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基于毕业实验设计组建多学科交叉科研互助小组提升大学生分子生物学实验技能

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中国生物化学与分子生物学报 2025年

作者：高慧婕刘志强刘超济宁医学院药学院临床药学教研室济宁医学院药学院基础医学教研室

分子生物学实验技能已成为当下医药类大学生从事科研实践所必需掌握的实验技能。为满足不同学科和不同专业对分子生物学技能的培养需求，本次研究组建跨专业、跨学科和跨国籍的科研互助小组，将分子生物学实验技能的培养与大型毕业实验... 详细信息

分子生物学实验技能已成为当下医药类大学生从事科研实践所必需掌握的实验技能。为满足不同学科和不同专业对分子生物学技能的培养需求，本次研究组建跨专业、跨学科和跨国籍的科研互助小组，将分子生物学实验技能的培养与大型毕业实验设计相结合，在综合实验中共同实践和掌握聚合酶链式反应、蛋白质免疫印迹技术、酶联免疫吸附测定等多项分子生物学技能。此次科研互助小组模式的开展，学生反馈良好，普遍认为自身的分子生物学技能大幅提升；药学专业和生物科学专业科研小组成员的《分子生物学》考核成绩分别是80.7分和72.5分，较同专业平均成绩74.77分和67.26分均有明显提高，学生分子生物学综合能力提升；科研小组成员多人多次参加省级生物医药技能大赛，获得二等奖和三等奖多项，成功申请大学生创新创业项目6项，其中省级1项，校级5项，学生科研创新能力有效提升；科研小组成员毕业答辩成绩86.12分，显著高于同答辩组全体成员平均成绩83.43分，学生的毕业设计水平和综合素能显著提高；科研小组成员考研录取率90%，显著高于同答辩组平均考研录取率38.61%。基于毕业实验设计组建多学科交叉科研互助小组，优化了教学资源，整合了教学优势，有效提升了大学生分子生物学实验技能和科研技能。

关键词：多学科交叉分子生物学技能科研互助小组毕业实验设计

U2 snRNP：肿瘤发生发展中的关键介质

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南京医科大学学报(自然科学版) 2025年第03期 418-425页

作者：李建璋张洁贞周琳长沙医学院医学检验学院临床生化教研室

U2小核糖核蛋白（small ribonucleoprotein,snRNP）是一种在人体细胞核剪切过程中发挥关键作用的剪接体。mRNA的成熟，包括5′和3′末端的加工、剪接和转运，都与U2 snRNP密切相关。在剪接体组装中，U2 snRNP对内含子分支位点序列进行... 详细信息

U2小核糖核蛋白（small ribonucleoprotein,snRNP）是一种在人体细胞核剪切过程中发挥关键作用的剪接体。mRNA的成熟，包括5′和3′末端的加工、剪接和转运，都与U2 snRNP密切相关。在剪接体组装中，U2 snRNP对内含子分支位点序列进行识别。在机体内U2 snRNP维持了人体内必需修复因子的转录。另外其可防止转录位点形成R环结构并直接促进DNA修复。研究表明，U2 snRNP在多种人类肿瘤组织中存在，并且其主要特征是核心成分基因的突变和核心组分的表达水平升高。这些变化进一步影响了肿瘤细胞的迁移、增殖、侵袭等，是肿瘤发生发展的关键因素。鉴于U2 snRNP在肿瘤中的分子调控作用，其有望成为临床诊治和药物治疗的新靶点。文章旨在全面回顾U2 snRNP在癌症中的作用机制。

关键词： U2 snRNP 肿瘤剪接体突变信号通路

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传统中药通过靶向铁死亡抗消化道肿瘤

中国生物化学与分子生物学报 2025年

作者：沈莹雪贾彦彬包头医学院基础医学与法医学院病原微生物教研室

消化道肿瘤发病率逐年上升，已经成为发生率高和预后差的世界性健康问题。铁死亡作为一种新型的死亡方式，其主要是由细胞内铁代谢异常引起细胞内铁过量，导致细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的大量产生和脂质过氧化物的... 详细信息

消化道肿瘤发病率逐年上升，已经成为发生率高和预后差的世界性健康问题。铁死亡作为一种新型的死亡方式，其主要是由细胞内铁代谢异常引起细胞内铁过量，导致细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的大量产生和脂质过氧化物的积累。随着铁死亡的研究逐渐深入，发现铁死亡可以增强消化道肿瘤细胞对药物治疗的敏感性，从而达到比较好的治疗效果，因此，近些年来这种死亡方式在消化道肿瘤的治疗领域引起了广泛的关注。传统中药具有悠久的使用历史，由于其成本较低，不良反应少的特点，已经广泛应用于癌症的治疗，越来越多的研究发现，传统中药能够诱导消化道肿瘤发生铁死亡，从而抑制肿瘤细胞的生长和转移。该文主要通过介绍铁死亡机制，进一步引出中药单体通过调控铁代谢、抑制与铁死亡相关的抗氧化系统、调控核因子E2相关因子2 （nuclear factor erythroid 2-related factor 2，NRF2）三个方面诱导消化道肿瘤细胞发生铁死亡，从而达到抑制消化道肿瘤的发生与发展，并且对传统中药以及中药单体与化疗药物联用抗消化道肿瘤的研究进行了部分阐述，为消化道肿瘤的治疗提供了新思路。

关键词：消化道肿瘤铁死亡传统中药中药单体

基于GEO数据库结合网络药理学和分子对接技术探究玉竹抗抑郁作用机制

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食品工业科技 2025年第1期46卷 359-366页

作者：姜振旭王朝兴王宇亮赵宏沈宇孙诗晴马永哲宋明明张宇佳木斯大学药学院黑龙江佳木斯154007 黑龙江省新药创制与药效毒理评价重点实验室黑龙江佳木斯154007

目的:基于生物信息学和网络药理学方法筛选玉竹治疗抑郁症的潜在药物靶点和信号通路,并通过PC12细胞实验初步证实其抗抑郁药效。方法:下载GSE98793表达矩阵和GPL570平台信息进行差异表达基因筛选;通过检索TCMSP数据库进行成分筛选,利用C... 详细信息

目的:基于生物信息学和网络药理学方法筛选玉竹治疗抑郁症的潜在药物靶点和信号通路,并通过PC12细胞实验初步证实其抗抑郁药效。方法:下载GSE98793表达矩阵和GPL570平台信息进行差异表达基因筛选;通过检索TCMSP数据库进行成分筛选,利用Cytoscape3.7.1软件,构建玉竹“药物-成分-靶点”相互作用网络图和PPI网络图;利用DAVID数据库,进行GO和KEGG富集分析;使用SYBYL-X 2.0软件对主要活性成分及靶点进行分子对接验证;采用谷氨酸(Glu)诱导PC12细胞模型后,将玉竹醇提物按低、中、高剂量进行分组给药,考查其对PC12细胞损伤的保护作用。结果:筛选得到玉竹抗抑郁活性成分23个,活性靶点34个;“药物-成分-靶点”网络图显示棕榈酸、月桂酸、(+)-雪松醇等为玉竹抗抑郁的主要活性成分;PPI网络图显示PTGS2、PTGS1、SLC6A2、GABRA1、TNF等为关键靶点;通过GO富集分析得到GO条目共209个,其中包括生物过程(BP)149个,细胞组分(CC)23个,分子功能(MF)37个;主要涉及Chemical carcinogenesis-receptor activation、Small cell lung cancer和Adipocytokine signaling pathway等信号通路;分子对接结果显示,玉竹主要活性成分与抑郁症主要靶点对接结果具有良好稳定性;体外细胞实验结果表明,600μg/mL的玉竹醇提物对Glu诱导的PC12细胞损伤具有明显恢复作用。结论:玉竹可能通过炎症反应、氧化应激和前列腺素合成等途径发挥抗抑郁作用。

关键词：玉竹抑郁症网络药理学 GEO 数据库作用机制

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干扰素调控COVID-19发生及发展的研究进展

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病毒学报 2025年

作者：张遥马宏炜何进伟张芳琳延安大学延安医学院病原生物学教研室空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室

自2019年12月至今，严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染所致的新型冠状病毒肺炎（Coronavirus disease 2019, COVID-19）疫情蔓延全球，对人类健康和社会经济产生了严重影响。病毒感染后机体可启动以干扰素（Interferon,IFN）为核心的固有免疫应答，而IFN作为一种重要的固有免疫分子，具有抗病毒和调节免疫反应的双重作用。近期研究表明，SARS-CoV-2可通过多种机制逃逸IFN反应，且在IFN应答缺陷或机体产生IFN自身抗体的条件下，COVID-19患者重症率增加、预后差，提示IFN对COVID-19病情转归具有重要调控作用。本综述将重点讨论IFN在SARS-CoV-2感染中的作用及其对疾病预后的影响，为COVID-19的防控和治疗提供理论支持。

关键词： IFN SARS-CoV-2 COVID-19 固有免疫疾病预后

3D打印个性化正畸装置对单根牙垂直移动的三维有限元分析

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3360-3368页

作者：曹怡琳王心彧庄妍王亚茹姜至秀刘丹瑜门九旭丁元圣黑龙江省生物医学材料及应用重点实验室黑龙江省佳木斯市154002 佳木斯大学口腔医学院黑龙江省佳木斯市154002

背景:基于牙齿垂直移动原理,通过数字化设计结合3D打印制作个性化正畸装置,可使个性化正畸装置与单个切牙形成支抗系统。借助微种植体绝对支抗作用可对单根牙在三维方向上进行精准控制。目的:基于生物力学原理设计了牙位11、12、21、22... 详细信息

背景:基于牙齿垂直移动原理,通过数字化设计结合3D打印制作个性化正畸装置,可使个性化正畸装置与单个切牙形成支抗系统。借助微种植体绝对支抗作用可对单根牙在三维方向上进行精准控制。目的:基于生物力学原理设计了牙位11、12、21、22压低移动与伸长移动的个性化正畸装置,通过三维有限元法分析个性化正畸装置的安全性与其对牙齿的移动作用。方法:应用Mimics、Geomagic Wrap、SolidWorks和Ansys Workbench软件分别建立了上颌前牙区(牙位11、12、21、22)牙槽骨-牙周膜-上颌切牙-个性化悬臂微种植体-连接板-个性化托槽的三维有限元模型,每个牙位分别设置个性化压低移动与伸长移动正畸装置,加载300 g拉力或推力,分析个性化正畸装置各部件应力水平,计算牙齿位移与牙周膜应力分布情况。结果与结论:①个性化压低移动正畸装置受到的最大等效应力为162.90 MPa,个性化伸长移动正畸装置受到的最大等效应力239.57 MPa,二者的最大等效应力均位于个性化托槽加力附件的垂直部分,个性化正畸装置各部件所受等效应力均在屈服强度内,均具有良好的安全性;②在个性化正畸装置作用下,牙齿初始位移呈现整体压低或伸长移动的趋势,垂直方向上的位移远远超过在水平方向和矢状方向上的位移;牙周膜根尖或颈部位置出现等效应力峰值,在根尖区牙周膜出现等效应力集中区域;③结果显示,个性化正畸装置可以使牙位11、12、21、22近似达到压低移动或伸长移动的目的,初步证实了个性化垂直移动正畸装置的有效性。

关键词： 3D打印个性化正畸装置单根牙压低移动伸长移动三维有限元分析支抗生物力学

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CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响

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中国免疫学杂志 2025年第2期41卷 433-438页

作者：王松豪秦坤韩雨张微微徐绍业邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室桂林541199 桂林医学院科学实验中心桂林541199

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构... 详细信息

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,获得的慢病毒上清浓缩后感染SH-SY5Y细胞,Western blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果及其对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:DNA测序结果显示,pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1蛋白表达。同时稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,MPP^(+)诱导下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1可抑制MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病中的发生机制奠定基础。

关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体

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萝卜硫素对纳米二氧化钛诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制

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中国食品学报 2025年

作者：孔玉雯朱金芳李丽华新疆农业大学食品科学与药学学院台州学院医学院基础教研室

目的：研究萝卜硫素（Sulforaphane SFN）对纳米二氧化钛颗粒(Titanium dioxide nanoparticles TiO2Nps)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法：将选择的50只6周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分成对照组（NC）、TiO2Nps模型组（100mg/k... 详细信息

目的：研究萝卜硫素（Sulforaphane SFN）对纳米二氧化钛颗粒(Titanium dioxide nanoparticles TiO2Nps)诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法：将选择的50只6周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分成对照组（NC）、TiO2Nps模型组（100mg/kg）、TiO2Nps+低剂量SFN给药组（0.5mg/kg）、TiO2Nps+中剂量SFN给药组（1mg/kg）、TiO2Nps+高剂量SFN给药组（2mg/kg），每组10只。9周后眼眶取血，留取小鼠肝脏。检测小鼠血清中ALT和AST水平，肝脏组织氧化应激、炎症指标。HE染色观察小鼠肝脏组织病理形态学变化，免疫组织化学染色检测小鼠肝脏中F4/80蛋白的表达。蛋白免疫印迹法检测OGG1、NF-κb、ERK、p-ERK蛋白表达水平。结果：与对照组相比，模型组小鼠血清中AST、ALT水平显著升高；与模型组相比，各SFN给药组均显著降低了小鼠血清中ALT、AST、TBIL水平；显著提高肝组织的GSH/GSSG比值以及SOD水平；显著降低小鼠肝脏组织MDA水平。实时定量PCR结果显示，与模型组相比，SFN给药组显著降低了IL-6、TNF-α的mRNA水平。Western Blotting结果显示，与模型组相比，给药组NF-κb、p-ERK、ERK蛋白表达水平显著下调。HE染色结果显示，与模型组相比，给药组的肝细胞空泡化程度有所改善；免疫组织化学染色结果显示，相比于模型组，给药组F4/80表达减少。结论：SFN能够减轻TiO2Nps诱导的小鼠肝损伤，氧化应激和炎症指标的变化表明SFN能够缓解TiO2Nps诱导的氧化应激和炎症反应，且可能通过NF-κb-ERK/p-ERK通路发挥作用。

关键词：萝卜硫素纳米二氧化钛肝损伤

基于生物信息学分析线粒体转录因子B1在结肠癌中高表达并促进细胞生长

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中国生物化学与分子生物学报 2025年第1期41卷 125-135页

作者：欧志高陈会莹汤婷朱剑军山西医科大学基础医学院医学细胞生物与遗传学教研室太原030001

线粒体转录因子B1(mitochondrial transcription factor B1,TFB1M)主要参与线粒体DNA转录,与肝细胞癌、星状细胞瘤等发生发展有关,然而其在结肠癌中的作用尚不清楚。本研究基于公共数据库和免疫组织化学方法分析TFB1M在结肠癌中的表达... 详细信息

线粒体转录因子B1(mitochondrial transcription factor B1,TFB1M)主要参与线粒体DNA转录,与肝细胞癌、星状细胞瘤等发生发展有关,然而其在结肠癌中的作用尚不清楚。本研究基于公共数据库和免疫组织化学方法分析TFB1M在结肠癌中的表达水平及预后;筛选TFB1M高低表达组差异表达基因,进行功能富集分析,突变分析、免疫细胞浸润和药物敏感性分析等。采用CCK-8、流式细胞术等方法检测过表达TFB1M对结肠癌细胞活力、凋亡及细胞周期分布的影响。结果发现,TFB1M在结肠癌中表达水平显著升高,其表达水平与N分期和TNM分期有关(P<0.05)。TFB1M高表达结肠癌患者预后较差。功能富集结果显示,TFB1M与白细胞介导的免疫、免疫球蛋白产生等信号通路有关。此外,ZFHX4、RYR2、PIK3CA和FAT 4等基因在TFB1M高表达组突变频率显著升高(均P<0.05)。在PIK3CA和FAT 4突变组中TFB1M表达水平显著升高(均P<0.05)。TFB1M高表达组中CD4+记忆活化T细胞占比升高,Treg细胞占比降低。TFB1M高表达组患者可能对陶扎色替(tozasertib)、阿糖胞苷(cytarabine)、长春新碱(vincristine)等更敏感,而TFB1M低表达组患者可能对Dasatinib、JQ1、ERK_2440等更敏感。细胞实验结果表明,过表达TFB1M时,结肠癌细胞活力升高、细胞凋亡减少,S期和G 2/M期细胞占比增多。以上研究结果表明,TFB1M可能通过调控免疫细胞浸润及功能在结肠癌细胞生长过程中发挥关键作用。

关键词：结肠癌线粒体转录因子B1 细胞活力细胞凋亡

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