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共刺激分子B7-H4在小鼠食管癌前病变进展中脾淋巴细胞表面的表达

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肿瘤 2014年第11期34卷 1010-1015页

作者：陈欣然王玲韩利霞周凯旋刘莉纪晓花单保恩河北医科大学第四医院科研中心河北石家庄050000 河北医科大学第四医院肿瘤研究所免疫室河北石家庄050000 河北省儿童医院输血科河北石家庄050000 白求恩国际和平医院256临床部检验科河北石家庄050000 廊坊卫生职业学院免疫病原学教研室河北廊坊065000

目的 :探讨小鼠食管癌前病变进展的不同阶段脾淋巴细胞中CD4+T细胞、CD8+T细胞和调节性T细胞[CD4+CD25+叉头翼状旋转转录因子3(forkhead-winged helix transcription factor 3,foxp3)+]所占比例及共刺激分子B7同系物4(B7 homologue 4,B7-H4)的表达变化。方法 :应用4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline-N-oxide,4NQO)饮水法诱导建立小鼠食管癌前病变模型,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色评价不同阶段小鼠食管组织的病理变化,应用FCM法检测食管癌前病变不同阶段小鼠脾淋巴细胞中CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞所占的百分率,以及B7-H4在上述细胞表面的阳性表达率。结果 :4NQO诱癌模型组小鼠食管组织在诱癌第12周出现低级别上皮内瘤变,并随着诱癌时间的延长,出现高级别上皮内瘤变和原位癌。4NQO诱癌模型组脾淋巴细胞中CD4+T细胞和CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞所占百分率明显高于对照组(以蒸馏水为饮用水)(P均<0.01)。4NQO诱癌模型组小鼠CD4+T细胞上B7-H4的阳性表达率明显高于对照组(P<0.01),并且具有时间依赖性(P<0.05)。结论 :4NQO饮水法能够诱导小鼠发生食管癌前病变,CD4+T细胞、调节性T细胞以及B7-H4可能参与了机体的免疫逃逸机制。

关键词：食管肿瘤癌前状态肿瘤逃逸淋巴细胞 B7-H4

慢病毒载体介导的小鼠骨髓树突状细胞RelB基因沉默

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第9期24卷 857-860页

作者：包杰王前郑磊裘宇容曾方银杨春莉黄宪章南方医科大学南方医院检验医学科广东广州510515 南方医科大学南方医院院办公室广东广州510515 广东省中医院检验科广东广州510120

目的:利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因,建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC,为自身免疫病的防治提供新方法。方法:设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5,合成并克隆到慢病毒载体上,与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装... 详细信息

目的:利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因,建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC,为自身免疫病的防治提供新方法。方法:设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5,合成并克隆到慢病毒载体上,与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装成病毒颗粒,收集病毒上清,测定病毒滴度,然后包装慢病毒感染DC,RT-PCR和免疫荧光方法检测,灰度扫描并用软件分析RelB基因的表达水平,未成熟DC作对照组,选择T6包装病毒为RNAi的阴性对照。结果:RT-PCR和免疫荧光方法发现R5病毒感染的DCRelB基因表达水平与未成熟DC基因表达水平接近,低于成熟DC的表达水平(P<0.05),而实验对照T6组病毒感染的DC其RelB基因表达水平高于未成熟DC(P<0.05)和R5病毒转染DC组(P<0.05)。结论:小鼠骨髓DC表达的RelB基因被慢病毒载体有效沉默,有望成为DC免疫治疗的新载体。

关键词：慢病毒载体树突状细胞 RelB基因基因沉默

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正常颅盖骨骨髓转化年龄分布的MRI研究

中华放射学杂志 2009年第5期43卷 514-518页

作者：潘诗农李琦李巍陈志安刘云会吴振华郭启勇中国医科大学附属盛京医院放射科沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院神经外科沈阳110004

目的采用3．0TMR T1WI探讨正常颅盖骨骨髓转化年龄分布方式。方法对360例行头部3．0TMR平扫未见异常及临床、实验室检查和随诊观察正常者作为研究对象，按年龄顺序依次分为〈1、1～2、3～5、6～14、15～29、30～49、≥50岁组，共7个年... 详细信息

目的采用3．0TMR T1WI探讨正常颅盖骨骨髓转化年龄分布方式。方法对360例行头部3．0TMR平扫未见异常及临床、实验室检查和随诊观察正常者作为研究对象，按年龄顺序依次分为〈1、1～2、3～5、6～14、15～29、30～49、≥50岁组，共7个年龄组，选择正中及旁矢状面T1WI进行定量、定性分析，根据不同颅盖骨板障厚度、信号分布特点，进行颅盖骨骨髓MRI分型。年龄与分型间相关性比较采用线性相关x^2检验。结果正常颅盖骨骨髓T1W1分为4型：（1）正常颅盖骨骨髓型115例，其中Ⅰa型47例，平均板障厚度（h）为（1．24±0．31）mm；Ⅰb型68例，h为（1．76±0．37）mm；Ⅱ型57例，h为（2．78±0．69）mm；Ⅲ型148例，其中Ⅲa型18例，h为（2．33±0．65）mm；Ⅲb型88例，h为（4．01±0．86）mm；Ⅲc型42例，h为（4．31±0．73）mm；Ⅳ型40例，其中Ⅳa型25例，h为（5．17±1．02）mm；Ⅳb型15例，h为（5．85±1．45）mm。（2）〈1岁组40例，Ⅰa型20例，Ⅰb型20例，h为（1．47±0．42）mm；1～2岁组40例，Ⅰa型16例，Ⅰb型18例，Ⅱ型6例，h为（1．68±0．52）mm；3～5岁组40例，Ⅰa型8例，Ⅰb型18例，Ⅱ型14例，h为（1．84±0．73）mm；6—14岁组60例，Ⅰa型3例，Ⅰb型12例，Ⅱ型27例，Ⅲa型0例，Ⅲb型12例，Ⅲc型6例，h为（2．92±1．00）mm；15～29岁组60例，Ⅱ型7例，Ⅲ型5例，Ⅲb型27例，ⅢC型15例，Ⅳa型6例，h为（3．95±0．97）mm；30～49岁组60例，Ⅱ型3例，Ⅲa型7例，Ⅲb型29例，Ⅲc型15例，Ⅳa型3例，Ⅲb型3例，h为（4．30±1．35）mm；≥50岁组，Ⅲa型6例，Ⅲb型20例，Ⅲc型6例，Ⅳa型16例，Ⅳb型12例，h为（4．51±1．40）mm。（3）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的年龄组与分型间呈线性相关性（x^2=266．36，P〈0．01），即随着年龄增长，颅盖骨骨髓由Ⅰ型向Ⅳ型转变。结论3．0TMRT1WI正常颅盖骨骨髓转化年龄分布方式具有特征性规律，随年龄增加，颅盖骨骨髓逐渐由Ⅰ型向Ⅳ型转变。

关键词：颅骨骨髓磁共振成像

IFN-γ对胆囊癌荷瘤小鼠IL-10和单核-巨噬细胞的影响

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中华消化外科杂志 2014年第1期13卷 51-54页

作者：葛春林孙涛程颖王坤中国医科大学附属第一医院普通外科教研室胰腺外科沈阳110001

目的探讨IFN-γ对胆囊癌小鼠模型中肿瘤内IL-10和单核-巨噬细胞的影响。方法20只BALB／C裸鼠通过皮下接种人胆囊癌细胞株GBC—SD构建胆囊癌小鼠模型，按照随机数字表法分为IFN-γ组和对照组（每组各10只）。IFN．叮组小鼠在肿瘤内注剃... 详细信息

目的探讨IFN-γ对胆囊癌小鼠模型中肿瘤内IL-10和单核-巨噬细胞的影响。方法20只BALB／C裸鼠通过皮下接种人胆囊癌细胞株GBC—SD构建胆囊癌小鼠模型，按照随机数字表法分为IFN-γ组和对照组（每组各10只）。IFN．叮组小鼠在肿瘤内注剃、鼠重组IFN-γ 0．1mL（1×10^5kU／L，生理盐水溶解），对照组注射同等剂量的生理盐水，通过ELISA法检测肿瘤中鼠源性IL-10的表达情况，通过免疫组织化学染色法计数CDl4’细胞（单核-巨噬细胞）、CD64^＋细胞（M1型巨噬细胞）和CD206’细胞（M2型巨噬细胞），并以Student’st检验对所得数据进行分析。结果接种肿瘤细胞1周后，裸鼠皮下全部成瘤，固定于左前肢腋下。IFN-γ组存活9只，对照组存活7只。IFN-γ组裸鼠肿瘤质量为（518±138）mg，对照组为（669±128）mg；IFN．1组肿瘤体积为（456±172）mm。，对照组为（505±146）mm。，两组裸鼠肿瘤质量和体积比较，差异无统计学意义（t=2．240，1．503，P〉0．05）。IFN-γ组裸鼠肿瘤中鼠源性IL-10浓度为（58±16）μg／g，显著低于对照组的（102±45）“g／g，两组比较，差异有统计学意义（t=2．796，P〈0．05）。IFN-γ组中单核-巨噬细胞计数为814-16，显著高于对照组的50-e21；M1型巨噬细胞计数为66±12，显著高于对照组的94-4；M2型巨噬细胞计数为154-4，显著低于对照组的40±14，两组细胞计数比较，差异均有统计学意义（t=3．214，13．127，6．914，P〈0．05）。结论IFN-γ能够降低肿瘤微环境中的IL-10浓度。IFN-γ能够诱导单核-巨噬细胞浸润至胆囊癌细胞问质中，主要分化为M1型巨噬细胞。

关键词：胆囊肿瘤 IL-10 IFN-γ 单核-巨噬细胞

鼻咽癌FFF与FF模式下VMAT计划剂量学比较

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中华放射肿瘤学杂志 2018年第4期27卷 401-405页

作者：贺先桃谭军文龙雨松韦婷王占宇陈绍俊广西医科大学第四附属医院肿瘤科放疗室柳州545005

目的比较鼻咽癌非均整（FFF）与均整（FF）模式下VMAT计划剂量学特性,分析FFF模式下VMAT计划临床可行性。方法选取2016—2017年间Ⅱ期鼻咽癌患者10例,分别对同一患者CT图像及CTV用相同处方剂量6975 cGy和相同优化参数在RayStation计... 详细信息

目的比较鼻咽癌非均整（FFF）与均整（FF）模式下VMAT计划剂量学特性,分析FFF模式下VMAT计划临床可行性。方法选取2016—2017年间Ⅱ期鼻咽癌患者10例,分别对同一患者CT图像及CTV用相同处方剂量6975 cGy和相同优化参数在RayStation计划系统平台设计6 MV X射线FFF和FF的VMAT计划,比较两种计划剂量学特性、机器跳数和出束时间。配对t检验差异。结果 FF计划与FFF计划的靶区D98%、靶区覆盖率、CI均相近（P=0.262~0.975）,FF计划在靶区D2%、Dmean、HI略有优势（P=0.004~0.038）;FFF计划较FF计划在左、右眼晶体受量、左腮腺受量〉30 Gy体积、左颞叶Dmean有一定降低（P=0.002~0.025）;正常组织（Body）在2~30 Gy内FFF计划受照体积均〈FF计划（P=0.000~0.003）;FFF计划平均机器跳数增至FF计划的1.188倍（P=0.000）,平均出束时间减少为FF计划的91.2%（P=0.024）。结论 FF计划和FFF计划均能满足临床剂量学要求。在靶区剂量分布上FF计划略有优势,在OAR保护和低剂量照射上FFF计划更具优势,虽然FFF计划机器跳数增加,但出束时间反而下降,因此FFF模式可能有利于提高治疗效率。

关键词：鼻咽肿瘤/容积调强弧形疗法非均整模式剂量学

GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性研究

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中国实用儿科杂志 2007年第8期22卷 587-590页

作者：徐小延邱广蓉宫立国辛娜孙开来中国医科大学医学遗传学教研室辽宁沈阳110001

目的探讨GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性。方法2001年,收集沈阳军区总医院心脏外科62个单纯性先天性心脏病(CHD)家系,选择GATA4基因编码区内4个可引起氨基酸改变的cSNP,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分... 详细信息

目的探讨GATA4基因与单纯性先天性心脏病的相关性。方法2001年,收集沈阳军区总医院心脏外科62个单纯性先天性心脏病(CHD)家系,选择GATA4基因编码区内4个可引起氨基酸改变的cSNP,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分析该62个单纯性CHD核心家系206名成员的基因型;应用ETDT软件进行单位点关联分析;应用2LD软件进行配对连锁不平衡检验;应用TRANSMIT软件进行单体型分析。结果Q19E(rs1139240)位点未检测到多态。L39V(rs1139241)、P66A(rs1139244)和G377S(rs3729856)位点存在多态。单位点关联分析显示L39V位点χ2=6·178(P检验显示L39V和P66A之间存在连锁不平衡(D’=0·999999)。单体型分析共观察到4种单体型,只有2种单体型的频率大于3%,但却占单体型总数的97·7%。这两种单体型的总体统计χ2=1·0345(P>0·05)。结论Q19E在本文人群中未检测到多态;L39V、P66A和G377S3个位点与单纯性CHD有明显的相关性(P<0·05)。

关键词：单纯性先天性心脏病 GATA4基因单核苷酸多态单体型

猪带绦虫Tsl4-3-3.6蛋白多克隆抗体制备及在不同发育阶段的表达

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中国病原生物学杂志 2019年第12期14卷 1423-1428页

作者：欧阳任辉罗波李想刘美辰周必英遵义医科大学寄生虫学教研室贵州遵义563000 贵州省第二人民医院医学检验科

目的制备猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体,并检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫及囊尾蚴阶段的表达情况。方法合成Ts14-3-3.6基因全长,然后克隆至pCznI原核表达质粒,转化至大肠埃希菌ArctieEx-press中并诱导表达,采用SDS-PAGE和Wester... 详细信息

目的制备猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体,并检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫及囊尾蚴阶段的表达情况。方法合成Ts14-3-3.6基因全长,然后克隆至pCznI原核表达质粒,转化至大肠埃希菌ArctieEx-press中并诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析,通过Ni柱亲和纯化获得Ts14-3-3.6重组蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰兔,制备抗Ts14-3-3.6多克隆抗体,以此为一抗采用Western blot检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段的表达。结果pCznI一Ts14-3-3.6重组表达质粒构建成功,诱导表达的Ts14-3-3.6重组蛋白存在于包涵体中,相对分子质量约29.43X102。Western blot检测纯化带有His标签的Ts14-3-3.6重组蛋白能被His标签抗体识别;用该蛋白免疫新西兰兔获得效价为1:512000的多克隆抗体;分别以提取的猪带绦虫成虫和囊尾蚴总蛋白为抗原进行Westernblot,均出现与Ts14-3-3.6多克隆抗体、囊虫病人血清及囊虫病猪血清反应条带,即均有该蛋白的表达。结论成功制备猪带绦虫Ts14-3-3.6重组蛋白并获得较高纯度的特异性高效价多克隆抗体。Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段均有表达。

关键词：猪带绦虫 Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体制备表达

HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒感染者发生肝硬化风险模型的建立

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中华检验医学杂志 2023年第7期46卷 712-718页

作者：李楠赵可馨刘子淇张嘉荣冯永辉中国医科大学附属第一医院检验科、国家医学检验临床医学研究中心沈阳110001

目的探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者发生肝硬化的独立影响因素,建立列线图模型并检验其诊断效能。方法回顾性分析2011—2021年就诊于中国医科大学附属第一医院596例HBeAg阴性慢性HBV感染者和677例乙型肝炎相... 详细信息

目的探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者发生肝硬化的独立影响因素,建立列线图模型并检验其诊断效能。方法回顾性分析2011—2021年就诊于中国医科大学附属第一医院596例HBeAg阴性慢性HBV感染者和677例乙型肝炎相关肝硬化患者的临床常用实验室数据,按7∶3比例随机分为建模组(892例)和验证组(381例),采用多重共线性检验和多因素Logistic回归分析肝硬化的独立影响因素,建立列线图模型并通过受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线、临床决策曲线及临床影响曲线对模型进行验证。结果多因素Logistic回归分析显示乙型肝炎核心抗体(OR=1.492,95%CI 1.316~1.706)、γ-谷氨酰转移酶(OR=1.015,95%CI 1.010~1.022)、血小板计数(OR=0.986,95%CI 0.982~0.988)和白蛋白(OR=0.853,95%CI 0.824~0.882)是乙型肝炎相关肝硬化发生的独立影响因素(P临床影响曲线显示模型净收益率较高,临床应用性能较好。结论乙型肝炎核心抗体、γ-谷氨酰转移酶、血小板计数和白蛋白是HBeAg阴性慢性HBV感染者发生肝硬化的独立影响因素,基于此建立的列线图具有良好的区分度、校准度和应用性能,能够为肝硬化发病风险的预测提供帮助。

关键词：乙型肝炎肝硬化乙型肝炎病毒列线图

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细胞分裂周期蛋白14生物学功能的研究进展

吉林大学学报（医学版） 2019年第4期45卷 960-964页

作者：刘儒谢基明孟峻内蒙古医科大学附属医院检验科内蒙古呼和浩特010050 内蒙古自治区人民医院检验科内蒙古呼和浩特010017

细胞分裂周期蛋白14(Cdc14)属于高度保守的丝、苏氨酸双特异性磷酸酶家族,能够下调周期素依赖性激酶(CDK)的活性,是重要的细胞周期调节蛋白,在真核生物细胞中广泛表达。Cdc14在不同的真核细胞中生物学功能相差甚远。在出芽酵母细胞中,Cd... 详细信息

细胞分裂周期蛋白14(Cdc14)属于高度保守的丝、苏氨酸双特异性磷酸酶家族,能够下调周期素依赖性激酶(CDK)的活性,是重要的细胞周期调节蛋白,在真核生物细胞中广泛表达。Cdc14在不同的真核细胞中生物学功能相差甚远。在出芽酵母细胞中,Cdc14通过逆转CDK的活性,进而调节出芽酵母细胞有丝分裂退出网络;在裂殖酵母细胞中,Cdc14的同源物多聚腺苷酸因子Clp1对于裂殖酵母细胞有丝分裂的退出无明显影响;在人类细胞中,Cdc14的同源物人类Cdc14A(hCdc14A)可使CDK失活,控制有丝分裂的时间。基于国内外对Cdc14的研究成果,现针对Cdc14在出芽酵母细胞、非洲裂殖酵母细胞、秀丽隐杆线虫细胞、非洲爪蟾细胞、鸟类细胞、小鼠卵母细胞和人类细胞7种不同真核生物细胞中的分型、定位及其生物学功能等进行综述,为Cdc14的研究提供参考。

关键词：有丝分裂细胞分裂周期蛋白14 减数分裂出芽酶酵母细胞周期素依赖性激酶