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怎样看待血液及尿分析仪的过筛作用

临床检验杂志 2003年第6期21卷 321-323页

作者：朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微... 详细信息

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微镜下辨认或计数的细胞，改变为根据细胞的大小、内部和表面结构、加入特殊试剂（如溶血剂、细胞化学试剂和染色剂等）后细胞的变化，用测量其电阻、对高频电磁波的传导性、在不同角度测细胞对光的散射程度以及用光度计测定颜色变化等光学和电学方法，直接或间接地加以计数和区分。虽然这些方法的设计都是有理论根据，并历经数十年的研究、改进和实际应用的考验，认为方法已成熟，所开发的仪器及配套试剂经过法定机构（如美国的FDA）批准后才进入市场的，但它们毕竟不是在显微镜下直接观察细胞，在有些情况，特别有病理条件下，其测定结果并不可靠或难以确定，还需要在显微镜下进行复检（review），这是经过多年实践后的一致看法，并且也是产品监控机构以及所有仪器厂家所承认并要求做到的。因此说，这类仪器仅仅是一种过筛性质的仪器。

关键词：血液分析仪尿液分析仪过筛作用显微镜检查临床检验

NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究

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临床检验杂志 2007年第1期25卷 13-16页

作者：郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印... 详细信息

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。

关键词： NADH-细胞色素b5还原酶原核表达 GST融合蛋白亲和层析

变性HPLC法在肾上腺脑白质营养不良分子诊断中的应用

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中华检验医学杂志 2007年第2期30卷 157-160页

作者：王志红黄梁浒兰风华南京军区福州总医院全军医学检验中心实验科福州350025

目的对4个肾上腺脑白质营养不良(ALD)家系进行基因突变分析。方法应用变性 HPLC 技术检测了4个 ALD 家系的 ABCD1基因,并通过核苷酸序列分析确证突变位点。结果所有患儿的母亲,患儿2、患儿3、患儿4弟弟及其表弟与正常对照的 PCR 产物混... 详细信息

目的对4个肾上腺脑白质营养不良(ALD)家系进行基因突变分析。方法应用变性 HPLC 技术检测了4个 ALD 家系的 ABCD1基因,并通过核苷酸序列分析确证突变位点。结果所有患儿的母亲,患儿2、患儿3、患儿4弟弟及其表弟与正常对照的 PCR 产物混合物,均出现变性HPLC 洗脱双峰,而正常对照均为单峰,提示相应基因片段存在突变位点。上述出现异源双峰的 PCR产物经直接测序,证实了相关突变的存在:患儿1母亲为 fs Glu 471突变携带者;患儿2存在 S108X 突变;患儿3存在 R617C 突变;患儿4弟弟和表弟均存在 A141T 突变。结论变性 HPLC 能有效地检测ABCD1基因突变,并为进一步地基因突变筛查与产前诊断提供依据。

关键词：肾上腺脑白质营养不良分子诊断技术基因色谱法,高压液相

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微量全血诱生γ-干扰素的酶免疫测定法

上海免疫学杂志 1997年第1期17卷 47-49页

作者：王艾丽杨正江舟王娟武建国南京军区南京总医院全军医学检验中心南京210002

建立了一种微量全血诱生γ-干扰素(IFN-γ)的酶免疫测定法.将抗凝全血、脂多糖(LPS)、植物血凝素(PHA)、RPMI 1640培养基和HRP标记的抗IFN-γ单克隆抗体,同置于用抗IFN-γ多克隆抗体包被的反应板微孔中.此法IFN-γ最小检出量为0.5ng/ml... 详细信息

建立了一种微量全血诱生γ-干扰素(IFN-γ)的酶免疫测定法.将抗凝全血、脂多糖(LPS)、植物血凝素(PHA)、RPMI 1640培养基和HRP标记的抗IFN-γ单克隆抗体,同置于用抗IFN-γ多克隆抗体包被的反应板微孔中.此法IFN-γ最小检出量为0.5ng/ml,特异性、重复性均较好,适于临床应用.

关键词：全血 γ-干扰素 ELISA 细胞免疫功能

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特异性亲环素A结合法测定环孢素血药浓度

中国药学杂志 2000年第8期35卷 536-538页

作者：李芳秋张中书许瑞吉储小曼周燕武建国南京军区南京总医院全军医学检验中心江苏南京210002

目的　建立测定全血中环孢素A(CsA)浓度的亲环素A结合法。方法　利用重组人亲环素A(rhCyPA)作为结合蛋白 ,3H CsA作示踪剂 ,活性炭吸附分离结合的与游离的两相 ,测定结合相的放射性。结果　方法的有效测定范围为 5 0～ 16 0 0ng·ml- 1 ... 详细信息

目的　建立测定全血中环孢素A(CsA)浓度的亲环素A结合法。方法　利用重组人亲环素A(rhCyPA)作为结合蛋白 ,3H CsA作示踪剂 ,活性炭吸附分离结合的与游离的两相 ,测定结合相的放射性。结果　方法的有效测定范围为 5 0～ 16 0 0ng·ml- 1 ,批内 (n =8)RSD为 8.2 % ,批间 (n =6 )RSD为 10 .6 % ,标本提取与测定方法的全程回收率为 10 4% ( 2 40ng·ml- 1 )和 10 6 %( 76 4ng·ml- 1 ) ,测定结果与FPIA法高度相关 (r =0 .96 ;P CsC >CsD >CsB。结论　测定CsA浓度的亲环素A结合法灵敏 ,重复性和稳定性好。

关键词：环孢素亲环素A 血药浓度监测

精子获能液的pH对精子胞浆内Ca^(2+)水平影响机制的初步研究

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临床检验杂志 2007年第5期25卷 367-370页

作者：蒋超黄祝吴永明徐会茹王晨阳侯林崔英霞姚兵南京军区南京总医院全军医学检验研究所

目的研究不同pH值的精子获能液对精子胞浆内Ca2+水平的影响。方法取15例正常生育男性精液,离心沉淀所得精子用不同pH值(4.2、5.2、6.2、7.2、8.2、9.2、10.2、11.2)的精子获能液处理,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分别检测精子胞浆内... 详细信息

目的研究不同pH值的精子获能液对精子胞浆内Ca2+水平的影响。方法取15例正常生育男性精液,离心沉淀所得精子用不同pH值(4.2、5.2、6.2、7.2、8.2、9.2、10.2、11.2)的精子获能液处理,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分别检测精子胞浆内游离钙离子的平均荧光强度值。结果流式细胞仪测定结果显示,与pH7.2获能液的荧光值(209.94±89.02)相比,获能液pH为6.2时,精子胞浆内钙离子的荧光强度值(161.91±53.92)降低(P0.05),其余各种pH值的获能液均较pH7.2获能液荧光强度显著降低(P0.05),其余各组与pH7.2获能液相比,均有显著性降低(P<0.01)。结论不同pH值的精子获能液,可能影响精子胞浆内的钙离子水平的变化,进而导致精子的各种生理活动的改变。

关键词：精子胞浆 Ca^2+ 流式细胞仪激光共聚焦显微镜

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前列腺特异膜抗原的研究现况

临床检验杂志 2000年第2期18卷 122-123页

作者：王卫萍武建国南京军区南京总医院全军医学检验中心江苏南京210002

前列腺特异膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)是存在于前列腺细胞膜上的组织特异性抗原,由于其在前列腺癌分期、诊断和治疗中具有重要的临床意义,故将其研究现况综述如下.

关键词：前列腺特异膜抗原前列腺癌 PSMA

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膜上斑点洁显示人红细胞b_5还原酶活性

生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 379-380页

作者：兰风华唐玉钗朱忠勇吴玉水南京军区福州总医院全军医学检验中心第四军医大学生化教研室

人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还... 详细信息

人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还原酶．有ｂ５还原酶活性的斑点用噻唑蓝染色．此法简单直观，可用于ｂ５还原酶的定性和半定量测定，为遗传性高铁血红蛋白血症的诊断提供了一种新的实验手段．

关键词：高铁血红蛋白血症 b5还原酶红细胞膜上斑点法

氧化修饰引起脂蛋白(a)结构和生化特性变化

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基础医学与临床 1997年第5期17卷 38-41页

作者：汪俊军庄一义张春妮南京军区南京总医院全军医学检验中心

本文观察了体外丙二醛（ＭＤＡ），铜离子（Ｃｕ２＋氧化修饰的脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］结构和生物学性质的变化。氧化修饰Ｌｐ（ａ）过氧化程度增高，负电荷增加，易被巨噬细胞—清道夫受体识别和摄取。ＭＤＡ修饰Ｌｐ（ａ）出现新... 详细信息

本文观察了体外丙二醛（ＭＤＡ），铜离子（Ｃｕ２＋氧化修饰的脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］结构和生物学性质的变化。氧化修饰Ｌｐ（ａ）过氧化程度增高，负电荷增加，易被巨噬细胞—清道夫受体识别和摄取。ＭＤＡ修饰Ｌｐ（ａ）出现新的ＭＤＡ－ＬＤＬ位点；同纤维蛋白溶酶原（Ｐｇ）竞争抑制试验显示氧化、修饰Ｌｐ（ａ）同Ｐｇ同源性增加。提示载脂蛋白（ａ）状态同动脉粥样硬化的病理过程有关。

关键词：脂蛋白(a) 氧化修饰纤溶酶原动脉粥样硬化