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新疆库车市和皮山县驴乳源金黄色葡萄球菌的MLST分型、毒力基因和耐药性检测

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黑龙江畜牧兽医 2024年第11期 78-83页

作者：吴自豪刘英杰蔡依龙陈伟塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

为了了解驴乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的流行情况,试验对从新疆驴乳中分离得到的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST分型)、药敏试验,以及生物被膜形成能力、毒力基因和溶血活性检测。结果表明:金黄色葡萄球菌在健... 详细信息

为了了解驴乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的流行情况,试验对从新疆驴乳中分离得到的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST分型)、药敏试验,以及生物被膜形成能力、毒力基因和溶血活性检测。结果表明:金黄色葡萄球菌在健康驴乳中的分离率为8%(6/75),6株金黄色葡萄球菌分别属于5个MLST分型(STs),即ST6238、ST8115、ST8116、ST8126和ST1660(其中ST8115、ST8116和ST8126为新发现的STs)。所有分离株对青霉素、克林霉素、红霉素和利福平等有不同程度的耐受,其中4株为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA),并且有2株MRSA对利奈唑胺耐药;4株金黄色葡萄球菌具有生物被膜形成能力。在驴乳金黄色葡萄球菌中检测到11种毒力基因,分别为sea、sec、seh、sei、tsst-1、hla、hlb、eta、clfA、clfB和cna基因,并且均具有溶血活性。说明驴乳源金黄色葡萄球菌具有较强的耐药性,而且在宿主致病和食品生产安全等方面具有潜在威胁。

关键词：驴乳 MLST分型耐药性 MRSA 毒力基因

新疆维吾尔自治区阿拉尔市某规模化养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其毒力、耐药性分析

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畜牧与饲料科学 2024年第1期45卷 114-119页

作者：陈俊凯于月通杨彬王泽坤李静陀海欣徐俊飞齐萌塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

[目的]分离鉴定新疆维吾尔自治区阿拉尔市猪乳源金黄色葡萄球菌,了解其致病性和耐药性。[方法]从阿拉尔市某规模化养殖场收集6份新鲜猪乳样本,采用甘露醇高盐琼脂(MSA)培养基分离乳样中的金黄色葡萄球菌,利用表型鉴定方法及细菌16S rDN... 详细信息

[目的]分离鉴定新疆维吾尔自治区阿拉尔市猪乳源金黄色葡萄球菌,了解其致病性和耐药性。[方法]从阿拉尔市某规模化养殖场收集6份新鲜猪乳样本,采用甘露醇高盐琼脂(MSA)培养基分离乳样中的金黄色葡萄球菌,利用表型鉴定方法及细菌16S rDNA序列分析法对分离到的菌株进行鉴定,检测分离菌株的生物被膜形成能力,利用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验,利用PCR法检测毒力基因和耐药基因。[结果]经分离培养及分子生物学鉴定,从6份乳样中获得2株金黄色葡萄球菌,分离率为33.33%(2/6);2株金黄色葡萄球菌均具有强生物被膜形成能力(+++);2株金黄色葡萄球菌均对利福平敏感,均对青霉素、头孢西丁、四环素、红霉素、替米考星、克林霉素和磺胺甲噁唑耐药;在检测的5种耐药基因中,2株金黄色葡萄球菌均携带ant(4)基因和mecA基因;在检测的20种毒力基因中,共检测到6种毒力基因,其中,2株金黄色葡萄球菌均携带seg、sei、hlb、fnbA、clfA基因,有1株携带hla基因。[结论]该养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力强,携带多种毒力基因和耐药基因,表现为多重耐药性。

关键词：金黄色葡萄球菌分离鉴定致病性耐药性猪乳

脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞miRNA表达谱的比较分析

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中国畜牧兽医 2024年 4066-4079页

作者：许浩天于月通李静马志远杨彬王泽坤陀海欣齐萌塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室

【目的】探索钙离子对牛乳腺上皮细胞炎症反应的调控作用,比较分析脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞的miRNA表达谱。【方法】使用脂多糖处理牛乳腺上皮细胞构建炎症反应模型,检测不同浓度(0.5～6.6 mmol/L)钙离子和脂多糖(50μg/mL... 详细信息

【目的】探索钙离子对牛乳腺上皮细胞炎症反应的调控作用,比较分析脂多糖与钙离子共处理的牛乳腺上皮细胞的miRNA表达谱。【方法】使用脂多糖处理牛乳腺上皮细胞构建炎症反应模型,检测不同浓度(0.5～6.6 mmol/L)钙离子和脂多糖(50μg/mL)共处理的牛乳腺上皮细胞的炎症因子转录水平。提取正常、脂多糖处理、脂多糖与钙离子共处理牛乳腺上皮细胞样本中总RNA,每组各3个样本。对9个RNA样本进行质量评估,并对其开展miRNA测序和生物信息学分析,最后对3组共有差异表达miRNA进行实时荧光定量PCR验证。【结果】在牛乳腺上皮细胞炎症模型中,高浓度钙离子可抑制炎症因子的转录。9个样本的clean reads在raw reads中占比为93.86%～98.18%,序列分布长度均集中在21～24 nt之间。3组样本的组内相似性高,而组间差异度高。3组样本共鉴定出47个差异表达miRNA,共有差异表达miRNA分别为bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达miRNA的靶基因显著富集于细胞通讯调节、信号调节、内膜系统、系统发育、细胞发育过程、细胞分化等GO条目,显著富集于HIF-1信号通路、ErbB信号通路、TNF信号通路、突触囊泡周期、肌醇磷酸代谢途径等通路。实时荧光定量PCR验证结果显示,3组样本共有差异表达miRNA(bta-miR-677和bta-miR-1246)表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】钙离子通过调控牛乳腺上皮细胞内bta-miR-11980、bta-miR-1246和bta-miR-677等差异表达miRNA的表达模式,间接影响牛乳腺上皮细胞炎症反应进程。

关键词：脂多糖钙离子牛乳腺上皮细胞 miRNA表达谱

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猪丹毒丝菌的分离鉴定和耐药性分析

中国兽医杂志 2024年第8期60卷 62-68页

作者：刘淑华王岚张家浩杨睿智刘祥杰李虎邢潇月李莲瑞塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木畜牧科技兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学生命科学与技术学院新疆阿拉尔843300

新疆维吾尔自治区阿克苏地区某规模化猪场猪只发生急性死亡,临床症状为关节炎和败血症等。为了解引起猪发病的致病菌及其耐药性,本试验通过实验室常规纯培养方法对采集自该猪场的病猪脏器进行细菌的分离纯化;通过革兰染色镜检和电子显... 详细信息

新疆维吾尔自治区阿克苏地区某规模化猪场猪只发生急性死亡,临床症状为关节炎和败血症等。为了解引起猪发病的致病菌及其耐药性,本试验通过实验室常规纯培养方法对采集自该猪场的病猪脏器进行细菌的分离纯化;通过革兰染色镜检和电子显微镜观察进行形态学鉴定,生化试验进行生化鉴定,并进行16S rDNA基因PCR扩增和序列分析;通过药敏试验检测分离菌株的耐药性。结果显示,分离菌株为革兰阳性菌,形态为长直、微弯曲状;生化鉴定结果显示,触酶反应、尿素、氧化酶和吲哚呈阴性,乳糖、果糖、硫化氢和葡萄糖呈阳性;结合16S rDNA基因序列比对确定分离菌株为猪丹毒丝菌。药敏试验结果显示,分离菌株对β-内酰胺类、硝基呋喃类、磺胺类和2种氨基糖苷类药物敏感。本试验结果为该规模化猪场治疗和防控猪丹毒以及进一步研究提供了科学依据。

关键词：猪丹毒丝菌分离与鉴定耐药性分析 16S rDNA

高盐饮水对肉鸡生长性能、器官指数及血清抗氧化指标的影响

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现代畜牧兽医 2024年第5期 31-36页

作者：王之超何江黄俊程孟竹高瑞环齐萌冯昕炜塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 新疆兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

试验通过在饮水中添加不同剂量的氯化钠(NaCl)探讨高盐饮水对肉鸡生长性能、器官指数及血清抗氧化指标的影响。选用260羽1日龄肉鸡,饲喂至7日龄后选取体重均衡、精神状态良好的240羽鸡苗,随机分为4组,每组3个重复,每个重复20羽。对照组... 详细信息

试验通过在饮水中添加不同剂量的氯化钠(NaCl)探讨高盐饮水对肉鸡生长性能、器官指数及血清抗氧化指标的影响。选用260羽1日龄肉鸡,饲喂至7日龄后选取体重均衡、精神状态良好的240羽鸡苗,随机分为4组,每组3个重复,每个重复20羽。对照组饮水中未添加NaCl,各试验组分别在饮水中添加1、2、3 g/L的NaCl。结果显示:试验第28 d时,与对照组相比,3个试验组肉鸡的平均日饮水量和料重比均显著上升(P<0.05);随着饮水中NaCl浓度上升,肉鸡的平均日增重显著降低(P<0.05);T3组肉鸡肝脏重量显著低于对照组(P<0.05)。随着饮水中NaCl浓度升高,肉鸡死亡率增高。各试验组肉鸡的脾脏重量、脾脏指数均显著低于对照组(P<0.05)。3个试验组肉鸡均出现心脏肥大现象,T2组与T3组肉鸡心脏指数达到腹水综合征范围。各试验组肉鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)均显著低于对照组(P<0.05),T2组、T3组肉鸡血清丙二醛(MDA)含量显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,饮水中添加1 g/L以上浓度NaCl会导致肉鸡生长性能下降,料重比增加,降低免疫器官指数及抗氧化性能。

关键词：高盐饮水生长性能免疫器官抗氧化肉鸡

新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及对氟苯尼考纳米凝胶的药物敏感性研究

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黑龙江畜牧兽医 2024年第6期 59-65页

作者：冷楠楠刘燕窦蕊鞠牧洁刘金环陈伟罗万和塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300

为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼... 详细信息

为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌圈直径(DIZ)、最小抑菌浓度(MIC)和抑菌曲线分析氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果。结果表明:从乳样中分离到一株细菌,该分离株革兰氏染色、镜检后呈蓝紫色并排列成葡萄串状,触酶、血浆凝固酶和甘露醇发酵试验结果均为阳性,其基因组DNA中能扩增出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶(nuc)基因,16S rDNA基因序列与金黄色葡萄球菌的相似性为99.7%,判断该分离菌为金黄色葡萄球菌。氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株均产生抑菌作用,DIZ大小为氟苯尼考纳米凝胶>氟苯尼考注射液>氟苯尼考原料药,均表现为高度敏感,其中氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株的DIZ均显著高于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液(P南疆地区成功分离出一株乳源金黄色葡萄球菌;相比于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液,氟苯尼考纳米凝胶对该分离株具有较好的抑菌效果。

关键词：金黄色葡萄球菌氟苯尼考纳米凝胶抑菌活性奶牛乳房炎菌株分离

新疆南疆地区犊牛冠状病毒的分离与鉴定及N基因进化分析

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经济动物学报 2024年

作者：黄琴杨兵张怡淼梁虎苏顺胡建军张伟塔里木大学兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室塔里木大学动物科学与技术学院阿克苏市西域牧业发展有限公司

新疆南疆地区许多规模化奶牛场存在犊牛病毒性腹泻疾病，为了该病的治疗与防控带来了一定的困难。因此，对犊牛腹泻疾病进行病原学鉴定、并进一步丰富南疆地区规模化奶牛场牛冠状病毒(BCoV)分子流行病学数据库，试验采用BCoV胶体金抗原... 详细信息

新疆南疆地区许多规模化奶牛场存在犊牛病毒性腹泻疾病，为了该病的治疗与防控带来了一定的困难。因此，对犊牛腹泻疾病进行病原学鉴定、并进一步丰富南疆地区规模化奶牛场牛冠状病毒(BCoV)分子流行病学数据库，试验采用BCoV胶体金抗原检测、病毒分离、测定病毒TCID50、RT-PCR扩增，同时通过序列比对分析与GenBank中具有代表性的BCoV N基因组序列的同源性，利用MEGA7.0.14软件构建N基因组系统进化树。结果表明:74份犊牛腹泻样本中经BCoV胶体金抗原检测有9份样品为阳性样本；用阳性样本接种人回盲肠癌细胞(HCT-8)并进行扩增，传至第四代可见细胞出现变圆、融合、最后脱落的主要典型细胞病变，获得NJ-1分离株一株；用TCID50检测分离株病毒液的病毒含量为10-6.2/0.1mL；其分离株用RT-PCR扩增得到大小约为730 bp 的目的条带，同参考毒株BCoV Mebus同源性为98.1%；N基因遗传进化树表明，NJ-1株与BCV-Aks-01毒株亲缘关系较近，处于同一分支，属于牛冠状病毒，为新疆南疆地区规模化奶牛场BCoV分子流行病学积累数据资料。

关键词：牛冠状病毒病毒分离 TCID RT-PCR

连翘酯苷A负调控HMGB1的表达抑制bEECs炎性损伤作用研究

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塔里木大学学报 2024年第1期36卷 22-27页

作者：苏朵朵马蓓丁泽周海青张佳妮山丽娜刘俊峰塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

奶牛子宫内膜炎是造成乳品行业巨大经济损失的主要疾病之一,从传统中草药连翘中提取的连翘酯苷A具有广泛的生物活性。本研究旨在阐明连翘酯苷A对大肠杆菌内毒素(LPS)介导的奶牛子宫内膜上皮细胞(bEECs)炎性损伤的抑制作用,并在体外阐明... 详细信息

奶牛子宫内膜炎是造成乳品行业巨大经济损失的主要疾病之一,从传统中草药连翘中提取的连翘酯苷A具有广泛的生物活性。本研究旨在阐明连翘酯苷A对大肠杆菌内毒素(LPS)介导的奶牛子宫内膜上皮细胞(bEECs)炎性损伤的抑制作用,并在体外阐明其可能的分子机制。研究结果表明,在LPS诱导的bEECs炎性损伤模型中,连翘酯苷A显著抑制了bEECs的损伤作用;qPCR结果表明,连翘酯苷A能显著抑制促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的释放,并具有剂量依赖性;免疫荧光与免疫印迹结果证实,连翘酯苷A显著抑制高迁移率蛋白1(HMGB1)的表达,进而阻遏p65蛋白的磷酸化。本研究表明,连翘酯苷A通过负调控HMGB1的表达,介导NF-κB信号通路对LPS诱导的bEECs炎性损伤具有保护作用。

关键词：连翘酯苷A 子宫内膜上皮细胞高迁移率蛋白1 炎性损伤

基于猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的RT-RAA-LF检测方法的建立

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中国动物传染病学报 2024年

作者：张紫薇马佳镁黄春媛于娜郑佳馨张艳刘光亮曹宗喜塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆农业大学动物医学学院海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室/国家动物疫病数据中心海口观测实验点苏州天隆生物科技有限公司海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心)

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害全球养猪业最重要的疾病之一，给世界范围内的养猪业带来了重大的经济损失。临床上快速、准确地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是PRRS防控的关键因素。该研究建立了一种基于逆转录重组酶辅助扩增(RT-... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害全球养猪业最重要的疾病之一，给世界范围内的养猪业带来了重大的经济损失。临床上快速、准确地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是PRRS防控的关键因素。该研究建立了一种基于逆转录重组酶辅助扩增(RT-RAA-LF)检测PRRSV的方法。该方法通过针对PRRSV ORF7基因序列设计特异性引物和探针。RT-RAA-LF检测可在39℃下用引物和探扩增10 min，通过侧流层析试纸条在3 min内用肉眼观察结果。该方法具有较高的灵敏度，最低检测限为101copies/μL，并且具有较强的特异性，与其他猪病原体无交叉反应。使用RT-RAA-LF和PCR检测157份样品，RT-RAA-LF与PCR方法的一致性χ2＜ 3.84，两种方法之间的符合率97.8%。上述结果表明，该研究成功建立了RT-RAA-LF检测方法，为PRRSV的快速和直观检测提供了一种新的方法。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 RAA ORF7 侧流层析试纸条快速检测