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彝药斯赤列甲醇提取物对骨关节炎模型大鼠的治疗作用及靶点预测

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中国组织工程研究 2024年第23期28卷 3627-3635页

作者：郑俭彬陆玉春江自鲜李秀芳王涛王文静云南中医药大学云南省昆明市650500 昆明市中医医院骨伤科云南省昆明市650051

背景:彝族人民将斯赤列用于治疗骨折、跌打劳伤、关节炎等。作者所在课题组前期研究发现斯赤列活性部位水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)可通过促进成骨细胞增殖、分化和成熟相关基因的表达发挥促进骨折愈合作用,但其活性部位甲... 详细信息

背景:彝族人民将斯赤列用于治疗骨折、跌打劳伤、关节炎等。作者所在课题组前期研究发现斯赤列活性部位水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)可通过促进成骨细胞增殖、分化和成熟相关基因的表达发挥促进骨折愈合作用,但其活性部位甲醇提取物(SAW-C)对骨关节炎的治疗作用尚不清楚。目的:探讨斯赤列甲醇提取物对骨关节炎的治疗作用,并通过网络药理学技术筛选斯赤列甲醇提取物治疗骨关节炎的有效靶点。方法:通过大鼠前交叉韧带切断手术复制大鼠骨关节炎模型,术后连续灌胃斯赤列甲醇总提物21 d,于造模第21天进行X射线影像学观察,测量膝关节宽度,检测血清中氧化应激指标和关节腔灌洗液中炎症因子水平,苏木精-伊红染色病理学观察,测量全层软骨厚度和透明软骨厚度,番红-固绿染色观察关节软骨蛋白聚糖含量。构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,对有效靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析,运用cytoscape软件构建蛋白互作网络图。结果与结论:①斯赤列甲醇提取物可降低骨关节炎大鼠关节腔灌洗液中肿瘤坏死因子α与血清中前列腺素E2、丙二醛水平,提高超氧化物歧化酶水平;缓解由骨关节炎所致的关节肿胀;改善关节软骨组织病理状态,维持关节全层软骨、透明软骨厚度以及软骨下骨中骨小梁面积;防止关节软骨中蛋白聚糖的流失,对软骨有保护作用;②网络药理学结果表明,斯赤列甲醇提取物的作用靶点可能与抑制TNF、AKT1、IL-6、MAPK3、SRC等因子释放,以及抑制EGFR信号通路和AGE-RAGE信号通路的过度激活有关。

关键词：斯赤列甲醇提取物骨关节炎关节软骨软骨细胞炎症氧化应激网络药理学

构建“等效模型”快速验证个性化骨模型的精确度

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中国组织工程研究 2024年第30期28卷 4795-4799页

作者：张爱丽黄家峥樊文李沂桓李爽甘学文熊鹰昆明医科大学附属延安医院云南省昆明市650051 昆明霂恩医疗科技有限公司云南省昆明市650000

背景:目前个性化骨模型精确度的验证通常是通过配对t检验或组内相关系数等方法来进行,但这类方法往往需要制作大批量模型,不能满足个性化模型即时使用的需求。目的:探讨构建“等效模型”快速验证个性化骨模型精确度的可行性。方法:随机... 详细信息

背景:目前个性化骨模型精确度的验证通常是通过配对t检验或组内相关系数等方法来进行,但这类方法往往需要制作大批量模型,不能满足个性化模型即时使用的需求。目的:探讨构建“等效模型”快速验证个性化骨模型精确度的可行性。方法:随机获取3例成年人骨骼CT影像并进行重建,运用3D打印制作个性化骨模型,再将个性化骨模型进行CT扫描并重建,使用Mimics对比重建模型和骨骼CT影像。运用Geomagic Studio对个性化骨模型CT影像的重建模型与骨骼CT影像的重建模型进行拟合偏差分析。对照骨骼CT影像的重建模型上所标注的测量位置和尺寸,对3D打印的个性化骨模型进行实物测量,并计算误差。结果与结论:①通过对比骨骼CT影像的重建模型与骨骼CT图像,二者在解剖结构和形态上相符,轮廓几乎重合;②通过拟合偏差分析,标准偏差依次为0.176,0.226,0.143 mm,所有结果均<0.25 mm;③通过实物测量并计算,相对误差均数依次为0.44%,0.21%,0.13%,所有结果均在5%的误差范围之内;④通过骨骼CT影像重建的模型符合制作个性化骨模型的基本条件;所构建的等效模型是符合临床需求和设计要求的,使用等效模型方法快速验证个性化骨模型精确度是可行的;⑤此方法可为个性化骨模型精确度的验证提供针对性强、验证迅速的途径,与常规配对t检验或组内相关系数等方法相比可缩短验证时间,能够达到提供临床即时使用的目的。

关键词：等效模型 3D打印个性化骨模型熔融沉积制造聚乳酸医工交互精准医疗

1064 nm Nd:YAG激光3种模式治疗黄褐斑的临床疗效及安全性观察

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临床皮肤科杂志 2024年第3期53卷 145-150页

作者：黄梦婷李杨罗雯和晓琳胥璟曹兰昆明市延安医院皮肤科云南昆明650051

目的:探讨1064 nm Nd:YAG激光3种模式联合治疗黄褐斑临床疗效及安全性。方法:选取51例黄褐斑患者,予调Q1064 nm Nd:YAG激光点阵、长脉宽及调Q 3种模式联合治疗3次,每月1次,予治疗前、末次治疗后2个月行VISIA皮肤生理功能分析得出黄褐斑... 详细信息

目的:探讨1064 nm Nd:YAG激光3种模式联合治疗黄褐斑临床疗效及安全性。方法:选取51例黄褐斑患者,予调Q1064 nm Nd:YAG激光点阵、长脉宽及调Q 3种模式联合治疗3次,每月1次,予治疗前、末次治疗后2个月行VISIA皮肤生理功能分析得出黄褐斑面积和严重指数(melasma area and severity index,MASI)评分、VISIA绝对分值,同时对术后不良反应进行记录。结果:治疗后MASI评分、VISIA绝对分值均较治疗前明显降低(P<0.05)。医生整体评价(PGA)10例(19.6%)明显改善;18例(35.3%)中度改善,未见明显不良反应。结论:点阵、长脉宽及调Q1064 nm Nd:YAG激光3种模式联合治疗黄褐斑安全有效。

关键词：黄褐斑 1064 nm Nd:YAG激光

加味荆芩汤对玫瑰痤疮模型小鼠皮损组织炎症及免疫反应的影响

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中医杂志 2024年第3期65卷 308-316页

作者：杨瑾赵丽娟伍迪张旭叶建州云南省中医医院云南省昆明市650021

目的探讨加味荆芩汤治疗玫瑰痤疮的可能作用机制。方法50只8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组和加味荆芩汤低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组小鼠予背部注射40μl抗菌肽LL-37(浓度为320μmol/L),每12 h... 详细信息

目的探讨加味荆芩汤治疗玫瑰痤疮的可能作用机制。方法50只8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组和加味荆芩汤低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组小鼠予背部注射40μl抗菌肽LL-37(浓度为320μmol/L),每12 h重复注射1次,共注射4次,以制备玫瑰痤疮小鼠模型,正常对照组小鼠同时间点背部皮内注射40μl PBS溶液。造模成功后加味荆芩汤低、中、高剂量组小鼠分别给予加味荆芩汤4.35、8.71、17.42 g/(kg·d)灌胃,正常对照组和模型组小鼠给予20 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。各组均每日1次,持续5天。观察各组小鼠皮损变化,并进行红斑面积测定及红斑程度评分;取注射部位皮肤组织HE染色观察病理形态学变化,甲苯胺蓝染色检测肥大细胞数量;ELISA法检测皮损组织中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;RT-qPCR法检测玫瑰痤疮发病机制中固有免疫关键因子[Toll样受体2(TLR2)及下游分子丝氨酸蛋白酶激肽释放酶5(KLK5)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]与相关炎症因子[IL-1β、IL-6、TNF-α]mRNA,适应性免疫CD4^(+)T细胞相关因子干扰素γ(INF-γ)mRNA表达;免疫组化染色法检测KLK5、MMP-9蛋白表达及CD4^(+)T阳性细胞数;Western blot法检测CD4^(+)T细胞相关因子[IFN-γ、CC趋化因子受体5(CCR5)、信号转导转录激活因子1(STAT1)、信号转导转录激活因子3(STAT3)]蛋白表达水平。结果正常对照组小鼠背部注射部位皮肤正常,未见皮损及红斑,病理显示未见炎性细胞浸润。模型组小鼠红斑程度评分及红斑面积较正常对照组显著升高(P0.05),炎细胞浸润较模型组略有减轻。与正常对照组比较,模型组小鼠皮损组织肥大细胞数,IL-1β、IL-6、TNF-α水平,IL-1β、IL-6、TNF-α、TLR2、INF-γ、KLK5、MMP-9 mRNA表达,KLK5、MMP-9蛋白表达,CD4^(+)T阳性细胞数,IFN-γ、STAT1蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,加味荆芩汤中、高剂量组肥大细胞数、IL-1β水平,IL-1β、TNF-αmRNA表达及CD4^(+)T阳性细胞数降低;加味荆芩汤高剂量组IL-6、TNF-α水平,IL-6、TLR2、INF-γ、MMP-9 mRNA表达,MMP-9、KLK5蛋白表达,CD4^(+)T阳性细胞数,IFN-γ、STAT1蛋白表达均降低(P<0.05)。结论加味荆芩汤对玫瑰痤疮小鼠模型皮肤症状具有显著改善作用,其作用机制可能与调控皮肤免疫炎症反应、进而减轻致病因子及炎症因子的释放相关。

关键词：玫瑰痤疮 CD4^(+)T细胞炎症因子免疫反应加味荆芩汤

不同颈椎前路椎间融合系统内固定颈椎的生物力学变化

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中国组织工程研究 2024年第6期28卷 821-826页

作者：王强李世芸熊鹰李甜甜昆明理工大学机电工程学院云南省昆明市650000 昆明医科大学附属延安医院骨科云南省昆明市650051 山能新能源(东营)有限公司山东省东营市257000

背景:针对在颈椎病治疗过程中,颈椎前路椎间融合系统Zero-P系统在术后会出现螺钉松动、断裂等问题,研发出一种新型Low-P系统。目的:对比新型Low-P与Zero-P型颈椎前路椎间融合系统对颈椎邻近节段生物力学的影响,并对内固定系统进行应力分... 详细信息

背景:针对在颈椎病治疗过程中,颈椎前路椎间融合系统Zero-P系统在术后会出现螺钉松动、断裂等问题,研发出一种新型Low-P系统。目的:对比新型Low-P与Zero-P型颈椎前路椎间融合系统对颈椎邻近节段生物力学的影响,并对内固定系统进行应力分析,从而为临床治疗提供理论参考。方法:建立无损颈椎C_(1)-C_(7)节段完整模型,基于模型有效性,建立在C_(4)-C_(5)节段置入Low-P型(Z型Low-P和H型Low-P)与Zero-P型系统的有限元模型,在前屈、后伸、侧弯和旋转4种工况下,分析置入器械、邻近椎体髓核、纤维环与终板的应力分布情况。结果与结论:(1)置入Low-P型与Zero-P型内固定器械后,H型Low-P系统活动范围大,Z型Low-P系统最大应力值较小,Zero-P型对邻近节段髓核最大应力较大,终板最大应力较小;(2)3种内固定系统对邻近节段纤维环的影响相接近;(3)Zero-P型内固定系统螺钉应力远大于Low-P系统;(4)提示相比Zero-P型内固定系统,新型Low-P系统降低了钢板和螺钉的应力值,可以降低螺钉松动、内固定系统失效等问题;Low-P型系统对于邻近椎间盘髓核的应力较小,可降低邻近节段椎间盘退变;此次研究结果可为Low-P型内固定系统的临床研究提供理论依据。

关键词：颈椎前路内固定系统 Low-P型 Zero-P型颈椎生物力学有限元分析

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不同激活剂对富血小板血浆生长因子的影响

中国组织工程研究 2025年第10期29卷 2067-2073页

作者：刘建香冯星星王淑霞周蓉吕孟兴屈柯暄昆明市儿童医院输血科云南省昆明市650028 昆明市儿童医院检验科云南省昆明市650028 昆明市儿童血液疾病免疫与分子诊断医学技术中心云南省昆明市650028

背景:生长因子是富血小板血浆在临床治疗中发挥作用的关键效应分子,不同激活剂激活富血小板血浆后生长因子浓度存在差异,是影响临床疗效的重要因素。目的:分析不同激活剂对富血小板血浆中生长因子质量浓度的影响。方法:招募12名健康志愿... 详细信息

背景:生长因子是富血小板血浆在临床治疗中发挥作用的关键效应分子,不同激活剂激活富血小板血浆后生长因子浓度存在差异,是影响临床疗效的重要因素。目的:分析不同激活剂对富血小板血浆中生长因子质量浓度的影响。方法:招募12名健康志愿者,采集EDTA-K2抗凝静脉血,应用二次离心法制备富血小板血浆。比较静脉血与富血小板血浆中生长因子的质量浓度差异。将富血小板血浆分别与4种激活剂(生理盐水、凝血酶、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸钙+凝血酶)按照体积比10∶1混匀,置于37℃恒温水浴箱孵育30 min,离心后提取上清液,检测生长因子质量浓度;利用血琼脂平板检测上清液中的细菌生长情况;采用Pearson相关分析不同激活剂与富血小板血浆中生长因子质量浓度的相关性,血小板计数值与富血小板血浆中生长因子质量浓度的相关性。结果与结论:(1)富血小板血浆中血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子AB、血管内皮生长因子、表皮生长因子的质量浓度分别是静脉血中对应生长因子质量浓度的8.7,22.2,2.3,2.8倍(P 0.05);(5)结果提示,不同激活剂对富血小板血浆中生长因子浓度产生不同影响,建议临床根据不同生长因子质量浓度和治疗需求选择不同激活剂,以提高临床疗效。

关键词：富血小板血浆凝血酶葡萄糖酸钙血小板衍生生长因子BB 血小板衍生生长因子AB 血管内皮生长因子表皮生长因子

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兔肩袖腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1的表达及作用机制

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 3049-3054页

作者：王旭吴亚洁张鑫福石志杨腾云熊波涵卢晓君赵道洪昆明医科大学第二附属医院骨科云南省昆明市650000 昆明医科大学云南省昆明市650500 昆明医科大学第一附属医院骨科云南省昆明市650000 昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650000

背景:近年在腱骨损伤领域部分学者将基质细胞衍生因子1搭载在组织工程支架上用以促进腱骨愈合,取得了较好的成效,但在基质细胞衍生因子1促进腱骨愈合机制及自然愈合过程中其是否参与修复,目前尚未明确。目的:研究兔肩袖全层冈上肌断裂... 详细信息

背景:近年在腱骨损伤领域部分学者将基质细胞衍生因子1搭载在组织工程支架上用以促进腱骨愈合,取得了较好的成效,但在基质细胞衍生因子1促进腱骨愈合机制及自然愈合过程中其是否参与修复,目前尚未明确。目的:研究兔肩袖全层冈上肌断裂后腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1表达,及其在腱骨损伤时对干细胞的迁移作用和最佳体外促迁移浓度。方法:随机取成年新西兰大白兔18只建立肩袖损伤模型,另取3只为空白对照。于造模后3,5,7,14,21,28 d各处死3只并处死空白组兔,取腱骨连接处组织保存在-80℃冰箱。应用ELISA反应检测损伤后各时间点愈合处基质细胞衍生因子1表达。取幼兔股骨骨髓间充质干细胞分离培养鉴定,通过transwell实验验证基质细胞衍生因子1对干细胞的促迁移作用效果及体外促迁移最佳浓度,将培养到P3代的干细胞与Brdu共培养后注入兔耳缘静脉,通过免疫组化染色验证干细胞是否迁移至损伤处。结果与结论:①基质细胞衍生因子1在肩袖腱骨愈合过程呈双峰表达,于伤后3 d明显增高(P<0.01)随后下降,于伤后5 d达最低,后再次升高于伤后14 d达峰值(P<0.01),然后下降;②细胞免疫组化染色可见标记有Brdu的干细胞确有迁移至损伤处;③transwell实验结果表明60-80 ng/mL的基质细胞衍生因子1对干细胞促迁移效果最好,而200 ng/mL浓度反而会起到抑制迁移作用;④基质细胞衍生因子1参与了肩袖腱骨愈合的炎症反应期和增殖期的愈合过程,其作用机制可能为通过促进干细胞迁移至损伤处并分化为各类细胞促进修复,并且基质细胞衍生因子1的促迁移作用存在于一定浓度范围,超出范围则可能起到抑制作用。

关键词：肩袖大撕裂腱骨愈合基质细胞衍生因子1 骨髓间充质干细胞兔

S100β、IL-6、hs-CRP联合检测明显提高急性创伤性颅脑损伤诊断的灵敏性

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实用医学杂志 2024年第11期40卷 1580-1585页

作者：聂晓改彭传梅张云芳涂坤王娇昆明市延安医院医学检验科昆明650051 昆明医科大学昆明650051

目的通过联合检测方法,寻找急性创伤性颅脑损伤(TBI)诊断更灵敏的生物标志物,为临床提供确切的诊断、治疗、监测指标。方法收集2022年10月至2023年6月由昆明市延安医院急诊创伤中心收住的急性TBI患者共156例,并纳入正常及骨折对照组,收... 详细信息

目的通过联合检测方法,寻找急性创伤性颅脑损伤(TBI)诊断更灵敏的生物标志物,为临床提供确切的诊断、治疗、监测指标。方法收集2022年10月至2023年6月由昆明市延安医院急诊创伤中心收住的急性TBI患者共156例,并纳入正常及骨折对照组,收集监测入组患者外周血标本,检测S100β、IL-6并收集患者入院即刻hs-CRP等临床资料,并进行统计学分析。结果急性TBI患者外周血S100β、IL-6、hs-CRP水平明显升高,诊断急性TBI的ROC曲线下面积分布为0.944、0.915、0.897,三个指标联合检测ROC曲线下面积高达0.975。Person相关分析发现三个指标之间呈正相关,尤其S100β和IL-6之间相关系数达0.715。二元logistic回归分析发现,S100β、IL-6、hs-CRP是急性TBI的独立危险因素。结论S100β、IL-6、hs-CRP联合检测可以有效提高急性TBI诊断的灵敏性,S100β与IL-6相互促进可能加重炎症机制导致的继发性颅脑损伤,尽早针对性治疗,可能改善预后。

关键词：创伤性颅脑损伤炎症 S100β 白细胞介素-6

三七皂苷Rg1对阿尔茨海默症大鼠的神经系统的保护作用

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基础医学与临床 2024年第8期44卷 1094-1100页

作者：王婷婷魏欢杨永丽周贤胡阳昆明市延安医院全科医学科云南昆明650051 昆明市延安医院神经内科云南昆明650051

目的探寻三七皂苷Rg1(notoginsenoside Rg1)保护神经系统防治阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用机制。方法采用SD大鼠侧脑室注射β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)构建AD大鼠模型,将大鼠随机分为3组(假手术组、模型组和三七皂苷Rg1... 详细信息

目的探寻三七皂苷Rg1(notoginsenoside Rg1)保护神经系统防治阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)的作用机制。方法采用SD大鼠侧脑室注射β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)构建AD大鼠模型,将大鼠随机分为3组(假手术组、模型组和三七皂苷Rg1治疗组)。治疗组同时使用三七皂苷Rg1灌胃治疗,假手术组使用等量0.9%氯化钠溶液进行灌胃。Morris水迷宫实验(MWM)用于检测大鼠学习和记忆行为能力,化学比色法试剂盒检测大脑皮质丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组织化学法检测大脑皮质中caspase-3蛋白含量,Western blot检测p38和p-p38蛋白表达水平。结果模型组比假手术组大鼠逃避潜伏期延长,在第Ⅲ象限的逗留时间减少,跨越平台次数减少;大脑MDA含量升高,SOD含量活性降低;caspase-3蛋白阳性神经元数增加;p38蛋白无显著变化,p-p38蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。三七皂苷Rg1治疗后AD大鼠逃避潜伏期缩短,目标象限逗留的时间及跨越平台次数明显增加,大脑MDA含量降低,SOD活性增加;caspase-3蛋白阳性神经元数减少,p38蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。结论三七皂苷Rg1可显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,增加抗氧化能力,起到神经系统保护作用。

关键词：三七皂苷Rg1 p38 细胞凋亡神经系统