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过表达溶质载体家族1成员5和敲低慢病毒载体构建及稳定转染RAW264.7细胞株

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1414-1421页

作者：郭大鑫范苏苏朱振东侯建红张旋云南省第三人民医院/大理大学第二附属医院云南省昆明市650011 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室/现代生物医药产业学院云南省昆明市650500

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供... 详细信息

背景:溶质载体家族1成员5(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)在多种疾病中发挥了潜在作用,但确切作用机制尚不清楚。构建稳定的SLC1A5过表达和敲低细胞模型可为深入研究SLC1A5在疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:构建小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体,以建立稳定转染的RAW264.7细胞株,为深入探讨SLC1A5在炎症中的作用提供实验基础。方法:根据SLC1A5基因序列设计合成引物并使用聚合酶链反应扩增该基因片段。将目的基因定向接入经Age I/Nhe I酶切的载体质粒GV492中构建重组慢病毒质粒,对阳性克隆进一步筛选后测序比对结果;pHelper1.0质粒载体、pHelper2.0质粒载体、目的质粒载体与293T细胞共同培养并转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定;在此基础上,通过体外培养RAW264.7细胞,确定嘌呤霉素工作质量浓度;不同滴度的慢病毒分别与RAW264.7细胞共同培养,根据荧光强度确定转染效率;用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测稳定转染细胞株的SLC1A5基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功;(2)过表达SLC1A5慢病毒的滴度为1×10~9 TU/mL,敲低SLC1A5慢病毒的滴度为3×10~9 TU/mL;(3)确定RAW264.7细胞嘌呤霉素工作质量浓度为3μg/mL;(4)过表达/敲低SLC1A5慢病毒转染RAW264.7细胞的最佳条件皆为HiTransG P转染增强液且感染复数值等于50;(5)过表达SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量明显上调,而敲低SLC1A5稳转细胞株中SLC1A5基因和蛋白的表达量显著下调。结果表明,成功构建了小鼠SLC1A5过表达和敲低的慢病毒载体并获得稳定转染的RAW264.7细胞株。

关键词：慢病毒载体溶质载体家族1成员5 SLC1A5 过表达敲低 RAW264.7细胞稳转细胞株

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烟草马铃薯Y病毒病与气象因子的相关性

烟草科技 2014年第2期47卷 86-89页

作者：付修廷游堂贵李晓燕黄韡曾厅余倪霞陆文林何湘华云南省烟草公司昭通市公司云南省昭通市昭阳区657000 云南省昭通市气象局云南省昭通市昭阳区657000

为了明确烟草马铃薯Y病毒病发生的适宜气候条件,依据云南昭通市昭阳区2009—2011年的病情观测数据及其同步气候观测资料,分析了气象因子对烟草马铃薯Y病毒病发生的影响。结果表明:气温、降水、日照时数与烟草马铃薯Y病毒病发生初期、盛... 详细信息

为了明确烟草马铃薯Y病毒病发生的适宜气候条件,依据云南昭通市昭阳区2009—2011年的病情观测数据及其同步气候观测资料,分析了气象因子对烟草马铃薯Y病毒病发生的影响。结果表明:气温、降水、日照时数与烟草马铃薯Y病毒病发生初期、盛期及其发病株率、病情指数密切相关,其发病株率、病情指数与气温、降水量均呈正相关,与日照呈负相关,在气温高、降水多、日照少的气候条件下,容易导致烟草马铃薯Y病毒病的发生蔓延。

关键词：烟草马铃薯Y病毒病气象因子

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《云南讨满洲檄》作者“金马”考

文史杂志 2025年第1期 60-60页

作者：艾钊昭通学院云南

《云南讨满洲檄》的作者“金马”,并非通常所认为的云南籍同盟会员吕志伊,而是云南籍同盟会员、大理人王毓嵩,吕志伊则是三位校订人之一。而署名“金马”,主要是因为王毓嵩的故乡有“金马碧鸡”的传说。

关键词：《云南讨满洲檄》金马吕志伊王毓嵩

大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2683-2689页

作者：张鑫瑞韩悦雷蕾刘建宇耿承奎云南中医药大学第二临床医学院云南中医药大学呈贡校区云南省昆明市650000 昆明医科大学附属延安医院骨科云南省昆明市650000

背景:从蛋白组学方面分析脂肪间充质干细胞及其来源外泌体促进组织修复的研究较多,但缺少二者之间的蛋白组学对比分析。目的:对脂肪间充质干细胞及其外泌体进行蛋白组学分析。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,从细胞上清液中提取外... 详细信息

背景:从蛋白组学方面分析脂肪间充质干细胞及其来源外泌体促进组织修复的研究较多,但缺少二者之间的蛋白组学对比分析。目的:对脂肪间充质干细胞及其外泌体进行蛋白组学分析。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,从细胞上清液中提取外泌体并进行鉴定;运用DIA蛋白组学分析大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行GO和KEGG分析。结果与结论:①脂肪间充质干细胞以长梭形为主,类似成纤维样;②经BCA法测定外泌体悬液的蛋白质量浓度为7.66 mg/mL;③外泌体呈典型的茶杯型,可见双层膜的囊泡结构,中央为低电子密度成分,外泌体粒径分布峰值为112.2 nm,浓度为7.5×10^(11)粒子/mL,平均直径在70-140 nm之间;④外泌体有表面标记蛋白CD9、TSG101高表达;⑤GO分析脂肪间充质干细胞及其外泌体的差异表达蛋白主要集中在细胞外基质和突触等位置,与离子结合和核糖体的结合能力相关,在细胞黏附和翻译过程中最为显著;⑥KEGG通路分析结果显示,差异表达蛋白主要参与细胞外基质受体交互、核糖体和细胞因子受体相互作用等,并且与胆固醇和甲状腺等多种代谢性疾病有关。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体蛋白组学对比分析组织修复

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滇东北一次暴雪天气过程个例分析

云南大学学报（自然科学版） 2008年第S2期30卷 318-323,471页

作者：马红罗松刘少荣高应鸣周永生云南省昭通市气象局云南昭通657000

利用常规观测资料和多普勒雷达回波资料,综合分析了2008年1月31日发生在滇东北的一次暴雪天气过程.结果表明:过程前期500 hPa南支槽加深东移,槽前西南急流把孟加拉湾的水汽源源不断地向高纬度输送,为暴雪区提供了充足的水汽条件.阻高崩... 详细信息

利用常规观测资料和多普勒雷达回波资料,综合分析了2008年1月31日发生在滇东北的一次暴雪天气过程.结果表明:过程前期500 hPa南支槽加深东移,槽前西南急流把孟加拉湾的水汽源源不断地向高纬度输送,为暴雪区提供了充足的水汽条件.阻高崩溃横槽转竖引导槽后冷空气南下,准静止锋补充加强,叠加在低层西南暖湿气流上空,触发了不稳定能量的释放.Ω型能量系统的建立和维持为强降雪的发生提供了足够的能量条件,强降雪发生在下游低能舌内.径向速度图上低层零速度带在0.38 km高度间隔内出现180°的顺转说明对流层低层存在强暖切变.西南方和东北方大片速度模糊区的出现反映了强西南急流的存在,西南急流的建立、维持和减弱时间与降雪强度的变化有较好的对应关系.强暖平流的存在和对流层低层1.0~1.2 km高度强垂直风切变的长时间维持为强降雪的产生提供了充足的动力条件.

关键词：暴雪雷达回波西南急流垂直风切变

2012年昭通冰雹过程雷达回波特征综合分析

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云南大学学报（自然科学版） 2013年第S1期35卷 183-187,116+321页

作者：马红郑翔飚韩勇怡云南省昭通市气象局云南昭通657000

利用昭通多普勒雷达资料和区域自动站资料,对2012年昭通雷达探测到的4次冰雹过程进行了综合分析,发现2次冰雹过程属于超级单体风暴,在多普勒雷达回波上都出现了钩状回波和中气旋.另2次冰雹过程属于带状回波冰雹.2次超级单体风暴中气旋... 详细信息

利用昭通多普勒雷达资料和区域自动站资料,对2012年昭通雷达探测到的4次冰雹过程进行了综合分析,发现2次冰雹过程属于超级单体风暴,在多普勒雷达回波上都出现了钩状回波和中气旋.另2次冰雹过程属于带状回波冰雹.2次超级单体风暴中气旋均早于钩状回波出现,速度场特征早于强度场特征15~20min,有利于判断风暴的形成和进行风暴的短时预警.超级单体回波强度和对流发展高度都高于带状回波,因而超级单体冰雹灾害强度和面积远大于带状回波冰雹.超级单体风暴移动方向在盛行风向的右侧20°~30°,都是右移超级单体风暴.环境风场特征是决定超级单体风暴移动路径的重要因素,对超级单体风暴冰雹的临近预报有指示作用.低层辐合区和逆风区有利于带状回波的发展和维持.

关键词：超级单体风暴多普勒雷达钩状回波中气旋带状回波云南昭通

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改良结扎法用于脊髓损伤造模的优势分析

中国组织工程研究 2025年第2期29卷 379-384页

作者：李道辉徐晓霜李郑涛田新鹏毕航川刘源戴永文陈凌强昆明医科大学第一附属医院骨科云南省昆明市650032 昆明医科大学公共卫生学院云南省昆明市650500 西昌市人民医院四川省凉山彝族自治州615000

背景:目前根据脊髓损伤的损伤方式不同衍生出不同的模型构建方法,传统物理损伤造模方法都有各自的优缺点,尚缺乏较为有效和稳定的脊髓损伤动物模型。目的:建立一种可复制、可调控、创伤小、死亡率低、模型更稳定、适用范围广、术后护理... 详细信息

背景:目前根据脊髓损伤的损伤方式不同衍生出不同的模型构建方法,传统物理损伤造模方法都有各自的优缺点,尚缺乏较为有效和稳定的脊髓损伤动物模型。目的:建立一种可复制、可调控、创伤小、死亡率低、模型更稳定、适用范围广、术后护理时间短的脊髓损伤大鼠模型。方法:将体质量和鼠龄相似的40只SD大鼠随机分为对照组和改良组,每组20只,对照组采用钳夹造模法构建脊髓损伤模型,改良组选用基于压迫法改良的结扎法,在开窗的基础上使用缝线结扎的方法进行脊髓损伤的造模。比较两组大鼠的排尿行为、血尿、脓尿(感染率)、死亡率、脊柱畸形率及术后1,3,5,7 d的BBB运动功能学评分。结果与结论:基于压迫法改良的结扎法建立的脊髓损伤大鼠模型比常规建模方法排尿行为恢复较快、血尿率低、感染率低、死亡率低、脊柱畸形率低,BBB评分结果更集中稳定(1周内均<2分),由此可证明基于压迫法改良的结扎法更适用于脊髓损伤大鼠模型的建立。

关键词：改良脊髓损伤模型钳夹造模法结扎法排尿反射排尿行为脊柱畸形 BBB评分

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电子束辐照灭菌对昭通酱挥发性成分的影响

食品工业科技 2023年第4期44卷 326-336页

作者：李俊杰张帮磊师睿李浪亢凯杰叶坪彭潇昭通学院化学化工学院云南昭通657000 云南省高校高原特色功能食品研究重点实验室云南昭通657000 昭通学院云南食品安全昭通研究院云南昭通657000

为探究辐照灭菌对昭通酱的可行性,本文考察了不同剂量电子束辐照对昭通酱感官评分、微生物含量及挥发性成分变化的影响。结果表明,当电子束辐照剂量为3.68 kGy时,昭通酱感官综合评价较好,菌落总数、真菌、大肠菌群含量均达到卫生标准,... 详细信息

为探究辐照灭菌对昭通酱的可行性,本文考察了不同剂量电子束辐照对昭通酱感官评分、微生物含量及挥发性成分变化的影响。结果表明,当电子束辐照剂量为3.68 kGy时,昭通酱感官综合评价较好,菌落总数、真菌、大肠菌群含量均达到卫生标准,昭通酱辐照前共鉴定出41种挥发性成分,辐照后共检出100种挥发性成分,辐照后挥发性成分主要由32种酯类、4种醛类、26种烯烃类、15种醇类、11种酮类、1种醚类、2种酚类和9种其它类物质组成。其中辐照剂量对醇类、酯类、醛类及其它类挥发性物质影响较大,辐照后酯类物质种类和含量增加明显,醛类和烯烃类物质含量下降。昭通酱辐照前挥发性成分主要有异丁醇、芳樟醇、4,7-二甲基十一烷和亚油酸甲酯,分别占总含量的36.90%、20.29%、11.70%和4.94%。辐照后昭通酱中挥发性成分主要有芳樟醇、亚油酸甲酯、苯甲酸乙酯、川芎嗪。辐照后异丁醇相对含量降低明显,而芳樟醇上升明显。根据结果可以得出3.68 kGy属昭通酱辐照灭菌的可靠剂量,其结果为昭通酱向高原地方特色产品的推广提供了参考信息。

关键词：昭通酱电子束辐照挥发性成分顶空固相微萃取气相色谱质谱联用

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金佛山方竹新品种‘小草坝方竹’

园艺学报 2022年第S1期49卷 185-186页

作者：龙元丽黎芸榜孙茂盛贾呈鑫卓黄启贵西南林业大学昆明650224 云南省昭通市彝良县林业和草原局云南昭通657600 云南省昭通市林业与草原局云南昭通657700

‘小草坝方竹’是由野生金佛山方竹(Chimonobabusa utilis)变异植株经进一步分离、移栽、培育而成的新品种。与原生种金佛山方竹的区别在于其秆型高大,秆基部数节气根发达;笋壳红褐色,秆壁较厚。笋期9月底—10月中旬,笋产量高,是优良的... 详细信息

‘小草坝方竹’是由野生金佛山方竹(Chimonobabusa utilis)变异植株经进一步分离、移栽、培育而成的新品种。与原生种金佛山方竹的区别在于其秆型高大,秆基部数节气根发达;笋壳红褐色,秆壁较厚。笋期9月底—10月中旬,笋产量高,是优良的笋用竹品种。

关键词：金佛山方竹品种

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