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3种类型烟草种质资源烟叶生物碱等化学成分差异性分析

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热带作物学报 2024年第1期45卷 97-113页

作者：许美玲焦芳婵贺晓辉吴兴富冯智宇云南省烟草农业科学研究院云南昆明650021 云南省香料烟有限责任公司云南保山678000

为筛选能为科研、生产和育种利用的优异烟草种质资源。对来源于国内外的141份烤烟、18份白肋烟和6份雪茄烟的烟叶常规化学成分和主要生物碱进行检测、比较和聚类分析。结果表明:总糖和还原糖含量以烤烟最高,总氮、烟碱和氧化钾以白肋烟... 详细信息

为筛选能为科研、生产和育种利用的优异烟草种质资源。对来源于国内外的141份烤烟、18份白肋烟和6份雪茄烟的烟叶常规化学成分和主要生物碱进行检测、比较和聚类分析。结果表明:总糖和还原糖含量以烤烟最高,总氮、烟碱和氧化钾以白肋烟种质最高。总植物碱和烟碱含量以烤烟种质自来黄2243最高,雪茄烟种质Dutch(Ohio)最低;降烟碱和烟碱转化率以烤烟种质平板柳叶最高,以烤烟种质二性子和白肋烟种质Burley11B最低。聚类分析将165份种质分成4类,烤烟种质主要集中在第1和第4类,其主要特征是总糖和还原糖含量较高,烟碱转化率较低;第2类的总糖和还原糖含量低,总氮、总植物碱和氧化钾含量高;第3类的烟碱和总植物碱含量低,降烟碱含量高,烟碱转化率高。不同类型种质资源的化学成分和生物碱差异明显,筛选出的不同梯度烟碱的种质可为烟碱的进一步研究提供材料支撑。

关键词：烟草种质化学成分总植物碱烟碱降烟碱烟碱转化率

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突变NtJAZ1基因获得高烟碱烤烟新材料

作物杂志 2024年

作者：高玉龙赵璐王丙武孔光辉王亚辉刘剑金段杰吴兴富李青者开明云南省烟草公司临沧市公司耿马分公司云南省烟草农业科学研究院国家烟草基因工程研究中心云南烟草公司普洱市公司

烟碱是栽培烟草中重要的化学成分之一，深刻影响烟叶质量。为了培育高烟碱含量的烟草新材料，在我国主栽品种云烟87的甲基磺酸乙酯（EMS）突变体库中筛选烟碱合成负调控因子基因NtJAZ1的突变体材料。结果表明：①在突变体库中筛选获得... 详细信息

烟碱是栽培烟草中重要的化学成分之一，深刻影响烟叶质量。为了培育高烟碱含量的烟草新材料，在我国主栽品种云烟87的甲基磺酸乙酯（EMS）突变体库中筛选烟碱合成负调控因子基因NtJAZ1的突变体材料。结果表明：①在突变体库中筛选获得了12个突变体材料，其中1个无义突变、10个突变导致NtJAZ1氨基酸变化、1份突变位点位于内含子。②温室种植纯合突变体材料，现蕾期检测整株叶片烟碱含量，其中2个株系J8，J11的烟碱含量显著高于对照。③温室种植J11收获的2个株系，打顶后其烟碱含量分别比对照提高48%和58%。④PMT和QPT是烟碱合成途径中的2个限速酶，qRT-PCR分析表明，NtPMT1a 和NtQPT基因在突变体J11 I-1根中的表达水平显著升高。筛选获得的高烟碱突变体材料J11不涉及转基因成分，可为培育高烟碱含量烤烟新品种提供种质资源。

关键词：烤烟烟碱 EMS NtJAZ1

偏最小二乘辅助紫外可见光谱法同时测定烟草中的葡萄糖与木糖含量

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光谱学与光谱分析 2024年第1期44卷 103-110页

作者：李宇张克灿彭丽娟朱正良何亮昆明理工大学化学工程学院云南昆明650500 云南省烟草质量监督检测站云南昆明650106

烟草中含有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、木糖等多种糖类物质,占据烟草干重的25%~50%,是烟草的重要组成部分,也是评估烟草内在品质的重要指标。不同的糖类物质在卷烟燃烧过程中会生成不同产物,从而直接或间接地影响卷烟的香气和口感。... 详细信息

烟草中含有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、木糖等多种糖类物质,占据烟草干重的25%~50%,是烟草的重要组成部分,也是评估烟草内在品质的重要指标。不同的糖类物质在卷烟燃烧过程中会生成不同产物,从而直接或间接地影响卷烟的香气和口感。建立烟草中各种单糖的测定方法,对烟草制品的质量控制具有现实意义。传统的检测方法如费林试剂法、连续流动分析法只能对烟草中的水溶性糖或总糖含量进行测定,无法对单一糖组分进行定量检测;气相色谱、液相色谱等方法虽能检测出不同单项,但是存在样品前处理过程麻烦、检测耗时较长等局限性。该工作在传统间苯三酚显色法测定木糖的基础上,以显色机理对该方法进行改进,解决了该检测体系下葡萄糖显色效果不佳的技术问题,可通过紫外可见光谱技术简单、高效地实现对烟草及卷烟制品中葡萄糖和木糖含量的精准测定。当同时测定上述两种糖组分时,由于二者的紫外可见光谱出峰位置相近,会相互影响彼此的测量准确性。为消除这一干扰,采用偏最小二乘回归法(PLS)建立光谱分析的多元校正模型,辅助改进后的间苯三酚法对烟草及其制品中葡萄糖和木糖含量进行同时检测。研究结果表明:改进后的间苯三酚法对于葡萄糖和木糖的单糖溶液,浓度分别在0.05~0.4和0.10~0.80 mmol·L^(-1)范围内时线性关系良好,该方法的检出限和定量限分别为0.001 7、 0.005 7 mmol·L^(-1)和0.007 2、 0.024 mmol·L^(-1),批内变异系数的范围为0.69%~3.03%,加标回收率范围为96.72%~102.85%,提取液中木素含量对测定结果没有显著干扰。对于葡萄糖和木糖组成的混糖溶液,采用外部检验对模型效果进行评价,外部检验集的预测值与理论值的相关系数R^(2)=0.994 7,相对偏差小于10%。该方法能够快速准确的测定烟草及烟草制品中葡萄糖和木糖含量,为烟草行业提供一种有效的单糖分析方法。

关键词：烟草烟草制品葡萄糖木糖紫外可见光谱偏最小二乘法

丽江金沙江流域烟草病毒电镜观测与宏病毒组分析

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云南农业大学学报（自然科学版） 2024年第2期39卷 17-26页

作者：矣小鹏周旭东韩天华申云鑫贺彪陈齐斌何永宏杨佩文云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 云南省农业科学院农业环境资源研究所云南昆明650205 云南省烟草公司玉溪市公司澄江分公司云南玉溪652500 云南省烟草公司丽江市公司云南丽江674100

【目的】明确丽江金沙江流域烟草病毒病的病毒种类及其分布特点,为病害防控提供依据。【方法】采集烟区具有明显病毒病症状的烟株样品53份,采用宏病毒组测序技术分析各病毒属的丰度,并构建遗传进化树;进一步采用扫描电镜观测病毒形态;... 详细信息

【目的】明确丽江金沙江流域烟草病毒病的病毒种类及其分布特点,为病害防控提供依据。【方法】采集烟区具有明显病毒病症状的烟株样品53份,采用宏病毒组测序技术分析各病毒属的丰度,并构建遗传进化树;进一步采用扫描电镜观测病毒形态;调查各病毒病在烟区的发生情况。【结果】宏病毒组测序分析结果表明:属水平上,华坪县(S1)样品中马铃薯Y病毒属(Potyvirus)、黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)和正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)丰度分别为66.08%、20.83%和5.91%;玉龙纳西族自治县(S2)样品中正番茄斑萎病毒属丰度为97.20%;宁蒗彝族自治县(S3)样品中马铃薯Y病毒属和正番茄斑萎病毒属丰度分别为96.29%和2.20%。系统进化树结果显示:S1样品病原为烟草马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)、烟草番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)和烟草黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV),S2样品病原为TSWV,S3样品病原为PVY和TSWV。电镜观察到样品中线状病毒粒体直径10~15 nm,长度700~900 nm;球状病毒粒体包括2种,一种为直径25~30 nm、无包膜,另一种为直径80~120 nm、表面有1层包膜。宏病毒组测序分析、系统进化树和电镜观测结果相吻合。田间调查结果表明:华坪县PVY、TSWV和CMV的发病率分别为42.34%~68.25%、12.59%~26.52%和29.27%~72.31%;玉龙县TSWV的发病率为5.66%~20.34%;宁蒗县PVY和TSWV的发病率分别为19.18%~36.27%和1.08%~4.92%。【结论】危害丽江金沙江流域烟区的烟草病毒种类主要为TSWV、PVY和CMV,其中,TSWV和PVY的检出率最高、发生最普遍。

关键词：金沙江流域烟草病毒病电镜观测宏病毒组

红彩瑞猎蝽与蠋蝽同类相残和集团内捕食作用分析

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烟草科技 2024年第1期57卷 58-67页

作者：曾涛杨海林游梓翊夏长剑邓海滨陈德鑫广东省烟草科学研究所广东省韶关市512029 云南省烟草公司玉溪市公司烟草行业病虫害生物防治工程研究中心云南省玉溪市653100 中国烟草总公司海南省公司海口雪茄研究所海口市571100

红彩瑞猎蝽和蠋蝽均为防治斜纹夜蛾的重要捕食性天敌,为明确两种捕食蝽不同虫态间的相互竞争关系,在室内条件下测定了红彩瑞猎蝽和蠋蝽种内同类相残和种间集团内捕食作用。结果显示,两种捕食蝽同类相残效应随着虫龄的增加而增加,红彩瑞... 详细信息

红彩瑞猎蝽和蠋蝽均为防治斜纹夜蛾的重要捕食性天敌,为明确两种捕食蝽不同虫态间的相互竞争关系,在室内条件下测定了红彩瑞猎蝽和蠋蝽种内同类相残和种间集团内捕食作用。结果显示,两种捕食蝽同类相残效应随着虫龄的增加而增加,红彩瑞猎蝽同类相残效应比蠋蝽更明显。两种捕食蝽在各个若虫和成虫时期均有集团内捕食现象,但卵极少被捕食。红彩瑞猎蝽各发育阶段的存活率均高于同样发育阶段的蠋蝽,尤其红彩瑞猎蝽1龄若虫存活率显著高于蠋蝽1龄若虫。提供猎物斜纹夜蛾时,红彩瑞猎蝽和蠋蝽各虫态的集团内捕食效应均明显降低。表明红彩瑞猎蝽为集团内捕食者,而蠋蝽为集团内猎物;两种捕食蝽组合应用于斜纹夜蛾的防治,捕食效果显著高于单一捕食蝽的效果。

关键词：红彩瑞猎蝽蠋蝽同类相残集团内捕食斜纹夜蛾

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鉴别白肋烟的特异性分子标记研究

分子植物育种 2024年

作者：张轲王春琼李海燕龙杰张晓伟肖迪陈丹童治军云南省烟草专卖局(公司) 云南省烟草农业科学研究院国家烟草基因工程研究中心烟草行业烟草生物技术育种重点实验室云南省烟草质量监督检测站

为了提供一种科学准确的白肋烟鉴别方法，本研究基于多个烟草基因组数据的生物信息学分析，设计了2 718对InDel引物，并利用BSA法构建了K326、TN90、F1、绿叶脉池和白叶脉池5个基因池筛选白肋烟InDel特异性标记，随后利用100个不同烟草... 详细信息

为了提供一种科学准确的白肋烟鉴别方法，本研究基于多个烟草基因组数据的生物信息学分析，设计了2 718对InDel引物，并利用BSA法构建了K326、TN90、F1、绿叶脉池和白叶脉池5个基因池筛选白肋烟InDel特异性标记，随后利用100个不同烟草材料进行验证。结果表明，筛选到的一个与白肋烟叶脉基因密切连锁的共显性标记TMb0192，TMb0192可以在50个白肋烟材料中扩增出一个169 bp的特异目标条带，但在50个非白肋烟材料中扩增出的PCR产物为181 bp目标条带，表明该InDel引物对白肋烟具有特异性。本研究筛选的TMb0192可以用于快速、有效地鉴别白肋烟和非白肋烟材料，为进一步科学、准确的鉴别检验制烟原料奠定基础，在基因组水平为烟草行业制烟原料的打假走私提供分子证据。

关键词：白肋烟共显性 InDel标记制烟原料鉴别检验

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醇化烟叶关键微生物类群与风格特色的相关性

湖南农业大学学报（自然科学版） 2024年第1期50卷 23-30页

作者：刘晓敏黄晓杰蔡昊城何沛朱志扬朱益彭光爵秦天马婷婷雷佳黎娟云南省烟草化学重点实验室云南昆明650231 云南省烟草公司临沧市公司双江分公司云南临沧677300 常德市烟草公司湖南常德415000 湖南农业大学农学院湖南长沙410128

分别选取清香型(云南玉溪)、浓香型(湖南郴州)和中间香型(贵州遵义)醇化1年的C2F烟叶,测定烟叶的主要化学成分;利用相似度检验分析烟叶微生物群落差异物种,随机矩阵理论构建分子生态网络;运用Mantel分析烟叶主要化学成分与微生物群落的... 详细信息

分别选取清香型(云南玉溪)、浓香型(湖南郴州)和中间香型(贵州遵义)醇化1年的C2F烟叶,测定烟叶的主要化学成分;利用相似度检验分析烟叶微生物群落差异物种,随机矩阵理论构建分子生态网络;运用Mantel分析烟叶主要化学成分与微生物群落的相关性,结果表明:清香型、中间香型和浓香型烟叶微生物群落结构存在显著差异,浓香型烟叶细菌及真菌群落ɑ多样性指数最高;烟叶显著富集的关键细菌类群为假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)和鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas);关键真菌类群为链格孢属(Alternaria)、根霉菌属(Rhizopus)和桑帕约氏酵母菌属(Sampaiozyma);以浓香型烟叶微生物分子生态网络规模最大,结构复杂且相对稳定。总糖与还原糖含量显著影响烟叶微生物群落的多样性与结构,清香型及中间香型烟叶内关键微生物类群均与总糖、还原糖含量呈显著正相关,而浓香型烟叶关键微生物类群均与总糖、还原糖含量呈显著负相关。

关键词：醇化烟叶烟叶香型化学成分微生物多样性关键类群相关性

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打顶对烤烟根际细菌群落结构和功能的影响

西南农业学报 2024年第3期37卷 561-567页

作者：杨锴贾孟田荟铃徐炜熊茜林云红杜宇王娜周鹏白羽祥王戈云南农业大学烟草学院昆明650201 云南省烟草公司楚雄州公司楚雄市公司云南楚雄675000 红塔烟草(集团)楚雄卷烟厂云南楚雄675000

【目的】进一步明确打顶措施对烟株根际细菌群落结构和潜在功能的影响,为打顶技术优化提供必要理论依据。【方法】采用16S rRNA高通量测序技术,以不打顶为对照,研究打顶对烟株根际细菌群落结构和潜在功能的影响。【结果】打顶使烤烟叶... 详细信息

【目的】进一步明确打顶措施对烟株根际细菌群落结构和潜在功能的影响,为打顶技术优化提供必要理论依据。【方法】采用16S rRNA高通量测序技术,以不打顶为对照,研究打顶对烟株根际细菌群落结构和潜在功能的影响。【结果】打顶使烤烟叶片氮、磷、钾含量发生变化,相较于对照,打顶后烟叶钾含量显著升高,烟叶氮、磷含量显著降低;土壤中的有机质、全氮、水解性氮、速效钾含量在打顶后显著升高,土壤pH显著降低,土壤全磷、全钾、有效磷含量打顶前后则无显著变化;打顶提高了芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)和酸杆菌门(Acidobacteria)相对丰度,而使变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、芽单胞菌属(Gemmatimonas)、溶杆菌属(Lysobacter)的相对丰度降低;α多样性和NMDS分析表明,打顶可使土壤细菌群落均匀度、丰富度变化,且改变土壤细菌群落结构,打顶显著提高Sob指数和Chao1指数,并引起群落结构显著分离;冗余分析(RDA)和方差分解分析(VPA)表明,土壤养分变化是导致根际细菌群落发生变化的重要原因,土壤理化性状与细菌群落改变密切相关,且土壤全氮和水解性氮对细菌群落影响最大;LEfSe分析表明,打顶导致细菌差异性物种显著增加;功能预测表明,打顶引起土壤化能异养和好氧化能异养型细菌的相对丰度降低。【结论】打顶显著改变烟株根际细菌群落结构和潜在功能,打顶导致的烤烟根际土壤养分改变可能是引起根际细菌群落变化的重要原因。

关键词：打顶土壤理化性状土壤细菌

球孢白僵菌和爪哇虫草菌对烟草青枯病的防效研究

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微生物学通报 2024年

作者：施春兰吴国星赵长飞杨燕通万丽娜田永明刘正玲谢永辉詹莜国顾小飞云南农业大学植物保护学院云南省烟草公司昆明市公司

【背景】烟草青枯病是青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的土传病害，给烟草生产带来了巨大损失。【目的】探究实验室2株生防菌株球孢白僵菌(Beauveria bassiana) HZXJ、爪哇虫草(Cordyceps javanica) Bd01对青枯劳尔氏菌(R. so... 详细信息

【背景】烟草青枯病是青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的土传病害，给烟草生产带来了巨大损失。【目的】探究实验室2株生防菌株球孢白僵菌(Beauveria bassiana) HZXJ、爪哇虫草(Cordyceps javanica) Bd01对青枯劳尔氏菌(R. solanacearum，简称青枯菌)的抑制作用及防效。【方法】采用平板对峙、载体带毒以及生长曲线法测定2株生防菌株及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用；通过室内盆栽试验及大田实验测定HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液对烟草青枯病的防治效果。【结果】平板对峙试验发现，HZXJ与Bd01菌株发酵液在10 d时对青枯劳尔氏菌的抑制率分别为51.28%和47.59%。HZXJ与Bd01的灭菌发酵上清液对青枯劳尔氏菌10 d时的平板抑制率分别为77.26%和44.86%，生防菌与病原菌OD600绘制的生长曲线亦表明HZXJ与Bd01的无菌发酵上清液对青枯劳尔氏菌均有抑制作用。盆栽实验结果表明，HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液处理后15 d对烟草青枯病防效分别为43.33%和19.99%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为39.99%；HZXJ与Bd01处理后30 d对烟草青枯病的防效分别为43.34%和21.86%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为46.90%。大田试验结果表明，HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液处理后15 d对烟草青枯病的防效分别为80%和35%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为40%；HZXJ与Bd01处理后30 d对烟草青枯病的防效分别为52.63%和63.16%，52%氯尿硫酸铜800倍液的防效为53.98%。【结论】菌株HZXJ和菌株Bd01对青枯劳尔氏菌有显著抑制效果。结合盆栽和大田试验可以证明菌株HZXJ和菌株Bd01有作为烟草青枯病生防菌的潜力。

关键词：烟草青枯病青枯劳尔氏菌球孢白僵菌爪哇虫草防效