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功能核酸在病原体检测中的应用

中国科学：化学 2022年第9期52卷 1502-1512页

作者：李久兴张子杰李应福麦克马斯特大学生物化学与生物医学系汉密尔顿加拿大

核酸(DNA和RNA)除了作为遗传信息的载体外,还具有催化反应和特异性识别等功能,因此被广泛应用于分析化学和生物检测中.本文系统阐述了本课题组近年来利用功能核酸检测病原微生物的主要研究成果,着重介绍了针对病原微生物的特异性脱氧核... 详细信息

核酸(DNA和RNA)除了作为遗传信息的载体外,还具有催化反应和特异性识别等功能,因此被广泛应用于分析化学和生物检测中.本文系统阐述了本课题组近年来利用功能核酸检测病原微生物的主要研究成果,着重介绍了针对病原微生物的特异性脱氧核糖核酸酶(DNAzyme)和适配体(aptamer)的筛选、基于功能核酸的生物传感器与检测方法的开发、以及功能核酸在快速检测SARS-CoV-2方面取得的进展,并在此基础上提出并展望了未来研究中的挑战.

关键词：功能核酸脱氧核糖核酸酶适配体病原微生物 SARS-CoV-2 生物传感器

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Bt水稻杂交育种中转基因的遗传分析

遗传 2000年第5期22卷 309-312页

作者：王忠华崔海瑞舒庆尧项友斌吴殿星高明尉夏英武成雄鹰 Illimar Altosaar 浙江大学原子核农业科学研究所杭州华家池310029 加拿大渥太华大学生物化学系

利用PCR、GUS染色和Western印迹杂交技术检测了Bt水稻杂交后代群体，发现在394株GUS阳性株中，共有392株表达Bt蛋白，协同表达株率达99.49％。由此表明，在杂交后代中报告基因Gus和目的基因cry1Ab紧密连锁遗传与表达。本试验还发现，在... 详细信息

利用PCR、GUS染色和Western印迹杂交技术检测了Bt水稻杂交后代群体，发现在394株GUS阳性株中，共有392株表达Bt蛋白，协同表达株率达99.49％。由此表明，在杂交后代中报告基因Gus和目的基因cry1Ab紧密连锁遗传与表达。本试验还发现，在BC1、BC1F2和粳粳交F2群体中转基因呈单基因显性遗传，而在籼粳交F2群体中偏离3:1分离。

关键词： Bt水稻转基因遗传分析杂交育种辅助选择

人体铜伴侣蛋白Atox1在大肠杆菌中的表达

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基础医学与临床 2001年第5期21卷 471-473页

作者：张雪峰高旭尹珅周虹 Narindrasorasak S Sarkar B 哈尔滨医科大学生物化学教研室哈尔滨150086 加拿大多伦多大学病童医院结构生物学与生物化学系

利用PCR技术扩增出人体转铜伴侣蛋白Atox1的cDNA片段 ,直接克隆到PCRII载体上 ,经DNA序列测定后 ,再插入到谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合表达载体PGEX 6p 2上 ,构成重组表达质粒PGEA ,将此质粒导入大肠杆菌 ,经IPTG诱导后获得PGEA融合... 详细信息

利用PCR技术扩增出人体转铜伴侣蛋白Atox1的cDNA片段 ,直接克隆到PCRII载体上 ,经DNA序列测定后 ,再插入到谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)融合表达载体PGEX 6p 2上 ,构成重组表达质粒PGEA ,将此质粒导入大肠杆菌 ,经IPTG诱导后获得PGEA融合蛋白的表达表达的融合蛋白经亲和层析。

关键词：转铜伴侣基因重组亲和层析融合蛋白大肠杆菌表达

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介孔炭作为加氢脱硫催化剂载体材料的研究

新型炭材料 2009年第4期24卷 333-343页

作者：谭正立肖惠宁张润铎 ZHANGZi-sheng SergeKaliaguine 加拿大新不仑瑞克大学化学工程系弗雷德里克顿新不仑瑞克加拿大E3B5A3 加拿大渥太华大学化学及生物工程系渥太华安大略加拿大K1N6N5 加拿大拉瓦尔大学化学工程系魁北克市魁北克加拿大G1V0A6

以介孔硅SBA-15为模板,焦糖和呋喃醇为碳源,通过多种浇注法制备介孔炭材料。采用低温氮吸附、透射电镜和X射线小角衍射分析模板及介孔炭的织构。结果显示合成的介孔炭成功地复制了SBA-15的结构。以制备的介孔炭作载体担载钴钼合成了加... 详细信息

以介孔硅SBA-15为模板,焦糖和呋喃醇为碳源,通过多种浇注法制备介孔炭材料。采用低温氮吸附、透射电镜和X射线小角衍射分析模板及介孔炭的织构。结果显示合成的介孔炭成功地复制了SBA-15的结构。以制备的介孔炭作载体担载钴钼合成了加氢脱硫催化剂,利用X射线能谱、透射电镜能量分布谱及一氧化氮化学吸附评估了催化剂的活性及活性点分布,结果表明介孔炭担载的催化剂活性高于活性炭担载的同类催化剂。

关键词：介孔炭加氢脱硫催化剂载体

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农杆菌介导Bt基因遗传转化高粱

生物工程学报 2009年第3期25卷 418-423页

作者：张明洲唐乔陈宗伦刘军崔海瑞舒庆尧夏英武 I.Altosaar 中国计量学院生命科学学院杭州310018 浙江大学原子核农业科学研究所杭州310029 渥太华大学生物化学系加拿大

高粱是全球仅次于小麦、水稻、玉米、大豆和马铃薯等的重要作物之一。以高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法和含有抗潮霉素和gus基因的双元载体将杀虫晶体蛋白基因cry1Ab导入高粱品种115、ICS21B和5-27,经Hyg筛选共获得21个... 详细信息

高粱是全球仅次于小麦、水稻、玉米、大豆和马铃薯等的重要作物之一。以高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法和含有抗潮霉素和gus基因的双元载体将杀虫晶体蛋白基因cry1Ab导入高粱品种115、ICS21B和5-27,经Hyg筛选共获得21个独立的转基因株系,52株转基因植株,平均转化率为1.9%。经PCR、Southern杂交和RT-PCR分析表明cry1Ab基因已整合入高粱基因组中并得到正确转录。Bt蛋白Westernblotting分析和ELISA定量测定显示,cry1Ab基因在转基因高粱植株中表达,但不同转基因植株表达量有差异。饲虫试验表明,转基因高粱对大螟(Sesamiainferens)具有一定抗性。

关键词： Bt基因农杆菌遗传转化高粱

关节力学负荷与骨关节炎的发生发展:太极拳在治疗康复中的应用（英文）

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天津体育学院学报 2014年第2期29卷 93-99页

作者：李静先加拿大渥太华大学

下肢骨关节炎是导致残疾的最常见疾病之一,也是对患者及家庭、医疗系统及社会带来最大影响的运动系统的主要疾患。骨关节炎是包括关节力学变化(如下肢骨骼力学轴线排列异常,关节负荷分布异常,活动过程中关节力矩异常)、韧带走向异常、... 详细信息

下肢骨关节炎是导致残疾的最常见疾病之一,也是对患者及家庭、医疗系统及社会带来最大影响的运动系统的主要疾患。骨关节炎是包括关节力学变化(如下肢骨骼力学轴线排列异常,关节负荷分布异常,活动过程中关节力矩异常)、韧带走向异常、软骨退化或软骨成分降解和肌肉神经控制功能异常等复合因素引起的全关节疾患。尽管其确切的发病机制仍不明了,关节生物力学在其发生和病程发展中的作用已为大量的前瞻性研究和持续数10年之久的长期追踪研究所证实。综述骨关节炎生物力学及病理机制的研究状况,生物力学干预在骨关节炎治疗康复中的应用,以及太极拳的生物力学特征及其在骨关节炎治疗康复中应用的最新研究进展。基于目前上述领域和太极拳生物力学特征的科学研究状况分析,以及美国风湿病学会在2012年发表的最新骨关节炎非手术和药物治疗指引中将太极拳列为膝骨关节炎运动干预方式之一所带来的国际影响,为了深入探索太极拳在下肢骨关节炎治疗康复效果的机制,以及发展有科学研究事实支持的太极拳运动干预康复方案,未来此领域的研究需要致力于研究骨关节炎患者身体活动时的关节生物力学变化,典型太极拳运动的生物力学特征,以及骨关节炎患者在太极拳运动干预过程中下肢关节力学的变化特征。

关键词：骨关节炎关节力学太极拳步态关节力矩

聚丙烯表面的生物相容性修饰:表面氨基放大还原胺化接枝磷酰胆碱

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化学学报 2005年第7期63卷 643-647,F009页

作者：宫永宽 WINNIK Francoise M 西北大学化学系西安710069 加拿大蒙特利尔大学化学系药学院

在氨气氛中对聚丙烯薄膜表面进行等离子处理,获得了不同浓度的表面氨基.表面氨基的数量经1,6-己二异氰酸酯键合三(2-氨乙基)胺可成倍增加.用还原胺化法将磷酰胆碱醛共价接枝到表面氨基上获得了磷酰胆碱改性的聚丙烯薄膜.X射线光电子能谱... 详细信息

在氨气氛中对聚丙烯薄膜表面进行等离子处理,获得了不同浓度的表面氨基.表面氨基的数量经1,6-己二异氰酸酯键合三(2-氨乙基)胺可成倍增加.用还原胺化法将磷酰胆碱醛共价接枝到表面氨基上获得了磷酰胆碱改性的聚丙烯薄膜.X射线光电子能谱(XPS)测定结果表明,接枝磷酰胆碱基团的表面覆盖率可达20%～40%.衰减全反射傅立叶变换红外(ATR-FTIR)和动态接触角测定结果也都说明磷酸胆碱基团被成功地接枝于聚丙烯表面.还原胺化法结合等离子处理及表面氨基放大技术,有望成为获取新型生物材料的一种有效途径.

关键词：生物相容性氨基 X射线光电子能谱(XPS) 胆碱接枝还原胺化等离子处理修饰己二异氰酸酯测定结果聚丙烯薄膜表面覆盖率动态接触角傅立叶变换衰减全反射薄膜表面放大技术生物材料胺化法碱改性氨乙基基团

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Bt水稻中cry1Ab基因的遗传分析

Acta Genetica Sinica 2001年第9期28卷 846-851页

作者：王忠华吴刚崔海瑞 Illimar Altosaar 夏英武舒庆尧浙江大学原子核农业科学研究所杭州310029 北京大学植物基因工程国家重点实验室北京100871 加拿大渥太华大学生物化学系

用ＰＣＲ、ＧＵＳ染色和Ｗｅｓｔｅｒｎ点杂交技术检测了Ｂｔ水稻杂交后代群体，在３９４株ＧＵＳ阳性株中，有３９２株表达Ｂｔ蛋白，协同表达株率达９９．４９％。由此表明，在杂交后代中报告基因ｇｕｓ和目的基因ｃｒｙ１Ａｂ紧密... 详细信息

用ＰＣＲ、ＧＵＳ染色和Ｗｅｓｔｅｒｎ点杂交技术检测了Ｂｔ水稻杂交后代群体，在３９４株ＧＵＳ阳性株中，有３９２株表达Ｂｔ蛋白，协同表达株率达９９．４９％。由此表明，在杂交后代中报告基因ｇｕｓ和目的基因ｃｒｙ１Ａｂ紧密连锁遗传与表达。ＧＵＳ组织染色和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测表明Ｂｔ水稻中的ＣｒｙｌＡｂ基因呈单位点显性基因遗传，且在有性世代中能稳定传递。还发现，在ＢＣ１、ＢＣ１Ｆ２和粳粳交Ｆ２群体中ＣｒｙｌＡｂ基因呈单位点显性基因遗传，而在籼粳交Ｆ２群体中偏离３∶１分离。

关键词： Bt水稻 crylAb基因遗传特点育种

Bt转基因水稻“克螟稻”杂交后代二化螟抗性研究初报

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作物学报 2000年第3期26卷 310-314页

作者：王忠华舒庆尧崔海瑞叶恭银吴殿星高明尉夏英武成雄鹰 Illimar Altosaar 浙江大学原子核农业科学研究所浙江杭州310029 浙江大学植物保护系浙江杭州310029 加拿大渥太华大学生物化学系

利用室内叶片快速鉴定法结合田间抗性调查 ,研究了粳型 Bt转基因水稻“克螟稻”与籼、粳稻杂交后代对二化螟 ( Chilo suppressalis)的抗性。结果显示 ,在与籼稻和粳稻的杂交后代 ( F1、F2 和 BC1)中 ,都出现了对二化螟表现高抗的植株。... 详细信息

利用室内叶片快速鉴定法结合田间抗性调查 ,研究了粳型 Bt转基因水稻“克螟稻”与籼、粳稻杂交后代对二化螟 ( Chilo suppressalis)的抗性。结果显示 ,在与籼稻和粳稻的杂交后代 ( F1、F2 和 BC1)中 ,都出现了对二化螟表现高抗的植株。用离体叶片法测定 ,4个组合 12 0株杂种 F1和 88株 GUS阳性( GUS+) BC1株与 30株克螟稻亲本相似 ,2天内对二化螟初孵幼虫的死亡率高达 10 0 .0 % ,而用相应组合的 GUS阴性 ( GUS-)株和非转基因亲本叶片饲喂的二化螟初孵幼虫 4天内的死亡率仅为 8.33%～ 2 2 .8%。此外 ,在未施用对鳞翅目害虫有毒性的农药的试验田 ,共调查 8个组合 70 7株 GUS+F2 植株和 7个组合 177株 GUS+BC1植株 ,仅有大约 1%的植株出现枯心和白穗 ;而对应的 4 0 5株 F2 和 182株 BC,GUS-株中分别有 99.3%和 99.5%出现了枯心。本实验的结果表明 ,应用杂交、回交常规育种方法将克螟稻的抗虫基因导入到新的推广水稻品种是可行的 ;同时也反映了报告基因 GUS仍可作为检测 cryl Ab的简便而有效的手段。

关键词： Bt水稻克螟稻 crylAb基因二化螟抗性