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柴胡皂苷A体外抑制猪轮状病毒增殖的研究

中国兽医科学 2025年

作者：陶然胡屹屹邓慧程曦韩楠卞贤宇王建新周金柱朱雪蛟张雪寒李彬江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室

体外筛选对猪轮状病毒（PoRV）有抗病毒作用的中药活性成分，为抗PoRV药物开发和临床防控提供理论依据。从6种中药活性成分中筛选到具有潜在抗PoRV作用的柴胡皂苷A（SSA），采用CCK8方法筛选了SSA在IPEC-J2细胞上药物安全浓度，然后用... 详细信息

体外筛选对猪轮状病毒（PoRV）有抗病毒作用的中药活性成分，为抗PoRV药物开发和临床防控提供理论依据。从6种中药活性成分中筛选到具有潜在抗PoRV作用的柴胡皂苷A（SSA），采用CCK8方法筛选了SSA在IPEC-J2细胞上药物安全浓度，然后用不同浓度的SSA处理PoRV感染的细胞，通过荧光定量PCR、TCID50及Western-blot实验技术分析SSA对PoRV（NJ2012株，G9P[7]型）增殖的影响；接着从病毒的吸附、入侵、复制及释放等阶段，分析了SSA对PoRV复制阶段的影响；最后通过荧光定量PCR和TCID50实验分析了SSA对不同基因型PoRV（G9P[23]型、G1P[7]型和G4P[23]型）、猴源RV及牛源RV增殖的影响。结果显示，SSA在120 μg/mL浓度范围内对IPEC-J2细胞均无明显的毒性作用，SSA分别在20、40、80 μg/mL处理浓度下，对PoRV呈现剂量依赖性抗病毒作用；SSA在PoRV复制阶段发挥抗病毒作用，对病毒的吸附、入侵及释放阶段均无明显影响；SSA对不同基因型PoRV、猴源RV及牛源RV均具有不同程度的抗病毒作用。综上，本研究发现SSA具有较好的体外抑制PoRV增殖的作用，且作用于病毒的复制阶段，进一步研究发现SSA对其他不同种属和基因型的RV也具有一定抗病毒作用，初步表明SSA具有潜在的广谱抗RV作用。该研究为开发抗RV药物和临床防控PoRV感染流行提供了一定的理论指导。

关键词：柴胡皂苷A 猪轮状病毒中药抗病毒

稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的THP-1细胞系的建立与应用

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中国兽医科学 2025年

作者：李玲霞张旭辉令小东韩生义吴锦艳尚佑军青海大学农牧学院青海大学畜牧兽医科学院中国农业科学院兰州兽医研究所

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与... 详细信息

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染至HEK293T细胞，通过包装获得表达N蛋白的慢病毒。接着将慢病毒感染THP-1细胞，再使用嘌呤霉素筛选，之后利用细胞有限稀释法得到稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，最后采用ELISA和Western-blot检测该细胞系对PPRV激活炎症反应的影响。结果表明，成功构建了THP-1-N细胞系，不仅该细胞系活力较好，而且具备稳定传代的能力。且稳定表达N蛋白的THP-1细胞可显著促进由PPRV感染所诱导的IL-1β表达，进而激活炎症反应。综上所述，成功建立了一种能够稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，为PPRV感染及致病机制研究提供了重要的生物材料。

关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白慢病毒细胞系炎症小体

短链脂肪酸介导的肠骨轴在骨代谢中的研究进展

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食品科学 2025年第2期46卷 260-267页

作者：张萱杨雪李新科孟璐王加启郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室(北京)北京100193

随着全球老龄化加剧,骨质疏松症等与年龄相关的骨骼代谢疾病发病率不断上升,寻求安全有效的治疗干预方法至关重要。目前肠道微生物及其代谢产物调节骨代谢已成为研究的热点。短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)如乙酸、丙酸和... 详细信息

随着全球老龄化加剧,骨质疏松症等与年龄相关的骨骼代谢疾病发病率不断上升,寻求安全有效的治疗干预方法至关重要。目前肠道微生物及其代谢产物调节骨代谢已成为研究的热点。短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)如乙酸、丙酸和丁酸等,能够通过肠-骨轴发挥骨形成和骨吸收的调节作用,对骨稳态调节具有一定的积极作用,并能改善炎症性骨丢失。本文综述SCFAs通过内分泌、免疫、改善营养吸收等途径调控骨代谢稳态,以期为老年代谢性骨病的预防和治疗提供科学依据。

关键词：肠-骨轴短链脂肪酸肠道微生物骨代谢骨质疏松症

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牦牛FABP4和FABP5基因克隆及生物信息和组织表达分析

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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2025年 1-9页

作者：张梦帆洛桑顿珠喇永福任稳稳马晓明张强卓玛次仁尼玛加措平措占堆梁春年中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃省牦牛繁育工程重点实验室农业农村部青藏高原畜禽遗传育种重点实验室西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所日喀则市昂仁县农业农村局

【目的】探究FABP4和FABP5基因对牦牛脂肪酸的调控机制,提升牦牛肉品质。【方法】采用RTPCR扩增牦牛FABP4和FABP5基因CDS序列,利用在线软件进行生物信息学分析,使用MEGA7.0构建系统发育进化树分析其同源性。采用实时荧光定量PCR检测FABP... 详细信息

【目的】探究FABP4和FABP5基因对牦牛脂肪酸的调控机制,提升牦牛肉品质。【方法】采用RTPCR扩增牦牛FABP4和FABP5基因CDS序列,利用在线软件进行生物信息学分析,使用MEGA7.0构建系统发育进化树分析其同源性。采用实时荧光定量PCR检测FABP4和FABP5基因在心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脂肪、肌肉和十二指肠中的表达水平,探究其在不同组织中的表达差异。【结果】牦牛FABP4、FABP5基因CDS序列全长分别为393和408 bp,分别编码130和135个氨基酸,基于FABP4和FABP5氨基酸序列相似性构建的系统进化树均显示,牦牛与美洲野牛的亲缘关系最近,其次是牛,与鸡的亲缘关系较远。FABP4和FABP5蛋白二级结构、三级结构以无规则卷曲和延伸链为主,无跨膜结构域和信号肽,推测其不是分泌蛋白,为稳定的亲水性蛋白。牦牛FABP4、FABP5氨基酸序列分别存在16和17个磷酸化位点,均以苏氨酸磷酸化位点为主;牦牛FABP4和FABP5蛋白均与PPARG、GOT2间存在互作关系,且其相互间存在互作关系。KEGG富集结果发现,FABP4和FABP5共同富集在PPAR信号通路上。FABP4和FABP5基因在牦牛各组织中均有不同程度的表达,其中在脂肪中的相对表达量最高。【结论】克隆了牦牛FABP4和FABP5基因,明确了其分子特征。牦牛FABP4和FABP5基因在脂肪组织中高表达,与脂肪的沉积和代谢密切相关。

关键词：牦牛 FABP4基因 FABP5基因肉品质脂肪沉积

基于非洲猪瘟病毒D250R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医科学 2025年

作者：朱文青徐丽华刘佳畦邬雨倩金子安吴旭琪袁秀芳周继勇郑肖娟浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞... 详细信息

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞表达的重组蛋白Flag-D250R均能被ASFV标准阳性血清识别，证明D250R蛋白是ELISA抗体检测方法的潜在靶标。在此基础上，以纯化的重组蛋白为免疫原制备鼠源多克隆抗体，该抗体ELISA效价大于1∶409 600。Western-blot试验表明该抗体与Flag-D250R和His-D250R均具有良好的反应性，证明His-D250R蛋白具有良好的抗原性。进一步以His-D250R蛋白为包被抗原，通过对抗原包被、封闭、抗体孵育、底物反应等条件的优化，建立间接ELISA抗体检测方法。其阴阳性临界值为0.359，检测PRV、PRRSV、PCV2、CSFV等阳性血清结果均呈阴性反应，灵敏度达1∶3 200，批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%，与商品化试剂盒符合率达98.8%。上述结果表明，基于His-D250R蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性、重复性良好，具备一定临床应用价值，可以为非洲猪瘟诊断方法开发提供重要支持。

关键词：非洲猪瘟病毒 D250R蛋白原核表达多克隆抗体间接ELISA

不同密度和补饲量对苜蓿地放养静原鸡产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响

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饲料研究 2025年 36-41页

作者：罗琰高博刘盛楠王胜明郭海龙石福岳邹军甘肃省畜牧兽医研究所农业农村部畜禽资源(羊)评价利用重点实验室静宁绿洲生态农业科技发展有限公司

试验旨在研究苜蓿地放养条件下不同密度和补饲量对静原鸡的产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响。采用3×3双因素试验设计，选取280日龄、体重相近、健康的静原鸡1 050只，设置放养密度分别为50 （A1）、100 （A2）、150只/300 m2（A... 详细信息

试验旨在研究苜蓿地放养条件下不同密度和补饲量对静原鸡的产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响。采用3×3双因素试验设计，选取280日龄、体重相近、健康的静原鸡1 050只，设置放养密度分别为50 （A1）、100 （A2）、150只/300 m2（A3），补饲量分别为50%（B1）、70%（B2）、90%（B3），每组3个重复，每个重复3个小区，对照组150只静原鸡为笼养。预试期7 d，正式试验期60 d。结果显示，A1B2组的产蛋率和平均蛋重高于除对照组外的其他组，料蛋比最低，A1B2组鸡蛋的蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄色泽和蛋黄比率最高，蛋形指数和蛋黄重高于除对照组外的其他组，A1B2组鸡蛋的蛋白质、脂肪、灰分和磷脂含量最高，A1B2组的水分和胆固醇含量最低。研究表明，综合考虑产蛋性能、蛋品质和鸡蛋营养成分的结果，苜蓿地放养条件下适宜于蛋用静原鸡的放养密度为50只/300 m2、补饲量为70%。

关键词：静原鸡密度补饲量产蛋性能蛋品质

生牛乳中金黄色葡萄球菌异质性耐药及机制研究

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畜牧兽医学报 2025年

作者：和晓兰赵艳坤孟璐刘慧敏高姣姣郑楠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(乌鲁木齐)新疆农产品质量安全实验室

旨在了解生牛乳中分离的金黄色葡萄球菌耐药情况以及金黄色葡萄球菌的异质性耐药流行情况，并探究异质性耐药机制。从东北、华北、华东、华南、西北和西南六个地区采集179批次生牛乳，分离鉴定出金黄色葡萄球菌36株。采用肉汤微量稀释... 详细信息

旨在了解生牛乳中分离的金黄色葡萄球菌耐药情况以及金黄色葡萄球菌的异质性耐药流行情况，并探究异质性耐药机制。从东北、华北、华东、华南、西北和西南六个地区采集179批次生牛乳，分离鉴定出金黄色葡萄球菌36株。采用肉汤微量稀释法鉴定金黄色葡萄球菌的敏感性和耐药性，联合纸片扩散法和E-test法从抗菌药物敏感表型的菌株中筛选疑似异质性耐药菌株，利用菌群谱型分析法（PAP）进行确证，传代测定异质性耐药稳定性，通过全基因组和比较基因组学分析异质性耐药机制。结果表明，36株金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素耐药率达11.11%～61.11%，对四环素和氨基糖苷类抗生素表现高度敏感。初筛得到19种金黄色葡萄球菌和抗菌药物组合异质性耐药，确证3种组合为异质性耐药表型，其中仅金黄色葡萄球菌J23保持稳定的异质性耐药表型。本研究表明，生牛乳源的金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类和喹诺酮类抗菌药物耐药性较高，对阿莫西林/克拉维酸的异质性耐药机制与blaZ和金属β-内酰胺酶的表达有关，对四环类药物的异质性耐药与四环素外排泵表达和耐药蛋白有关。

关键词：生牛乳金黄色葡萄球菌异质性耐药耐药亚群全基因组学

甘肃一起小反刍兽疫病例中流行毒株的生物学特性和遗传进化分析

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中国兽医科学 2025年

作者：刘萍杜国玉柳周斌聂帅帅吴锦艳曹小安何继军尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室庄浪县通化镇畜牧兽医站

2023年11月，甘肃省临夏市某羊场羔羊死亡，根据临床症状、病理剖检及实时荧光定量RT-PCR结果诊断为小反刍兽疫病毒（PPRV）感染。采用RT-PCR扩增PPRV流行株全基因组序列，比对分析全基因组及其F基因、H基因和N基因序列，绘制进化树。... 详细信息

2023年11月，甘肃省临夏市某羊场羔羊死亡，根据临床症状、病理剖检及实时荧光定量RT-PCR结果诊断为小反刍兽疫病毒（PPRV）感染。采用RT-PCR扩增PPRV流行株全基因组序列，比对分析全基因组及其F基因、H基因和N基因序列，绘制进化树。为探讨不同滴度PPRV疫苗毒株Nigeria75/1对绵羊外周血单个核细胞（PBMCs）增殖和分化的影响，采用CCK-8检测PBMCs的增殖情况，流式细胞术对CD4+和CD8+T淋巴细胞进行分型分析。结果显示，PPRV流行毒株基因组全长15954 bp，属于基因Ⅳ型；该流行毒株与2013-2014年小反刍兽疫疫情分离毒株China/XJYL/2013、China/3/2013及China/GS/2018亲缘关系最近。另外，不同滴度的PPRV疫苗毒株Nigeria75/1均抑制绵羊PBMCs体外增殖，且高滴度的PPRV疫苗毒株抑制CD4+和CD8+T淋巴细胞的分化。以上结果表明，引起此次PPRV感染的毒株可能来源于2013—2014年小反刍兽疫疫情。PPRV疫苗重复免疫或高剂量免疫可能是造成我国PPRV疫苗免疫后仍然会感染和发病的原因。

关键词：病理剖检小反刍兽疫病毒遗传进化分析流行病学

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极端条件下含能材料的模拟研究思考

高压物理学报 2025年第1期39卷 17-43页

作者：姬广富中国工程物理研究院流体物理研究所冲击波物理与爆轰物理全国重点实验室四川绵阳621999

含能材料在军事、民用和航天等领域具有广泛应用,极端条件下其物理化学性质会发生显著变化。通过模拟研究预测和优化含能材料性能具有重要意义,包括性能预测、优化设计、安全评估、成本效率控制等。为此,综述了极端条件下含能材料的研... 详细信息

含能材料在军事、民用和航天等领域具有广泛应用,极端条件下其物理化学性质会发生显著变化。通过模拟研究预测和优化含能材料性能具有重要意义,包括性能预测、优化设计、安全评估、成本效率控制等。为此,综述了极端条件下含能材料的研究背景、基本性质、模拟研究方法及进展、关键问题以及相关实验研究进展。其中,详细介绍了量子力学、分子动力学、蒙特卡罗和有限元等模拟方法及其研究进展,阐述了高压、高温、激光作用和界面效应等极端条件下模拟研究的关键问题,并列举了含能材料在撞击感度、化学释能规律、3D打印、绿色电合成、爆轰机理和超高含能材料合成等方面的实验研究进展。通过遴选代表性研究,展示了模拟研究在实际问题中的应用和解决方案。同时,介绍了一些最新研究成果,以反映该领域的最新进展和未来趋势。此外,详细讨论了跨学科研究的实现方式以及含能材料在极端条件下的安全性问题,包括可能的风险和预防措施。

关键词：含能材料极端条件模拟研究高压高温激光作用

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