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五倍子水提物对UVB诱导光老化成纤维细胞的保护作用

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中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：陈志伟周磊王殷杰陈赤清向杰石召华胡俊杰湖北中医药大学药学院五峰赤诚生物科技有限公司湖北本草时代大健康产业有限公司湖北中医药大学中药资源与中药复方教育部重点实验室

目的探究五倍子水提取物(galla chinensis extract GCE)对中波长紫外线（UVB）诱导的人真皮成纤维细胞（HSF）光老化的保护作用及机制。方法通过自由基清除实验、弹性蛋白酶抑制实验评价五倍子水提物的抗衰老能力；建立UVB诱导的细胞... 详细信息

目的探究五倍子水提取物(galla chinensis extract GCE)对中波长紫外线（UVB）诱导的人真皮成纤维细胞（HSF）光老化的保护作用及机制。方法通过自由基清除实验、弹性蛋白酶抑制实验评价五倍子水提物的抗衰老能力；建立UVB诱导的细胞光老化模型，给予五倍子水提物干预，通过CCK-8法检测细胞存活率，β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平，细胞流式仪检测活性氧（ROS），试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）的活性；通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、白细胞介素-6（IL-6）、I型胶原蛋白（COL-1）含量。蛋白免疫印迹法（western blot）检测相关蛋白表达水平。结果五倍子水提物具有清除自由基、抑制弹性蛋白酶活性、提高UVB诱导的HSF细胞存活率、COL-1含量、抗氧化物酶活性（CAT、SOD）等作用；还可以抑制UVB诱导的HSF细胞衰老、ROS、IL-6、MMP-1和MDA生成以及抑制丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白的表达水平。结论五倍子水提物通过提高抗氧化酶活力以及抑制MAPK信号通路的激活，发挥抗光老化作用。

关键词：五倍子水提物光老化人真皮成纤维细胞

红花玉兰MYB家族基因MawuCPC的克隆及在花色调控中的作用分析

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华北农学报 2024年第4期39卷 110-118页

作者：王启迪朱惠贤马江陈发菊朱仲龙李雪萍河南科技大学园艺与植物保护学院河南洛阳471000 三峡大学生物技术研究中心湖北宜昌443002 五峰博翎种业有限公司湖北五峰443413

红花玉兰是我国特有的珍稀园林观赏树种,其花色变异类型极为丰富,有深红、粉红和白色等一系列的花色变异品种,然而其花色调控的分子机制目前仍不清楚。为探究红花玉兰花色调控的分子机制,以不同色系的红花玉兰为试验材料,克隆获得了红... 详细信息

红花玉兰是我国特有的珍稀园林观赏树种,其花色变异类型极为丰富,有深红、粉红和白色等一系列的花色变异品种,然而其花色调控的分子机制目前仍不清楚。为探究红花玉兰花色调控的分子机制,以不同色系的红花玉兰为试验材料,克隆获得了红花玉兰的花色调控关键候选基因MawuCPC,对其开展了系统进化分析、氨基酸序列结构分析、亚细胞定位试验、酵母双杂交试验、荧光素酶试验,并通过实时定量PCR比较分析了不同花色品种间MawuCPC的表达水平。结果表明,红花玉兰的MawuCPC基因编码区长度为258 bp,共编码85个氨基酸;系统进化分析显示,MawuCPC与拟南芥以及其他物种的CPC类成员共聚于同一进化分支,进一步支持了MawuCPC属于红花玉兰的CPC家族成员;序列结构分析进一步显示,MawuCPC蛋白仅具有1个保守的R3结构域和1个bHLH结合基序。亚细胞定位试验结果表明,MawuCPC蛋白特异性地定位于细胞核内。酵母双杂交和荧光素酶试验显示,MawuCPC和MawuPAP1均可以与红花玉兰的bHLH家族蛋白MawubHLH1发生相互作用,且MawuCPC与MawubHLH1的结合能够严重抑制MawuPAP1和MawubHLH1对结构基因MawuDFR启动子的表达增强作用。实时定量PCR结果显示,MawuCPC在红花玉兰白花系品种JB中表达水平最高,在粉花系品种娇艳中表达次之,在红花系品种娇红1号中表达最低。以上结果表明,在红花玉兰中,MawuCPC可能同样是通过与PAP1/2类蛋白竞争结合bHLH蛋白来发挥其花色调控的作用,且可能正是由于该基因的表达水平差异促使红花玉兰产生了极其丰富的花色变异类型。

关键词：红花玉兰 CPC MawuCPC 酵母双杂交表达调控花色

抗CD33单克隆抗体肽图分析方法的建立与验证

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中国药学杂志 2024年第16期 1495-1503页

作者：白露叶日平刘蒙蒙李雪琪张秀真赵永新杭州多禧生物科技有限公司

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位，并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依... 详细信息

目的建立抗CD33单克隆抗体肽图分析方法并对方法进行验证。方法分别使用不同类型设备和不同流动相体系进行抗CD33抗体肽图检测。通过合成抗体CDR区域肽段进行特征肽段定位，并用质谱法对定位结果进行确认。以相对保留时间作为判断依据，根据《中国药典》2020年版完成方法验证。结果超高效液相色谱法（ultraperformance liquid chromotograph, UPLC）进行肽图检测比高效液相色谱法（high performance liquid chromotograph, HPLC）时间更短，三氟乙酸流动相体系相比甲酸流动相体系分离度更高。使用合成肽段的定位结果与质谱鉴定结果一致。方法专属性验证结果显示制剂空白、样品溶液空白对肽图特征峰检测无干扰，不同抗体肽图谱之间存在明显差异；重复性验证结果显示6份平行样品间特征肽段相对保留时间相对标准偏差（RSD）为0.01%～0.05%;中间精密度验证结果显示不同分析人员特征肽段相对保留时间RSD为0.04%～0.32%;耐用性验证结果显示不同酶处理条件[胰蛋白酶量为（1±0.2）μg、酶解温度为（37±1）℃、酶解时间为（4±1）h]特征肽段相对保留时间RSD为0.02%～0.09%,不同色谱条件[三氟乙酸占比（0.08±0.02）%、流速（0.3±0.05）mL·min-1、柱温（40±2）℃]、不同批次色谱柱特征肽段相对保留时间RSD为0.36%～1.43%。样品溶液在25 h内检测，特征肽段相对保留时间RSD为0.01%～0.04%。结论本研究采用合成肽段对液相肽图检测中的肽段进行定位，同时采用相对保留时间进行检测结果的判定，为生物药肽图检测提供了新的思路。

关键词：肽图分析超高效液相色谱法三氟乙酸质谱

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不同茶树品种的径山茶挥发性成分差异研究

茶叶科学 2024年

作者：侯智炜吕永铭马宽张汇源顾哲张然李乐金俞谷苏祝成陈红平浙江农林大学茶学与茶文化学院中国农业科学院茶叶研究所厦门市谷特美生物科技有限公司杭州径山五峰茶业有限公司

为深入探究不同茶树品种的径山茶挥发性成分差异，采用搅拌棒吸附萃取-气相色谱-质谱联用技术（SBSE-GC-MS）、顶空-气相色谱-离子迁移谱技术（HS-GC-IMS）对径山1号、径山2号、鸠坑种、迎霜和翠峰5个茶树品种的径山茶挥发性成分进行分... 详细信息

为深入探究不同茶树品种的径山茶挥发性成分差异，采用搅拌棒吸附萃取-气相色谱-质谱联用技术（SBSE-GC-MS）、顶空-气相色谱-离子迁移谱技术（HS-GC-IMS）对径山1号、径山2号、鸠坑种、迎霜和翠峰5个茶树品种的径山茶挥发性成分进行分析。首先，基于GC-MS和GC-IMS分别共鉴定出93种和79种挥发性成分。其次，通过主成分分析（PCA）揭示了不同茶树品种的径山茶挥发性成分之间的差异。最后，运用正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）的变量投影重要性（VIP）确定不同品种间的差异挥发性成分，并通过相对香气活度值（ROAV）进一步筛选关键差异挥发性成分。结果表明，在GC-MS和GC-IMS中分别有16种和12种挥发性化合物被鉴定为不同茶树品种径山茶的关键差异挥发性化合物。其中，径山2号的特征挥发性成分包括2-庚醇、茉莉酸甲酯、2-甲基丁醛和2-庚酮等，具有较为明显的清香特征，其含量高于其他品种；径山1号中顺茉莉酮、庚醛和(Z)-3-己烯醇的含量较为丰富；迎霜品种中氧化柠檬烯和戊醛的含量较高。结合感官评价结果表明，径山1号、翠峰和径山2号的香气评分较高。研究揭示了不同茶树品种径山茶的特征性挥发物具有显著差异，为径山茶生产中优质原料的选择提供理论依据，对实现高品质径山茶的精准加工和定向品质控制具有重要价值。

关键词：径山茶茶叶香气茶树品种气相色谱-质谱联用气相色谱-离子迁移谱

五倍子单宁酸微胶囊的制备、性质表征及“双抗”活性评估

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食品与发酵工业 2024年第11期50卷 121-127,I0007-I0009页

作者：张娜何郎志杨心彪陈赤清刘义稳鲁群黄艳春丁士勇刘睿华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 五峰赤诚生物科技股份有限公司湖北宜昌443400 环境食品学教育部重点实验室湖北武汉430070 农业农村部华中都市农业重点实验室湖北武汉430070

为掩蔽单宁酸的涩味,提高其接受性,并且提高其生物活性的稳定性,该文以魔芋葡甘聚糖为壁材,并结合冷冻干燥技术进行单宁酸微胶囊的制备。以单宁酸包埋率为评价指标优化包埋工艺,并对微胶囊的微观形态、结构、热力学性能、缓释性以及抗... 详细信息

为掩蔽单宁酸的涩味,提高其接受性,并且提高其生物活性的稳定性,该文以魔芋葡甘聚糖为壁材,并结合冷冻干燥技术进行单宁酸微胶囊的制备。以单宁酸包埋率为评价指标优化包埋工艺,并对微胶囊的微观形态、结构、热力学性能、缓释性以及抗氧化性和抑菌活性进行综合分析。结果表明,单宁酸微胶囊的最佳制备工艺为:芯壁比1∶15(质量比),壁材质量浓度20 g/L,反应温度45℃,搅拌时间2.0 h,在此条件下制备的单宁酸包埋率为75.33%;呈无规则状,表面稍有裂缝。红外光谱及差式扫描量热分析均表明,单宁酸成功地被封装于胶囊内,且具有良好的热性能。与未处理的单宁酸相比,单宁酸微胶囊化后具有一定的缓释作用,单宁酸组以及微胶囊组在口腔消化阶段的质量浓度分别为0.98、0.57 mg/m L,有效解决单宁酸适口性的问题。包埋后并没有影响单宁酸的抗氧化性和抗菌生物活性,单宁酸对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率IC_(50)值分别为9.20、9.58μg/m L,单宁酸微胶囊则分别为9.08、8.99μg/m L;且单宁酸微胶囊化前后对4种肠道致病菌的均具有一定的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用较强,单宁酸对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率达(87.06±2.28)%、(84.44±6.85)%,而微胶囊的抑菌率分别为(96.02±3.11)%、(79.34±3.97)%,单宁酸能够使细菌的细胞膜受损,影响细菌的生长繁殖,起到较好的抑菌作用。因此,单宁酸微胶囊化为单宁酸在不同领域中的应用提供了有益的思路。

关键词：五倍子单宁酸微胶囊性质表征抗氧化活性抗菌作用

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基于incopat专利数据库的五倍子专利分析

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第6期26卷 1505-1514页

作者：王晨雨陈赤清向杰陈志伟徐雷胡俊杰叶利春石召华湖北中医药大学药学院五峰赤诚生物科技有限公司湖北中医药大学中医临床学院湖北中医药大学中药资源与中药复方教育部重点实验室湖北时珍实验室

五倍子是现代临床常用的中药，应用广泛，可以用于治疗痔疮、出血、口腔溃疡等多种疾病。基于incopat专利数据库对全球近20年的五倍子专利进行检索，共检索到8123件相关专利；运用基本的图表分析法，从申请趋势、专利价值、技术领域、... 详细信息

五倍子是现代临床常用的中药，应用广泛，可以用于治疗痔疮、出血、口腔溃疡等多种疾病。基于incopat专利数据库对全球近20年的五倍子专利进行检索，共检索到8123件相关专利；运用基本的图表分析法，从申请趋势、专利价值、技术领域、法律状态等方面对五倍子专利进行格局分析。分析结果表明，五倍子的开发正处于快速发展阶段，五倍子在治疗痔疮、口腔溃疡、出血等方面具有较深入的研究，五倍子中药材、中成药和化妆品是当今的研发热点，中韩两国为五倍子的专利主要分布国家。我国的五倍子专利数量虽然众多，但是专利的质量、价值与世界的专利水平具有一定的差距；从五倍子的当前发展趋势上来看，该领域仍有较大的专利申请空间，我国五倍子专利申请人可结合自身优势、发展趋势及发展短板制定科学的发展策略，从根本上提高五倍子产业的核心竞争力。

关键词：五倍子专利 incopat专利数据库格局分析发展趋势

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椰糠栽培条件下‘云烟87’种子产质量变化及生长模型构建

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分子植物育种 2024年

作者：潘磊毛春堂吴家昶陈云松潘义宏张立猛玉溪中烟种子有限责任公司云南五佳生物科技有限公司

为构建智能化烟草繁种技术体系，本研究以‘云烟87’为研究对象，在温室无土栽培条件下，对比分析椰糠作为栽培基质对‘云烟87’产质量的影响，探索研究其对应的繁种生长模型。通过对农艺性状和种子产质量的数据分析，椰糠处理不仅在农... 详细信息

为构建智能化烟草繁种技术体系，本研究以‘云烟87’为研究对象，在温室无土栽培条件下，对比分析椰糠作为栽培基质对‘云烟87’产质量的影响，探索研究其对应的繁种生长模型。通过对农艺性状和种子产质量的数据分析，椰糠处理不仅在农艺性状方面优于土壤处理，而且椰糠处理还大幅增加了烟株的单株果数和单株种子产量，两次试验较土壤分别提高了91.73%、48.42%和115.90%、94.23%，并且种子质量也优于土壤处理；利用Pearson方法分析了大气温度、大气湿度和移栽时间与椰糠栽培条件下‘云烟87’生长指标之间的相关性，基于梯度下降回归算法构建了株高增量、最大叶长增量、最大叶宽增量和有效叶片数增量的回归模型，株高增量模型的R2=0.89，最大叶长增量模型的R2=0.82，最大叶宽增量模型的R2=0.97，有效叶片数增量模型的R2=0.95，模型精度高，预测结果接近样本均值。模型不仅阐述了大气温度、大气湿度与椰糠栽培条件下‘云烟87’生长之间的关系，而且可以根据‘云烟87’生长状况，合理给出温度和湿度的调节方案，为烤烟温湿度控制提供理论依据。

关键词：椰糠云烟87 种子增长量梯度下降算法生长模型

无土栽培基质中氮、钾施用量对微生物群落结构的影响分析

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分子植物育种 2024年

作者：潘磊毛春堂吴家昶陈云松潘义宏张立猛云南五佳生物科技有限公司玉溪中烟种子有限责任公司

为明确烟草无土栽培繁种基质中微生物群落的动态变化及不同时期适宜的氮钾施用量，本研究以‘云烟87’为材料，以椰糠为栽培基质，通过宏基因组学方法，研究‘云烟87’在不同氮钾梯度下椰糠中微生物群落在团棵期和种子采收期的动态变化... 详细信息

为明确烟草无土栽培繁种基质中微生物群落的动态变化及不同时期适宜的氮钾施用量，本研究以‘云烟87’为材料，以椰糠为栽培基质，通过宏基因组学方法，研究‘云烟87’在不同氮钾梯度下椰糠中微生物群落在团棵期和种子采收期的动态变化。通过分析发现，在团棵期和采收期各检出14个菌门，24个菌属，优势菌门中变形菌门Proteobacteria相对丰度最高，其次是放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes；优势菌属为根瘤菌属Rhizobium、不粘杆菌属Asticcacaulis、德沃氏菌属Devosia、慢生根瘤菌属Bradyrhizobium和Pseudolabrys，根瘤菌属Rhizobium相对丰度在各处理中均最高；移栽期至团棵期1-F4处理(25%氮钾施用量)和盛花期至采收期3-F2处理(25%氮钾总量)的氮钾浓度提高了基质中微生物的碳水化合物代谢、氨基酸代谢、能量代谢基因丰度，有利于提升基质中微生物alpha多样性。

关键词：烟草繁种无土栽培宏基因组微生物群落多样性

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全球农业动物基因编辑基础研究发展动态分析

农业生物技术学报 2024年第1期32卷 220-233页

作者：张萌萌蒋颖李宁北京首农未来生物科技有限公司

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队... 详细信息

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队、研究前沿热点以及农业动物基因编辑技术研究现状。结果表明，我国基因编辑技术在论文层面处于国际领先地位，2015～2022年统计基因编辑技术相关论文量居全球第2，全球排名前20机构中，中国机构含8个，占40%。但与发达国家(美国)相比，我们还存在差距，主要体现在底盘核心技术创新不足，基因编辑系统开发、优化及Cas蛋白发现等均在国外；国际顶级学术期刊发表论文虽居全球第2，但远不及美国，中国在《自然-生物技术》(Nature Biotechnology)期刊中发文量最多(31篇)，仅占美国发文量的五分之一；基因编辑技术在农业动物中的研究报道整体数量较少，但呈逐年增多趋势，其在农业动物育种领域的应用存在巨大的潜力；最后结合自身国情，展望基因编辑技术前景以及在农业动物育种领域的发展趋势，以期为利用基因编辑技术解决农业动物育种特别是抗病育种中重大难题提供参考。

关键词：基因编辑农业动物文献分析全球