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失血大鼠肠道多节段病理学评价及巨噬细胞功能研究

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军事医学 2024年

作者：魏汉琪蒋兴伟苏允琦高锋华宁畅文安华英巩家媛刘鹏宇王哲马骏于群军事科学院军事医学研究院

目的研究重度失血大鼠模型中各肠道节段的病理损伤和炎症情况随时间变化的特点，探索肠道巨噬细胞极化对肠道炎症病理生理的可能影响。方法将雄性Wistar大鼠随机平均分为假手术组和失血组，失血组股动静脉插管并在25～30 min内快速失... 详细信息

目的研究重度失血大鼠模型中各肠道节段的病理损伤和炎症情况随时间变化的特点，探索肠道巨噬细胞极化对肠道炎症病理生理的可能影响。方法将雄性Wistar大鼠随机平均分为假手术组和失血组，失血组股动静脉插管并在25～30 min内快速失去大鼠总血量的40%，假手术组仅插管不失血，然后将上述两组大鼠分别随机平均分为5组，分别以放血完成后0 h、3 h、6 h、12 h和24 h作为实验终点处死，快速分离全肠并在十二指肠、空肠、回盲部、结肠和直肠相同位置剪取肠段进行病理组织学评分、酶联免疫吸附测定相关炎症因子以及多色免疫组织化学染色测定巨噬细胞表面标志物，统计实验数据并分析。结果 1.与假手术组相比，结肠3 h、6 h时的组织学评分无显著差异，直肠除24 h以外各时间点评分无显著差异，其余各肠段0 h后各时间点的评分与假手术组均存在显著差异（P<0.05）；回盲部、结肠组织损伤程度随失血时间的延长逐渐加重（P<0.05）；同一失血时间不同肠段相比，3 h时十二指肠、空肠、回盲部的损害程度显著高于结肠、直肠（P<0.05）,6 h时十二指肠、空肠、回盲部的损害程度显著高于直肠（P<0.05）,12 h时十二指肠、空肠、回盲部与结肠的损害程度显著高于直肠（P<0.05）,24 h时回盲部的损害程度与直肠相比存在显著差异（P<0.05）。2.相比于假手术组，重度失血大鼠十二指肠段12 h后的TNF-ɑ、IL-1β表达显著上调；空肠段IL-1β在3 h后表达显著上调，TNF-ɑ则在6 h表达显著上调；回盲部、结肠、直肠段重度失血在3 h时即引起IL-1β、TNF-α表达的显著增加。3.重度失血后大鼠3 h时空肠、回盲部的巨噬细胞极化细胞显著增加，M1型比例更高、增加更多，6 h后极化巨噬细胞比例逐渐降低至失血前水平，6 h时空肠的M2型巨噬细胞占比下降更多，回盲的M1型巨噬细胞占比下降更多。结肠3 h后M1型巨噬细胞比例下降，3 h时M2型有增加趋势。重度失血3 h时十二指肠、直肠M2型极化巨噬细胞占比增加，6 h后有所减少。结论不同肠道节段在失血发生后病理损伤程度有差异，并且存在一定的时间变化规律，与巨噬细胞炎症水平也有一定的相关性。

关键词：失血大鼠肠道炎症巨噬细胞

TSPO配体YL-IPA08对脂多糖诱导的小鼠抑郁和焦虑样行为的改善作用及其抗炎机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：崔林雨王婧雅段婧瑶李云峰代威郭文治山西医科大学麻醉学院军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所军事科学院军事医学研究院解放军总医院第七医学中心麻醉科

目的探究18k D转运蛋白（TSPO）配体YL-IPA08对脂多糖（LPS）诱导的小鼠抑郁、焦虑样行为和认知功能障碍的改善作用及相关抗炎机制。方法（1）50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS模型组、LPS+YL-IPA08(1.0或3.0 mg/kg)组和YL-IP... 详细信息

目的探究18k D转运蛋白（TSPO）配体YL-IPA08对脂多糖（LPS）诱导的小鼠抑郁、焦虑样行为和认知功能障碍的改善作用及相关抗炎机制。方法（1）50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS模型组、LPS+YL-IPA08(1.0或3.0 mg/kg)组和YL-IPA08(3.0 mg/kg)组，每组10只。LPS模型小鼠在第1天和第8天各经腹腔注射1次LPS(0.5 mg/kg);LPS+YL-IPA08(1.0或3.0 mg/kg)组和YL-IPA08(3.0 mg/kg)组小鼠连续13 d灌胃给予YL-IPA08(1.0或3.0 mg/kg),1次/d。第9至12天依次采用开场实验、悬尾实验、强迫游泳实验、新物体识别实验和高架十字迷宫实验评估各组小鼠的抑郁、焦虑样行为及认知功能。Western blotting检测小鼠前额叶皮质突触后致密蛋白95(PSD95)和脑源性神经营养因子（BDNF）的表达水平。（2）将BV2小鼠小胶质细胞分为对照组、LPS模型组（1 mg/L LPS孵育6h）、LPS+YL-IPA08(0.5或1.0μmol/L)组（0.5或1.0μmol/L YL-IPA08孵育1 h后，1 mg/L LPS孵育6 h）和YL-IPA08组（1.0μmol/L YL-IPA08孵育1 h）。ELISA法检测炎性因子白细胞介素（IL）-1β、γ干扰素（IFN-γ）、IL-4、IL-10和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平，Western blotting检测细胞中介导TGF-β信号转导的Smad蛋白家族成员2、3(Smad2、Smad3)的表达水平。结果（1）行为学实验结果显示，开场实验中各组小鼠运动总距离比较差异无统计学意义（P>0.05），而与对照组比较，LPS模型组小鼠进入中心区次数和停留时间明显减少，在悬尾和强迫游泳实验中不动时间延长，在新物体识别实验中识别指数明显降低，在高架十字迷宫实验中进入开放臂次数百分比和开臂停留时间百分比明显降低，前额叶皮质PSD95及BDNF表达明显降低，差异均有统计学意义（P神经炎症和调节TGF-β/Smad通路有关。

关键词： YL-IPA08 抑郁焦虑认知功能炎症

卡介苗用于小鼠黑色素瘤模型免疫治疗的效应及其机制

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中国免疫学杂志 2024年

作者：徐铭泽宁唤唤路延之康健彭钰君张婧瑶胡家豪代婷董梦娟薛飒柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学军事医学创新中心空军军医大学基础医学院学员队延安大学生命科学学院宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系

目的：探究卡介苗（BCG）和c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）用于黑色素瘤小鼠的免疫治疗效果与机制。方法：构建小鼠黑色素瘤细胞B16F10腹股沟皮下注射荷瘤模型，分别采用1×106CFU BCG和rBCG皮下瘤旁注射免疫治疗3次，观察小鼠生... 详细信息

目的：探究卡介苗（BCG）和c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）用于黑色素瘤小鼠的免疫治疗效果与机制。方法：构建小鼠黑色素瘤细胞B16F10腹股沟皮下注射荷瘤模型，分别采用1×106CFU BCG和rBCG皮下瘤旁注射免疫治疗3次，观察小鼠生存情况，肿瘤生长与转移情况；分离小鼠肿瘤组织制备细胞悬液，流式细胞术检测各免疫细胞比例；qRT-PCR检测肿瘤组织免疫相关基因转录水平。结果：BCG和rBCG免疫治疗均可显著抑制小鼠黑色素瘤的生长，延长小鼠生存时间，且rBCG免疫治疗抑制肿瘤转移的效果优于BCG。两菌株均可显著降低肿瘤生长和转移相关的M2型巨噬细胞和髓源性抑制细胞比例。两菌株均能促进肿瘤组织淋巴细胞浸润，rBCG显著促进肿瘤组织B细胞浸润增加。BCG免疫治疗上调肿瘤转移相关的细胞因子转录水平，而rBCG治疗并不影响上述基因转录。结论：BCG和rBCG免疫对小鼠黑色素瘤具有治疗作用，c-di-AMP为佐剂的rBCG抑制肿瘤转移的效果优于BCG，其作用机制与调节肿瘤组织内免疫应答水平有关。

关键词：卡介苗重组卡介苗黑色素瘤环二腺苷酸免疫治疗

环磷酰胺作用于SH-SY5Y细胞的损伤效应及能量代谢变化（英文）

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中国药理学与毒理学杂志 2024年

作者：李佳佳王娇肖文一韦冬晖张永祥蒋宁周文霞军事科学院军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室

目的建立环磷酰胺(CTX)及其活性代谢衍生物4-氢过氧环磷酰胺(4-HC)的神经损伤模型，研究CTX和4-HC的神经毒性效应及其潜在机制。方法采用8个不同浓度的CTX溶液(0.01 mmol·L-1～80 mmol·L-1)和8个不同浓度的4-HC溶液(0.01μmol·L-1... 详细信息

目的建立环磷酰胺(CTX)及其活性代谢衍生物4-氢过氧环磷酰胺(4-HC)的神经损伤模型，研究CTX和4-HC的神经毒性效应及其潜在机制。方法采用8个不同浓度的CTX溶液(0.01 mmol·L-1～80 mmol·L-1)和8个不同浓度的4-HC溶液(0.01μmol·L-1～80μmol·L-1)作用于SH-SY5Y细胞48 h，应用IncuCyte ZOOM系统记录细胞形态变化和生长曲线；采用CCK-8法检测细胞活力；用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH释放率。CTX(1,5,10和20 mmol·L-1)和4-HC(1,5,10，和20μmol·L-1M)以同样的方式处理细胞后，使用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖；免疫荧光法检测DNA双链断裂标志物γ-H2AX的含量和线粒体膜电位变化。CTX(1,5和10 mmol·L-1)和4-HC(1,5,10μmol·L-1)以同样的方式处理细胞后，SeaHorse XF检测细胞糖酵解及线粒体氧化磷酸化水平。结果与细胞对照组相比，CTX和4-HC组的细胞融合率曲线逐渐下降，呈浓度和时间依赖性；CTX和4-HC组的细胞活力呈浓度依赖性下降(P<0.01)，半数抑制浓度(IC50)分别为4.44 mmol·L-1和4.781μmol·L-1;LDH释放率显著增加(P<0.01);EdU+细胞百分比显著下降(P<0.01);γ-H2AX+细胞百分比显著增加(P<0.05)；线粒体膜电位显著降低(P<0.05);CTX和4-HC处理导致最大糖酵解能力、酵解储备、最大呼吸速率和ATP产生速率显著降低(P<0.05)。结论 CTX和4-HC对SH-SY5Y细胞具有明显的细胞毒性作用，可降低细胞活力，破坏细胞膜结构，阻碍细胞增殖，其机制可能与导致细胞DNA损伤、能量代谢紊乱和线粒体功能障碍密切相关。

关键词：环磷酰胺 4-过氧化氢环磷酰胺神经毒性能量代谢

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糖皮质激素对免疫细胞调控的研究进展

中国免疫学杂志 2024年第1期40卷 31-36页

作者：李佳荣张纪岩南华大学药学院南华大学药物药理研究所军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所

免疫系统是重要的人体健康卫士，免疫系统失调是引发各种疾病的源头，免疫防御和免疫监视调控能力的降低导致病原体和恶变细胞难以及时清除，从而增加了致病概率和病死风险。科学研究已经证实压力过大是导致免疫系统失调的重要因素，已... 详细信息

免疫系统是重要的人体健康卫士，免疫系统失调是引发各种疾病的源头，免疫防御和免疫监视调控能力的降低导致病原体和恶变细胞难以及时清除，从而增加了致病概率和病死风险。科学研究已经证实压力过大是导致免疫系统失调的重要因素，已在动物模型和人体中发现，压力加大会提高体内神经内分泌激素的水平，尤其是糖皮质激素和儿茶酚胺，而且应激激素对免疫功能产生诸多不利影响。本综述重点梳理糖皮质激素对免疫细胞的调控研究进展。

关键词：压力免疫力糖皮质激素

来源：博看期刊

光生物疗法对中枢神经系统的影响及机制研究进展

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军事医学 2024年第8期48卷 630-635页

作者：包可宋伦黄欣军事科学院军事医学研究院安徽医科大学基础医学院

作为重要的前沿技术领域，脑科学和类脑智能研究成为全球近年来科学研究的新方向。无创神经调控与神经功能评估技术已成为脑科学研究和临床应用的重要工具，以经颅磁刺激等技术为代表的非侵入性神经调控技术在多种神经系统疾病的治疗与... 详细信息

作为重要的前沿技术领域，脑科学和类脑智能研究成为全球近年来科学研究的新方向。无创神经调控与神经功能评估技术已成为脑科学研究和临床应用的重要工具，以经颅磁刺激等技术为代表的非侵入性神经调控技术在多种神经系统疾病的治疗与康复中具有广阔的应用前景。该文综述了光生物疗法在脑重大疾病治疗与认知科学领域应用及作用机制研究进展。

关键词：低强度光疗法光生物调节中枢神经系统脑损伤阿尔兹海默病帕金森病脑缺血认知

长期睡眠期噪声暴露对小鼠认知功能的影响及生物钟相关机制

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环境与职业医学 2024年第2期41卷 119-124,132页

作者：付一鸣张鑫垚佘晓俊朱英文杨红莲杲修杰付波崔博军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津300050 中国人民解放军92619部队42分队海南三亚572001

[背景]环境噪声污染严重,目前关于长期睡眠期噪声暴露对认知功能影响及可能的生物钟机制相关研究较少。[目的]探讨睡眠期噪声暴露诱导小鼠认知功能损伤及可能的生物钟机制,为噪声暴露防护提供理论依据。[方法]20只雄性C57BL/6J小鼠随机... 详细信息

[背景]环境噪声污染严重,目前关于长期睡眠期噪声暴露对认知功能影响及可能的生物钟机制相关研究较少。[目的]探讨睡眠期噪声暴露诱导小鼠认知功能损伤及可能的生物钟机制,为噪声暴露防护提供理论依据。[方法]20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和噪声暴露组,每组10只。噪声暴露组采用噪声发生器进行每天12 h(08∶00—20∶00),共30 d的睡眠期噪声暴露,校准标定噪声强度为90 dB。对照组不施加任何干预措施。噪声暴露结束后,采用新物体识别实验和旷场实验检测小鼠认知功能,对小鼠海马组织进行尼氏染色,对离子钙结合适配器分子1蛋白(Iba-1)进行免疫荧光化学染色,采用实时荧光定量PCR检测炎症因子、生物钟基因表达,并采用试剂盒检测小鼠海马组织氧化应激指标变化。[结果]睡眠期噪声暴露后,新物体识别实验结果显示:与对照组相比,噪声暴露组小鼠辨别指数为0.06±0.04,低于对照组的0.65±0.13(P神经元固缩,染色加深,排列紊乱,连接松散。免疫荧光结果显示:与对照组相比,噪声暴露组小鼠海马组织小胶质细胞活化,Iba-1表达增加(P生物钟基因Clock、Per2、Rev-erbαmRNA水平增加(P生物钟基因失稳态并引发海马神经炎症,促使小胶质细胞激活,引起小鼠的认知功能损伤。

关键词：睡眠期噪声暴露神经炎症认知损伤生物钟

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甜叶悬钩子苷对脊髓损伤小鼠运动功能障碍和神经炎症的改善作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 326-335页

作者：杨爽许娜张剑旭孙成彪王燕董明鑫刘文森军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130117 延边大学医学院生理学与病理生理学教研室吉林延吉133002 吉林医药学院吉林吉林132000

目的:探讨甜叶悬钩子苷(RUB)对小鼠脊髓损伤(SCI)和神经炎症的影响,并阐明其作用机制。方法:将48只雌性昆明小鼠随机分为假手术组、SCI组、SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组,每组12只;采用脊髓损伤行为学(BBB)评分法评估SCI小鼠后肢运... 详细信息

目的:探讨甜叶悬钩子苷(RUB)对小鼠脊髓损伤(SCI)和神经炎症的影响,并阐明其作用机制。方法:将48只雌性昆明小鼠随机分为假手术组、SCI组、SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组,每组12只;采用脊髓损伤行为学(BBB)评分法评估SCI小鼠后肢运动功能,脊髓组织含水量法检测SCI小鼠脊髓水肿情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠促炎细胞因子环氧化酶2(COX-2)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平,ELISA法检测各组小鼠血清中炎症因子水平,HE染色观察各组小鼠脊髓组织病理形态学,免疫荧光法检测各组小鼠脊髓组织中小胶质细胞活化情况,Western blotting法检测SCI小鼠脊髓组织中相关蛋白表达水平。结果:BBB评分,与假手术组比较,SCI组小鼠评分低至0分;与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠BBB评分逐步升高。脊髓组织含水量法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织含水量明显升高(P神经炎症,抑制小胶质细胞活化,其机制可能与下调脊髓组织中NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达有关。

关键词：甜叶悬钩子苷脊髓损伤神经炎症核因子κB 丝裂原活化蛋白激酶

三维培养间充质干细胞来源的分泌组物对海水浸泡合并创伤小鼠海马神经元的保护作用

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解放军医学杂志 2024年

作者：兰晓娟谢胜强王秉贤马文静陈巧汨程岗吕文英张剑宁安徽医科大学第五临床医学院海军临床学院解放军总医院第六医学中心神经外科解放军总医院第一医学中心神经外科医学部军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所南华大学衡阳医学院安徽医科大学基础医学院

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。... 详细信息

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。采用小鼠海马神经元(HT22细胞)建立SW合并SI细胞模型。将HT22细胞随机分为对照组、SI组、SI+SW组、SI+CM组和SI+SW+CM组。采用CCK-8法检测各组细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，细胞划痕实验观察细胞迁移能力，Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和铁死亡相关蛋白长链酰基辅酶A合酶4(ACSL4)、环氧化酶-2(Cox-2)的表达水平。结果 15%浓度海水浸泡12 h后，HT22细胞活力明显下降(P学意义(P神经元的损伤，有望成为SW合并TBI的潜在治疗措施。

关键词：间充质干细胞分泌组物海水浸泡创伤性脑损伤