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干细胞治疗帕金森病的研究进展

中国比较医学杂志 2019年第8期29卷 142-148页

作者：吕颖白琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心

帕金森病是一种中脑黑质多巴胺能神经元渐进性变性死亡从而导致黑质-纹状体通路受损的中枢神经系统退行性疾病,临床主要的治疗方式为药物和手术,但均只能短期缓解症状且后期副作用大,无法达到治愈的效果。干细胞具有自我更新能力和多向... 详细信息

帕金森病是一种中脑黑质多巴胺能神经元渐进性变性死亡从而导致黑质-纹状体通路受损的中枢神经系统退行性疾病,临床主要的治疗方式为药物和手术,但均只能短期缓解症状且后期副作用大,无法达到治愈的效果。干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,干细胞移植可在损伤组织内进行神经再生与修复,为帕金森病的治疗带来了曙光。本文从干细胞取材、不同类型干细胞治疗帕金森病的方法、疗效和优缺点等方面进行比较分析,总结了干细胞治疗帕金森病的几种可能的作用机制,希望对干细胞治疗帕金森病的机制研究、细胞类型和移植方式的选择及临床试验等提供一定的帮助。

关键词：帕金森病干细胞细胞移植

口腔遗传病与罕见病生物样本库建设及相关样本保存编码专家共识

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中华口腔医学杂志 2023年第8期58卷 749-758页

作者：阮文彦张燕丽郑树国孙瑶范志朋宋亚玲孙宏晨王文梅代杰文赵震锦张婷婷陈栋潘永初蒋月桂王旭东郑黎薇朱庆林何淼许宝山贾仲林韩冬段小红第四军医大学口腔医院口腔罕见病与遗传病门诊/口腔生物学教研室、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 北京大学口腔医学院·口腔医院预防科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081 同济大学口腔医学院·附属口腔医院口腔种植科、上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 首都医科大学口腔医学院、全牙再生与口腔组织功能重建北京市重点实验室北京100050 武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079 吉林大学口腔医院口腔病理学教研室长春130021 南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院口腔黏膜病科南京210008 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院第一门诊、辽宁省口腔疾病重点实验室沈阳110002 天津医科大学口腔医院口腔颌面外科天津300070 郑州大学第一附属医院口腔综合科郑州450052 南京医科大学附属口腔医院口腔正畸科、江苏省口腔疾病研究重点实验室、江苏省口腔转化医学工程研究中心南京210029 西安交通大学口腔医院牙体牙髓病科西安710004 四川大学华西口腔医院儿童口腔科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔医学重点实验室西安710032 武汉大学口腔医(学)院儿童口腔科武汉430079 中山大学附属口腔医院口腔颌面外科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州510080 四川大学华西口腔医院唇腭裂外科、口腔疾病研究国家重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心成都610041 北京大学口腔医学院·口腔医院修复科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,... 详细信息

口腔遗传病与罕见病生物样本极其珍贵,收集保存此类样本有助于阐明此类疾病的发病机制以及提高诊治水平,而针对此类疾病生物样本库的标准化建设是实现这些目的的重要基石。目前有关口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的文献信息非常少,也缺乏口腔颌面部来源生物样本分类及其编码的标准或建议,不利于口腔专病生物样本库的标准化和信息化建设。本文总结了口腔遗传病与罕见病生物样本库建设的背景、必要性、原则和要点。在全国生物样本标准化技术委员会出台的团体标准《人类生物样本分类与编码》基础上,新增76种口腔颌面部来源生物样本的编码建议,以期实现口腔颌面部来源生物样本分类与编码的标准化,推动口腔专病特别是口腔遗传病与罕见病生物样本库的智慧化建设,提升我国口腔遗传病与罕见病的整体研究水平。

关键词：口腔医学生物样本库罕见病遗传病标准化信息化专家共识

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单倍体胚胎干细胞的研究进展及应用前景

生殖医学杂志 2020年第9期29卷 1237-1243页

作者：徐希桥徐家伟王海松孙莹璞郑州大学第一附属医院生殖医学中心郑州450000 河南省生殖与遗传重点实验室郑州450000 河南省妇产疾病(生殖医学)临床医学研究中心郑州450000 胚胎植入前遗传学诊断与筛查河南省工程实验室郑州450000

单倍体胚胎干细胞(haESCs)是只包含一组从精子或卵子遗传而来的基因组的干细胞,被称为孤雄单倍体胚胎干细胞(AG-haESCs)或孤雌单倍体胚胎干细胞(PG-haESCs)。近年来人们对haESCs的研究从脊椎动物、哺乳动物、非人灵长类动物到人类,不断... 详细信息

单倍体胚胎干细胞(haESCs)是只包含一组从精子或卵子遗传而来的基因组的干细胞,被称为孤雄单倍体胚胎干细胞(AG-haESCs)或孤雌单倍体胚胎干细胞(PG-haESCs)。近年来人们对haESCs的研究从脊椎动物、哺乳动物、非人灵长类动物到人类,不断取得突破性进展,建立起了各种动物的孤雄和孤雌单倍体干细胞系。haESCs既有与二倍体胚胎干细胞相似的多能性又有类似于配子的特性,故可用于产生半克隆小鼠,配合基因编辑技术与基因筛选系统,为个体水平研究基因功能和表观遗传修饰提供了强有力的工具,具有广泛的应用前景。本文综述了haESCs的特性及其应用进展,提出了haESCs研究过程中尚未完全解决的关键问题以及它们在基因筛选方面的潜在应用。

关键词：单倍体胚胎干细胞系基因筛选表观遗传

氧化锆多孔表面显微形貌对成骨细胞增殖及分化的影响

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北京大学学报（医学版） 2022年第1期54卷 31-39页

作者：王铮丁茜高远马全诠张磊葛兮源孙玉春谢秋菲北京大学口腔医学院·口腔医院修复科国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔数字化医疗技术和材料国家工程实验室口腔数字医学北京市重点实验室国家卫生健康委员会口腔医学计算机应用工程技术研究中心国家药品监督管理局口腔生物材料重点实验室北京100081 佛山(华南)新材料研究院广东佛山528000 北京大学口腔医学院·口腔医院中心实验室北京100081 北京大学口腔医学院·口腔医院口腔医学数字化研究中心北京100081

目的:探索两种氧化锆多孔表面显微形貌对小鼠前成骨细胞增殖、分化的影响。方法:根据加工及造孔方式不同,将氧化锆试件分为4组,分别为切削终烧结组(milled sintering group,M-Ctrl)、切削多孔组(milled porous group,M-Porous)、3D打印... 详细信息

目的:探索两种氧化锆多孔表面显微形貌对小鼠前成骨细胞增殖、分化的影响。方法:根据加工及造孔方式不同,将氧化锆试件分为4组,分别为切削终烧结组(milled sintering group,M-Ctrl)、切削多孔组(milled porous group,M-Porous)、3D打印终烧结组(3D printed sintering group,3D-Ctrl)和3D打印多孔组(3D printed porous group,3D-Porous)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、激光显微形貌测量显微镜进行表面显微形貌分析,用接触角测量仪测量静态接触角,通过能量色散X射线仪进行表面元素分析。将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1接种于试件表面,SEM观察细胞培养第1、7天的黏附形态;使用细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测量细胞培养第1、3、5天的增殖情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测分化诱导第14天时碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,Colla1)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,Runx2)及骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的相对表达量。结果:3D-Porous组孔径[(419.72±6.99)μm]及孔深度[(560.38±8.55)μm]均显著大于M-Porous组的孔径[(300.55±155.65)μm]及孔深度[(69.97±31.38)μm,(P0.05)。M-Porous及3D-Porous组表面均可见细胞在孔内黏附,且培养第3、5天时两组试件表面细胞增殖活性均显著高于M-Ctrl组及3D-Ctrl组(P<0.05)。细胞分化诱导第14天时3D-Porous组ALP、Colla1、Runx2、OCN mRNA的相对表达量均显著低于M-Ctrl组及3D-Ctrl组(P<0.05)。M-Porous组Colla1、Runx2、OCN mRNA的相对表达量均显著高于3D-Porous组(P<0.05)。结论:氧化锆表面多孔形貌能促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖及黏附,但对其成骨向分化有一定抑制作用。

关键词：氧化锆多孔表面成骨细胞骨结合

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登革热动物模型研究进展

中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 120-124,137页

作者：陈倩鲍琳琳王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

在过去的几十年间,随着社会发展和气候变暖等原因,登革热在全球的流行范围不断扩大、发病率急剧上升,已成为一个全球性公共卫生问题。建立理想的登革热动物模型对研究登革病毒感染及发病机制至关重要。鉴于登革病毒的种属特异性及特殊... 详细信息

在过去的几十年间,随着社会发展和气候变暖等原因,登革热在全球的流行范围不断扩大、发病率急剧上升,已成为一个全球性公共卫生问题。建立理想的登革热动物模型对研究登革病毒感染及发病机制至关重要。鉴于登革病毒的种属特异性及特殊的致病机制,登革病毒感染动物模型的建立面临诸多挑战。登革病毒感染免疫缺陷小鼠,可产生高水平的病毒复制和严重的临床表现,如血管通透性增加及血小板下降等;但部分症状与人类不同,如出现神经症状。登革病毒感染人源化小鼠模型,可研究人体对登革病毒的部分免疫反应,但并不全面和准确。登革病毒可感染非人灵长类动物,但通常不产生明显的临床症状。因此,仍需进一步研究各种登革病毒感染模型,建立更理想的动物模型,支撑登革病毒发病机制研究及抗病毒药物、疫苗的临床前评价。本文汇集了近年来建立登革病毒感染动物模型的研究进展以及动物模型在病毒发病机制、疫苗评估、药物测试等方面的应用情况,为登革病毒感染模型的研究和应用提供参考信息。

关键词：登革热登革病毒动物模型

生长分化因子5基因原核表达质粒构建和表达及其体内成软骨的诱导活性

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第50期13卷 9842-9845页

作者：卢康荣王万山薛侠朴仲贤朴英杰南方医科大学教育部和广东省共建"重大疾病的转录组与蛋白质组学重点实验室" 广东省广州市510515 南方医科大学比较医学研究所广东省广州市510515 陕西省妇幼保健院陕西省西安市710001 汕头大学医学院中心实验室广东省汕头市515041

背景:生长分化因子5在软骨、四肢和关节的发育、形成中起着重要作用,是目前最常应用的研究早期关节发育的标志分子。克隆人生长分化因子5基因可为软骨、关节缺损的修复奠定研究基础。目的:利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人生长分化因... 详细信息

背景:生长分化因子5在软骨、四肢和关节的发育、形成中起着重要作用,是目前最常应用的研究早期关节发育的标志分子。克隆人生长分化因子5基因可为软骨、关节缺损的修复奠定研究基础。目的:利用基因工程技术在大肠杆菌中表达人生长分化因子5成熟肽,探讨重组蛋白的体内诱导活性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2006-01/06在南方医科大学分析测试中心完成。材料:人流产胚胎膝关节区软骨组织取自解放军广州军区总医院妇产科,标本获取征得家属同意。10只KM小鼠购自南方医科大学实验动物中心,雌雄各半,体质量18～22g,6～8周龄。方法:通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人胚胎软骨组织克隆生长分化因子5完整成熟肽基因,将所得基因片段插入pET22b(+)载体构建重组原核表达载体pET22b(+)-GDF5,重组质粒转化大肠杆菌BL-21进行IPTG诱导表达。凝胶介质镍离子螯合法纯化目的蛋白,植入小鼠后肢股部肌袋内常规苏木精-伊红染色进行生物学活性鉴定。主要观察指标:琼脂糖凝胶电泳观察目的基因表达条带,测序观察目的基因序列,SDS-PAGE电泳观察目的蛋白表达条带,组织学观察生长分化因子5诱导活性。结果:RT-PCR产物长约350bp,阳性克隆质粒经双酶切可切出约350bp的片段,测序表明与Genbank中的序列完全一致。SDS-PAGE电泳显示重组子转化菌在相对分子质量14100位置处出现特异外源蛋白表达带,和成熟肽相对分子质量13600接近。纯化后体内植入实验组织切片显示,大量的间充质干细胞聚集和增生,并分化成为成软骨细胞,分泌软骨基质并埋入其中变为软骨细胞。结论:通过RT-PCR法从人胚胎软骨组织中成功克隆出人生长分化因子5完整成熟肽基因,可在大肠杆菌中得到高效表达,经纯化后在动物体内具有成软骨诱导活性。

关键词：生长分化因子5 克隆表达活性

序列分析及确认HLA新等位基因B*55:46

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中国组织工程研究 2015年第19期19卷 3037-3041页

作者：尹红李晓丰李剑平中国医科大学附属盛京医院麻醉科辽宁省沈阳市110041 辽宁省血液中心输血医学研究所辽宁省沈阳市110044 辽宁省血液安全研究重点实验室辽宁省沈阳市110044 沈阳市血液安全研究重点实验室辽宁省沈阳市110044 沈阳市干细胞临床应用研究中心辽宁省沈阳市110044

背景:近几年来,随着中华骨髓库的建立和人类白细胞抗原分型技术的不断发展和提高,中国人类白细胞抗原新等位基因不断被发现。目的:探索中国人的人类白细胞抗原新等位基因。方法:应用PCR-序列特异性寡核苷酸探针基因分型技术,对1名27岁... 详细信息

背景:近几年来,随着中华骨髓库的建立和人类白细胞抗原分型技术的不断发展和提高,中国人类白细胞抗原新等位基因不断被发现。目的:探索中国人的人类白细胞抗原新等位基因。方法:应用PCR-序列特异性寡核苷酸探针基因分型技术,对1名27岁男性汉族造血干细胞志愿捐献者进行HLA基因分型,并应用基于测序的方法分析该基因序列及与最相近等位基因序列的差异。结果与结论:PCR-序列特异性寡核苷酸探针结果显示该样本HLA-B基因座反应格局出现异常提示;基因测序结果表明其B基因座第3外显子序列与所有已知HLA-B等位基因序列均不一致,在所检测的第2、3外显子中,与序列最相近的等位基因B*55:02:01的差异只是在第3外显子发生了nt 412 A→G一个核苷酸替代,导致第138位密码子由AAC→GAC,相应的编码的天冬酰胺改变为天冬氨酸。将其序列提交国际基因数据库及IMGT/HLA数据库,证实该HLA等位基因为国际上首次发现,被世界卫生组织织人类白细胞抗原因子命名委员会正式命名为HLA-B*55:46(HM989018)。

关键词： HLA抗原等位基因寡核苷酸探针造血干细胞干细胞培养新等位基因 HLA-B*55:46 序列分析聚合酶链式反应序列特异性寡核苷酸探针碱基氨基酸人类白细胞抗原基因座外显子

血浆D-二聚体对IVF/ICSI患者控制性促排卵后妊娠结局的预测价值

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生殖医学杂志 2020年第1期29卷 50-55页

作者：连若纯徐仕儒许健刁梁辉黄春宇曾勇深圳中山泌尿外科医院生殖医学中心深圳市围着床期生殖免疫重点实验室深圳中山生殖与遗传研究所

目的评估血浆D-二聚体水平对IVF/ICSI治疗患者OHSS的发生和不良妊娠结局的预测价值。方法选取2016年6月至2017年5月于本院行IVF/ICSI治疗的69例患者,在降调日、扳机日以及验孕日取血,使用Mini VIDAS全自动化荧光酶标免疫测试系统进行D-... 详细信息

目的评估血浆D-二聚体水平对IVF/ICSI治疗患者OHSS的发生和不良妊娠结局的预测价值。方法选取2016年6月至2017年5月于本院行IVF/ICSI治疗的69例患者,在降调日、扳机日以及验孕日取血,使用Mini VIDAS全自动化荧光酶标免疫测试系统进行D-二聚体检测,分析D-二聚体在促排卵过程中的动态变化,扳机日D-二聚体水平与OHSS发生倾向相关性,并分析正常妊娠组(即成功分娩)和妊娠失败组(即未能成功妊娠或分娩)两组间验孕日D-二聚体的变化情况。结果 (1)D-二聚体浓度在降调日、扳机日及验孕日分别为(280±160)ng/ml、(240±190)ng/ml、(1 100±540)ng/ml,降调日与扳机日D-二聚体浓度无显著性差异(P>0.05),而在验孕日显著上升(P0.05)。(3)取卵个数≥20个疑似OHSS或已确诊OHSS的患者与接受新鲜胚胎移植患者(取卵0.05]。(4)验孕日正常妊娠组D-二聚体浓度[(1 200±580)ng/ml]高于妊娠失败组[(900±420)ng/ml],但差异无统计学意义(P>0.05)。结论血浆中D-二聚体浓度并不足以评估控制性促排卵(COH)过程中高凝状态,扳机日或验孕日D-二聚体水平对OHSS的发生及不良妊娠结局无预测作用。对于COH过程中高凝状态的准确评估,可能需要同时监测多个凝血或纤溶指标,临床医生更要结合临床,不能仅凭D-二聚体水平判断患者的预后转归。

关键词： D-二聚体控制性超促排卵卵巢过度刺激征妊娠结局

重症甲型H1N1流感病毒感染诱导小鼠胸腺凋亡萎缩

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中国免疫学杂志 2020年第14期36卷 1676-1679页

作者：王阳张须龙李枫棣安云庆刘波(指导) 曹彬(指导) 中日友好医院北京100000 首都医科大学北京100000 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100000 山东省淄博市临淄区人民医院临床微生物科呼吸与危重症医学科淄博市呼吸感染与临床微生物重点实验室淄博255400

目的:探讨重症流感病毒感染介导的胸腺萎缩及其作用机制。方法:4~6周龄SPF级BALB/c小鼠滴鼻给予50μl TCID50甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(1×10^6个/ml),构建重症流感病毒感染小鼠模型;检测各感染时间小鼠体质量、胸腺大小及... 详细信息

目的:探讨重症流感病毒感染介导的胸腺萎缩及其作用机制。方法:4~6周龄SPF级BALB/c小鼠滴鼻给予50μl TCID50甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(1×10^6个/ml),构建重症流感病毒感染小鼠模型;检测各感染时间小鼠体质量、胸腺大小及重量;HE染色检测胸腺组织病理变化;流式细胞术检测胸腺内不同发育阶段T细胞数量及凋亡;原位TUNEL法检测胸腺细胞凋亡;细胞凋亡相关基因芯片和荧光定量PCR检测验证促凋亡和抗凋亡相关基因变化。结果:成功建立小鼠重症甲型H1N1流感病毒感染模型。感染2~3 d后小鼠胸腺萎缩变小,以胸腺皮质区萎缩为主,感染5~7 d皮质区完全消失。主要存在于皮质区的双阳性T细胞(CD4^+CD8^+),随感染过程进展逐渐减少直至消失。细胞凋亡,尤其是皮质区细胞凋亡增多是胸腺萎缩的重要原因。促凋亡相关基因表达增加,尤其Fas介导的细胞凋亡可能是胸腺皮质区细胞凋亡的重要机制。结论:重症流感病毒感染可诱导胸腺(尤其是皮质区)萎缩,FasL-Fas介导的细胞凋亡是胸腺萎缩的重要原因。

关键词：流感病毒胸腺萎缩细胞凋亡 Fas