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NK细胞体外扩增的影响因素及临床应用

生命的化学 2024年第5期44卷 900-909页

作者：刘金影庞晶晶高旭寇佳媛张艳芬哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081

随着免疫学及分子生物学技术的发展,以细胞为主体的(如T细胞、NK细胞等)生物疗法在肿瘤过继性细胞免疫治疗中显示出巨大的潜能。与T细胞疗法相比,NK细胞无需激活即可完成杀伤,具有快速释放炎性细胞因子和杀死靶细胞的能力,因此近年来受... 详细信息

随着免疫学及分子生物学技术的发展,以细胞为主体的(如T细胞、NK细胞等)生物疗法在肿瘤过继性细胞免疫治疗中显示出巨大的潜能。与T细胞疗法相比,NK细胞无需激活即可完成杀伤,具有快速释放炎性细胞因子和杀死靶细胞的能力,因此近年来受到格外关注。但人体内NK细胞的数量、纯度和活性无法满足科研及临床应用的需要,阻碍了以NK细胞为基础的多种应用的发展,故有必要在体外对NK细胞进行有效扩增。本文从NK细胞体外扩增的影响因素及其临床应用两方面进行综述。

关键词： NK细胞体外扩增临床应用

青钱柳三萜皂苷类化合物抗结直肠癌作用的定量蛋白质组学研究

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华夏医学 2024年第2期37卷 54-60页

作者：袁玺李善斌覃玲诗邹健梁成钦周先丽桂林医学院智能医学与生物技术学院桂林541199 桂林医学院药学院桂林541199 广西高校生物化学与分子生物学重点实验室桂林541199

目的探索青钱柳三萜皂苷类化合物Cypaliuruside K体外抗人结直肠癌细胞活性作用,并初步分析该化合物抗人结直肠癌细胞的作用机制。方法以青钱柳中分离得到的化合物Cypaliuruside K为试验药物,对SW480肿瘤细胞进行干预。实验分为对照组... 详细信息

目的探索青钱柳三萜皂苷类化合物Cypaliuruside K体外抗人结直肠癌细胞活性作用,并初步分析该化合物抗人结直肠癌细胞的作用机制。方法以青钱柳中分离得到的化合物Cypaliuruside K为试验药物,对SW480肿瘤细胞进行干预。实验分为对照组和药物组,分别提取各组细胞内总蛋白进行串联质谱标签(TMT)蛋白质组学分析。结果蛋白质谱分析结果表明,共有402个差异表达蛋白质,结直肠癌中上调蛋白主要富集通路由亚细胞定位分析表明差异蛋白大多定位在线粒体、细胞质和细胞膜上。基因本体论(GO)分析结果显示,差异蛋白主要参与DNA复制、蛋白质合成、糖代谢等过程。京都基因与基因组百科全书(KEEG)分析结果显示,差异蛋白主要参与细胞代谢、遗传信息传导、生物系统通路等相关信号通路。结论基于筛选出的8个与抗人结直肠癌肿瘤细胞密切相关蛋白,通过定量蛋白组学初步揭示Cypaliuruside K可能通过增加MAPK8、SMAD2、PMAIP1、BBC3、JUN、MAPK1、NRAS及减少CYCS蛋白表达,达到体外抗SW480肿瘤细胞作用。

关键词：青钱柳三萜皂苷类化合物结直肠癌蛋白组学生物信息学

酶介导的邻近细胞标记方法探究细胞间相互作用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第4期40卷 424-432页

作者：沙昱彤李景超易文浙江大学生命科学学院生物化学研究所肿瘤与干细胞生物学实验室杭州310058

细胞-细胞相互作用(cell-cell interactions,CCIs)可以通过细胞表面蛋白质、聚糖、脂质等介导的细胞间突触形成而发生,以维持机体稳态和调控生理功能。这些CCIs是复杂的,涉及许多不同的细胞表面和细胞内分子的参与。随着基础研究和转化... 详细信息

细胞-细胞相互作用(cell-cell interactions,CCIs)可以通过细胞表面蛋白质、聚糖、脂质等介导的细胞间突触形成而发生,以维持机体稳态和调控生理功能。这些CCIs是复杂的,涉及许多不同的细胞表面和细胞内分子的参与。随着基础研究和转化医学的不断发展,如何准确识别细胞间相互作用并对其进行表征和定量,引起了广泛关注。近年来,研究CCIs的技术手段不断推陈出新,而邻近标记是一种十分有前景的研究细胞间相互作用的化学生物学方法。目前,主要有两种类型的标记策略。一种是依赖基因工程操作,在“诱饵”细胞表面表达外源酶,通过其与相邻细胞上的受体底物的直接结合,以便发生细胞间邻近标记。另一种是使用酶或小分子催化剂(例如光催化剂),通过基因工程重组表达或借助化学(化学酶)方法将它们偶联在“诱饵”细胞表面,在适当的刺激或激活后,靶向递送感兴趣的标记分子,实现邻近标记。其中,酶介导的邻近细胞标记方法在检测和表征CCIs上具有重要的应用价值。该综述将标记过程中涉及有酶参与的方法定义为酶介导的邻近细胞标记方法,这种方法的一个明显优势是,由于酶和受体底物之间直接的物理接触或酶催化产生高反应活性标记分子而实现小的标记半径范围。该综述旨在归纳与总结近年来开发的酶介导的邻近细胞标记方法的原理、优缺点及现有应用。

关键词：细胞-细胞相互作用酶介导的邻近细胞标记方法邻近标记方法

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞System Xc-/GSH/GPX4铁死亡通路的表达及其对炎症因子分泌的影响

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安徽医科大学学报 2024年第1期59卷 64-70页

作者：刘灿马武开陈昌明安阳蒋总黄海贵州医科大学医学检验学院临床生物化学与分子生物学教研室贵阳550004 贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵阳550004

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例... 详细信息

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例,采用Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离PBMC,将细胞分为健康对照、RA、铁死亡抑制剂、铁死亡诱导剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe 2+相对荧光强度、DHE荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)阳性细胞比例,蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR(qPCR)检测核转录因子红系2相关因子(Nrf2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4蛋白与mRNA的表达,流式细胞术检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6的含量。结果与健康对照组比较,RA组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平升高,Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达降低,PBMC上清液中TNF-α、IL-1、IL-6的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡抑制剂组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平降低,SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达升高,Nrf2蛋白的表达升高,PBMC上清液中IL-6的含量降低、TNF-α的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡诱导剂组PBMC内ROS水平升高,SLC7A11蛋白和mRNA的表达降低,Nrf2蛋白的表达降低、GPX4蛋白的表达升高,PBMC上清液中TNF-α、IL-1的含量升高,差异有统计学意义。与铁死亡诱导剂组比较,RA患者PBMC细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论RA患者PBMC中存在铁死亡,抑制或诱导RA患者PBMC铁死亡,将抑制或促进炎性因子分泌。抑制RA患者PBMC铁死亡可能有助于治疗RA。

关键词：类风湿关节炎外周血单个核细胞铁死亡 System Xc-/GSH/GPX4

小檗碱对多囊卵巢综合征小鼠卵丘扩展的作用及机制研究

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中国医药导报 2024年第13期21卷 1-6页

作者：夏晴王大勇葛方亮郑菲菲赵雪叶可刘璐璐刘雁峰北京中医药大学东直门医院妇科北京100700 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的探索小檗碱(Ber)对多囊卵巢综合征小鼠卵丘扩展的作用及机制。方法选取育龄21~25 d的SPF级雌性C57BL/6小鼠28只,按照随机数字表法将其分为对照组、PCOS组、Ber低剂量组、Ber高剂量组,各7只。对照组皮下注射等体积玉米油溶剂,PCOS... 详细信息

目的探索小檗碱(Ber)对多囊卵巢综合征小鼠卵丘扩展的作用及机制。方法选取育龄21~25 d的SPF级雌性C57BL/6小鼠28只,按照随机数字表法将其分为对照组、PCOS组、Ber低剂量组、Ber高剂量组,各7只。对照组皮下注射等体积玉米油溶剂,PCOS组、Ber低剂量组、Ber高剂量组均皮下注射脱氢表雄酮(6 mg/100 g,溶于玉米油溶剂),连续21 d。以小鼠出现动情周期紊乱为PCOS模型构建成功标准。随后连续28 d,Ber低剂量组灌胃200 mg/kg Ber,Ber高剂量组灌胃400 mg/kg Ber,PCOS组灌胃等剂量的生理盐水。向各组小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素及人绒毛膜促性腺激素,于输卵管壶腹部获取卵丘卵母细胞复合物(COC),体外培养0、6 h观察小鼠卵丘扩展情况。免疫组织化学检测各组小鼠卵丘颗粒细胞中FTO蛋白表达水平。向人颗粒细胞瘤样细胞系(KGN细胞)中转染PC3.1质粒(PC3.1组)及PC3.1-FTO质粒(PC3.1-FTO组),免疫荧光检测两组细胞中透明质酸合成酶2(HAS2)表达水平。向KGN细胞中转染NC si RNA(NC组)及FTO si RNA(si FTO组),免疫荧光检测两组细胞中HAS2表达水平。结果与对照组比较,PCOS组小鼠动情周期失去周期性变化。提示PCOS小鼠模型构建成功。与PCOS组比较,Ber低剂量组小鼠动情周期逐渐恢复,Ber高剂量组小鼠动情周期仍失去周期性变化。与对照组比较,PCOS组小鼠COC卵丘细胞分布更致密,卵丘扩展受阻。与PCOS组比较,Ber低、高剂量组小鼠COC卵丘细胞分布更松散,卵丘扩展受阻明显改善。与对照组比较,PCOS组卵丘颗粒细胞中FTO表达水平升高(P<0.05)。与PCOS组比较,Ber低、高剂量组卵丘颗粒细胞中FTO表达水平均降低(P<0.05)。与PC3.1组比较,PC3.1-FTO组KGN细胞中HAS2表达水平降低(P<0.05)。与NC组比较,si FTO组KGN细胞中HAS2表达水平升高(P<0.05)。结论 Ber可能通过降低卵丘颗粒细胞中FTO表达水平,诱发HAS2表达水平升高,从而改善PCOS卵丘扩展状态。

关键词：多囊卵巢综合征脂肪质量和肥胖相关基因卵丘扩展透明质酸合成酶2

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选择素的放射响应及L选择素的调控

内蒙古医学杂志 2024年第3期56卷 307-311页

作者：李思远贺俊彦李亚琼何淑雅南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室河南衡阳421001 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所放射生物学研究室北京100850

放射生物剂量计的研究一直是放射生物学领域中的一个热点及难点,核事故后对放射伤员进行快速、准确的诊断是事故救援及后续正确救治的关键,建立快速、高通量的放射生物剂量诊断方法具有重要的意义。外周血是临床检验中方便实用的检材,... 详细信息

放射生物剂量计的研究一直是放射生物学领域中的一个热点及难点,核事故后对放射伤员进行快速、准确的诊断是事故救援及后续正确救治的关键,建立快速、高通量的放射生物剂量诊断方法具有重要的意义。外周血是临床检验中方便实用的检材,血液中蛋白质检验方法多样,易实现高通量、快速检测。在现阶段的研究中发现外周血中P选择素和L选择素均具有较好的放射响应,但是在放射医学领域关于选择素家族分子的研究尚未深入。本文对放射医学领域中选择素家族的研究现状进行总结,并对L选择素的调控机制进行简单综述,期望能为放射生物剂量计的研究引入新的分子,为将来放射损伤后L选择素的调控机制研究提供帮助。

关键词：放射生物剂量计 P选择素 L选择素 L选择素调控机制

超级增强子相关基因结直肠癌预后模型的构建及其相关基因功能的初步探索

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中国科技期刊数据库医药 2024年第6期 0202-0206页

作者：许悦欢晁耐霞广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广西南宁530021 广西高校生物分子医学研究重点实验室广西南宁530021

整合结直肠癌中肿瘤特异的超级增强子(Super Enhancer)相关基因,并依此构建预后模型,同时分析长链非编码RNA HOXC-AS2在结直肠癌中的功能。方法在基因综合表达(GEO)数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中收集了结直肠癌患者超级增强子... 详细信息

整合结直肠癌中肿瘤特异的超级增强子(Super Enhancer)相关基因,并依此构建预后模型,同时分析长链非编码RNA HOXC-AS2在结直肠癌中的功能。方法在基因综合表达(GEO)数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中收集了结直肠癌患者超级增强子相关基因表达谱和临床数据,通过单因素cox比例风险回归整合标志基因与生存信息,采用随机森林算法(Random Forest Algorithm)构建基于超级增强子相关基因的结直肠癌预后模型。通过TCGA数据库分析LncRNA HOXC-AS2在泛癌中的表达情况,并使用Rt-qPCR验证HOXC-AS2在结直肠癌细胞SW620和正常结肠细胞中FHC的差异表达。对HOXC-AS2进行生存分析,通过GSEA分析HOXC-AS2在结直肠癌中的功能,ESTIMATE算法进行评估HOXC-AS2与免疫浸润的关系。结果鉴定出了结直肠癌患者中266个肿瘤特异超级增强子相关基因、单因素cox回归分析发现了33个超级增强子相关基因与患者生存预后相关,随机森林法基于这些基因构建出了拥有较强预后预测效能的结直肠癌预后模型。此外,超级增强子相关LncRNA HOXC-AS2在多种癌症中高表达,并且Rt-qPCR结果显示LncRNA HOXC-AS2在结直肠癌细胞株SW620中相对于正常结肠细胞FHC高表达。生存分析结果显示HOXC-AS2的高表达与结直肠癌患者预后不良高度相关,ESTIMATE算法分析表明LncRNA HOXC-AS2与肿瘤免疫浸润相关,GSEA分析表明LncRNA HOXC-AS2在结直肠癌发生发展中起重要作用。结论基于结直癌特异超级增强子相关基因的预后模型可较为精准预测结直肠患者的生存情况,有助于指导结直肠癌患者的精准治疗;超级增强子相关LncRNA HOXC-AS2在结直肠癌的发生发展中起重要作用。

关键词：结直肠癌超级增强子长链非编码RNA

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RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰:旧貌新颜

中国生物化学与分子生物学报 2024年第6期40卷 731-739页

作者：李虎杰曹正岳郑晓飞河北大学化学与材料科学学院药物化学与分子诊断教育部重点实验室河北省化学生物学重点实验室河北保定071002 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所实验血液学与生物化学研究室放射生物学北京市重点实验室北京100850

细胞内存在多种类型的RNA分子,在调控细胞进程中各自发挥着重要的作用。RNA修饰是在RNA分子上添加化学基团,修饰基团可以改变RNA稳定性、结构和功能,RNA修饰使RNA的功能和作用具有多样性。在氧化应激条件下,8-羟基鸟嘌呤是一种标志性的... 详细信息

细胞内存在多种类型的RNA分子,在调控细胞进程中各自发挥着重要的作用。RNA修饰是在RNA分子上添加化学基团,修饰基团可以改变RNA稳定性、结构和功能,RNA修饰使RNA的功能和作用具有多样性。在氧化应激条件下,8-羟基鸟嘌呤是一种标志性的RNA氧化修饰形式。RNA的结构与功能都可能会受到8-羟基鸟嘌呤修饰的影响,RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰发生可以通过诱导RNA链断裂、碱基脱落等方式影响RNA的结构与功能。研究表明,RNA中8-羟基鸟嘌呤修饰水平可以作为疾病发展的评估指标。随着RNA修饰研究的深入,对RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰的研究也日益受到重视。本文主要对RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰的生成、RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰的生物学功能、RNA 8-羟基鸟嘌呤修饰修复调控相关蛋白质分子、8-羟基鸟嘌呤修饰RNA分子检测技术,以及RNA 8-羟基鸟嘌呤与神经性疾病和癌症等疾病的关系研究进展进行综述,旨在为RNA修饰的生物学功能和8-羟基鸟嘌呤修饰RNA在疾病中的潜在作用研究提供思路和启示。

关键词： RNA氧化 8-羟基鸟嘌呤氧化应激修复疾病

加快仪器设备更新,推进生物化学实验教学创新发展

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基础医学教育 2024年第6期26卷 486-490页

作者：李梦瑶杨旭东宁启兰武丽涛西安交通大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系西安710061

随着科学技术的逐步发展,各种实验设备也在不断更迭。先进的实验设备在推动科学进步的同时,也在培养学生的实验动手能力、数据分析能力和创新科研能力中发挥着重要的作用。另一方面,先进设备的引进,极大助力了新型实验的开展。近几年,... 详细信息

随着科学技术的逐步发展,各种实验设备也在不断更迭。先进的实验设备在推动科学进步的同时,也在培养学生的实验动手能力、数据分析能力和创新科研能力中发挥着重要的作用。另一方面,先进设备的引进,极大助力了新型实验的开展。近几年,生物化学实验室通过更新多种仪器设备,在实验教学过程中为学生提供了更加准确和稳定的实验结果,加强了学生对理论知识的理解和掌握,在培养学生的实验能力上取得了良好的教学实践。另外,在更新和引进新设备的同时,生物化学实验教学平台也在不断推进生物化学创新实验的开展,促进生物化学实验教学改革。综上所述,仪器设备的更新和引进在医学实验教育、科技创新人才培养以及推进实验教学改革中起到了不可替代的作用。

关键词：生物化学实验教学教学改革设备更新人才培养