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冰冻血小板低温损伤及防护机制的研究进展

中国实验血液学杂志 2014年第6期22卷 1761-1765页

作者：易晓阳王艳韩颖军事医学科学院野战输血研究所北京100850

血小板作为人体血液中的重要组分,在生理性止血中起着非常重要的作用。血小板的输注主要用于特发性血小板减少性紫癜、放化疗病人的血小板减少以及其他原因导致的出血性血小板减少症。室温保存时间(5 d)限制了血小板的临床应用,导致血... 详细信息

血小板作为人体血液中的重要组分,在生理性止血中起着非常重要的作用。血小板的输注主要用于特发性血小板减少性紫癜、放化疗病人的血小板减少以及其他原因导致的出血性血小板减少症。室温保存时间(5 d)限制了血小板的临床应用,导致血小板的废弃率不断升高,因此延长血小板的保存时间对血小板的临床应用意义重大。目前-80℃冻存血小板是一种较为理想的长期保存方法,本文就血小板冰冻保存过程中损伤及对其防护机制的研究进展作一综述。

关键词：血小板冰冻保存损伤机制防护机制

拉曼光谱在血红蛋白结构及功能研究中的应用进展

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光谱学与光谱分析 2014年第2期34卷 439-444页

作者：卢明子郭延军赵莲周虹军事医学科学院野战输血研究所北京100850 国家纳米科学中心北京100190

血红蛋白发挥多种重要生理功能,但对其结构及功能的认识尚不能满足疾病诊治的需求。拉曼光谱在血红蛋白结构及功能研究中具有很大应用潜力,不但可以检测血红蛋白中血红素及其周围分子结构变化,还可以反映血红蛋白反应动力学具体过程。同... 详细信息

血红蛋白发挥多种重要生理功能,但对其结构及功能的认识尚不能满足疾病诊治的需求。拉曼光谱在血红蛋白结构及功能研究中具有很大应用潜力,不但可以检测血红蛋白中血红素及其周围分子结构变化,还可以反映血红蛋白反应动力学具体过程。同时,血红蛋白拉曼光谱在疾病状态下异常血红蛋白检测,血氧饱和度定量测定及血液代用品的高铁血红蛋白含量检测中突显优势。本文综述了拉曼光谱在血红蛋白结构及功能领域中的研究,简述了拉曼光谱在一些病变血红蛋白诊断中的研究进展,分析了影响血红蛋白拉曼光谱检测的因素,以促进拉曼光谱技术在血红蛋白结构和功能研究中的应用。

关键词：血红蛋白拉曼光谱血红蛋白病血氧饱和度高铁血红蛋白

化学发光免疫法测定大鼠血清中金环蛇抗菌肽的含量

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国际药学研究杂志 2016年第5期43卷 952-955页

作者：郑颖刘桃云朱晓霞甘慧顾若兰吴卓娜李俭李通孟志云军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的采用化学发光免疫法测定大鼠血清金环蛇抗菌肽(BF-30)的含量,为药代动力学研究提供简单快速的检测手段,初步探讨BF-30体内药代动力学特征。方法建立化学发光免疫分析方法并对方法的基质效应、精密度、准确度、稳定性和稀释效应进行... 详细信息

目的采用化学发光免疫法测定大鼠血清金环蛇抗菌肽(BF-30)的含量,为药代动力学研究提供简单快速的检测手段,初步探讨BF-30体内药代动力学特征。方法建立化学发光免疫分析方法并对方法的基质效应、精密度、准确度、稳定性和稀释效应进行确证,应用该法检测Wistar大鼠血清中BF-30的浓度。结果在大鼠血清中,BF-30在0.5~40 ng/ml浓度范围内Logistic曲线拟合良好,最低定量限为0.5 ng/ml;该法不存在基质效应;日内精密度为8.76%~14.15%、日间精密度为4.91%~11.11%,准确度为-1.27%^-7.71%;样品在-20℃放置13 d、反复冻融2次稳定性良好;储备液在-20℃放置30 d稳定性良好;样品在稀释40倍后无稀释效应。结论该分析方法简便、准确、可靠,能满足大鼠血清中BF-30含量的测定及其临床前药代动力学研究。

关键词：金环蛇抗菌肽化学发光免疫法血清药物浓度

快速测定人血浆中洛匹那韦/利托那韦浓度的LC-MS/MS方法建立

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国际药学研究杂志 2016年第1期43卷 162-166页

作者：时美慧李俭甘慧郑颖孟志云窦桂芳军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的建立LC-MS/MS方法快速测定人血浆中洛匹那韦（lopinavir,LPV）/利托那韦（ritonavir,RTV）（克力芝）的含量。方法血浆样品采用蛋白沉淀法处理后,以甲醇-水（0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 ml/min,色谱柱采用Thermo Hyp... 详细信息

目的建立LC-MS/MS方法快速测定人血浆中洛匹那韦（lopinavir,LPV）/利托那韦（ritonavir,RTV）（克力芝）的含量。方法血浆样品采用蛋白沉淀法处理后,以甲醇-水（0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 ml/min,色谱柱采用Thermo Hypersil GOLD柱（2.1 mm×100 mm,5 mm）,柱温为25℃,采用ESI源以选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对为LPV（m/z 629.3→155.0）、RTV（m/z 721.3→268.0）,内标MS275（m/z 377.1→359.2）。结果两药在人血浆中浓度在20~1000 ng/ml时,线性关系良好（r〉0.994）。日内、日间精密度,低浓度〈20%,中高浓度〈15%,回收率为86.5%~96.3%。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于两药的临床血药浓度监测及其药物代谢动力学研究。

关键词：洛匹那韦利托那韦血药浓度监测液相色谱-质谱联用

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血液制品病毒安全性控制措施研究进展

军事医学 2015年第3期39卷 225-228页

作者：马玉媛赵雄尹惠琼章金刚军事医学科学院野战输血研究所

血液制品是以健康人血浆为原料生产制备的一种特殊"药品",自20世纪80年代经血液制品传播人类免疫缺陷病毒事件频发以来,如何确保血液制品病毒安全性倍受关注。经过数十年的努力,目前各国均形成了严密体系,通过多种预防控制措施确保血液... 详细信息

血液制品是以健康人血浆为原料生产制备的一种特殊"药品",自20世纪80年代经血液制品传播人类免疫缺陷病毒事件频发以来,如何确保血液制品病毒安全性倍受关注。经过数十年的努力,目前各国均形成了严密体系,通过多种预防控制措施确保血液制品的病毒安全性,包括原料血浆的控制、生产过程中的病毒灭活/去除处理、严格遵守药品生产质量管理规范等。未来,新发传染病病原体将对血液制品的病毒安全性造成新的威胁,因此需不断研究新的应对措施。

关键词：血液制品病毒安全性原料血浆病毒灭活/去除处理

小鼠皮肤表皮和真皮细胞共移植诱导毛囊再生实验研究

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中国修复重建外科杂志 2016年第4期30卷 485-490页

作者：陈琳习佳飞刘大庆张秀媛吕洋李静王静雪周军年南雪岳文裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所北京100850 军事医学科学院华南干细胞与再生医学研究中心

目的探讨绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的C57小鼠皮肤表皮和真皮细胞共移植诱导裸鼠毛囊重建的实验研究。方法取C57-GFP新生及成年小鼠分离表皮与真皮,分别制备成年小鼠原代真皮-表皮混合细胞(按1∶1比例混合)、成... 详细信息

目的探讨绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的C57小鼠皮肤表皮和真皮细胞共移植诱导裸鼠毛囊重建的实验研究。方法取C57-GFP新生及成年小鼠分离表皮与真皮,分别制备成年小鼠原代真皮-表皮混合细胞(按1∶1比例混合)、成年小鼠原代真皮细胞、新生小鼠第3代真皮细胞,荧光显微镜观察细胞激发绿色荧光情况,免疫细胞化学检测培养的新生小鼠第3代真皮细胞毛囊干细胞标志。取Balb/c裸鼠,分别将成年小鼠原代真皮-表皮混合细胞(A组)、成年小鼠原代真皮细胞(B组)、新生小鼠第3代真皮细胞(C组)及生理盐水(D组)移植至裸鼠皮下,术后4、5、6周行大体观察,6周时取移植部位皮肤行GFP免疫组织化学染色观察各组毛囊形成情况。结果荧光显微镜观察示,分离、培养的C57-GFP新生及成年小鼠表皮及真皮细胞均能激发绿色荧光;免疫细胞化学检测培养的第3代真皮细胞中毛囊干细胞标志,显示波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白强阳性,表明细胞多为真皮鞘细胞;部分细胞表达毛乳头细胞标志CD133、多能聚糖及毛囊隆突部标志角蛋白15。裸鼠皮下移植实验:大体观察示A组可见接种部位皮下呈灰黑色,但未见毛发穿出皮肤表面;B、C、D组裸鼠皮肤均无着色。免疫组织化学染色示,A组形成新的、完整的毛囊结构或参与形成毛囊;B组GFP阳性细胞多表达于毛囊真皮鞘、外根鞘;C组GFP阳性细胞主要分布于毛囊真皮鞘、外根鞘、毛乳头,在汗腺中也有表达;D组GFP染色呈阴性。结论小鼠皮肤的表皮和真皮细胞在裸鼠体内相互作用可形成完整的毛囊结构,而仅移植新鲜分离或培养的真皮细胞则主要参与毛囊形成,无法形成完整的毛囊结构。

关键词：毛囊干细胞细胞移植毛囊再生小鼠裸鼠

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血液制品的现状与展望

生物工程学报 2011年第5期27卷 730-746页

作者：王卓赵雄吕茂民章金刚军事医学科学院野战输血研究所北京100850

血液制品特指血浆蛋白制品和相应的重组制品。根据临床应用的效能,血液制品可以分为白蛋白类、免疫球蛋白类、凝血因子类和微量蛋白制品等不同种类。血浆白蛋白制品是最早应用于战伤救治的血液制品,高纯白蛋白、重组白蛋白以及重组白蛋... 详细信息

血液制品特指血浆蛋白制品和相应的重组制品。根据临床应用的效能,血液制品可以分为白蛋白类、免疫球蛋白类、凝血因子类和微量蛋白制品等不同种类。血浆白蛋白制品是最早应用于战伤救治的血液制品,高纯白蛋白、重组白蛋白以及重组白蛋白融合药物的研发和上市开创了血液制品的新局面。肌肉注射用免疫球蛋白因其制备工艺相对简单,使用方便,价格低廉且不良反应可以接受而一直在临床实践中应用;静脉注射用免疫球蛋白随着新的适应症不断发现,其应用范围越来越广;皮下注射用免疫球蛋白的出现使免疫球蛋白的使用更加方便,已经成为静脉注射用免疫球蛋白安全有效的替代品;针对特定病原体的特异性免疫球蛋白在临床上更具有不可替代的作用。凝血因子和重组凝血因子类制品主要用于相应的先天性遗传性缺陷患者,纤维蛋白原、因子Ⅶ、因子Ⅷ、von Willebrand因子复合物、因子Ⅸ和凝血酶原复合物、因子Ⅺ、因子ⅩⅢ等制品的应用取得了良好的治疗效果。因子Ⅶa和活化凝血酶原复合物对于治疗产生凝血因子抑制物的血友病病人具有十分明显的效果。纤维蛋白原类制品和凝血酶在外科止血方面发挥着重要的作用。多种微量血浆蛋白制品已经上市,如蛋白C、抗凝血酶、α1-抗胰蛋白酶和组织纤溶酶原激活剂等。部分微量血浆蛋白制品也在研发和临床试验过程中,如C1-抑制剂、补体系统Ⅰ因子、α2-巨球蛋白、血清胆碱酯酶、铜蓝蛋白以及纤维结合蛋白等。尽管多种重组血浆蛋白制品已经上市,血浆来源的制品仍将具有其不可替代的特殊地位,血浆蛋白新品种的研发仍是热点。目前,我国血液制品的研发与国外存在着较大的差距,我国血液制品企业面临着机遇与挑战。

关键词：血液制品血浆蛋白重组血浆蛋白白蛋白免疫球蛋白凝血因子

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高岭土的止血应用研究进展

军事医学 2017年第2期41卷 141-145页

作者：干长姣甘慧孟志云朱晓霞顾若兰吴卓娜孙文种王东根窦桂芳军事医学科学院野战输血研究所北京100850

高岭土(kaolin)是一种具有良好吸附性、可塑性、易分散性等优良性能的天然非金属矿产,在轻工业、石油化工、陶瓷、化妆、建筑等领域应用广泛。近年来,高岭土作为一种强效的内源性促凝血物质在医学领域的应用受到关注。该文介绍了高岭土... 详细信息

高岭土(kaolin)是一种具有良好吸附性、可塑性、易分散性等优良性能的天然非金属矿产,在轻工业、石油化工、陶瓷、化妆、建筑等领域应用广泛。近年来,高岭土作为一种强效的内源性促凝血物质在医学领域的应用受到关注。该文介绍了高岭土的结构组成、矿物学性质及其止血机制,包括吸水浓缩血液引发自然凝固和激活凝血因子Ⅻ,综述了目前国内外高岭土在止血应用领域的研究进展,并对其止血应用现状及前景进行了总结展望。

关键词：高岭土止血机制凝血因子

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通用型红细胞工程的研究进展

中国实验血液学杂志 2011年第3期19卷 814-819页

作者：檀英霞季守平宫锋军事医学科学院野战输血研究所北京100850

生产、使用O型通用型红细胞(universal red blood cells)是未来输血医学发展的方向,本文综述了近年制备通用型红细胞的技术。第1种是红细胞血型抗原修饰技术,又分为2种方法:①糖苷酶酶解法,利用特异的外切糖苷水解酶将红细胞表面的A、B... 详细信息

生产、使用O型通用型红细胞(universal red blood cells)是未来输血医学发展的方向,本文综述了近年制备通用型红细胞的技术。第1种是红细胞血型抗原修饰技术,又分为2种方法:①糖苷酶酶解法,利用特异的外切糖苷水解酶将红细胞表面的A、B抗原的糖基去除,制备酶解转变的O型红细胞(ECO-RBC);B型红细胞制备的ECO-RBC已经成功地进行了临床输血试验,可安全地输给A型和O型患者;由于A抗原结构的复杂性,A型红细胞的酶解转变研究存在很大困难,目前应用细菌来源的新型糖苷酶同时实现了A1→O、A2→O的转变;②PEG化技术,利用化学材料甲氧基聚乙二醇(mPEG)非特异地遮蔽红细胞表面抗原,制备O型及表面稀有血型抗原阴性的通用型红细胞。第2种是诱导多能干细胞或成体细胞分化为成熟的红细胞的技术,不仅可制备ORh-型红细胞,还可作为新的血液来源以解决目前的血源短缺问题。目前,可用来诱导产生红细胞体系的启动细胞有造血干细胞(HSC),诱导性多能干细胞(iPSC)和人胚胎干细胞(hESC)或真皮成纤维细胞(Fib);利用多能干细胞制备通用型红细胞尚处于实验研究阶段,其生产工艺、生产成本及生产的红细胞的安全性、有效性距离临床应用还有许多问题有待解决。尽管如此,这些研究结果对防止血荒或血液传染性疾病的发生,保障应急用血,提高临床输血安全具有重要意义。

关键词：通用型红细胞工程酶解转变的通用型红细胞多能干细胞人胚胎干细胞成纤维细胞