检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

B群脑膜炎球菌H因子结合蛋白研究进展

微生物学免疫学进展 2024年第2期52卷 100-105页

作者：吴瑞(综述) 刘方蕾(审校) 兰州生物制品研究所有限责任公司第一研究室、甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

H因子结合蛋白(factor H-binding protein, fHbp)是脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)表面的一种关键毒力调节因子。fHbp通过与其配体H因子结合,使得脑膜炎球菌逃避人体免疫系统的识别和攻击,进而可在人体血液中生存,可引起脑膜炎和败血症... 详细信息

H因子结合蛋白(factor H-binding protein, fHbp)是脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)表面的一种关键毒力调节因子。fHbp通过与其配体H因子结合,使得脑膜炎球菌逃避人体免疫系统的识别和攻击,进而可在人体血液中生存,可引起脑膜炎和败血症等临床表现。由于B群脑膜炎球菌(Meningitidis serogroup B,MenB)荚膜多糖与人体神经组织具有相似性,因而荚膜多糖不适合作为疫苗的抗原成分。MenB疫苗大多采用蛋白疫苗的研发路线,研究人员通过反向疫苗学技术确定了fHbp及其他膜蛋白的免疫效果,其中fHbp是最有潜力的疫苗候选抗原成分,且该蛋白是目前已上市的MenB疫苗(Trumenba~?和Bexsero~?)的共有成分。现就fHbp作为MenB疫苗的抗原成分在疫苗中的研究进展作一概述。

关键词： H因子结合蛋白融合蛋白表达量免疫原性五价联合疫苗

6种复合固定液对金黄仓鼠视网膜组织固定效果的比较

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验动物与比较医学 2024年

作者：吴海凤周小江李晨江李怀银高明兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心

目的比较6种固定液对金黄地鼠视网膜组织石蜡切片的影响，优化金黄地鼠视网膜组织石蜡切片固定方法。方法取18只雄性SPF级金黄地鼠，随机分为6组，每组3只。分别使用质量分数4%多聚甲醛、Bouin’s、Carnoy、Davidson’s、Zenker和Hell... 详细信息

目的比较6种固定液对金黄地鼠视网膜组织石蜡切片的影响，优化金黄地鼠视网膜组织石蜡切片固定方法。方法取18只雄性SPF级金黄地鼠，随机分为6组，每组3只。分别使用质量分数4%多聚甲醛、Bouin’s、Carnoy、Davidson’s、Zenker和Helly溶液进行心脏灌注，将眼球组织取出后制作眼杯，投入相应固定液中固定，48 h后制作石蜡切片并进行HE染色。光学显微镜下观察组织细胞的形态学特征并进行双盲法评分，统计学方法分析固定效果和染色质量。结果各组切片镜下观察结果显示：Davidson’s溶液固定的切片视网膜完整无断裂，各层结构清晰，细胞核形态良好，视网膜与巩膜、色素膜连接紧密。经4%多聚甲醛、Bouin’s和Carnoy溶液固定的切片均有视网膜不同程度的断裂、视网膜与巩膜脱离现象。Zenker和Helly溶液固定的切片质量最差，视网膜组织脱落明显，裂隙大，各层细胞不清晰，染色淡。双盲法评分后经SPSS 27.0分析得出Davidson’s溶液染色效果最佳，4%多聚甲醛和Bouin’s固定液染色效果仅次于Davidson’s固定液，Carnoy固定液染色效果较差，Zenker固定液和Helly固定液染色效果最差，Zenker固定液和Helly固定液组与其它组比较在统计学上有显著性差异（P<0.05）。结论金黄地鼠视网膜组织推荐固定首选Davidson’s溶液，其次为4%多聚甲醛固定液、 Bouin’s固定液和Carnoy固定液。

关键词：固定液金黄地鼠视网膜石蜡切片

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

除菌过滤在轮状病毒疫苗工艺中的初步应用

中国医药工业杂志 2024年

作者：童彦军陈同伏署光贺倩马超李佳林兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗一室甘肃省疫苗工程技术研究中心

为了考察三价轮状病毒疫苗半成品工艺优化中除菌过滤对产品质量属性的影响，评估除菌过滤在半成品工艺中应用的可行性，该研究分2个阶段进行了22批的半成品过滤试验。试验滤膜孔径为0.22 μm，材质为聚偏二氟乙烯，考察除菌过滤对试验... 详细信息

为了考察三价轮状病毒疫苗半成品工艺优化中除菌过滤对产品质量属性的影响，评估除菌过滤在半成品工艺中应用的可行性，该研究分2个阶段进行了22批的半成品过滤试验。试验滤膜孔径为0.22 μm，材质为聚偏二氟乙烯，考察除菌过滤对试验产品病毒滴度及外观、pH、渗透压和澄清度的影响，并对拟选定的滤膜材质进行细菌截留试验。结果显示，采用聚偏二氟乙烯、孔径为0.22 μm的除菌滤器进行三价轮状病毒疫苗半成品除菌过滤后，对试验产品的病毒滴度和理化特性如外观、pH和渗透压的影响差异性不显著(P>0.05)，但能显著提高试验产品的澄清度(P＜0.05)。该研究为三价轮状病毒疫苗半成品配制工艺增加除菌过滤积累了关键数据和经验。

关键词：三价轮状病毒疫苗半成品除菌过滤细菌截留试验

呼吸道合胞病毒滴度双抗体夹心ELISA检测方法的建立

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

国际免疫学杂志 2024年第1期47卷 33-38页

作者：王婉唐悦赵忆宁陈玥如傅生芳程亚慧李雄雄兰州生物制品研究所有限责任公司第二研究室、甘肃省疫苗工程技术研究中心兰州730046

目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)滴度。方法以RSV融合前F蛋白的两种抗体AM14与D25作为捕获抗体和检测抗体,通过对其抗体浓度的优化来确定DAS-ELISA较适反应条件,并对该方法的特异性、重复性、灵敏度及适用性进行验证。结果选择用AM14抗体作为捕获抗体,D25作为检测抗体。捕获抗体AM14较适工作浓度为20μg/mL,检测抗体D25的稀释比例为1∶3000。建立的DAS-ELISA与轮状病毒(rotavirus,RV)和人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3,HPIV-3)无交叉反应,且不同稀释倍数的RSV病毒进行批内与批间重复试验的变异系数(coefficient of variation,CV)均室RSV病毒滴度检测提供依据。

关键词：呼吸道合胞病毒融合前F蛋白双抗体夹心ELISA 病毒滴度

重组猪胰酶在冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2024年第1期52卷 17-22页

作者：肖蕾刘晓巍张志刚马树奇杨俊杰徐小明张艳李红芳兰州生物制品研究所有限责任公司疫苗二室、甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的探究重组猪胰酶(recombinant porcine trypsin, RPT)代替猪源胰酶在冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产中的可能性。方法选用SPF级地鼠,无菌取肾,用4种不同浓度(0.05、0.10、0.15和0.20 mg/mL)的重组猪胰酶消化原代地鼠肾(primar... 详细信息

目的探究重组猪胰酶(recombinant porcine trypsin, RPT)代替猪源胰酶在冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产中的可能性。方法选用SPF级地鼠,无菌取肾,用4种不同浓度(0.05、0.10、0.15和0.20 mg/mL)的重组猪胰酶消化原代地鼠肾(primary hamster kidney, PHK)细胞,比较细胞总数、细胞活率以及培养6 d的细胞形态,筛选出最佳重组猪胰酶的工作浓度;对消化液A(含0.30%柠檬酸钠的0.30 mg/mL重组猪胰蛋白酶溶液)和消化液B(含0.30%柠檬酸钠的0.15 mg/mL重组猪胰蛋白酶溶液)消化效果进行对比,选择合适的消化液;对P1代PHK细胞接种狂犬病病毒aG株,确定最佳病毒感染复数(multiplicity of infection, MOI);对不同胰酶消化的细胞接种狂犬病病毒aG株,并比较两者病毒滴度。结果重组猪胰酶对原代PHK细胞消化的最佳浓度为0.10 mg/mL,消化液A更适用于P1代PHK细胞的消化,细胞培养6 d后形成致密单层,胞体饱满;最佳MOI范围为0.10~0.50,且试验具有高度重复性;镜下观察细胞病变无明显变化,但是重组猪胰酶消化后的细胞比猪源胰酶脱落较少,肉眼可见病毒收获液更澄清;2种胰酶消化制备的P1代PHK细胞病毒滴度差异无统计学意义(P=0.630,P>0.05)。结论重组猪胰酶可以替代猪源胰酶用于制备冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞),为冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产工艺的改进奠定基础。

关键词：重组猪胰酶原代地鼠肾细胞狂犬病病毒消化液疫苗制备

G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活病毒在小鼠中的免疫原性和保护效力评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2024年第2期52卷 1-7页

作者：寇桂英火文程亚慧唐悦关文竹王云瑾陈汉泉包红李雄雄兰州生物制品研究所有限责任公司第二研究室甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的将G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活后与弗氏佐剂配伍免疫小鼠,评价其免疫原性和保护效力。方法将冻融1次的HN-28病毒收获液离心去除细胞碎片,上清用50%蔗糖垫底进行超速离心,用MEM培养液重悬沉淀得到纯化的病毒,通过SDS-PAGE和Western ... 详细信息

目的将G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活后与弗氏佐剂配伍免疫小鼠,评价其免疫原性和保护效力。方法将冻融1次的HN-28病毒收获液离心去除细胞碎片,上清用50%蔗糖垫底进行超速离心,用MEM培养液重悬沉淀得到纯化的病毒,通过SDS-PAGE和Western blot分析纯化后的病毒;然后用甲醛灭活病毒,将灭活病毒在MA-104细胞上连续盲传代3次,通过观察细胞病变(cytopathic effect, CPE)和半数细胞感染病变法(CCID_(50))进行病毒灭活验证检测;将灭活病毒与弗氏佐剂按1∶1比例混合,免疫BALB/c小鼠,对照组用MEM与弗氏佐剂按1∶1比例混合后按相同方法和剂量免疫BALB/c小鼠。定期采血并用ELISA检测小鼠血清中抗轮状病毒IgG和IgA滴度;3剂免疫后用病毒微量中和试验测定每剂免疫后血清中和抗体并计算几何平均滴度(geometric average titer, GMT);3剂免疫后28 d,用HN-28活病毒灌胃攻毒,评价血清抗体对小鼠的保护效力。结果 SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,纯化后的病毒纯度较高,在预期分子量处出现了对应的条带;HN-28灭活病毒在MA-104细胞连续传3代,显微镜下均未观察到CPE,CCID_(50)检测结果为阴性;免疫小鼠血清检测结果显示,HN-28灭活病毒在小鼠体内诱导产生的IgG抗体平均滴度为4.53 lg、IgA抗体平均滴度为2.54 lg、中和抗体平均滴度为2.86 lg,而对照组和免疫前血清中IgG、IgA均为阴性;与实验组小鼠相比,攻毒后1周,对照组小鼠体温明显升高,腹泻率增加,对照组小鼠粪便中轮状病毒的检出率高于实验组。结论 HN-28灭活病毒在BALB/c小鼠中具有良好的免疫原性和保护性。

关键词：轮状病毒 HN-28毒株免疫原性攻毒试验保护性评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

γ-聚谷氨酸的研究进展

微生物学免疫学进展 2024年第1期52卷 84-90页

作者：李华(综述) 胡丽娜(审校) 焦磊(审校) 兰州生物制品研究所有限责任公司第三研究室、甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)是一种天然的阴离子聚合物,由γ-酰胺键连接D-或/和L-谷氨酸的α-氨基与相邻谷氨酸的γ-羧基的重复结构组成。γ-PGA具有极强的水溶性、可生物降解性、生物相容性、安全无毒、可食用和环境友... 详细信息

γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)是一种天然的阴离子聚合物,由γ-酰胺键连接D-或/和L-谷氨酸的α-氨基与相邻谷氨酸的γ-羧基的重复结构组成。γ-PGA具有极强的水溶性、可生物降解性、生物相容性、安全无毒、可食用和环境友好的生物学特性,被广泛应用于农业、环境保护、医药、食品、工业和化妆品等领域,是一种较为理想的新型生物材料,拥有巨大的应用前景及经济价值,近年来引起越来越多的国内外研究人员的关注。现就γ-PGA的结构、理化性质、产生菌株、相关基因、生物合成以及应用等方面作一概述。

关键词： γ-聚谷氨酸新型生物材料结构生物合成应用

重组戊型肝炎病毒病毒样颗粒体外生物学活性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2024年第2期52卷 14-20页

作者：秦海艳谢忆张巧玲杨林鹏刘宇阳杨俊杰兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的评价重组戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)体外生物学活性,为重组HEV VLP疫苗的应用提供基础研究数据。方法将0.00(空白对照)、0.25、1.00、4.00μg/mL的重组HEV VLP分别与BALB/c小鼠... 详细信息

目的评价重组戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)体外生物学活性,为重组HEV VLP疫苗的应用提供基础研究数据。方法将0.00(空白对照)、0.25、1.00、4.00μg/mL的重组HEV VLP分别与BALB/c小鼠的骨髓细胞和脾脏淋巴细胞共同培养。检测小鼠骨髓细胞MHCII、CD40和CD86分子的表达情况,评价重组HEV VLP促进小鼠骨髓细胞向抗原提呈细胞(antigen presenting cell, APC)分化和成熟的情况;分析脾脏淋巴细胞中活化的B淋巴细胞(CD19~+CD69~+)、活化的T淋巴细胞(CD3~+CD69~+)、辅助性T淋巴细胞(T helper lymphocytes, Th)(CD3~+CD4~+)和细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes, CTL)(CD3~+CD8~+)细胞的比例,评价重组HEV VLP促进小鼠脾脏B淋巴细胞和T淋巴细胞活化和分化情况。结果 0.25、1.00、4.00μg/mL的重组HEV VLP刺激的小鼠骨髓细胞MHCII、CD40和CD86分子表达均升高,差异均有统计学意义(P均生物学活性,为重组HEV VLP疫苗的开发奠定了良好的理论和实验基础。

关键词：戊型肝炎病毒病毒样颗粒骨髓脾脏淋巴细胞生物学活性

两种AH100-ATS高压均质机在汉逊酵母细胞破碎中适用性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2024年第1期52卷 48-54页

作者：王玢邵志伟杨林鹏陈卓涛马素娟杨千苇周静李薇杨俊杰周晖国兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的评价150型AH100-ATS高压均质机和40型AH100-ATS高压均质机在汉逊酵母细胞破碎中的适用性。方法用2种AH100-ATS高压均质机分别重复破碎3组汉逊酵母,每组细胞破碎3次,光学显微镜下观察并比较2种高压均质机破碎汉逊酵母细胞前后的形... 详细信息

目的评价150型AH100-ATS高压均质机和40型AH100-ATS高压均质机在汉逊酵母细胞破碎中的适用性。方法用2种AH100-ATS高压均质机分别重复破碎3组汉逊酵母,每组细胞破碎3次,光学显微镜下观察并比较2种高压均质机破碎汉逊酵母细胞前后的形态;SDS-PAGE电泳检测破碎后细胞中目的蛋白的释出;血球计数板计数且计算破碎后的细胞破碎率;Bradford法检测及计算蛋白释出度;计时破碎所需要的时间。结果光学显微镜下,2种高压均质机破碎汉逊酵母细胞前后的细胞形态均可见明显差别;150型AH100-ATS高压均质机破碎汉逊酵母细胞后释出蛋白的粒径分布体积比高于40型AH100-ATS高压均质机,差异有统计学意义(P研究中汉逊酵母细胞的破碎,且较40型AH100B-ATS高压均质机破碎需要更短的时间,且具有更好的破碎效果。

关键词：高压均质机汉逊酵母细胞高压均质破碎细胞破碎率蛋白释出度破碎时间