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激发子诱发小麦叶肉细胞原生质体微管骨架排列格局与[Ca^(2+)]_(cyt)的变化

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分子细胞生物学报 2007年第4期40卷 205-213页

作者：刘刚党磊王冬梅河北农业大学生命科学学院保定071001 浙江大学生命科学学院杭州310058

以小麦叶肉细胞原生质体-激发子互作为研究体系,通过免疫荧光标记和Ca^(2+)荧光染料的装载并结合药理学试验,借助激光共聚焦扫描显微镜观察,探讨小麦抵抗叶锈菌侵染过程中微管骨架和Ca^(2+)之间的内在联系。试验结果表明,激发子处理可... 详细信息

以小麦叶肉细胞原生质体-激发子互作为研究体系,通过免疫荧光标记和Ca^(2+)荧光染料的装载并结合药理学试验,借助激光共聚焦扫描显微镜观察,探讨小麦抵抗叶锈菌侵染过程中微管骨架和Ca^(2+)之间的内在联系。试验结果表明,激发子处理可引起抗性品种原生质体[Ca^(2+)]_(cyt)的升高并诱发微管骨架的解聚,预解聚微管骨架,再用激发子处理,可使抗性品种原生质体[Ca^(2+)]_(cyt)的升高幅度增加。

关键词：微管 Ca^2+ 激发子原生质体小麦

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两株低温沼气产酸细菌的分离鉴定及产酸特性

微生物学报 2015年第11期55卷 1437-1444页

作者：万永青张伟满都拉田瑞华王瑞刚段开红内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010018 金宇保灵生物药品有限公司内蒙古呼和浩特010030

【目的】分离筛选低温沼气产酸细菌并研究其发酵特性。【方法】利用筛选培养基分离产酸细菌;通过形态学观察、16S rRNA进行鉴定;利用糖发酵、淀粉水解、明胶液化、过氧化氢酶等实验考察发酵特性;采用气相色谱法测定挥发性脂肪酸(Volatil... 详细信息

【目的】分离筛选低温沼气产酸细菌并研究其发酵特性。【方法】利用筛选培养基分离产酸细菌;通过形态学观察、16S rRNA进行鉴定;利用糖发酵、淀粉水解、明胶液化、过氧化氢酶等实验考察发酵特性;采用气相色谱法测定挥发性脂肪酸(Volatile fatty acid,VFA),对菌株的产酸特性进行研究。【结果】从霍林河市户用沼液中分离出两株在4℃产酸较高的菌株FJ-8和FJ-15,经16S rRNA系统发育树分析分别属于Pseudomonas sp.和Shewanella sp.。两株菌均能够水解淀粉、液化明胶,且过氧化氢酶反应均呈阳性。它们最适的产酸温度分别是15℃和20℃,在4℃液体发酵10 d后所产总VFAs分别为2593 mg/L和2687 mg/L。其中乙酸含量分别为792 mg/L和966 mg/L。另外,相同条件下5 L模拟发酵结果显示处理组(添加所筛两株菌混合发酵液)的周产气量比对照组高出59%。【结论】分离出的两株产酸细菌FJ-8和FJ-15在低温条件下具有较好的产酸性能,在提高低温条件下沼气产气量方面具有很强的应用前景。

关键词：产酸鉴定挥发性脂肪酸低温沼气发酵

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耐高温东方伊萨酵母乙醇发酵特性

农业工程学报 2014年第3期30卷 180-187页

作者：王风芹汪媛媛陶西张瑞谢慧宋安东河南农业大学生命科学学院农业部农业微生物酶工程重点实验室郑州450002

燃料乙醇作为一种可再生清洁能源，越来越受到人们的广泛关注，选育出一株耐高温乙醇发酵菌株对于提高乙醇发酵效率、降低能耗和生产成本具有重要意义。该文对分离自烟叶腐解物中的耐高温乙醇发酵菌株HN-1进行生理生化特性试验及分子生... 详细信息

燃料乙醇作为一种可再生清洁能源，越来越受到人们的广泛关注，选育出一株耐高温乙醇发酵菌株对于提高乙醇发酵效率、降低能耗和生产成本具有重要意义。该文对分离自烟叶腐解物中的耐高温乙醇发酵菌株HN-1进行生理生化特性试验及分子生物学鉴定，并对其发酵特性进行初步研究。结果表明：HN-1菌株为东方伊萨酵母，能够利用葡萄糖和果糖发酵生产乙醇，但不能利用木糖、半乳糖等。该菌株的最适生长温度为38℃，乙醇发酵的合适温度范围为38-45℃，且随着发酵温度的升高，乙醇生成速率加快，发酵时间缩短。38℃乙醇发酵的最适葡萄糖浓度为120g／L，乙醇产量为58．19g／L，乙醇产率为0．460g／g。利用玉米秸秆水解液发酵，乙醇产量为20．74g／L，乙醇产率为0．468g／g，达到葡萄糖理论转化率的91．6％。该研究为生物乙醇的高温发酵提供了宝贵的菌种资源和技术支撑。

关键词：发酵秸秆乙醇菌种鉴定东方伊萨酵母

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奶山羊PIS遗传缺陷基因的检测及应用

遗传 2012年第7期34卷 895-900页

作者：杨波贾丽丽赵德超孟丽云刘雪锋张燕军张文广李金泉内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018 内蒙古自治区动物育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018 内蒙古ATCG生物信息研究所呼和浩特010020

文章旨在建立一种奶山羊无角间性综合征(Polled intersex syndrome,PIS)遗传缺陷基因检测方法。根据PIS基因序列(AF404302)分别设计PIS、PIS+、NEI 3对扩增引物,利用PCR技术鉴定奶山羊PIS遗传缺陷基因型。基因型为PIS PIS+与PIS PIS+的... 详细信息

文章旨在建立一种奶山羊无角间性综合征(Polled intersex syndrome,PIS)遗传缺陷基因检测方法。根据PIS基因序列(AF404302)分别设计PIS、PIS+、NEI 3对扩增引物,利用PCR技术鉴定奶山羊PIS遗传缺陷基因型。基因型为PIS PIS+与PIS PIS+的表型正常个体分别扩增出(141,300 bp)和(141,449,300 bp)的片段组合,隐性纯合间性山羊(PIS+PIS+)扩增出(449,300 bp)的片段组合。利用该方法检测一个224个体的奶山羊群体,结果显示:PIS PIS、PIS PIS+和PIS+PIS+个体分别为70、150和4个。该群体中PIS PIS+基因型频率高达66.9%,PIS+基因频率为35.3%,其子代群体出现间性山羊的可能性将超过12%。文章所开发的奶山羊PIS遗传缺陷基因检测方法可直接准确判别种公羊的基因型,从而避免缺陷基因携带者种公羊的使用。该方法易操作且准确性高,对奶山羊的标记辅助选择及奶山羊产业的健康发展具有重要意义。

关键词：无角间性综合征(PIS) 分子遗传检测基因分型性别鉴定

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自然发酵酸菜汁中乳酸杆菌的分离与鉴定

中国调味品 2019年第10期44卷 6-7,13页

作者：孟建宇徐慧欣内蒙古农业大学生命科学学院应用与环境微生物实验室

采用添加溴甲酚绿的分离培养基对自然发酵酸菜汁中的乳酸菌进行分离。利用经典分类法及16S rDNA序列分析,对筛选到的乳酸菌进行细菌学鉴定。结果表明,从自然发酵的酸菜汁中分离出的3株乳酸菌均属于乳杆菌属(Lactobacillus)。

关键词：酸菜汁乳酸菌分离鉴定 16S rDNA

马的骨髓间充质干细胞诱导为软骨细胞和成骨细胞及其鉴定

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动物学杂志 2020年第3期55卷 353-362页

作者：房君魏奥刘乐徐鸿洋张焱如周欢敏内蒙古农业大学生命科学学院生物制造重点实验室呼和浩特010018

本研究旨在将建立的马(Equus caballus)骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和软骨细胞。通过原代细胞培养获取马的骨髓间充质干细胞,并对第3代(P3)纯化细胞进行干细胞特性鉴定,之后诱导其向不同细胞分化并对诱导分化的细胞进行染色和... 详细信息

本研究旨在将建立的马(Equus caballus)骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和软骨细胞。通过原代细胞培养获取马的骨髓间充质干细胞,并对第3代(P3)纯化细胞进行干细胞特性鉴定,之后诱导其向不同细胞分化并对诱导分化的细胞进行染色和特异性基因表达的鉴定。实验结果显示,获得的马骨髓细胞表达了干细胞转录因子和间充质干细胞表面标记物,确定获得的细胞为马骨髓间充质干细胞。P3代细胞经诱导培养后由长梭形转变为“骨结节”形态的成骨细胞和“铺路石”形态的软骨细胞。茜素红将诱导的成骨细胞团染成红色,并随着时间的递增红色“骨结节”逐步增大;阿尔新蓝则将蛋白聚糖和透明质酸等含量丰富的诱导细胞染为蓝色,并且随着诱导天数的增加被染成蓝色的软骨细胞逐渐增多,而对照组细胞未见着色。实时荧光定量PCR检测发现,成骨细胞中Col和ALPL基因的表达量随诱导时间的延长发生明显变化;普通PCR结果显示,在诱导的软骨细胞中扩增获得了collagenⅡ、aggrecan和Sox9软骨特异基因,而对照组细胞不表达特异基因。综上所述,本实验建立了马骨髓间充质干细胞并成功将其诱导分化为成骨细胞和软骨细胞,为骨组织缺损修复和软骨细胞的治疗提供了实验基础。

关键词：马骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞软骨细胞

遗传学教学中在细胞与分子水平上理解等位基因的显性与隐性

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遗传 2015年第1期37卷 98-108页

作者：邢万金莫日根内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021

在孟德尔遗传学中显性与隐性描述一对等位基因在杂合体时的功能关系,把在表型上看出效果的等位基因称为显性等位基因,看不出效果的称为隐性等位基因,并由此提出分离定律和自由组合定律,开创了遗传学这一学科。这样的描述最初是逻辑推理... 详细信息

在孟德尔遗传学中显性与隐性描述一对等位基因在杂合体时的功能关系,把在表型上看出效果的等位基因称为显性等位基因,看不出效果的称为隐性等位基因,并由此提出分离定律和自由组合定律,开创了遗传学这一学科。这样的描述最初是逻辑推理的需要,但对于研究生命结构与功能关系的实验性科学而言,必须在细胞与大分子实体上找到显性与隐性的生物学基础。在遗传学教学中,如何用现代分子遗传学知识诠释经典的显性和隐性概念是教师经常面临的释疑问题。笔者认为要理解等位基因显性和隐性的实质,必须了解等位基因的差异及其产物RNA或蛋白质在细胞中的具体作用。不同等位基因的蛋白质或者RNA产物在细胞内的不同时间、不同地点所起的作用不同,赋予了在细胞、组织或器官水平上能够区分观测到的表型差异,即显性或者隐性。文章根据基因结构的变异、基因调控的差异、基因产物的类型与作用等在细胞与分子水平上分别举例探讨了等位基因显性与隐性的分子实质及其变化,以期在遗传学教学过程中使学生对基因的变异和功能有更全面、更具体的理解。

关键词：遗传学教学等位基因显性隐性

W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性

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高等学校化学学报 2008年第10期29卷 1999-2002页

作者：王发祥夏立秋丁学知赵新民单世平莫湘涛张友明喻子牛湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室长沙410081 华中农业大学生命科学与技术学院农业微生物国家重点实验室武汉430070

W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个'螺旋桨状'的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对... 详细信息

W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个'螺旋桨状'的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高;经原子力显微镜观察,发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6μm,且晶体表面不及野生型光滑;此外,W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似,但经过紫外光照射9 h后,其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上.W544F突变较好地解决了Cry1Ac毒素蛋白田间应用不持久的问题,具有重要的应用价值.

关键词： Cry1Ac蛋白定点突变色氨酸苯丙氨酸稳定性

小鼠胚胎发育过程中Brachyury对Wnt信号通路的作用研究

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基因组学与应用生物学 2019年第6期38卷 2509-2515页

作者：田志鹏智达夫龙鑫曹贵方内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018 内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018

Brachyury对调控小鼠胚胎发育起着至关重要的作用,缺乏Brachyury蛋白的小鼠胚胎不能正常发育。Wnt信号通路在小鼠胚胎发育中可控制胚胎的轴向发育等重要的生理过程,Brachyury可能通过与Wnt信号通路的相互作用导致短尾表型的产生。为了揭... 详细信息

Brachyury对调控小鼠胚胎发育起着至关重要的作用,缺乏Brachyury蛋白的小鼠胚胎不能正常发育。Wnt信号通路在小鼠胚胎发育中可控制胚胎的轴向发育等重要的生理过程,Brachyury可能通过与Wnt信号通路的相互作用导致短尾表型的产生。为了揭示Brachyury与Wnt信号通路相互作用关系,本研究制作了Brachyury突变小鼠,通过提取不同时期的胚胎并提取总RNA,经反转录进行qPCR检测Brachyury与Wnt信号通路相关成分的表达关系。结果显示,Brachyury、Axin2、Dkk1及Wnt3a的表达在突变胚胎和野生胚胎中的表达有显著差异。因此,Brachyury作为转录因子对上述Wnt信号通路成分的表达有调节作用,它们形成一个调控网络调控小鼠胚胎的正常发育。本研究为小鼠胚胎发育期间Brachyury (T)的功能作用提供了理论基础。

关键词： Brachyury蛋白 Wnt信号通路小鼠胚胎