠血液中花生四烯酸和亚油酸异常代谢。Western blot表明,HPNS能够抑制T2DM小鼠NF-κB通路,降低TNF-α和IL-6的表达,提示PNS可能通过抑制NF-κB通路;调节花生四烯酸和亚油酸代谢,降低炎性因子和氧化应激水平,改善肝脏功能发挥降低血糖的作用。

关键词：三七总皂苷降糖作用 NF-κB通路花生四烯酸代谢亚油酸代谢

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束缚应激致高脂血症ApoE^(-/-)小鼠心肌损伤的分子靶标筛选与机制分析

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法医学杂志 2024年第2期40卷 172-178页

作者：陈尚亨董盛仲王智敏洪光辉叶星林子杰林俊毅江洁清王守宇林汉成沈忆文复旦大学基础医学院法医学系上海200032

目的采用蛋白质组学技术筛选慢性束缚应激致高脂血症小鼠心肌损伤的标志物及其潜在机制。方法通过束缚ApoE-/-小鼠建立高脂血症合并慢性应激模型,运用蛋白质组学与生物信息学等技术描绘慢性应激对高脂血症小鼠心肌损伤的特征性分子改变... 详细信息

目的采用蛋白质组学技术筛选慢性束缚应激致高脂血症小鼠心肌损伤的标志物及其潜在机制。方法通过束缚ApoE-/-小鼠建立高脂血症合并慢性应激模型,运用蛋白质组学与生物信息学等技术描绘慢性应激对高脂血症小鼠心肌损伤的特征性分子改变及相关调控机制,并从中探索潜在的诊断标志物。结果蛋白质组学分析结果显示,与高脂血症组相比,高脂血症合并束缚应激组小鼠共有43个显著上调与58个显著下调的差异表达蛋白质。其中,GBP2、TAOK3、TFR1、UCP1是极具诊断潜力的分子标志物。KEGG通路富集分析结果表明,铁死亡是加剧高脂血症合并束缚应激模型心肌损伤的重要机制通路。mmu_circ_0001567/miR-7a/Tfr-1和mmu_circ_0001042/miR-7a/Tfr-1可能是该模型中与铁死亡相关的重要circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结论慢性束缚应激可能通过铁死亡加剧高脂血症小鼠的心肌损伤,本研究筛选出4个具有潜在应用价值的心肌损伤分子诊断标志物,为高脂血症合并应激致心脏性猝死的研究提供了新的方向。

关键词：法医病理学生物信息学慢性束缚应激高脂血症铁死亡生物标志物心肌损伤小鼠

CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的mi RNA21检测

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分析试验室 2024年第4期43卷 559-563页

作者：李甜邹红敏陈菲游芸张莉萍河南科技大学基础医学与法医学院洛阳471023

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切... 详细信息

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切一端带有荧光基团、另一端带有猝灭基团的单链DNA荧光报告探针,产生可检测的荧光信号。考察了CHA反应温度、发夹探针浓度、荧光报告探针浓度和Cas12a切割时间的影响。在优化条件下,荧光信号与miRNA21浓度的对数呈良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9924,检出限为1.1 pmol/L。利用本方法对miRNA21加标的胎牛血清样品进行分析,20 pmol/L和100 pmol/L miRNA21的回收率分别为(92.0±4.2)%和(94.1±4.7)%。CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的miRNA检测方法,使miRNA检测摆脱了热循环仪器,操作简单,通用性强,具有实际应用潜力。

关键词：催化发夹自组装 CRISPR/Cas12a miRNA21 荧光

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细菌对肿瘤转移的影响

科学通报 2024年

作者：俞婧仪孟庆娜陈永霞季飞洋王林波浙江大学附属邵逸夫医院肿瘤外科杭州医学院基础医学与法医学院

肿瘤转移作为肿瘤发展进程中的重要阶段,是导致肿瘤患者死亡的主要原因之一.细菌与肿瘤的发生发展密切相关,且在肿瘤转移中扮演着重要的角色.探究细菌对肿瘤转移的作用,对于肿瘤研究至关重要,有助于进一步揭示肿瘤转移的机制,对于研发... 详细信息

肿瘤转移作为肿瘤发展进程中的重要阶段,是导致肿瘤患者死亡的主要原因之一.细菌与肿瘤的发生发展密切相关,且在肿瘤转移中扮演着重要的角色.探究细菌对肿瘤转移的作用,对于肿瘤研究至关重要,有助于进一步揭示肿瘤转移的机制,对于研发新的治疗靶点、制定个性化的治疗策略以及判断肿瘤预后具有至关重要的意义.本文回顾了近年来细菌对肿瘤转移影响的研究最新进展,从胞内菌和胞外菌两个方面展开了深入分析,阐明了细菌与肿瘤转移的关系,重点探究了细菌通过直接影响肿瘤细胞以及通过肿瘤微环境的方式对肿瘤转移产生影响的机制.同时,本文也讨论了过往研究中存在的问题,如对细菌来源和定植部位的了解不足,以及研究深度和广度的缺乏.针对这些问题,本文提出了未来研究应该关注的方向,包括选择合适的细菌标志物、扩大细菌种类的研究范围,以及根据细菌特性设计药物靶点和药物载体,探讨了可能的临床转化方案,期望能为肿瘤转移的诊治提供新的思路和方法.

关键词：细菌肿瘤转移肿瘤细胞肿瘤微环境

METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 442-449页

作者：余玲张自力曾蓉张节王鹏潘万龙川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100 川北医学院附属医院老年科四川南充637100

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。

关键词：甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2 N6-甲基腺苷乙型肝炎病毒

以执业医师考试为导向的医学免疫学网络试题库建设与应用

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医学教育管理 2024年第3期10卷 303-307页

作者：陈建芳梅建军刘晓梅周蕾任可包头医学院基础医学与法医学院包头014040

医学免疫学是一门重要的医学基础课程,也是执业医师考试的考核内容。本文以执业医师考试为导向,采用考易网络题库与考试评价系统,从试题库的建设内容和题型方面进行医学免疫学网络试题库建设,目前试题库总题量达到2 400余题,逐步应用于... 详细信息

医学免疫学是一门重要的医学基础课程,也是执业医师考试的考核内容。本文以执业医师考试为导向,采用考易网络题库与考试评价系统,从试题库的建设内容和题型方面进行医学免疫学网络试题库建设,目前试题库总题量达到2 400余题,逐步应用于开设医学免疫学课程的考试,并根据临床医学和预防医学专业学生考试成绩,采用难度、区分度、信度等指标评价试卷质量,分析课程教学效果。在试题库的建设和应用过程中,需要教师不断探讨研究,更新和完善试题库,将试题库建设成为动态高效的课程考核工具。该试题库建成后,既有利于提高执业医师考试的通过率,也有利于实行考教分离,为培养新时代具有岗位胜任能力的医学人才奠定基础。

关键词：医学免疫学执业医师考试网络试题库

EFHD2调节NOX4/ROS通路启动糖代谢重编程促进乳腺癌进展的机制研究

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中国比较医学杂志 2024年

作者：徐明飞张怡康如意刘超越川北医学院基础医学院与法医学院人体解剖学教研室川北医学院临床医学院川北医学院基础医学院与法医学院免疫学教研室

目的基于NOX4/ROS信号通路探讨EFHD2影响乳腺癌发生进展的作用机制。方法将细胞分为NC-shRNA组和EFHD2-shRNA组，构建沉默EFHD2表达的慢病毒载体及其对照载体后转染乳腺癌细胞MDA-MB-23、MCF-7，qRT-PCR验证转染效率；CCK8检测细胞增... 详细信息

目的基于NOX4/ROS信号通路探讨EFHD2影响乳腺癌发生进展的作用机制。方法将细胞分为NC-shRNA组和EFHD2-shRNA组，构建沉默EFHD2表达的慢病毒载体及其对照载体后转染乳腺癌细胞MDA-MB-23、MCF-7，qRT-PCR验证转染效率；CCK8检测细胞增殖活性；平板克隆实验检测细胞集落形成能力；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡及ROS水平；qRT-PCR检测GLUT1、PDK1、PFK1、PKM2、PDH、LDHmRNA的表达；Westernblot检测Cleavedcaspase-3、MMP-2、NOX4蛋白的表达。结果与NC-shRNA组相比，EFHD2-shRNA组细胞中EFHD2的表达明显降低，细胞存活及其集落形成能力减弱；细胞凋亡率及促凋亡蛋白Cleavedcaspase-3的表达升高；细胞迁移距离缩短，细胞侵袭数及促迁移、侵袭蛋白MMP-2的表达降低；乳酸及GLUT1、PDK1、PFK1、PKM2、LDH的水平降低，ATP及PDH的水平升高；流式结果表明沉默EFHD2后ROS水平降低，NOX4蛋白下调。结论EFHD2可通过调节NOX4/ROS信号通路，抑制ROS生成，引起乳酸及葡萄糖堆积从而促进乳腺癌细胞凋亡，抑制细胞增殖、迁移及侵袭。

关键词：乳腺癌代谢重编程 NOX4/ROS信号通路 EFHD2 免疫逃逸

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基于磁共振成像技术的牙龄推断研究进展

法医学杂志 2024年第2期40卷 112-117页

作者：施蕾薛冶邱丽蓉鲁婷范飞周宇驰邓振华四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但... 详细信息

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但仍需进一步验证其准确性和适应性。本文综述了MRI技术在牙发育和年龄推断中的研究现状、研究瓶颈和局限性,为基于MRI技术的牙龄推断研究提供参考和借鉴。

关键词：法医人类学法医齿科学年龄推断磁共振成像牙龄牙发育综述

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黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺优化

中成药 2024年第6期46卷 1818-1823页

作者：李杰李越婷李慧贞张畅畅河南科技大学基础医学与法医学院河南洛阳471023

目的优化黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺。方法以葡萄糖-乳酸(1∶5)为低共熔溶剂。在单因素试验基础上,以提取时间、含水量、液料比为影响因素,生物碱得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间35... 详细信息

目的优化黄连生物碱超声辅助低共熔溶剂提取工艺。方法以葡萄糖-乳酸(1∶5)为低共熔溶剂。在单因素试验基础上,以提取时间、含水量、液料比为影响因素,生物碱得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为提取时间35 min,含水量26%,液料比33∶1,生物碱得率为7.22%。结论该方法稳定可靠,切实可行,可为黄连开发利用提供参考。

关键词：黄连生物碱超声提取工艺低共熔溶剂 Box-Behnken响应面法