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中药干预类风湿关节炎相关信号通路研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 289-298页

作者：卢增鹏于海洋张晓刚张虎林郭成龙赵玉萍甘肃中医药大学附属医院兰州730000 兰州大学第一医院兰州730000

类风湿关节炎(RA)作为一种自身免疫性疾病,主要以持续性滑膜炎症为其主要特征,常对称性的累及多个关节,严重时可导致关节畸形、关节功能丧失甚至残疾。RA发病机制复杂,防治复杂,彻底治愈困难。既往研究证实,控制炎症过程的核转录因子-κ... 详细信息

类风湿关节炎(RA)作为一种自身免疫性疾病,主要以持续性滑膜炎症为其主要特征,常对称性的累及多个关节,严重时可导致关节畸形、关节功能丧失甚至残疾。RA发病机制复杂,防治复杂,彻底治愈困难。既往研究证实,控制炎症过程的核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、调节氧化应激、抑制炎症、维护细胞稳态的核因子E_(2)相关因2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路、在细胞生长、分化、凋亡及炎症反应中发挥关键作用的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、抗炎、抗氧化、调控滑膜细胞的沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路、抗炎、调控能量代谢的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、与RA中的血管生成相关的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路均是防治RA的重要靶点与机制。同时,众多研究证实,中医药通过调控上述信号通路,发挥上述信号通路的相关作用来防治RA,并展现了中医药调控途径多、长效、不良反应少等优势。兹该文通过查阅众多研究报道,阐述了上述信号通路在RA中的作用,并详细总结了以近年来中药干预上述信号通路防治RA的最新研究成果,旨在推动对RA发病机制和中药治疗的深入研究,为中药的合理应用提供科学依据,更是为未来治疗RA的新药物研发和临床实践提供有益的启示。

关键词：类风湿关节炎中医药信号通路

新抗原脉冲树突状细胞疫苗在肿瘤免疫治疗中的作用

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解放军医学杂志 2024年第2期49卷 220-228页

作者：王彤昕张凡闫鑫张雅婷李玉民甘肃省消化系肿瘤重点实验室甘肃兰州730030 兰州大学第二医院肿瘤外科甘肃兰州730030

新抗原脉冲树突状细胞疫苗(Neo-DCVac)是一种新型肿瘤免疫治疗手段。新抗原是指肿瘤细胞突变产生的具有较强免疫原性和肿瘤特异性的肽段。Neo-DCVac是基于新抗原被树突状细胞摄取、加工后递呈并激活T细胞引发机体免疫反应,从而发挥抗肿... 详细信息

新抗原脉冲树突状细胞疫苗(Neo-DCVac)是一种新型肿瘤免疫治疗手段。新抗原是指肿瘤细胞突变产生的具有较强免疫原性和肿瘤特异性的肽段。Neo-DCVac是基于新抗原被树突状细胞摄取、加工后递呈并激活T细胞引发机体免疫反应,从而发挥抗肿瘤作用。在高通量测序基础上发展而来的个体化Neo-DCVac有望成为肿瘤精准免疫治疗的新方向。本文从个体化Neo-DCVac构建、在实体瘤中联合治疗的临床应用、适宜接种人群和目前存在的局限性等方面进行综述,旨在为肿瘤免疫治疗的相关研究提供参考。

关键词：新抗原树突状细胞疫苗肿瘤免疫治疗

2β-Acetoxyferruginol去醋酸基骨架衍生物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

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有机化学 2024年第2期44卷 613-621页

作者：吴思敏唐嘉欣周于佳徐学涛张昊星王少华五邑大学生物科技与大健康学院广东江门529020 深圳大学生命与海洋科学学院广东深圳518060 兰州大学药学院兰州730000

合成了系列2β-acetoxyferruginol去醋酸基骨架衍生物(1~24),并测定了其α-葡萄糖苷酶抑制活性.结果表明:化合物1~24均有较好的α-葡萄糖苷酶抑制作用.其中(3R,4aS,10aS)-6-羟基-1,1,4-三甲基-1,2,3,4,4a,9,10,10-八氢邻蒽3-基-4-(三氟甲基)苯甲酸酯(15)抑制α-葡萄糖苷酶活性最强[IC_(50)=(23.91±2.34)μmol/L],是阿卡波糖抑制活性的23.6倍.构效关系分析表明三氟甲基的引入更有利于提高化合物的活性.动力学结果显示化合物15为可逆非竞争性的α-葡萄糖苷酶抑制剂.3D荧光结果表明化合物15与α-葡萄糖苷酶的结合可改变α-葡萄糖苷酶的构象.分子对接结果显示化合物15与α-葡萄糖苷酶Asp68,Arg312,Tyr313形成了氢键,与Phe177和Phe300形成疏水作用.

关键词： 2β-acetoxyferruginol α-葡萄糖苷酶 3D荧光分子对接

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具核梭杆菌对结直肠癌诊疗作用的研究进展

中国微生态学杂志 2024年第1期36卷 110-114页

作者：闫玉琴王伟余繁荣祁涛苏少晨兰州大学口腔医学院甘肃兰州730000 兰州大学第一医院口腔科

口腔菌群作为人体的第二大微生物群,对人体健康具有非常重要的作用。具核梭杆菌是口腔中的常驻菌之一,与其他菌共同维持机体的稳态,现已被证实是结直肠癌最相关的菌属之一,参与结直肠癌的发生、发展以及预后。很多学者根据具核梭杆菌在... 详细信息

口腔菌群作为人体的第二大微生物群,对人体健康具有非常重要的作用。具核梭杆菌是口腔中的常驻菌之一,与其他菌共同维持机体的稳态,现已被证实是结直肠癌最相关的菌属之一,参与结直肠癌的发生、发展以及预后。很多学者根据具核梭杆菌在结直肠癌中的致病机制,寻找以具核梭杆菌为靶点的对结直肠癌进行早期诊断和治疗的新方法。本文阐述了具核梭杆菌在结直肠癌中的致病机制,着重探讨其在结直肠癌的诊断和治疗中的潜在作用,以期为临床诊疗提供参考。

关键词：具核梭杆菌结直肠癌诊疗

影像组学在非小细胞肺癌免疫治疗中的研究进展

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中国肺癌杂志 2024年第8期27卷 637-644页

作者：侯悦张天明王虹兰州大学第二医院呼吸内科兰州730000

肺癌是肿瘤相关死亡的主要原因,非小细胞肺癌是其中最常见的亚型。目前,以程序性细胞死亡受体1或其配体的免疫检查点抑制剂为代表的免疫治疗已广泛应用于非小细胞肺癌患者的临床诊疗实践,但仅少数患者能从中受益,免疫治疗缺乏可靠的预... 详细信息

肺癌是肿瘤相关死亡的主要原因,非小细胞肺癌是其中最常见的亚型。目前,以程序性细胞死亡受体1或其配体的免疫检查点抑制剂为代表的免疫治疗已广泛应用于非小细胞肺癌患者的临床诊疗实践,但仅少数患者能从中受益,免疫治疗缺乏可靠的预测标志物。影像组学是一种借助计算机软件使用数据表征算法从生物医学图像中提取大量定量信息的工具,大量研究已经证实预测非小细胞肺癌免疫疗效的影像组学模型作为新型免疫疗效预测标志物,有望指导肺癌患者的个体化诊疗决策,具有光明的应用前景。本文对影像组学预测非小细胞肺癌免疫治疗反应、识别假性进展和超进展、免疫检查点抑制剂相关性肺炎、恶病质风险和联合其他组学中的研究进展作一综述。

关键词：影像组学肺肿瘤免疫治疗

呼吸道合胞病毒NS1蛋白鼠单克隆抗体的制备

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生物工程学报 2024年第5期40卷 1536-1547页

作者：陈娇王亚娟陈志华茹毅郑海学裴晶晶中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046 兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050

本研究旨在制备抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1)单克隆抗体,以分析在转染和感染过程中NS1蛋白的表达和分布情况,并评估其在免疫沉淀反应中的应用价值。将NS1基因片段构建... 详细信息

本研究旨在制备抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1)单克隆抗体,以分析在转染和感染过程中NS1蛋白的表达和分布情况,并评估其在免疫沉淀反应中的应用价值。将NS1基因片段构建至原核表达质粒,经大肠杆菌表达、亲和层析纯化后得到NS1蛋白,将纯化的蛋白免疫小鼠后,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)技术筛选能稳定分泌NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并将该单抗用于间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)与免疫印迹(Western blotting)检测,分析RSV NS1在过表达细胞和病毒感染细胞中的表达与分布情况,评估该单抗在免疫沉淀反应中的应用价值。结果发现,RSV NS1蛋白在大肠杆菌中成功表达及纯化,免疫小鼠后,获得了一株特异性强、反应性好的RSV NS1单抗,其亚型为IgG1,且抗体效价可达1:15360000;使用该单抗鉴定出RSV NS1蛋白在转染和感染细胞中正常表达,IFA结果表明,NS1主要分布在细胞质与细胞核;并验证该单抗在免疫沉淀反应中作为捕获抗体能够特异性结合细胞中表达的NS1蛋白。本研究经原核表达系统成功获得RSV NS1蛋白,成功制备出抗RSV NS1单抗,该抗体能特异性识别NS1蛋白,可被应用于免疫沉淀方法,为NS1蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词：呼吸道合胞病毒 NS1蛋白原核表达单克隆抗体免疫沉淀

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敲除LTA4H基因的PK-15细胞系构建及其对口蹄疫病毒复制的影响

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微生物学报 2024年第3期64卷 733-744页

作者：王家丽蒲秀瑛杨帆邵文华黄梦瑶曹伟军郑海学张伟兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建白三烯A4水解酶(leukotriene A4 hydrolase,LTA4H)基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney-15,PK-15),探究LTA4H对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复制的影响,为开展LTA4H功能研究及调控病毒复制机制研究提供理论依据。【方法】设计2条针对猪LTA4H基因的引导RNA(small guide RNA,sgRNA),分别构建至载体pX459-puro-MCS中;将CRISPR重组质粒转染PK-15细胞,用嘌呤霉素(puromycin)抗生素筛选,并通过有限稀释法筛选单克隆细胞,之后通过Western blotting和测序检测LTA4H基因的敲除,获得LTA4H基因功能缺失细胞系。使用Western blotting、RT-qPCR及病毒滴度测定等方法检测敲除LTA4H基因后对FMDV复制及相关蛋白的表达情况。【结果】获得的单克隆敲除细胞系与野生型细胞相比,能够显著抑制FMDV复制。【结论】本研究成功构建了LTA4H基因敲除的PK-15细胞系,证明LTA4H对FMDV的复制具有促进作用,研究结果为后续LTA4H功能研究提供理论依据。

关键词： CRISPR/Cas9 白三烯A4水解酶细胞系口蹄疫病毒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GS15株NSP2蛋白多位点缺失病毒的拯救与体外生长特性分析

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微生物学报 2024年第7期64卷 2307-2322页

作者：张兴民张婧孙普李娇阳崔占鼎李国秀王健李平花袁红李坤曹轶梅付元芳李冬赵志荀曾巧英卢曾军甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建... 详细信息

【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建拯救获得NSP2三个位点缺失的工程病毒。【方法】在前期双缺失病毒感染性克隆的基础上,利用融合PCR方法分别构建缺失NSP2第323-364位和第372-433位优势抗原表位的两个3个位点缺失的重组质粒。经脂质体介导,转染Marc-145细胞拯救病毒,通过电子显微镜观察、免疫荧光实验、测定病毒滴度、绘制生长曲线等方法对缺失病毒的生长特性进行分析。【结果】成功获得拯救病毒r GS15-?3-1和r GS15-?3-2。电子显微镜下可以观察到直径大小为50-80 nm的病毒粒子;免疫荧光实验检测表明,拯救病毒与亲本病毒GS15一致,都能检测到PRRSV N蛋白表达;缺失区域RT-PCR扩增鉴定,拯救病毒传至40代缺失标记稳定存在;r GS15-△3-1与r GS15-△3-2病毒滴度分别为2.00×10^(6.0)TCID_(50)/m L和2.25×10^(5.8)TCID50/m L,与亲本病毒相比病毒滴度差异显著(P研究通过对PRRSV基因2型非结构蛋白NSP2多位点缺失病毒的体外生长特性分析,为研制新型PRRSV标记疫苗奠定了基础,也为猪繁殖与呼吸综合征的防控提供新的策略。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆非结构蛋白2(NSP2) 缺失标记生长特性

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发酵党参黄酒的营养及功效成分分析

中国酿造 2024年第2期43卷 64-70页

作者：王楠高颖瑞徐巧红胡芳弟兰州大学药学院甘肃兰州730000 兰州大学甘肃省党参产业技术工程研究中心甘肃兰州730000

该研究以发酵党参为原料制备发酵党参黄酒(FCHJ),以党参黄酒(CHJ)为对照,测定FCHJ中的总酚、总黄酮及氨基酸含量、矿物元素及体外抗氧化活性,并采用小鼠脾淋巴细胞增殖实验、RAW264.7细胞的增殖和吞噬作用及NO的释放量探讨发酵党参黄酒... 详细信息

该研究以发酵党参为原料制备发酵党参黄酒(FCHJ),以党参黄酒(CHJ)为对照,测定FCHJ中的总酚、总黄酮及氨基酸含量、矿物元素及体外抗氧化活性,并采用小鼠脾淋巴细胞增殖实验、RAW264.7细胞的增殖和吞噬作用及NO的释放量探讨发酵党参黄酒多糖(FCHJ-CP)体外免疫调节活性。结果表明,FCHJ中总酚及总黄酮含量较对照增加了32.53%及60.79%;FCHJ共检出17种氨基酸,其中必需氨基酸8种,必需氨基酸占总氨基酸含量35.53%;两种黄酒营养丰富、呈味良好,均富含K、Ca、Na、Mg、Fe、Zn等人体必需矿物元素。FCHJ对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、超氧阴离子、羟基自由基最大清除率分别为97%、98%、100%。FCHJ-CP质量浓度为200μg/m L时,可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖(P细胞增殖和吞噬以及促进NO的释放(P<0.01)。

关键词：发酵党参黄酒营养及功效成分抗氧化活性免疫调节活性