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铁皮石斛可溶性酸性转化酶基因克隆与表达分析

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华南农业大学学报 2017年第2期38卷 81-85页

作者：孟衡玲张薇卢丙越苏一兰薛春丽云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室/红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661100

【目的】克隆铁皮石斛Dendrobium officinale可溶性酸性转化酶基因SAI,分析该基因生物学信息及时空表达特异性。【方法】基于同源序列克隆铁皮石斛SAI基因c DNA全长,采用生物信息学方法进行序列分析,并采用qRTPCR进行组织特异性表达分... 详细信息

【目的】克隆铁皮石斛Dendrobium officinale可溶性酸性转化酶基因SAI,分析该基因生物学信息及时空表达特异性。【方法】基于同源序列克隆铁皮石斛SAI基因c DNA全长,采用生物信息学方法进行序列分析,并采用qRTPCR进行组织特异性表达分析。【结果】铁皮石斛SAI基因全长为1 595 bp,c DNA编码区1 368 bp,Genbank登录号为KU598852。该基因编码455个氨基酸,蛋白相对分子质量为50 700。NCBI BLASTx分析表明,该基因氨基酸序列与柑橘Citrus unshiu酸性转化酶基因、甜橙***酸性β-呋喃果糖苷酶基因序列相似性最高,达77%,与其他植物酸性转化酶基因的相似性均高于68%。聚类分析表明,铁皮石斛SAI基因与玉米Zea mays液泡转化酶基因、甘蔗Saccharum officinarum SAI基因亲缘关系最近。该基因编码的蛋白质属于非跨膜结构的亲水性热稳定蛋白,定位于液泡中。SAI基因在2年生铁皮石斛的茎中表达量最高,3年生的叶中表达量最低。【结论】成功克隆铁皮石斛液泡酸性转化酶基因,该基因在铁皮石斛不同组织不同生育时期的表达量差异较大。

关键词：铁皮石斛酸性转化酶基因克隆实时荧光定量PCR

珍珠岩引发对盐胁迫下青椒种子萌发和幼苗生长的影响

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云南农业大学学报（自然科学版） 2018年第3期33卷 468-473页

作者：杨若鹏赵欣李许华孟衡玲红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661199 云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661199

【目的】探究珍珠岩引发对盐胁迫下青椒种子萌发特性和幼苗耐盐性的影响。【方法】通过珍珠岩引发处理两种青椒(精细翠长、辣艳12号)种子,并设定3个Na Cl浓度(0、100、200 mmol/L)模拟盐胁迫,测定不同处理下辣椒种子的萌发指数和幼苗干... 详细信息

【目的】探究珍珠岩引发对盐胁迫下青椒种子萌发特性和幼苗耐盐性的影响。【方法】通过珍珠岩引发处理两种青椒(精细翠长、辣艳12号)种子,并设定3个Na Cl浓度(0、100、200 mmol/L)模拟盐胁迫,测定不同处理下辣椒种子的萌发指数和幼苗干鲜重、3种抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性,丙二醛(MDA)含量及3种渗透调节物质(游离脯氨酸、可溶性蛋白质、可溶性糖)的含量。【结果】引发处理下辣椒种子的萌发指数和幼苗干重、鲜重均高于相应的对照,经过引发处理后的两种青椒幼苗的SOD、POD和CAT的活性显著高于对照(P<0.05);而青椒幼苗的膜脂过氧化产物MDA含量则呈现出逐渐降低的趋势;游离脯氨酸、可溶性蛋白质和可溶性糖的含量均高于对照。【结论】珍珠岩引发能够提高两种辣椒种子的活力并增强青椒幼苗的耐盐性。

关键词：珍珠岩青椒种子抗氧化酶盐胁迫

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温湿度胁迫对瓜实蝇存活和繁殖特性的影响

北方园艺 2019年第15期 36-43页

作者：何超孔琼袁盛勇沈登荣谢昆王传铭红河学院生命科学与技术学院云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室

以瓜实蝇为研究对象,采用生物测定法,通过研究成虫、蛹、卵在不同温度和湿度胁迫下,成虫存活率及寿命、产卵量、卵孵化率、羽化率等生物学特性的变化,以期明确温湿度胁迫对该虫存活和繁殖特性的影响。结果表明:成虫在39~43℃下处理1 h,... 详细信息

以瓜实蝇为研究对象,采用生物测定法,通过研究成虫、蛹、卵在不同温度和湿度胁迫下,成虫存活率及寿命、产卵量、卵孵化率、羽化率等生物学特性的变化,以期明确温湿度胁迫对该虫存活和繁殖特性的影响。结果表明:成虫在39~43℃下处理1 h,其存活率均随温度的升高而降低,41.5~42.5℃是成虫的致死敏感高温区;35℃或41℃下处理0.5~10.0 d,存活率均随处理时间的延长而降低;成虫在31~41℃下驯化1 h后,在43℃高温下的存活率随驯化温度的升高先增后减;在43℃处理2 h或4℃处理3 d后,成虫寿命及单雌产卵量均显著降低;蛹在33~47℃下处理4 h,羽化率随温度的升高而降低;卵在41~43℃下分别处理15、30、45 min,卵孵化率均随处理时间延长而显著降低。蛹的羽化率随沙土含水量升高而降低;湿度胁迫不同日龄蛹的羽化率差异显著;蛹在沙土含水量0%下处理1~9 d,羽化率随胁迫时间延长而下降;25℃下,成虫在RH 0%或RH 100%下处理10~130 h,存活率随处理时间的延长而降低;干旱胁迫下,羽化率随高温或低温处理时间的延长而显著降低。以上研究表明,温、湿度胁迫对瓜实蝇存活和繁殖有显著抑制作用,抑制效果与温、湿度持续时间及胁迫时各虫态龄期密切相关。

关键词：瓜实蝇温湿度胁迫存活繁殖

不同石榴品种对井上蛀果斑螟生长发育和繁殖的影响

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应用生态学报 2017年第3期28卷 935-940页

作者：何超沈登荣尹立红李锡良和建才袁盛勇田学军红河学院生命科学与技术学院/云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100 西南林业大学林学院昆明650216

井上蛀果斑螟是云南石榴上的一种主要蛀果害虫.为明确石榴不同品种对该虫生长发育和繁殖的影响,在温度(25±1)℃、光周期15 L∶9 D、相对湿度(70±10)%条件下,系统观察了井上蛀果斑螟在甜绿籽、厚皮甜沙籽、甜光颜、酸绿籽和酸沙籽5个... 详细信息

井上蛀果斑螟是云南石榴上的一种主要蛀果害虫.为明确石榴不同品种对该虫生长发育和繁殖的影响,在温度(25±1)℃、光周期15 L∶9 D、相对湿度(70±10)%条件下,系统观察了井上蛀果斑螟在甜绿籽、厚皮甜沙籽、甜光颜、酸绿籽和酸沙籽5个品种上的发育历期、存活率和产卵量等生物学特性,并组建了其实验种群生命表.结果表明:井上蛀果斑螟在5个石榴品种上的卵期、幼虫期、蛹期、雄成虫寿命、全世代历期及卵孵化率均无显著差异;预蛹期、雌成虫寿命、幼虫存活率、化蛹率、羽化率、总成活率、单雌产卵量及雌雄蛹质量存在显著差异,除幼虫存活率外,均以酸绿籽种群较高,厚皮甜沙籽种群次之,二者间差异不显著.生命表参数表明,净增殖率、内禀增长率和周限增长率均为酸绿籽种群显著高于甜绿籽、甜光颜和酸沙籽种群,但与厚皮甜沙籽种群差异不显著;平均世代周期各品种间无显著差异;种群加倍时间为酸绿籽种群显著小于其余4个品种.5个石榴品种中,酸绿籽和厚皮甜沙籽较适宜井上蛀果斑螟的生长发育和繁殖.

关键词：井上蛀果斑螟石榴品种发育历期存活率繁殖生命表参数

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云南哈尼梯田红米地方品种遗传多样性分析

作物杂志 2018年第5期 21-26页

作者：马孟莉郑云周晓梅张婷婷张晓倩卢丙越红河学院生命科学与技术学院/云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100

云南元阳哈尼梯田有丰富的水稻品种,特别是红米资源。本研究利用均匀分布于水稻基因组的100对简单序列重复(SSR)标记分析元阳哈尼梯田60份红米地方品种遗传多样性。100对SSR引物共扩增条带477个,平均每对引物扩增4.770个条带;有效等位... 详细信息

云南元阳哈尼梯田有丰富的水稻品种,特别是红米资源。本研究利用均匀分布于水稻基因组的100对简单序列重复(SSR)标记分析元阳哈尼梯田60份红米地方品种遗传多样性。100对SSR引物共扩增条带477个,平均每对引物扩增4.770个条带;有效等位基因数(Ne)从1.035～6.000,平均为2.518;香农多样性指数(I)为0.086～1.912,平均为1.016;多态性信息含量(PIC)范围为0.064～0.838,平均为0.519;基因杂合度(H)从0到0.950,平均为0.167;聚类分析可将60个红米品种分为两大类,第一类为籼稻亚种,包括57个水稻品种,第二类只有3个品种,为粳稻亚种。研究表明云南哈尼梯田水稻红米品种具有丰富的遗传多样性。

关键词：哈尼梯田水稻红米地方品种遗传多样性

幼虫期短时高温对井上蛀果斑螟生长发育及生殖的影响

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华南农业大学学报 2020年第4期41卷 68-75页

作者：何超沈登荣尹立红张睿袁盛勇田学军红河学院生命科学与技术学院/云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100 西南林业大学林学院云南昆明650216

【目的】明确幼虫期短时高温对井上蛀果斑螟Assara inouei存活、生长发育及生殖的影响。【方法】将井上蛀果斑螟初孵幼虫和老熟幼虫在32、35、38、41和44℃条件下,分别处理1、2和4 h,测定其存活率;将井上蛀果斑螟初孵幼虫和老熟幼虫在35... 详细信息

【目的】明确幼虫期短时高温对井上蛀果斑螟Assara inouei存活、生长发育及生殖的影响。【方法】将井上蛀果斑螟初孵幼虫和老熟幼虫在32、35、38、41和44℃条件下,分别处理1、2和4 h,测定其存活率;将井上蛀果斑螟初孵幼虫和老熟幼虫在35、38、41℃条件下,分别处理1、2和4 h后,研究其发育历期、化蛹率、羽化率、雌雄虫寿命、单雌产卵量及子代卵孵化率等。【结果】随着温度的升高和处理时间的延长,井上蛀果斑螟幼虫存活率逐渐减小。井上蛀果斑螟初孵幼虫在35℃处理下发育历期缩短,38和41℃处理下发育历期延长。老熟幼虫经短时高温处理后,随着温度的升高及处理时间的延长,化蛹率、蛹质量、蛹羽化率、产卵期、雌虫寿命及产卵量均逐渐减小,蛹历期逐渐延长。【结论】井上蛀果斑螟初孵幼虫对短时高温的适应性高于老熟幼虫,短时高温对井上蛀果斑螟老熟幼虫的存活、生长发育及生殖有显著影响。本研究揭示了井上蛀果斑螟幼虫对高温的适应性,可为井上蛀果斑螟种群动态的预测预报提供科学依据。

关键词：井上蛀果斑螟短时高温存活生长发育生殖

6种寄主果实对南瓜实蝇和瓜实蝇产卵选择及其子代发育的影响

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环境昆虫学报 2019年第2期41卷 316-322页

作者：何超孔琼袁盛勇沈登荣谢昆王传铭红河学院生命科学与技术学院云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100

为探讨南瓜实蝇和瓜实蝇对不同寄主的产卵选择性及其与子代生长发育的关联度,采用生态测定方法,研究2种实蝇对南瓜、黄瓜、姜柄瓜、西葫芦、丝瓜和苦瓜6种寄主果实的产卵选择以及幼虫取食6种寄主后对其生长发育的影响。在产卵选择性试验... 详细信息

为探讨南瓜实蝇和瓜实蝇对不同寄主的产卵选择性及其与子代生长发育的关联度,采用生态测定方法,研究2种实蝇对南瓜、黄瓜、姜柄瓜、西葫芦、丝瓜和苦瓜6种寄主果实的产卵选择以及幼虫取食6种寄主后对其生长发育的影响。在产卵选择性试验中,2种实蝇对6种寄主的产卵选择性较为一致,均偏向于在丝瓜和黄瓜上产卵。在非产卵选择性试验中,南瓜实蝇在黄瓜和姜柄瓜上的产卵量较多;瓜实蝇在丝瓜和姜柄瓜上的产卵量较多;2种实蝇都对姜柄瓜有一定的偏好。在气味诱导的产卵选择性试验中,南瓜实蝇在姜柄瓜和黄瓜上的产卵量较多;瓜实蝇在黄瓜和丝瓜上的产卵量较多;2种实蝇都对黄瓜气味有一定的偏好;且南瓜实蝇和瓜实蝇都不偏好在苦瓜上产卵。南瓜实蝇分别取食黄瓜、苦瓜时,其幼虫期、蛹期较短;取食姜柄瓜时,蛹重最大;分别取食南瓜和黄瓜时的化蛹率、羽化率最高。瓜实蝇取食西葫芦时,幼虫期较短;取食丝瓜时,蛹期较短,且蛹重最大;分别取食黄瓜和南瓜时的化蛹率、羽化率最高。南瓜实蝇和瓜实蝇对不同寄主果实的产卵选择性均存在明显差异,寄主外部物理性状对实蝇的产卵选择有显著影响,2种实蝇对6种寄主果实产卵选择性和幼虫生长发育适应性的相关性不显著。

关键词：南瓜实蝇瓜实蝇产卵选择生长发育寄主适应性

阿维菌素对南瓜实蝇的不育作用及谷胱甘肽-S-转移酶活力的影响

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北方园艺 2019年第8期 40-46页

作者：何超孔琼袁盛勇沈登荣谢昆王传铭红河学院生命科学与技术学院云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661100

以南瓜实蝇为研究对象,采用人工饲料添加法,通过研究阿维菌素不同浓度处理下,南瓜实蝇产卵量、卵孵化率及谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性变化,评价阿维菌素对该虫的不育效果,以期为该虫的综合治理提供参考依据。结果表明:阿维菌素对南瓜... 详细信息

以南瓜实蝇为研究对象,采用人工饲料添加法,通过研究阿维菌素不同浓度处理下,南瓜实蝇产卵量、卵孵化率及谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性变化,评价阿维菌素对该虫的不育效果,以期为该虫的综合治理提供参考依据。结果表明:阿维菌素对南瓜实蝇具有显著的不育效果。不同浓度处理后,南瓜实蝇单雌产卵量和卵孵化率均显著减少,各浓度不育效果依次为0.10 mg·L^(-1)>0.50 mg·L^(-1)>1.00 mg·L^(-1)>0.05 mg·L^(-1)>0.01mg·L^(-1);且单独处理雌成虫不育效果>雌雄成虫均处理>单独处理雄成虫。各浓度处理南瓜实蝇雌雄成虫GSTs活力均随成虫日龄的增加而显著升高,其子代幼虫和蛹的GSTs的活力较对照均表现为不同程度的增加。阿维菌素对南瓜实蝇具有较好的不育作用,且对该虫子代产生了显著影响,为阿维菌素作为南瓜实蝇不育剂应用提供了参考依据。

关键词：南瓜实蝇阿维菌素不育作用谷胱甘肽-S-转移酶

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草地贪夜蛾Sf9细胞对饥饿诱导自噬的响应

华北农学报 2017年第3期32卷 91-95页

作者：谢昆王丽仙王靖朱灵明尹建华叶青霞孙艳红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661199 云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室云南蒙自661199

为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基... 详细信息

为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基因,并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后,Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明,经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf9细胞中出现Sf Atg8-PE的表达,共聚焦显微镜检测到Sf9细胞膜上的自噬小体。以上证据证实饥饿(PBS)能诱导Sf9细胞发生自噬,为深入研究Sf9细胞对自噬的响应奠定了基础。

关键词：草地贪夜蛾 Sf9 饥饿自噬