检索结果-南通市图书馆

宁夏两家猪场猪萨佩罗病毒的检测与多样性分析

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畜牧与兽医 2020年第4期52卷 80-85页

作者：董馨燕超李勇何彪蔡祥龙孙鑫鹏孔云逸许立华宁夏大学宁夏银川750021 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所狂犬病oie参考试验室吉林长春130000

为了解宁夏地区猪群中萨佩罗病毒(PSV)的感染流行情况,本研究通过RT-PCR的方法对不同区域的2个规模化养猪场的160份临床健康猪咽拭子和肛拭子样品进行了检测。试验表明,所检的2个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为61.25%,其中咽拭... 详细信息

为了解宁夏地区猪群中萨佩罗病毒(PSV)的感染流行情况,本研究通过RT-PCR的方法对不同区域的2个规模化养猪场的160份临床健康猪咽拭子和肛拭子样品进行了检测。试验表明,所检的2个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为61.25%,其中咽拭子检出率为7.5%,肛拭子猪检出率为58.75%。试验结果表明PSV在宁夏地区普遍存在。

关键词：萨佩洛病毒感染流行阳性率

非洲猪瘟病毒p30和pK205R双抗原间接ELISA检测方法的建立

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中国兽医科学 2024年

作者：何佳依邹艳丽王燕刘珊苗雨润任炜杰王振忠白昀陈欢贾红郑龙三吴晓东冯志新钱莺娟中国农业科学院北京畜牧兽医研究所南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室农业部动物细菌学重点实验室中国动物卫生与流行病学中心国家非洲猪瘟参考实验室江苏省农业科学院兽医研究所

为建立一种可靠、快速的血清学检测方法，以非洲猪瘟病毒（ASFV）结构蛋白p30和非结构蛋白pK205R作为包被抗原，建立了一种双抗原间接ELISA方法，用于检测ASFV抗体。结果表明，该方法与伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原... 详细信息

为建立一种可靠、快速的血清学检测方法，以非洲猪瘟病毒（ASFV）结构蛋白p30和非结构蛋白pK205R作为包被抗原，建立了一种双抗原间接ELISA方法，用于检测ASFV抗体。结果表明，该方法与伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体、猪圆环病毒和猪瘟病毒等常见猪源病原阳性血清无交叉反应；对ASFV阳性血清的敏感性能达到1︰12800；批内变异系数为7.95%，批间变异系数为9.18%，均小于10%。利用该方法与***商品化ELISA试剂盒分别检测130份临床猪血清，其阳性符合率为92.19%，阴性符合率为86.36%，总符合率为89.23%。综上所述，本研究成功建立了ASFV p30和pK205R双抗原间接ELISA检测方法，为检测猪血清中ASFV特异性抗体提供了新的技术支持。

关键词：非洲猪瘟病毒 p30蛋白 pK205R蛋白间接ELISA

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腺病毒诊断方法的研究进展

中国病原生物学杂志 2021年第2期16卷 241-244,F0004页

作者：冯冠榕田丽平鲁会军金宁一李楠肖朋朋温州大学病毒学研究所浙江温州325035 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

腺病毒(adenovirus,AdV)可引发人兽共患的急性传染病。优化检测技术对该病毒早发现、早确诊、早治疗的防控具有重要意义。本文总结了近年来AdV的检测技术与方法,从病毒分离鉴定、形态学观察、核酸检测、抗原检测及特异性抗体检测等5个... 详细信息

腺病毒(adenovirus,AdV)可引发人兽共患的急性传染病。优化检测技术对该病毒早发现、早确诊、早治疗的防控具有重要意义。本文总结了近年来AdV的检测技术与方法,从病毒分离鉴定、形态学观察、核酸检测、抗原检测及特异性抗体检测等5个方面分别介绍数种诊断方法,涉及科研、临床及养殖等多个领域,为该病毒的防控提供检测技术参考。

关键词：腺病毒实验室诊断人兽共患病综述

表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定

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微生物学报 2007年第2期47卷 335-339页

作者：赵忠鹏夏咸柱扈荣良谢之景闫芳黄耕杨松涛军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein,Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine adenovirus type2,CAV2)骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPo... 详细信息

为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein,Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine adenovirus type2,CAV2)骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPoly2-CAV2-ΔE3-Rgp,释放其基因组,转染MDCK细胞系,获得E3缺失区(Deletion of early protein3,ΔE3)含有Rgp表达盒的重组病毒CAV2-ΔE3-Rgp。该重组病毒能在MDCK细胞上产生典型的腺病毒细胞病变。通过酶切、PCR、基因测序,表明该重组病毒含有完整的Rgp表达盒。通过RT-PCR、Western blot等检测,表明该重组病毒能够表达Rgp抗原。用该重组病毒免疫犬,3次免疫后,可以诱导犬产生特异的抗CAV2HI抗体,其效价超过1∶256和抗狂犬病病毒(Rabies virus,RV)中和抗体,其效价超过0.50IU/mL。试验结果表明,获得的重组病毒免疫犬后,能够产生抗狂犬病毒和腺病毒的高效价保护性抗体,是一种有潜力的犬科动物狂犬病毒腺病毒二联疫苗候选株。

关键词：狂犬病毒犬2型腺病毒

NRF2激动剂衣康酸4-辛酯对猪伪狂犬病病毒的抑制作用研究

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中国兽医科学 2024年

作者：方春艳杨发誉朱紫祥郑海学包世俊魏衍全张石磊甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心

为筛选高效抑制猪伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus，PRV）的小分子抑制剂，首先利用流式细胞分析技术结合小分子药物库筛选出对PRV具有高效抑制活性的小分子药物，并利用CCK-8法检测其对PK15细胞活力的影响。其次，利用Western-blot检... 详细信息

为筛选高效抑制猪伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus，PRV）的小分子抑制剂，首先利用流式细胞分析技术结合小分子药物库筛选出对PRV具有高效抑制活性的小分子药物，并利用CCK-8法检测其对PK15细胞活力的影响。其次，利用Western-blot检测PRVgB蛋白、TCID50测定PRV滴度等方法检测小分子药物对PRV的抑制作用。最后，利用Western-blot检测小分子药物抑制PRV生命周期的具体阶段。结果显示，流式细胞术分析筛选出的对PRV抑制最明显的3种小分子药物中，CyanosafracinB、Staurosporine对PK15细胞有很强的细胞毒性，而衣康酸4-辛酯（4-OI）在300μmol/L的浓度下对PK15细胞基本无毒性。4-OI对不同MOI的PRV均表现出较强的抑制作用，表现为PRV子代病毒滴度的降低、PRVgB蛋白的表达水平下降，并呈剂量依赖性。4-OI及其靶蛋白Nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2（NRF2）能够抑制PRV在细胞内的复制，而不影响PRV吸附PK15细胞及其内化过程。本研究表明4-OI是一种潜在的高效抑制PRV的小分子药物，为PRV防控提供了新的参考依据。

关键词：药物筛选衣康酸4-辛酯(4-OI) 猪伪狂犬病病毒(PRV) 抗病毒作用

狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究

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中国人兽共患病杂志 2004年第12期20卷 1075-1078页

作者：袁慧君扈荣良张守峰包世俊涂长春军事医学科学院军事兽医研究所

目的　检测狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”基因疫苗及IL - 18在犬体内的免疫效果 ,并确定不同包裹剂对基因疫苗免疫效果的影响。方法　本试验以 pIRES1neo和人用灭活苗分别作为阴、阳性对照 ,以糖 /核蛋白双基因共表达载体 pIGN单独或与I... 详细信息

目的　检测狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”基因疫苗及IL - 18在犬体内的免疫效果 ,并确定不同包裹剂对基因疫苗免疫效果的影响。方法　本试验以 pIRES1neo和人用灭活苗分别作为阴、阳性对照 ,以糖 /核蛋白双基因共表达载体 pIGN单独或与IL - 18的真核表达载体pIIL18混合 ,以司苯 -甘油混合或以生理盐水溶液形式 ,按每条犬 2 0 0 μgDNA/ml,接种 3次 (其中 1组第 3次加强免疫时采用浓缩的狂犬病灭活苗 ) ,间隔 2周的免疫程序 ,经股四头肌进行注射免疫。通过间接ELISA、细胞中和试验及淋巴细胞转化试验分别检测体液和细胞免疫水平。结果与结论　结果显示 ,1.所有试验组在第 3次加强免疫后特异性抗体和中和抗体水平显著高于阴性对照组 ;pIGN pIIL18组诱导的细胞免疫水平高于无 pIIL18的 pIGN免疫组 ;2 .以司苯 -甘油作为包裹剂的基因疫苗诱导产生的免疫应答水平与裸质粒 (生理盐水溶液 )形式的基因疫苗间无显著差异 ;3.以糖 /核蛋白二价基因疫苗pIGN作为基础免疫 ,再以狂犬病浓缩灭活苗加强免疫后 ,能迅速诱导较高的体液免疫应答水平。以上结果说明 ,狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”DNA疫苗具有实际应用于免疫预防的潜力。

关键词：狂犬病病毒糖/核蛋白DNA疫苗 IL-18 犬免疫

狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗田间免疫效果评定

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中国兽医学报 2007年第2期27卷 195-199页

作者：肖跃强李海涛刘澜张守峰扈荣良军事医学科学院军事兽医研究所

以狂犬病病毒糖、核蛋白'二价'DNA疫苗pVGN免疫3月龄至8岁龄家犬302条,分为2组:Ⅰ组201条,两侧股内侧肌注;Ⅱ组101条,单侧股内侧肌加单侧耳廓皮内联合注射.免疫3次,剂量为每条犬每次300μg,于试验的0d和35d分别进行.三免后21d用间接ELIS... 详细信息

以狂犬病病毒糖、核蛋白'二价'DNA疫苗pVGN免疫3月龄至8岁龄家犬302条,分为2组:Ⅰ组201条,两侧股内侧肌注;Ⅱ组101条,单侧股内侧肌加单侧耳廓皮内联合注射.免疫3次,剂量为每条犬每次300μg,于试验的0d和35d分别进行.三免后21d用间接ELISA检测特异性抗体,Western-blot分析抗体组成,间接免疫荧光和小鼠中和试验测定抗体中和效价.结果显示,三免后抗体阳转率为58%,组间抗体水平差异不显著(P＞0.05),机体产生了抗糖蛋白、核蛋白2种特异性抗体,抗体稀释8～512倍后,每50μL可以中和100TCID50狂犬病病毒SRV9,个别稀释到2048倍仍具有中和作用,抗体稀释8～16倍后每15μL可中和120MICLD50狂犬病病毒CVS,少部分犬三免后抗体稀释16～32倍后能中和300MICLD50狂犬病病毒CVS.说明该疫苗具有良好的免疫原性,且诱生的抗体能发挥病毒中和作用.

关键词：狂犬病 DNA疫苗田间免疫 ELISA 间接免疫荧光小鼠中和试验

几种理化因子对狂犬病病毒分离株感染力影响的再检测

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中国生物制品学杂志 2011年第1期24卷 45-47页

作者：潘铁骊张菲张守峰扈荣良军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

目的分析几种理化因子对狂犬病病毒街毒分离株感染力的影响。方法将2006年分离的1株狂犬病街毒BD06株适应细胞后的第18代毒株暴露于不同的理化条件下,通过接种BHK-21细胞测定其病毒滴度(TCID50),观察其感染力的变化。结果 BD06株狂犬... 详细信息

目的分析几种理化因子对狂犬病病毒街毒分离株感染力的影响。方法将2006年分离的1株狂犬病街毒BD06株适应细胞后的第18代毒株暴露于不同的理化条件下,通过接种BHK-21细胞测定其病毒滴度(TCID50),观察其感染力的变化。结果 BD06株狂犬病病毒在100℃作用10 s和56℃作用2 min可以完全灭活,在37℃可存活6 d,4℃可存活2周,-20℃以下可存活半年以上;病毒置紫外线灯下30 cm处2 min内全部被灭活;在pH 6～10的中性环境下能够存活,在pH 5以下的弱酸性和pH 11以上的碱性环境中,10 min内可完全灭活;病毒对胰酶稳定;30%以上的丙酮在20 min,2倍体积的氯仿在5 min,75%的乙醇在2 min,0.05%的甲醛在6 h,10%的甲醛在5 min内均可将病毒全部灭活。结论分析了几种理化因子对狂犬病病毒BD06株感染力的影响,为生产实践中灭活狂犬病病毒或消毒提供了参考。

关键词：狂犬病病毒理化因子病毒感染力

新疆维吾尔自治区动物狂犬病流行特征及其毒株遗传进化分析

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病毒学报 2019年第3期35卷 479-485页

作者：王宇洋艾日登才次克陈卫东许炜迪刘婷芳冯华超涂忠忠涂长春古丽娜尔薛文美热木古丽·巴依待拉提苏晓慧张静王文冯烨军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所新疆维吾尔自治区动物卫生监督所吉林农业大学

新疆维吾尔自治区多年来一直没有狂犬病的报道,直到2013年经实验室确诊在塔城市发生野生动物咬伤导致的羊狂犬病疫情。为了解我国新疆维吾尔自治区动物狂犬病的流行情况,本研究从2014年起在新疆维吾尔自治区开展动物狂犬病流行病学监测... 详细信息

新疆维吾尔自治区多年来一直没有狂犬病的报道,直到2013年经实验室确诊在塔城市发生野生动物咬伤导致的羊狂犬病疫情。为了解我国新疆维吾尔自治区动物狂犬病的流行情况,本研究从2014年起在新疆维吾尔自治区开展动物狂犬病流行病学监测,以探讨新疆维吾尔自治区动物狂犬病的流行特点及其与周边省份和接壤国家狂犬病流行之间的关系。截止2018年底,采用直接免疫荧光试验(DFA),主动监测365份犬及69份蝙蝠样品;发病动物检测牛、羊、骆驼等家畜及流浪犬和野生狐狸样品9份。对确诊的阳性样品进行狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)N基因全长扩增,并与周边省份和接壤国家的RABV毒株进行系统进化分析,结果表明新疆维吾尔自治区的RABV均为世界群草原型亚群,与我国内蒙古自治区、蒙古、哈萨克斯坦和俄罗斯的毒株同源性较高,为96.9%～99.7%。这表明野生动物狂犬病在上述地区已经形成传播圈。为有效控制新疆维吾尔自治区狂犬病疫情,应加强当地犬群的大规模免疫,同时应加强动物狂犬病监测力度。

关键词：狂犬病狂犬病病毒(RABV) 草原型遗传进化分析