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膜表达IL-21的饲养层细胞对NK细胞体外扩增的影响

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中国实验血液学杂志 2024年第5期32卷 1578-1584页

作者：徐振钊张学华赵玲萍李高桦崔甜甜王晓玲李璇臧茹歌岳文王亚楠李国新习佳飞南方医科大学第一临床医学院南方医院胃肠肿瘤精准医学重点实验室普外科广东省重点实验室广东广州510515 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

目的:探究膜表达IL-21的饲养层细胞对NK细胞体外扩增的影响。方法:通过电转法构建膜表达IL-21的K562稳转细胞系,细胞灭活后与NK细胞共培养,观察NK细胞增殖情况。通过乳酸脱氢酶(LDH)和干扰素-γ(IFN-γ)释放实验检测扩增获得的NK细胞体... 详细信息

目的:探究膜表达IL-21的饲养层细胞对NK细胞体外扩增的影响。方法:通过电转法构建膜表达IL-21的K562稳转细胞系,细胞灭活后与NK细胞共培养,观察NK细胞增殖情况。通过乳酸脱氢酶(LDH)和干扰素-γ(IFN-γ)释放实验检测扩增获得的NK细胞体外杀伤功能。构建NOD/SCID小鼠异种移植肠癌肿瘤模型,设置空白对照组、NK细胞组和扩增NK细胞组,检测扩增NK细胞体内肿瘤杀伤功能。结果:通过电转法成功构建了膜表达IL-21的K562细胞。与膜表达IL-21的K562细胞共培养17 d后,NK细胞的扩增倍数可达700倍,与对照组相比扩增能力明显增强(P肿瘤细胞杀伤实验检测结果显示,NK细胞和扩增后的NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用无明显差异,对小鼠体内肿瘤的杀伤效果也无明显差异。结论:膜表达IL-21的K562细胞可显著增强NK细胞的体外扩增能力,但不影响NK细胞的体内外杀伤功能,可用于后续NK细胞的体外规模化扩增。

关键词： NK细胞 K562细胞体外扩增白介素-21

姜黄素纳米晶注射液联合损伤控制性外科对高原寒冷环境腹部火器伤救治的实验研究

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医学研究与战创伤救治 2024年第3期37卷 246-253页

作者：孙赳杨雪李佳佳屈金权杨欣悦郑爱萍刘江伟新疆医科大学研究生学院乌鲁木齐830054 新疆军区总医院新疆特殊环境医学重点实验室乌鲁木齐830000 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850

目的观察姜黄素纳米晶注射液(CNI)、损伤控制性外科(DCS)和CNI联合DCS治疗对模拟高原寒冷环境下猪腹部肠管火器贯通伤的救治效果。方法40只健康长白仔猪,随机数字表法分为4组,每组10只,对照组为高原致伤组(HI),实验组分别为高原致伤+CN... 详细信息

目的观察姜黄素纳米晶注射液(CNI)、损伤控制性外科(DCS)和CNI联合DCS治疗对模拟高原寒冷环境下猪腹部肠管火器贯通伤的救治效果。方法40只健康长白仔猪,随机数字表法分为4组,每组10只,对照组为高原致伤组(HI),实验组分别为高原致伤+CNI治疗组(HIC)、高原致伤+DCS治疗组(HID)、高原致伤+DCS+CNI治疗组(HDC)。高原寒冷环境猪腹部火器肠管贯通伤模型建立:仔猪放入模拟高原寒冷环境的西北地区特殊环境人工实验舱48 h,并使用手枪射击右侧腹部。HIC组伤后2、8、16 h分别予以CNI静脉输注,此后每天输注3次。HID组伤后4 h予以DCS治疗。HDC组伤后CNI输注同HIC组,并于伤后4 h行DCS治疗。分别对比手术相关指标,术后并发症,伤后不同时间血液炎症相关指标、肝功能指标、24 h生命体征。结果HIC组较HI组血液学炎症指标改善,生存时间延长(P0.05)。HID组和HDC组的手术时间、术中失血量、术中补液量、麻醉复苏时间、首次排便时间差异无统计学意义(P>0.05)。伤后HIC组、HID组、HDC组比HI组的白细胞、ALT、AST、肿瘤坏死因子-α、IL-6水平低,且HDC组更明显(P0.05)。结论CNI联合损伤控制性外科可能是高原寒冷环境腹部火器伤救治的有效方法。

关键词：损伤控制性外科姜黄素纳米晶注射液高原寒冷环境腹部火器伤

PTBP1通过调控FGFR2的可变剪接促进肝癌的发展

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遗传 2024年第1期46卷 46-62页

作者：陈昱颖张倩桂梦会冯岚曹鹏博周钢桥南华大学衡阳医学院衡阳421001 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所医学蛋白质组全国重点实验室国家蛋白质科学中心北京100850 四川大学华西医院转化医学国家重大科技基础设施成都610000 南京医科大学公共卫生学院南京211166

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是原发性肝癌的主要类型,是一种早期无明显症状、易发生转移、存活率低的恶性肿瘤。多聚嘧啶区结合蛋白1 (polypyrimidine tract binding protein 1,PTBP1)是一种重要的RNA结合蛋白,可诱导促癌... 详细信息

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是原发性肝癌的主要类型,是一种早期无明显症状、易发生转移、存活率低的恶性肿瘤。多聚嘧啶区结合蛋白1 (polypyrimidine tract binding protein 1,PTBP1)是一种重要的RNA结合蛋白,可诱导促癌剪接事件的发生。虽然PTBP1在肝癌细胞中的促癌功能已被证实,但是其介导的促癌可变剪接事件及作用机制尚未得到完全解析。本文利用免疫共沉淀联合质谱分析发现与PTBP1结合的蛋白复合体显著富集于编码成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)的基因可变剪接调控过程。通过RNA免疫共沉淀和定量PCR实验,证实PTBP1可显著下调肝癌细胞中FGFR2-IIIb异构体的水平,上调FGFR2-IIIc异构体的水平,促进FGFR2-IIIb向FGFR2-IIIc的异构体转换。随后,通过CCK-8、transwell和平板克隆实验,在肝癌细胞系HepG2和Huh7中评价了FGFR2-IIIb和FGFR2-IIIc的肿瘤生物学功能。结果显示FGFR2-IIIb发挥抑癌功能,而FGFR2-IIIc发挥促癌功能。机制研究证实,FGFR2-IIIb向FGFR2-IIIc异构体的转换显著促进肝癌细胞的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymaltransformation,EMT)及FGFR下游ERK和AKT信号通路的活化。本研究揭示了PTBP1促进肝癌进展的分子调控机制,为肝癌的防治提供了新的理论依据。

关键词：肝细胞癌 PTBP1 可变剪接 FGFR2 上皮-间充质转化

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声遗传学及其在军事医学中的应用

解放军医学杂志 2024年第3期49卷 360-366页

作者：庄滢潭罗博煜张晓东刘拓宇范欣悦夏国华袁清郑斌滕越军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 中部战区陆军第八十一集团军陆航第八十一旅北京101114 解放军总医院第三医学中心泌尿外科北京100039 天津大学脑科学与神经工程天津重点实验室医学工程与转化医学研究院天津300072

声遗传学是指利用声波激活细胞表面的机械敏感性离子通道(MSCs)蛋白,调控细胞行为及功能的新兴合成生物学技术。由于MSCs系统在细胞中广泛存在,且声遗传学具有无创性、强穿透性、高安全性、高精确度等优势,使得声遗传学在生物医学基础... 详细信息

声遗传学是指利用声波激活细胞表面的机械敏感性离子通道(MSCs)蛋白,调控细胞行为及功能的新兴合成生物学技术。由于MSCs系统在细胞中广泛存在,且声遗传学具有无创性、强穿透性、高安全性、高精确度等优势,使得声遗传学在生物医学基础研究与临床应用等领域极具发展潜力,尤其在神经元调控、肿瘤机制研究、声动力治疗及听力损伤等方面。本文对声遗传学的基本原理、发展现状及其在噪声性听力损失防治研究中的应用进行综述,并总结和分析当前面临的挑战和未来发展方向,为声遗传学在军事医学领域的进一步深入研究和发展提供参考。

关键词：声遗传学合成生物学机械敏感离子通道超声响应军事医学

高毒力且高耐药铜绿假单胞菌感染小鼠肺炎模型的构建与特征分析

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军事医学 2024年第2期48卷 101-107页

作者：王林张再青陈方舟吴妮尔周冬生胡凌飞军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071 解放军总医院京北医疗区北京100094

目的选用高毒力且高耐药铜绿假单胞菌(PA)F291007株建立C57BL/6J小鼠气溶胶吸入感染肺炎模型,并研究该模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法首先,对F291007株进行分离和鉴定。其次,将菌液经液体气溶胶肺递送途径感染小鼠建立肺炎感... 详细信息

目的选用高毒力且高耐药铜绿假单胞菌(PA)F291007株建立C57BL/6J小鼠气溶胶吸入感染肺炎模型,并研究该模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法首先,对F291007株进行分离和鉴定。其次,将菌液经液体气溶胶肺递送途径感染小鼠建立肺炎感染模型。在感染过程中,观察小鼠状态及存活状况,检测主要脏器的细菌载量、组织病理和细胞因子变化。最后对关键细胞因子进行封闭处理,观察小鼠存活情况。结果成功分离鉴定F291007株。致死剂量感染小鼠后死亡时间集中在1 d内。亚致死剂量感染小鼠后,机体内大量免疫细胞发挥吞噬、杀伤入侵病原体作用,表现为肺部细菌被快速清除,细菌载量随时间延长呈指数下降。肺部病理改变以1~3 d最为严重,之后逐渐恢复。感染后小鼠肺泡灌洗液和血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-17A和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在1~3 d分泌显著升高。抗体封闭3种细胞因子后,感染小鼠存活率出现显著下降。结论成功构建了小鼠PA吸入感染肺炎恢复模型,并通过多种指标明确了1~3 d是小鼠感染后的免疫应答关键期。该小鼠模型可用于深入开展高毒力且高耐药PA吸入感染肺炎的发病机制、免疫调控、治疗评价等研究,可为开发新型治疗手段提供重要的实验基础,具有良好的应用价值。

关键词：铜绿假单胞菌肺部感染气溶胶小鼠模型

补肾活血方对帕金森病模型小鼠回肠组织TLR/NF-κB通路及肠道菌群的影响

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中医杂志 2024年第10期65卷 1038-1045页

作者：齐小荣郝斐然汤响林黎发根王雨佳王亮谌盈帆杨明会李敏中国人民解放军总医院第六医学中心中医医学部北京海淀100048 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院

目的从肠道菌群探讨补肾活血方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法将72只雄性C57/BL6J小鼠随机分为空白组、模型组、美多芭组及补肾活血方低、中、高剂量组,每组12只。空白组小鼠腹腔注射10 ml/kg生理盐水,其余各组小鼠采用腹腔注射... 详细信息

目的从肠道菌群探讨补肾活血方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法将72只雄性C57/BL6J小鼠随机分为空白组、模型组、美多芭组及补肾活血方低、中、高剂量组,每组12只。空白组小鼠腹腔注射10 ml/kg生理盐水,其余各组小鼠采用腹腔注射浓度为3 mg/ml的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)30 mg/kg诱导PD小鼠模型,均每天1次,连续7天。造模成功后,补肾活血方低、中、高剂量组分别给予补肾活血方7.5、15、30 g/(kg·d)灌胃,美多芭组给予多美多芭片112.5 mg/(kg·d)灌胃,空白组和模型组予15 ml/(kg·d)蒸馏水灌胃,均每天灌胃1次,连续14天。采用爬杆实验、转棒实验、抓力实验和负重游泳实验评估小鼠行为学指标;16S rRNA高通量测序技术分析各组小鼠肠道菌群改变;Western Blot法测定小鼠回肠组织Toll样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)通路炎症因子[包括Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)]蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠爬杆触底时间延长,抓力减小,转棒持续时间和游泳持续时间缩短,回肠组织中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-17蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,美多芭组和补肾活血方低、中、高剂量组爬杆触底时间缩短,抓力增加,美多芭组和补肾活血方高剂量组转棒持续时间延长,回肠组织TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-17蛋白表达均降低,而仅有补肾活血方高剂量组游泳持续时间延长(P<0.05或P<0.01)。与补肾活血方低剂量组比较,补肾活血方中、高剂量组爬杆触底时间缩短(P<0.05或P<0.01);补肾活血方高剂量组抓力增加,TLR2、TLR4、IL-17蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。肠道菌群结果显示,与空白组比较,模型组Dominance指数、Pielou_e指数、Shannon指数、Simpson指数差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,美多芭组Shannon指数、Chao1指数、Observed_otus指数,以及补肾活血方高剂量组Chao1指数、Observed_otus指数、Dominance指数、Pielou_e指数、Shannon指数、Simpson指数差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在门水平上,各组差异具有统计学意义的菌门相对丰度类别包括变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门(P<0.05或P<0.01);在属水平上,各组差异具有统计学意义的菌属相对丰度类别包括Muribaculaceae、阿克曼菌属、幽门螺杆菌(P<0.05或P<0.01)。结论补肾活血方治疗PD的可能作用机制是通过重构紊乱的肠道菌群结构,减轻炎症反应进而达到改善PD运动功能的目的。

关键词：帕金森病补肾活血方肠道菌群炎症反应 Toll样受体核因子κB

患者来源肾盂癌类器官模型的构建及其在化疗药敏反应中的应用

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生物工程学报 2024年第7期40卷 2211-2222页

作者：刘晓青李学超马洁张继泉朱云平河北大学生命科学学院河北保定071002 军事医学研究院生命组学研究所国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心医学蛋白质组全国重点实验室北京102206 解放军总医院第五医学中心北京100700

肾盂癌是一种较为常见的上尿路上皮癌,由于缺乏理想的体外模型,严重阻碍了该类疾病治疗策略研究的进展。本研究基于肾盂癌患者来源肿瘤组织样本,建立肾盂癌类器官培养方法,并基于肾盂癌类器官构建肿瘤化疗药物反应模型。通过免疫组化和... 详细信息

肾盂癌是一种较为常见的上尿路上皮癌,由于缺乏理想的体外模型,严重阻碍了该类疾病治疗策略研究的进展。本研究基于肾盂癌患者来源肿瘤组织样本,建立肾盂癌类器官培养方法,并基于肾盂癌类器官构建肿瘤化疗药物反应模型。通过免疫组化和荧光实验证实,培养获得的肾盂癌类器官核异型性明显,与亲本肾盂癌组织一致;肾盂癌类器官中肿瘤标志分子CD44和细胞增殖标志分子Ki67均呈强阳性,表明类器官富集肿瘤干细胞,具有较强增殖能力。药物反应实验显示肾盂癌类器官对吡柔比星高度敏感,杀伤作用明显。本研究成功建立了肾盂癌类器官体外培养体系,并进行了初步体外药敏试验,为以肾盂癌为代表的上尿路上皮癌的个体化诊疗提供了新的体外实验模型。

关键词：肾盂癌类器官肿瘤干细胞药物测试

亚甲基四氢叶酸脱氢酶2是异质性细胞叠套结构形成的负调控分子

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第6期40卷 819-826页

作者：冯鹏飞刘辰瑜黄一诺孙卓然张揚易黄红艳王晨曦王小宁解放军医学院研究生院北京100853 解放军总医院第二医学中心老年医学研究所衰老与相关疾病研究北京市重点实验室国家老年疾病临床医学研究中心北京100853 军事医学研究院生物工程研究所北京100071 首都医科大学附属北京世纪坛医院肿瘤治疗性疫苗北京市重点实验室北京100038

异质性细胞叠套结构(heterotypic cell-in-cell structure,heCICs)介导独特的非自主性细胞死亡,广泛参与肿瘤发生、发展和临床预后等多种重要的病理学过程。亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(methylenetetrahydrofolata dehydrogenase 2,MTHFD2)作为一碳代谢的关键酶之一,在多种肿瘤细胞中高表达。在本研究中,为了探究MTHFD2对heCICs形成能力的影响,首先应用活细胞染料对肝癌细胞和免疫细胞分别进行标记,利用荧光显微镜对细胞进行拍摄分析建立heCICs模型。进一步通过RNAi技术瞬时敲低细胞中的MTHFD 2,结果显示,MTHFD 2敲低后,PLC/PRF/5和Hep3B分别与免疫细胞形成heCICs的能力显著升高(均P<0.01)。通过同源重组方法构建MTHFD2重组表达质粒,进一步构建MTHFD2过表达细胞系;将过表达细胞系与免疫细胞共培养检测MTHFD2过表达对heCICs形成能力的影响,结果显示,过表达MTHFD2后heCICs形成率显著降低(均P<0.001)。综上,本研究表明,MTHFD2是heCICs形成的负调控因子,为靶向MTHFD2促进heCICs形成增强免疫细胞胞内杀伤提供了研究基础。

关键词：亚甲基四氢叶酸脱氢酶2 异质性细胞叠套结构肝癌免疫治疗

全国2 271家医院消毒供应中心管理现状调查

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中华医院感染学杂志 2024年第6期34卷 950-953页

作者：康洁杨红张青北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所消毒供应中心恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142 北京大学肿瘤医院护理部北京100142 中国医学科学院北京协和医院消毒供应中心北京100730

目的了解全国医院消毒供应中心(CSSD)管理现状,为贯彻落实WS310.1-2016《医院消毒供应中心第1部分:管理规范》,提出科学依据及参考。方法依据规范要求自行设计问卷调查表,于2021年10月18日—22日从31个省、自治区、直辖市抽取二、三... 详细信息

目的了解全国医院消毒供应中心(CSSD)管理现状,为贯彻落实WS310.1-2016《医院消毒供应中心第1部分:管理规范》,提出科学依据及参考。方法依据规范要求自行设计问卷调查表,于2021年10月18日—22日从31个省、自治区、直辖市抽取二、三级医院CSSD护士长/主任为调查对象,采用问卷星以微信形式填写问卷。结果调查2 271所医院的消毒供应中心,96.21%的医院复用医疗器械实行消毒供应中心集中管理,87.36%的医院实施全部手术器械处置集中由CSSD管理的工作模式。有86.53%的消毒供应中心由护理部直接管理,64.77%医院消毒供应中心护理人员占比>50%。26.38%的医院配备下排气压力蒸汽灭菌器,35.27%的医院配置环氧乙烷灭菌器。3.61%的医院配置低温蒸汽甲醛灭菌器;69.76%医院提供水处理设备说明书。88.11%的消毒供应中心对集中处理的无菌物品实现质量追溯管理,有51.87%的CSSD实现信息化质量追溯。41.08%的消毒供应中心提供院外消毒灭菌服务。结论我国消毒供应中心执行集中化管理程度较高,清洗消毒灭菌干燥设备配置比例较高,信息化质量追溯系统管理有待提高,有能力提供院外清洗消毒灭菌服务的消毒供应中心进行安全风险评估后可以提供此项服务,为无菌物品质量提供保障。

关键词：医院消毒供应中心管理现状问卷调查