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血吸虫病传播阻断地区环介导等温扩增技术机构检测钉螺血吸虫感染性效果

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第1期34卷 81-84页

作者：陈凤李科荣李文豹田淑惠李萍赵银娇杨敬杨华罗秉荣马俊华郝明明陈绍荣刘榆华罗天鹏云南省大理白族自治州血吸虫病防治研究所云南大理671000 云南省鹤庆县血吸虫病防治站

目的比较环介导等温扩增技术(LAMP)和镜检法在血吸虫病传播阻断地区检测血吸虫感染性钉螺的效果,为该类地区优化钉螺监测技术提供科学依据。方法选择云南省鹤庆县达到传播阻断标准的新庄、古乐、邑头、连义4个山丘型血吸虫病流行村作为... 详细信息

目的比较环介导等温扩增技术(LAMP)和镜检法在血吸虫病传播阻断地区检测血吸虫感染性钉螺的效果,为该类地区优化钉螺监测技术提供科学依据。方法选择云南省鹤庆县达到传播阻断标准的新庄、古乐、邑头、连义4个山丘型血吸虫病流行村作为研究村,其中新庄、古乐为山区村,连义、邑头为坝区村。2018年7月采用系统抽样结合环境抽查法进行钉螺调查,捕获钉螺用解剖镜检法观察血吸虫感染。同时在各有螺环境捡获的钉螺镜检后随机选择10~20只进行组织提取,按不同环境分别编号,混合后进行LAMP检测。比较不同流行村环境LAMP阳性率差异。结果 4个村共调查83处有螺环境,捕获活螺7 949只,镜检未发现血吸虫感染性钉螺。1 786只钉螺共混合成226管样品进行LAMP检测,在2个坝区村发现LAMP核酸阳性3管,分布在2个村3处有螺环境,其中连义村1处环境,环境阳性率5.89%;邑头村2处环境,环境阳性率14.29%,2个坝区村环境阳性率差异无统计学意义(P=0.344),但坝区村环境总阳性率(9.67%,3/31)高于山区村(0)(P=0.048)。结论 LAMP技术检测血吸虫感染性钉螺较传统解剖镜检法更敏感,可作为山丘型血吸虫病传播阻断流行区高危有螺环境钉螺检测方法的一种补充。

关键词：钉螺环介导等温扩增技术传播阻断云南省

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大理地区大片形吸虫的最适中间宿主研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第3期37卷 360-363页

作者：方文李天美李婷张剑萍郝明明刘榆华陈绍荣云南省大理州血吸虫病防治研究所

明确大理地区大片形吸虫的最适中间宿主,为制定防治措施提供依据。收集大片形吸虫虫卵,28℃孵育。每日定时吸取虫卵,观察其发育情况,直至孵出毛蚴。将3种实验用螺随机分为感染组和未感染组。感染组螺数量依次为:尖膀胱螺141只、椭圆萝卜... 详细信息

明确大理地区大片形吸虫的最适中间宿主,为制定防治措施提供依据。收集大片形吸虫虫卵,28℃孵育。每日定时吸取虫卵,观察其发育情况,直至孵出毛蚴。将3种实验用螺随机分为感染组和未感染组。感染组螺数量依次为:尖膀胱螺141只、椭圆萝卜螺240只和小土蜗251只;未感染组螺数量依次为:尖膀胱螺124只、椭圆萝卜螺136只和小土蜗87只。感染实验于24孔细胞培养板上进行,每孔加入数量比为1∶3的螺与毛蚴。感染4 h后将螺放入养螺盆,每盆放置48~60只螺,室温下饲养。未感染组螺直接放入养螺盆,与感染组螺同法饲养。每日挑拣死螺,显微镜下观察大片形吸虫幼虫发育情况,同时记录室温和水温。待螺体内的幼虫发育为子雷蚴(含尾蚴雏形),收集囊蚴。结果显示,毛蚴于第11天孵出。感染组螺中,尖膀胱螺、椭圆萝卜螺的最长存活时间为72 d,小土蜗的最长存活时间为53 d。期间测定的饲养室温为21℃~27℃(平均24℃),水温为21℃~25℃(平均23℃)。141只尖膀胱螺均为阴性,至感染后第72天,仍有12只存活;仅1只椭圆萝卜螺为阳性,于感染后第28天死亡,其余239只均为阴性,至感染后第72天,仍有36只存活。共检出112只阳性小土蜗,感染率为44.6%(112/251),至感染后第53天,全部死亡。未感染组螺中,尖膀胱螺、椭圆萝卜螺的最长存活时间为77 d,小土蜗的最长存活时间为57 d。124只尖膀胱螺均为阴性,至饲养第77天,有8只存活;136只椭圆萝卜螺均为阴性,至饲养第77天,有30只存活;87只小土蜗均为阴性,至饲养第57天全部死亡。所有阳性螺均未观察到胞蚴;仅有的1只阳性椭圆萝卜螺体内可观察到母雷蚴;112只阳性小土蜗体内可观察到雷蚴、母雷蚴、子雷蚴和尾蚴。阳性小土蜗于感染后第11天可见雷蚴,第23天可见母雷蚴,第26天可见含不成熟尾蚴的子雷蚴,第30天可见含成熟尾蚴的子雷蚴,感染40天后死亡的阳性小土蜗软体中发现尾蚴。感染后第40天开始捡获囊蚴,持续11 d,共收获511个囊蚴,其中499个囊蚴(占97.7%)均于次日清晨8:00检获,剩余12个囊蚴(占2.3%)于其中4天下午(14:30~16:30)捡获,期间存活的小土蜗有29只,其中24只为阳性,占阳性螺总数的21.4%(24/112),每只阳性螺逸出尾蚴且形成囊蚴的平均数为21个(511/24)。大理地区大片形吸虫的最适中间宿主为小土蜗。

关键词：大片形吸虫中间宿主小土蜗尖膀胱螺椭圆萝卜螺大理

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肝片形吸虫囊蚴形成过程及其特点

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第6期34卷 526-528页

作者：方文李天美杨敬刘榆华云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000

将大理地区肝片形吸虫(Fasciola hepatica)毛蚴随机感染小土蜗(Galba pervia)10只,感染后第44天,首次捡获囊蚴10个,持续24 d,共捡获囊蚴495个。环境改变前后,8:00-24:00均未发现有尾蚴逸出或囊蚴结成,结囊以凌晨为主,囊蚴可附着于水中... 详细信息

将大理地区肝片形吸虫(Fasciola hepatica)毛蚴随机感染小土蜗(Galba pervia)10只,感染后第44天,首次捡获囊蚴10个,持续24 d,共捡获囊蚴495个。环境改变前后,8:00-24:00均未发现有尾蚴逸出或囊蚴结成,结囊以凌晨为主,囊蚴可附着于水中任何物体,并易从附着物上脱落。提示大理地区肝片形吸虫尾蚴逸出及结囊主要在凌晨进行。

关键词：肝片形吸虫尾蚴囊蚴大理

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大理地区肝片形吸虫感染中间宿主实验研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第4期32卷 285-288页

作者：方文李天美李科荣陈凤刘榆华云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000

目的了解大理地区肝片形吸虫（Fasciola hepatica）的中间宿主种类和虫体发育过程及特点。方法2012年7月～2013年7月,在大理地区收集牛源肝片形吸虫虫卵,置28℃水浴箱中孵化;并在大理农村无粪便污染的农田、沟渠内,捕捉尖膀胱螺（Physa... 详细信息

目的了解大理地区肝片形吸虫（Fasciola hepatica）的中间宿主种类和虫体发育过程及特点。方法2012年7月～2013年7月,在大理地区收集牛源肝片形吸虫虫卵,置28℃水浴箱中孵化;并在大理农村无粪便污染的农田、沟渠内,捕捉尖膀胱螺（Physa acuta）、椭圆萝卜螺（Radix swinhoei）和小土蜗（Galba pervia）,实验前证实无任何吸虫感染。毛蚴分别感染尖膀胱螺、椭圆萝卜螺和小土蜗,将螺放入泥盆中饲养并观察,每日捡出死螺,解剖观察幼虫在螺体内发育情况,直至尾蚴逸出结囊为止。最后收集10个囊蚴进行PCR,扩增其线粒体COX1基因部分序列（pCOX1）。结果前后8批次共感染1 146只椭圆萝卜螺、996只尖膀胱螺和3 307只小土蜗。2只椭圆萝卜螺感染后虽发现母雷蚴,但未见进一步发育到子雷蚴阶段,而尖膀胱螺则未能感染成功。仅小土蜗感染成功,感染率为27.2%（900/3 307）。在水温22℃时,毛蚴侵入小土蜗后,发育到胞蚴的时间为7～15 d、母雷蚴为11～20 d,子雷蚴为30～37 d,尾蚴成熟逸出,并结囊形成囊蚴的时间为42～55 d。囊蚴经PCR鉴定为肝片形吸虫,在约500 bp处出现明显的条带。结论大理地区采集的3种螺中,仅小土蜗成功感染肝片形吸虫。

关键词：肝片形吸虫中间宿主小土蜗椭圆萝卜螺尖膀胱螺大理

阿苯达唑和三氯苯哒唑对人体大片形吸虫的驱虫效果比较

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第1期26卷 106-108页

作者：方文陈凤刘宏坤杨琼杨琳云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000

目的比较阿苯达唑和三氯苯哒唑对人体大片形吸虫的驱虫效果。方法第1例患者口服阿苯达唑200mg，1日2次，连服5d，另1例患者每13顿服三氯苯哒唑片剂10mg/kg，连服2d。收集2例患者服药后第1、2、5天的全量粪便（共3份），以及第2例患者服... 详细信息

目的比较阿苯达唑和三氯苯哒唑对人体大片形吸虫的驱虫效果。方法第1例患者口服阿苯达唑200mg，1日2次，连服5d，另1例患者每13顿服三氯苯哒唑片剂10mg/kg，连服2d。收集2例患者服药后第1、2、5天的全量粪便（共3份），以及第2例患者服药前和服药期间的全量粪便（共7份），采用尼龙袋集卵法收集虫卵，并置于28℃水浴箱中孵化。结果第1例患者口服阿苯达唑后的第1、2、5天粪便中均检出片形吸虫卵，经28。c水浴箱孵化，持续观察25d，未见毛蚴孵出，也未见虫卵发育的迹象，同时患者体温波动在37．4～383℃之间，仍感腹痛。另1例患者在服用三氯苯哒唑前和服药期间以及结束后第1天的粪便中检出虫卵，服药结束后的第2、5天粪便中未检出虫卵。服药前及期间排出的虫卵经28℃水浴箱孵化至第13天孵化出毛蚴；而服药结束后第1天的虫卵持续观察25d未见毛蚴孵出，也未见虫卵发育的迹象，同时患者在服药结束后第4天症状和体征完全消失。结论阿苯达唑对大片形吸虫成虫短期内无明显的杀虫作用，但可明显影响虫卵的发育，致使虫卵不能孵化出毛蚴；三氯苯哒唑对人体大片形吸虫成虫和虫卵可能均有杀灭作用，具有疗效好，疗程短，无明显不良反应的特点。

关键词：大片形吸虫阿苯达唑三氯苯哒唑驱虫

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我国外来入侵生物福寿螺的物种鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：蒋玲赵永波李天美大理州血吸虫病防治研究所大理大学公共卫生学院

福寿螺为我国外来入侵生物之一，是传播广州管圆线虫病的主要中间宿主，目前已在我国广泛扩散，并对入侵地的农林牧渔业生产、生态环境及人体健康造成严重威胁。准确、快速地鉴别福寿螺的种类是开展其入侵机制、扩散规律及种群遗传学等... 详细信息

福寿螺为我国外来入侵生物之一，是传播广州管圆线虫病的主要中间宿主，目前已在我国广泛扩散，并对入侵地的农林牧渔业生产、生态环境及人体健康造成严重威胁。准确、快速地鉴别福寿螺的种类是开展其入侵机制、扩散规律及种群遗传学等各项研究的基础，并对制定与实施防治策略有重大意义。目前福寿螺的鉴定方式主要基于传统形态学及分子生物学，其中福寿螺的分子鉴定主要基于特异性引物PCR快速鉴别技术与DNA条形码技术，本文对福寿螺的物种鉴定方式进行综述。

关键词：福寿螺物种鉴定形态学分子鉴别

氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂和四聚·杀螺胺悬浮剂杀灭椎实螺实验研究

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中国血吸虫病防治杂志 2013年第1期25卷 61-63页

作者：王尚位王海英罗秉荣李科荣刘榆华赵申华杨华李天美云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000

目的观察50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂(WPN)和26%四聚杀螺胺悬浮剂(MNSC)杀灭椎实螺效果。方法将WPN和MNSC分别配制成有效成分浓度为0.06、0.13、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L和4.00 mg/L的溶液,在实验室浸泡椎实螺成螺,统计椎实螺死... 详细信息

目的观察50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂(WPN)和26%四聚杀螺胺悬浮剂(MNSC)杀灭椎实螺效果。方法将WPN和MNSC分别配制成有效成分浓度为0.06、0.13、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L和4.00 mg/L的溶液,在实验室浸泡椎实螺成螺,统计椎实螺死亡率并计算半数致死浓度(LC50值)。采用有效成分浓度分别为0.03、0.06、0.13、0.25、0.50、1.00g/m2和2.00 g/m2的WPN和MNSC开展室内喷洒杀灭椎实螺试验,统计椎实螺死亡率并计算计算LC50值。分别配制WPN和MNSC有效成分浓度为1.00、0.50、0.25、0.13 mg/L的溶液,分组投放椎实螺,观察不同时间椎实螺上爬情况。结果 WPN浸杀48 h和72 h的LC50值分别为0.93 mg/L和0.64 mg/L,MNSC浸杀48 h和72 h的LC50值分别为0.74 mg/L和0.51 mg/L;WPN和MNSC有效成分浓度>1.00 g/m2时,喷洒3 d后椎实螺死亡率均达100%;在有效成分浓度为1.00 mg/L的WPN和MNSC药液中,未见椎实螺上爬,但在低浓度药液中有少量椎实螺上爬。结论 WPN和MNSC均有杀灭椎实螺效果,且均可抑制椎实螺上爬。现场开展杀灭椎实螺工作时,浸杀法应采用WPN和MNSC有效成分浓度2.00 mg/L浸杀48 h以上为宜,喷洒法应采用有效成分含量1.00 g/m2喷洒3 d为宜。

关键词：氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂四聚杀螺胺悬浮剂椎实螺杀螺效果

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肝片形吸虫囊蚴抵抗力观察

中国人兽共患病学报 2017年第9期33卷 809-813页

作者：方文李天美李婷陈绍荣刘榆华罗家军云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000

目的观察肝片形吸虫囊蚴经加热、干燥、食用调料等处理后的存活情况。方法将肝片形吸虫囊蚴经1)加热:微波高火30s、60s;沸水10、30s和1、2、3min。2)干燥:室温下自然干燥24、40h。3)食源调料:蒜汁、酱油、醋以及3种等量混合液浸泡10、20... 详细信息

目的观察肝片形吸虫囊蚴经加热、干燥、食用调料等处理后的存活情况。方法将肝片形吸虫囊蚴经1)加热:微波高火30s、60s;沸水10、30s和1、2、3min。2)干燥:室温下自然干燥24、40h。3)食源调料:蒜汁、酱油、醋以及3种等量混合液浸泡10、20、30min;38°白酒及饱和盐水各浸泡10、20、30min。4)4℃下保存10个月。结果 2种加热方式处理后囊蚴全部死亡;放置于玻片上的囊蚴干燥24h,死亡4只,附着于叶片上的囊蚴干燥40h,死亡2只;在蒜汁、酱油、醋中浸泡10、20、30min,囊蚴全部存活;在3种调料的等量混合液、饱和盐水及38°白酒中浸泡10、20、30min后,均有部分存活,另有一部分囊蚴结构清晰但虫体不动,但也无明显死囊蚴的特征;在4℃下保存10个月,仍有存活的囊蚴。结论常用的调料对囊蚴不起作用,自然干燥1~2d不能完全杀灭囊蚴,在低温潮湿环境中可较长时间保持活力。沸水加热10s或微波高火30s即可杀死囊蚴。

关键词：肝片形吸虫囊蚴温度调料抵抗力

云南省宾川县片形吸虫病人群流行病学调查及危险因素分析

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中国血吸虫病防治杂志 2015年第4期27卷 399-402页

作者：陈凤刘榆华杨慧段玉春杨敬赵银娇郝明明潘丽娟邓银菊施亚楠陈芙玲张建国罗家军云南省大理州血吸虫病防治研究所大理671000 云南省宾川县血吸虫病防治站

目的了解云南省宾川县人群片形吸虫感染情况及相关危险因素。方法 2014年2-3月,选择宾川县州城镇2个行政村的6个自然村作为调查点,对≥5岁的常住人口采用ELISA法进行血清抗体检测,采用Kato-Katz法和尼龙绢集卵孵化法对血检阳性者进行粪... 详细信息

目的了解云南省宾川县人群片形吸虫感染情况及相关危险因素。方法 2014年2-3月,选择宾川县州城镇2个行政村的6个自然村作为调查点,对≥5岁的常住人口采用ELISA法进行血清抗体检测,采用Kato-Katz法和尼龙绢集卵孵化法对血检阳性者进行粪便虫卵检查。对筛检出的片形吸虫病病例进行个案调查,同时选择同村性别相同、年龄相近的血检阴性者作为对照,按1∶2进行匹配,开展病例对照研究,以探索片形吸虫感染的危险因素。结果共血检1207人,36人阳性,人群片形吸虫血清抗体总阳性率为2.98%;不同性别及年龄组人群血检阳性率差异均无统计学意义(χ2=1.686、7.106,P均>0.05);但不同行政村及自然村人群感染率差异均有统计学意义(χ2=4.103、13.181,P均研究表明,食用外购凉拌菜(4.30)、生薄荷(1.22)、生韭菜(4.30)和饮生水史(3.75)OR值较高,但均无统计学意义(χ2=0.524、0.046、0.524、1.571,P均>0.05)。结论宾川州城地区片形吸虫感染仍然存在,呈散发状态。进食被片形吸虫囊蚴污染的生蔬菜和生水可能是当地人群片形吸虫感染途径,寻找到确切入口途径是控制感染的关键。

关键词：片形吸虫病流行病学调查危险因素宾川县云南省