检索结果-南通市图书馆

同方期刊数据库

产气荚膜梭菌四环素耐药基因双重荧光定量PCR检测方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年

作者：欧兰欣叶碧锦孙铭飞戚南山李娟吕敏娜林栩慧蔡海明胡俊菁宋勇乐陈祥杰朱易斌尹理君张健騑廖申权张浩吉佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室

旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法，为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略。本研究针对tetA（P）和tetB（P）的保守序列设计引物和探针，构... 详细信息

旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法，为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略。本研究针对tetA（P）和tetB（P）的保守序列设计引物和探针，构建重组质粒，对退火温度和体系进行优化，同时采用药敏纸片琼脂扩散法测定菌株对四环素类药物的敏感性加以验证。结果发现，优化后的反应程序为95 ℃ 30 s；95 ℃ 5 s，56 ℃ 30 s，共 39个循环。使用该反应程序仅能扩增重组质粒，对照菌株无扩增曲线；组内变异系数小于1.3%，组间变异系数小于1.8%，重组质粒最低检测限度为102copies·μL－1。使用本方法对33份产气荚膜梭菌临床分离株样品进行耐药基因检测，同时进行药敏试验，发现本研究建立的检测方法对四环素耐药基因的检出率均为75.8%（25/33），且与药敏试验结果一致。综上，本研究建立了一种特异、敏感、重复性好的产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法。

关键词：产气荚膜梭菌四环素 tetA(P) tetB(P) 双重荧光定量PCR

鸡球虫病7价多表位嵌合重组抗原ET seven真核质粒的构建、表达及其初步功能分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年

作者：倪君丽刘欣超孙栋方肆云王定爱申翰钦严专强戚南山孙铭飞顾有方广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室温氏食品集团股份有限公司安徽科技学院动物科技学院

为构建以鸡柔嫩艾美耳球虫EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等入侵相关蛋白分子为抗原基础的多表位嵌合重组抗原ET seven真核表达质粒，同时验证其在DF-1细胞中的表达和通过不同辅助递送方式在鸡体内的表达及... 详细信息

为构建以鸡柔嫩艾美耳球虫EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等入侵相关蛋白分子为抗原基础的多表位嵌合重组抗原ET seven真核表达质粒，同时验证其在DF-1细胞中的表达和通过不同辅助递送方式在鸡体内的表达及其免疫功能。本研究利用生信分析获得7个抗原表位，分别提取柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段虫体总RNA，通过RT-PCR扩增获得EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等7个抗原的表位区域编码基因，构建基因图谱由公司合成以pcDNA3.1(+)为真核表达载体，构建真核表达质粒pcDNA3.1-ET seven；将鉴定阳性、测序正确的质粒pcDNA3.1-ET seven转染至DF-1细胞，利用RT-PCR和Western blot方法检测ET seven重组基因片段在DF-1细胞中的表达；以磷酸钙纳米颗粒作为辅助质粒递送佐剂检测pcDNA3.1-ET seven在鸡体内引起的细胞因子水平变化，间接ELISA检测特异性IgG抗体水平。结果显示：成功构建真核表达质粒pcDNA3.1-ET seven，RT-PCR和Western blot检测到ET seven的特异性表达，质粒通过磷酸钙纳米佐剂免疫鸡体后，检测细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ、CD-40均在三次免疫后7 d高水平表达，其中CD-40与IL-6的表达水平最高。pcDNA3.1-ET seven重组质粒结合磷酸钙佐剂肌肉注射二次免疫后7 d间接ELISA检测特异性IgG抗体呈阳性。结果表明，pcDNA3.1-ET seven重组质粒构建成功，在鸡体内有良好的免疫原性，为鸡球虫病的疫苗防控提供新的思路和技术支撑。

关键词：柔嫩艾美耳球虫多表位重组质粒真核表达 DNA疫苗

2023年江苏常州地区H9N2亚型禽流感病毒遗传演化与抗原性分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国家禽 2024年

作者：李玉冬张海涛罗燕周勇董金泽陈洪壮束思成陈雪张双玉刘晓妹杨亚军李荣杰夏福芳蒲娟罗坚强中国农业大学动物医学院兽医公共卫生安全全国重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室江苏立华牧业股份有限公司常州市动物疫病预防控制中心

试验旨在调查H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）在江苏省常州市的流行情况。2023年3—12月，在常州市所有辖区的交易平台、散养户、活禽市场、屠宰场等7种场所类型的147个采样场点开展H9N2亚型AIV流行病学调查，试验采... 详细信息

试验旨在调查H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）在江苏省常州市的流行情况。2023年3—12月，在常州市所有辖区的交易平台、散养户、活禽市场、屠宰场等7种场所类型的147个采样场点开展H9N2亚型AIV流行病学调查，试验采集鸡、鸭、鹅、鸽等咽拭子、组织样品以及环境拭子共计1 970份，进行AIV分离及其流行病学特征分析，并对分离的H9N2亚型AIV进行遗传演化、关键氨基酸与糖基化位点和抗原性分析。结果显示：共鉴定出73株H9N2亚型AIV，平均分离率为3.70%;4月和5月分离率较高，分别为7.07%和8.00%；分离地点中活禽市场和交易平台的分离率最高；H9N2亚型AIV在鸡、鸭、鸽、野鸟粪便和环境中均有分离，在环境和鸡中的分离率最高，分别为6.90%和4.15%；分离的H9N2亚型AIV属于欧亚谱系9.1分支中Group 2群，与2021—2023年多个地区人感染H9N2亚型AIV亲缘关系较近；与参考株序列相比，H9N2亚型AIV分离株HA蛋白的130-loop、150-loop及190-helix存在明显氨基酸多态性，但没有发现新的糖基化位点；H9N2亚型AIV分离株均属于当前优势流行的抗原群，尚未发生明显抗原漂移。综上所述，江苏常州地区H9N2亚型AIV流行的热点场所是活禽市场和交易平台，提示环境消毒是控制病毒传播和污染的关键手段；H9N2亚型AIV可能在野生禽类中流行，须减少家禽与野禽接触；并且H9N2亚型AIV分离株HA蛋白受体结构域变异可能对人间感染造成持续威胁，值得关注。

关键词： H9N2亚型禽流感活禽市场遗传演化抗原性江苏

PB2基因在流感病毒跨物种传播和哺乳动物适应性中的作用及机制研究进展

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国家禽 2024年

作者：郭雨欣周栋梁蒲娟张蕊国家兽医公共卫生安全重点实验室农业农村部禽流感等重大家禽疫病防控重点实验室中国农业大学动物医学院

近年来，随着禽流感病毒感染人病例的不断增加，对其跨物种传播和哺乳动物适应性的研究备受关注。作为RNA聚合酶复合体的重要组成部分，PB2蛋白在流感病毒转录复制和宿主适应性中发挥关键作用。PB2的特定氨基酸位点突变以及不同亚型流... 详细信息

近年来，随着禽流感病毒感染人病例的不断增加，对其跨物种传播和哺乳动物适应性的研究备受关注。作为RNA聚合酶复合体的重要组成部分，PB2蛋白在流感病毒转录复制和宿主适应性中发挥关键作用。PB2的特定氨基酸位点突变以及不同亚型流感病毒间的交换重组，能够改变病毒在宿主细胞中的聚合酶活性，进而影响病毒的宿主范围和致病性，促进病毒跨物种传播的能力。此外，PB2蛋白还通过与宿主关键因子的相互作用参与调控病毒对不同哺乳动物的宿主适应性。文章对PB2蛋白的结构和功能特征及其在哺乳动物适应性机制方面的最新研究进展进行归纳总结，为揭示流感病毒跨物种传播机制及相关防控手段的完善提供参考信息。

关键词：流感病毒 PB2基因跨物种传播哺乳动物适应性分子机制

H9N2亚型禽流感病毒PB2蛋白哺乳动物适应性变异的筛选与功能鉴定

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国家禽 2024年

作者：郭雨欣蒲娟国家兽医公共卫生安全重点实验室农业农村部禽流感等重大家禽疫病防控重点实验室(北京) 中国农业大学动物医学院

研究旨在鉴定H9N2亚型禽流感病毒PB2基因进化产生的哺乳动物适应性突变并明确其在哺乳动物宿主中的复制能力和致病性。试验通过建立中国源H9N2亚型禽流感病毒PB2氨基酸序列库、利用多态性分析以及聚合酶活性检测，筛选出PB2基因演化出... 详细信息

研究旨在鉴定H9N2亚型禽流感病毒PB2基因进化产生的哺乳动物适应性突变并明确其在哺乳动物宿主中的复制能力和致病性。试验通过建立中国源H9N2亚型禽流感病毒PB2氨基酸序列库、利用多态性分析以及聚合酶活性检测，筛选出PB2基因演化出的潜在适应性位点，并进一步利用哺乳动物细胞以及小鼠模型明确新突变的哺乳动物适应性。结果显示：PB2氨基酸序列中存在12个具有明显多态性的位点，其中PB2-340K、PB2-588V以及PB2-627V的变化趋势与自2015年起人感染病例增加呈正相关，并表现明显的人宿主偏好；这3个突变中，PB2-E627V显著增强了H9N2亚型禽流感病毒在人源293T细胞中聚合酶活性，并且显著提高了H9N2亚型禽流感病毒在哺乳动物细胞中的复制能力以及在小鼠中的病毒载量和致病性。以上研究表明，H9N2亚型禽流感病毒PB2蛋白表现出哺乳动物适应性进化特点，并且能够增强对小鼠的致病性，带来跨宿主感染风险。

关键词：禽流感病毒 H9N2 哺乳动物适应性 PB2基因 E627V 聚合酶活性

基因1型鹅星状病毒VP27蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2576-2584页

作者：向勇李林林张俊勤董嘉文黄允真翟颀徐志宏廖明孙敏华广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225

【目的】制备可特异性识别基因1型鹅星状病毒(Goose astrovirus genotype 1,GAstV-1)且与GAstV-2不发生交叉反应的多克隆抗体,以期为后续GAstV-1免疫检测技术的建立提供材料。【方法】通过比对GAstV-1与GAstV-2衣壳蛋白的氨基酸序列以... 详细信息

【目的】制备可特异性识别基因1型鹅星状病毒(Goose astrovirus genotype 1,GAstV-1)且与GAstV-2不发生交叉反应的多克隆抗体,以期为后续GAstV-1免疫检测技术的建立提供材料。【方法】通过比对GAstV-1与GAstV-2衣壳蛋白的氨基酸序列以寻找其差异较大的区域作为靶基因。对GAstV-1 GDYJ-21-01株VP27基因密码子进行偏嗜性优化合成,构建原核表达质粒pCZN1-GAstV-1 VP27,转化大肠杆菌Top10感受态细胞以诱导表达VP27蛋白;将纯化后的VP27蛋白免疫新西兰白兔后收获抗血清以制备GAstV-1 VP27多克隆抗体,通过间接ELISA和SDS-PAGE分析该纯化抗体的效价和纯度,并利用间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体的特异性。【结果】试验成功构建重组质粒pCZN1-GAstV-1 VP27;SDS-PAGE显示其表达的重组蛋白分子质量约为35 ku,主要以包涵体形式存在。间接ELISA试验结果显示,纯化后的GAstV-1 VP27多克隆抗体效价高达1∶9 841 500,纯度高于85%。IFA结果显示,GAstV-1 VP27多克隆抗体可特异性识别GAstV-1,且与GAstV-2无交叉反应。临床病料组织检测结果显示,GAstV-1核酸阳性的病料组织均可出现特异性荧光,而GAstV-2核酸阳性且GAstV-1核酸阴性的病料组织未出现荧光。【结论】本研究获得了高效价且可特异性识别GAstV-1(与GAstV-2无交叉反应)的VP27多克隆抗体,为建立鉴别诊断GAstV-1的抗原免疫检测技术奠定了基础。

关键词： 1型鹅星状病毒(GAstV-1) VP27 原核表达多克隆抗体

维普期刊数据库博看期刊

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

顶复门原虫多胺合成研究进展

动物医学进展 2024年第2期45卷 105-110页

作者：殷熙娟廖申权戚南山李娟吕敏娜蔡海明胡俊菁林栩慧宋勇乐张健騑刘文俊孙铭飞仲恺农业工程学院广东广州510225 广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东广州510640

多胺是一类聚阳离子脂肪族化合物,广泛存在于生物体内,其在顶复门原虫的生长、发育和繁殖等多个阶段发挥着重要作用。顶复门原虫的多胺合成途径存在多样性,其与宿主细胞的经典路径不同,且顶复门原虫多胺生物合成限速酶(鸟氨酸脱羧酶与S... 详细信息

多胺是一类聚阳离子脂肪族化合物,广泛存在于生物体内,其在顶复门原虫的生长、发育和繁殖等多个阶段发挥着重要作用。顶复门原虫的多胺合成途径存在多样性,其与宿主细胞的经典路径不同,且顶复门原虫多胺生物合成限速酶(鸟氨酸脱羧酶与S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶)的半衰期与宿主细胞限速酶的半衰期存在显著差异。因此,顶复门原虫多胺合成限速酶及转运载体成为抗原虫药物研发的候选靶标,以顶复门原虫多胺合成限速酶及多胺转运载体为靶标的抗寄生原虫抑制剂研究取得一定进展。论文综述了顶复门原虫多胺的生物学功能、生物合成途径及其抑制剂研究进展,以期为抗原虫药物靶标研究及新型抑制剂研发提供参考。

关键词：顶复门原虫多胺合成药物靶标

一例鸭坦布苏病毒与鸭圆环病毒混合感染樱桃谷肉鸭的病例报告

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广东畜牧兽医科技 2024年第3期49卷 71-76页

作者：潘彦林张俊勤孙敏华徐志宏廖明仲恺农业工程学院动物科技学院广东广州510225 广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640

2023年8月,广西某养鸭场鸭子突发软脚、腿部肌肉震颤等神经症状,为探究该场鸭群致病病原,对该鸭场的患病鸭进行调查。剖检结果显示:患病鸭肝脏轻度肿大、质脆,呈黄褐色,肾脏肿大。病理切片显示:肝细胞胞质中可见微小圆形空泡,可见少量淤... 详细信息

2023年8月,广西某养鸭场鸭子突发软脚、腿部肌肉震颤等神经症状,为探究该场鸭群致病病原,对该鸭场的患病鸭进行调查。剖检结果显示:患病鸭肝脏轻度肿大、质脆,呈黄褐色,肾脏肿大。病理切片显示:肝细胞胞质中可见微小圆形空泡,可见少量淤血;脾脏组织见较多细胞坏死,细胞核固缩。病原检测结果显示:鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭圆环病毒(DuCV)为阳性,细菌及其他病原检测结果为阴性。序列分析发现,该场流行的DTMUV与SCS01毒株遗传距离最近,属于Cluster 2.1;DuCV与山东毒株YF180401遗传距离最近,属于DuCV-1型,确定该养殖场鸭群突然发病为DTMUV混合感染DuCV所致。这两种病毒都是临床中常见危害鸭群的病原,但混合感染情况却少有报道。该研究旨在为我国今后开展DTMUV和DuCV的检测和综合防控提供参考。

关键词：鸭坦布苏病毒鸭圆环病毒混合感染樱桃谷肉鸭

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

4株禽腺病毒4型的分离及序列分析

广东畜牧兽医科技 2024年第4期49卷 43-48页

作者：邝瑞欢陈玫婷孟宪波王刚徐志宏谢梓民董嘉文广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640 清远市清城区动物卫生防疫中心广东清远511500

禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAdV-4)是家禽常见的传染病病原之一,可引起鸡心包积液-肝炎综合征,死亡率为20%-80%,给家禽养殖业造成巨大的经济损失。该研究分离鉴定了分别来自广东省和云南省的4株FAdV-4,通过对FAdV-4主要结构蛋白He... 详细信息

禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAdV-4)是家禽常见的传染病病原之一,可引起鸡心包积液-肝炎综合征,死亡率为20%-80%,给家禽养殖业造成巨大的经济损失。该研究分离鉴定了分别来自广东省和云南省的4株FAdV-4,通过对FAdV-4主要结构蛋白Hexon基因和Fiber-2基因的全基因扩增及序列分析,结果显示,4株FAdV-4分离株(分别命名为JM、QY、FS和YN)Hexon基因和Fiber-2基因的核苷酸序列相似性均为100%。Hexon基因和Fiber-2基因系统进化树显示,本研究分离的4株FAdV-4均位于I群禽腺病毒的C种,属于禽腺病毒4型分支,与我国流行的FAdV-4亲缘关系较近。该研究为探究目前流行的FAdV遗传进化关系提供了参考。

关键词：禽腺病毒4型病毒分离 Hexon基因 Fiber-2基因序列分析