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美洲大蠊提取物对前列腺癌细胞的抑制作用及相关机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2024年第11期 1260-1266页

作者：段赛竹许凤陈海燕成家茂大理大学临床医学院大理大学基础医学院

目的：研究美洲大蠊提取物（PA-CII-3）抗前列腺癌的作用及相关机制。方法：将对数生长期的PC3细胞分为对照组及实验组，在实验组细胞中依次加入1 000、1 200、1 400、1 600、1 800、2 000μg/mL的PA-CII-3溶液进行干预，采用CCK-8法筛... 详细信息

目的：研究美洲大蠊提取物（PA-CII-3）抗前列腺癌的作用及相关机制。方法：将对数生长期的PC3细胞分为对照组及实验组，在实验组细胞中依次加入1 000、1 200、1 400、1 600、1 800、2 000μg/mL的PA-CII-3溶液进行干预，采用CCK-8法筛取合适的药物浓度和作用时间。然后以1 400μg/mL的PA-CII-3溶液对PC3细胞持续干预72 h，采用CCK-8法和平板集落形成实验检测细胞增殖能力，采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力，分别采用Real-time qPCR法和Western blot法检测锌α2糖蛋白（ZAG）的mRNA和蛋白表达情况。结果：PA-CII-3干预后，PC3细胞的增殖和迁移能力均受到显著抑制（P<0.05,P<0.01），并促进了PC3细胞中ZAG的mRNA和蛋白表达（P<0.05）。结论：PA-CII-3可能通过抑制PC3细胞的增殖和迁移及上调ZAG发挥抗前列腺癌作用。

关键词：美洲大蠊提取物前列腺癌锌α2糖蛋白细胞增殖细胞迁移

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铁皮石斛多糖通过上皮-间质转化抗肝纤维化

中山大学学报（医学科学版） 2024年第1期45卷 76-84页

作者：杨柳青范钦白雅洁许颖罗继娜成家茂陈海燕大理大学基础医学院云南大理671003 大理大学临床医学院云南大理671003 大理大学第一附属医院超声科云南大理671013

【目的】探讨铁皮石斛多糖(DOP)对CCl4诱导肝纤维化(HF)的影响及其作用机制。【方法】将56只雄性SD大鼠随机分为七组:正常组(NG)、模型组(MG)、秋水仙碱组(CG,0.1mg/kg)、扶正化瘀组(FG,0.45g/kg)、低剂量DOP组(LDG,0.05 g/kg)、中剂量... 详细信息

【目的】探讨铁皮石斛多糖(DOP)对CCl4诱导肝纤维化(HF)的影响及其作用机制。【方法】将56只雄性SD大鼠随机分为七组:正常组(NG)、模型组(MG)、秋水仙碱组(CG,0.1mg/kg)、扶正化瘀组(FG,0.45g/kg)、低剂量DOP组(LDG,0.05 g/kg)、中剂量DOP组(MDG,0.1 g/kg)和高剂量DOP组(HDG,0.2 g/kg),每组8只。采用皮下注射40%CCl4橄榄油混合液制备HF大鼠模型,每3 d注射1次,共10周。造模第6周结束后,各药物组分别给予秋水仙碱、扶正化瘀和DOP溶液灌胃处理,NG和MG大鼠给予等量0.9%生理盐水处理,每天1次,连续4周。各组大鼠肝组织病理学采用苏木精-伊红(HE)、Masson染色、天狼星红(Sirius red)染色检测;肝功能和肝纤四项指标采用血液生化法检测;肝组织中α-SMA、Col-I、E-cadherin、ZEB1基因和蛋白的表达分别采用RT-qPCR法和Western Blot法检测。【结果】HE、Masson、Sirius red染色结果显示MG大鼠肝脏组织出现典型的HF病理特征,LDG、MDG和HDG大鼠HF均出现不同程度改善。肝功能检测结果显示,LDG、MDG、HDG大鼠的血清AST、TBIL、AKP水平与MG相比均显著降低(P<0.05或<0.01),血清ALT水平除LDG外均显著降低(P<0.05或<0.01)。肝纤四项指标检测结果显示,LDG、MDG、HDG大鼠的血清HA、LN、PC-Ⅲ、COL-Ⅳ含量与MG比较均明显下降(P<0.05或<0.01)。基因、蛋白检测结果显示,LDG、MDG、HDG大鼠肝组织中α-SMA、COL-I、ZEB1的相对表达量明显降低(P<0.05或<0.01),而E-cadherin的相对表达量升高(P<0.05或<0.01)。此外,HA、α-SMA、COL-I、ZEB1、E-cadherin的表达均存在一定的DOP剂量依赖性。【结论】DOP可通过抑制大鼠肝组织的上皮-间质转化减轻CCl4诱导的HF程度。

关键词：肝纤维化铁皮石斛多糖上皮-间质转化 E-钙黏蛋白锌指E盒结合同源框1

HERC2基因变异所致常染色体隐性遗传智力障碍38型一家系的遗传学分析

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中华精神科杂志 2024年第6期57卷 345-350页

作者：马江磊张元元段福慧王光明大理大学第一附属医院基因检测中心大理671000 大理大学临床医学院大理671000

目的:探讨HERC2基因变异所致智力障碍伴发育迟缓1个家系的遗传学特征。方法:选取于2020年5—7月在大理大学第一附属医院就诊的1个智力障碍伴发育迟缓的患儿家系3代共10人为研究对象。收集该家系先证者的临床资料及家系成员患病情况,应... 详细信息

目的:探讨HERC2基因变异所致智力障碍伴发育迟缓1个家系的遗传学特征。方法:选取于2020年5—7月在大理大学第一附属医院就诊的1个智力障碍伴发育迟缓的患儿家系3代共10人为研究对象。收集该家系先证者的临床资料及家系成员患病情况,应用全外显子组测序技术对先证者进行致病基因筛选,采用Sanger测序对可疑致病基因进行家系验证。根据美国遗传学与基因组学(American College of Medical Genetics and Genomics,ACMG)学会的基因变异解读标准与指南对可疑致病基因突变位点进行致病性分类。结果:先证者男,12岁,因“发育迟缓9年,智力障碍3个月”就诊,表现为身材矮小,无故自语自笑,眼神对周围环境回避,韦氏智力测验提示智力水平低下。先证者弟弟有类似智力障碍伴发育迟缓等表现,余家系成员正常。全外显子组测序结果显示先证者携带HERC2基因c.7675A>G位点纯合突变,Sanger测序显示其弟弟携带同样的HERC2基因c.7675A>G位点纯合突变,其余家系成员携带相同的HERC2基因c.7675A>G位点杂合突变。根据ACMG指南判定该基因位点突变为临床意义未明。结论:HERC2基因c.7675A>G位点突变可能是导致该家系智力障碍伴发育迟缓的遗传学基础。

关键词：精神发育迟滞发育障碍全外显子组测序 HERC2基因基因突变

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探讨美洲大蠊虫粉对脊髓损伤大鼠的保护作用

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中国实验动物学报 2024年第1期32卷 58-64页

作者：李杰周邦瑜马彦博阮玉山李绍波大理大学临床医学院云南大理671000 大理大学第一附属医院云南大理671000

目的探讨美洲大蠊虫粉对脊髓损伤大鼠的保护作用和可能的机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术组、盐水组、美洲大蠊虫粉组、TOLL样受体4(toll-like receptors,TLR4)抑制剂组。除假手术组外其余3组均构建大鼠脊髓半横断损伤模型。术后... 详细信息

目的探讨美洲大蠊虫粉对脊髓损伤大鼠的保护作用和可能的机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术组、盐水组、美洲大蠊虫粉组、TOLL样受体4(toll-like receptors,TLR4)抑制剂组。除假手术组外其余3组均构建大鼠脊髓半横断损伤模型。术后假手术组不做治疗,盐水组与美洲大蠊虫粉组分别给予生理盐水和美洲大蠊虫粉(630 mg/kg)灌胃处理,TLR4抑制剂组给予TLR4抑制剂(3 mg/kg)腹腔注射处理。术后1、3、7、14 d运用BBB评分评估大鼠后肢运动功能,苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓组织病理改变,免疫组化观察神经元数目变化,酶联免疫法检测炎性因子IL-1、IL-6、IL-10和TNF-α表达,Western Blot检测TLR4、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)和NF-κB p65表达。结果与假手术组相比,盐水组BBB评分、神经元数目显著下降,而病理损伤程度、IL-1、IL-6、TNF-α、TLR4、MyD88、NF-κB p65水平显著增加(P<0.05),与盐水组相比,美洲大蠊虫粉组和TLR4抑制剂组增加了BBB评分、神经元数目、降低了病理损伤程度、IL-1、IL-6、TNF-α、TLR4、MyD88、NF-κB p65水平(P<0.05),与TLR4抑制剂组相比,美洲大蠊虫粉组更好地增加了BBB评分、神经元数目,降低病理损伤程度、IL-1、TNF-α表达。结论美洲大蠊虫粉可以通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减少脊髓损伤后炎性因子的产生,起到保护神经和促进运动恢复的作用。

关键词：美洲大蠊脊髓损伤炎症反应 TLR4 NF-κB

Drp-1、PGC-1α在胎粪吸入综合征新生大鼠肺组织中的作用及其机制

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解放军医学杂志 2024年第3期49卷 265-271页

作者：徐洁莹赵淑华大理大学临床医学院云南大理白族自治州671000 大理大学第一附属医院儿科暨云南省儿科疾病临床医学分中心云南大理白族自治州671000

目的探讨动力相关蛋白1(Drp-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1-α(PGC-1α)在胎粪吸入综合征(MAS)新生大鼠肺组织中的作用及其机制。方法50只2~3周龄SD新生大鼠随机分为5组(n=10):对照组、模型组与SN50低、中、高浓度组。... 详细信息

目的探讨动力相关蛋白1(Drp-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1-α(PGC-1α)在胎粪吸入综合征(MAS)新生大鼠肺组织中的作用及其机制。方法50只2~3周龄SD新生大鼠随机分为5组(n=10):对照组、模型组与SN50低、中、高浓度组。对照组气管暴露后,气管内注入2ml/kg生理盐水,其余各组气管内注入2ml/kg的胎粪悬浮液;24h后对照组、模型组不予处理,SN50低、中、高浓度组腹腔注射10、30、60μg/ml浓度SN50各100μl。6h后处死各组大鼠,检测X线胸片、肺大体观、肺湿/干重比(W/D),HE染色观察肺组织病理变化,Westernblotting检测新生大鼠肺组织中NF-κB(p65)、p-NF-κBp65(p-p65)、Drp-1、PGC-1α蛋白的表达变化,免疫组织化学方法观察新生大鼠肺组织中p65、Drp-1、PGC-1α等相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组胸片及大体观可见炎性浸润,W/D、肺损伤病理评分明显升高(P0.05),而SN50中、高浓度组PGC-1α蛋白表达水平明显升高(P0.05)。免疫组化检测结果显示,与对照组比较,模型组p65、Drp-1蛋白表达水平明显升高(P0.05),而SN50中、高浓度组Drp-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),PGC-1α蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论胎粪吸入可诱导新生大鼠肺组织炎症,其机制可能与增强氧化应激、促进线粒体功能障碍、激活Drp-1/NF-κB信号通路,以及抑制PGC-1α蛋白表达有关。

关键词：胎粪吸入综合征核因子-κB 氧化应激线粒体

铁皮石斛多糖基于Notch信号通路抗大鼠肝纤维化作用及其超声评价

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中国实验方剂学杂志 2024年第21期30卷 70-77页

作者：许颖罗继娜杨柳青田纤纤成家茂陈海燕大理大学临床医学院云南大理671003 大理白族自治州人民医院云南大理671000 大理大学基础医学院云南大理671003 大理大学第一附属医院云南大理671000

目的:探讨铁皮石斛多糖(DOP)基于Notch信号通路逆转四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化(HF)的作用,并采用超声弹性成像技术评价药物疗效。方法:将56只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、秋水仙碱组、扶正化瘀组、DOP低、中、高剂量组,每组... 详细信息

目的:探讨铁皮石斛多糖(DOP)基于Notch信号通路逆转四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化(HF)的作用,并采用超声弹性成像技术评价药物疗效。方法:将56只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、秋水仙碱组、扶正化瘀组、DOP低、中、高剂量组,每组8只。模型组及各给药组均皮下注射CCl4-橄榄油(2∶3)混合液,每3 d注射1次,共10周。造模6周后,各给药组分别给予秋水仙碱(1×10^(-4) g·kg^(-1))、扶正化瘀胶囊粉(0.45 g·kg^(-1))和低、中、高剂量DOP(0.05、0.1、0.2 g·kg^(-1))连续灌胃4周,每日1次。采用苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察大鼠肝组织的病理形态学改变。采用全自动生化分析仪分析血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)和碱性磷酸酶(ALP)水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肝纤四项指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)含量。分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织中的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Notch1、Jagged1、Hes1的mRNA和蛋白表达。采用声辐射力脉冲(ARFI)弹性成像技术获取大鼠肝脏的杨氏模量(YM),观察DOP用药前后YM的变化,并分析YM与肝纤四项、肝组织中α-SMA和Notch1信号通路相关因子蛋白的相关性。结果:与正常组比较,模型组大鼠的肝组织病理检查结果显示,肝组织肝细胞索排列紊乱,炎性细胞浸润明显,出现大量的脂肪空泡和纤维组织增生;大鼠的血清肝功能和肝纤四项表达均显著升高(P<0.01);大鼠肝组织中的α-SMA、Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA和蛋白相对表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠肝组织的假小叶及汇管区胶原纤维沉积均有不同程度改善;除DOP低剂量组大鼠的血清ALT水平变化不明显外,各给药组均能显著降低大鼠的血清肝功能和肝纤四项表达,并显著降低大鼠肝组织中的α-SMA、Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA和蛋白的相对表达量,以DOP高剂量组最为明显(P<0.05,P<0.01)。ARFI超声评价及相关性分析结果显示,给药后,与正常组比较,模型组肝组织的YM显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组的肝组织YM均显著下降(P<0.01);且YM与HA、LN、PC-Ⅲ及α-SMA、Notch1、Jagged1和Hes1蛋白均呈强正相关(r分别为0.754、0.734、0.801、0.885、0.896、0.757、0.800,P<0.01),仅与Col-Ⅳ呈中等正相关(r=0.688,P<0.01)。结论:DOP可通过下调Notch1/Jagged1/Hes1信号通路逆转HF。YM有利于DOP抗HF程度和疗效的评估。

关键词：铁皮石斛多糖肝纤维化 Notch信号通路超声评价杨氏模量

钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂抗足细胞损伤机制研究进展

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中国新药与临床杂志 2024年第9期43卷 646-650页

作者：环薇李潇洪文娟罗晓菲成家茂大理大学临床医学院云南大理671003 大理大学第一附属医院肾脏内科云南大理671013 大理大学基础医学院解剖教研室云南大理671003

慢性肾脏病是一个全球性的公共卫生问题,可进展为终末期肾脏病。足细胞损伤是多种肾小球疾病常见的病理类型,蛋白尿的发生可随足细胞数量的减少而增加。足细胞损伤的治疗仍受到病因复杂、免疫治疗副作用大、非免疫抑制靶向治疗起步晚等... 详细信息

慢性肾脏病是一个全球性的公共卫生问题,可进展为终末期肾脏病。足细胞损伤是多种肾小球疾病常见的病理类型,蛋白尿的发生可随足细胞数量的减少而增加。足细胞损伤的治疗仍受到病因复杂、免疫治疗副作用大、非免疫抑制靶向治疗起步晚等诸多限制。近年来,关于钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)在慢性肾脏病中的作用机制研究越来越广泛而深入,但以足细胞为靶点的研究报道仍较少。本文综述SGLT2i抗足细胞损伤机制,以期为SGLT2i在治疗足细胞损伤相关性疾病中的应用提供更充分的理论支持。

关键词：钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂肾功能衰竭足细胞慢性肾脏病

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丙泊酚和瑞马唑仑对前列腺癌细胞增殖的影响

临床麻醉学杂志 2024年第5期40卷 520-526页

作者：阳锦秋辛储林尹光芬李娟大理大学临床医学院云南省大理市671000 大理大学基础医学院云南省大理市671000 大理大学第一附属医院麻醉科

目的探讨丙泊酚和瑞马唑仑对前列腺癌细胞增殖的影响及相关机制。方法选择人前列腺癌细胞系DU145和PC3,培养至对数生长期。将细胞随机分为四组:对照组(C组)、丙泊酚组(P组)、瑞马唑仑组(R组)和丙泊酚复合瑞马唑仑组(PR组)。C组用完全培... 详细信息

目的探讨丙泊酚和瑞马唑仑对前列腺癌细胞增殖的影响及相关机制。方法选择人前列腺癌细胞系DU145和PC3,培养至对数生长期。将细胞随机分为四组:对照组(C组)、丙泊酚组(P组)、瑞马唑仑组(R组)和丙泊酚复合瑞马唑仑组(PR组)。C组用完全培养基培养,P组和R组分别在完全培养基中加入丙泊酚和瑞马唑仑的半数抑制浓度(IC_(50))培养(DU145和PC3细胞中丙泊酚的IC_(50)分别为120μg/ml和100μg/ml,瑞马唑仑的IC_(50)分别为500μmol/L和400μmol/L),PR组DU145细胞加入低浓度丙泊酚100μg/ml和瑞马唑仑400μmol/L共培养,PC3细胞加入低浓度丙泊酚80μg/ml和瑞马唑仑300μmol/L共培养。于培养后0、6、12、24、36 h采用CCK-8法测定待检测孔的吸光度。于培养后14 d采用平板克隆形成实验计算集落数量。采用qPCR法和Western blot法检测c-Myc和cyclin D1 mRNA表达量和蛋白含量。通过网络药理学分析找出丙泊酚和瑞马唑仑作用于前列腺癌细胞的关键靶基因,并采用qPCR法和Western blot法检测该靶基因的mRNA表达量和蛋白含量。结果与C组比较,DU145和PC3细胞P组、R组和PR组培养后36 h吸光度均明显降低、集落数量明显减少、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达量和蛋白含量明显降低(P<0.05)。与P组比较,DU145细胞R组和PR组培养后36 h吸光度、cyclin D1 mRNA表达量明显降低,R组c-Myc mRNA表达量明显升高,PR组集落数量明显减少、c-Myc蛋白含量明显降低(P<0.05);PC3细胞R组cyclin D1 mRNA表达量和蛋白含量明显降低,PR组培养后36 h吸光度明显降低、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达量和蛋白含量明显降低(P<0.05)。与R组比较,DU145和PC3细胞PR组集落数量明显减少,c-Myc mRNA表达量和蛋白含量明显降低(P<0.05)。网络药理学分析结果显示:丙泊酚、瑞马唑仑与前列腺癌的共同靶点为信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)。与C组比较,DU145和PC3细胞P组、R组和PR组STAT3 mRNA表达量和蛋白含量明显降低(P<0.05)。与P组比较,DU145细胞R组STAT3 mRNA表达量和蛋白含量明显升高,PR组STAT3蛋白含量明显升高(P<0.05);PC3细胞R组STAT3 mRNA表达量明显降低(P<0.05)。与R组比较,DU145细胞PR组STAT3蛋白含量明显降低(P<0.05)。结论丙泊酚和瑞马唑仑可以单独或协同抑制前列腺癌细胞增殖,降低前列腺癌细胞c-Myc和cyclin D1 mRNA表达量和蛋白含量,其机制可能与抑制HIF-1α通路中的STAT3靶点有关。

关键词：前列腺癌丙泊酚瑞马唑仑细胞增殖信号传导及转录激活蛋白3

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癫痫伴抑郁模型大鼠海马突触相关蛋白的表达

中华行为医学与脑科学杂志 2024年第1期33卷 9-14页

作者：邱红梅郭旺杨雪萍王盛雪褚宇豪李云大理大学临床医学院大理671000 大理大学第一附属医院神经内科大理671000

目的探讨癫痫伴抑郁模型大鼠海马突触相关蛋白突触素(synaptophysin,SYN)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)及生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP43)的表达情况。方法选取3月龄雌性清洁级SD大鼠进行实验,采用氯化锂-匹罗卡品建立癫痫大鼠模型,造模成功的癫痫模型大鼠根据是否伴发抑郁分为癫痫伴抑郁组(10只)和癫痫组(10只),另取体质量相匹配的10只大鼠作为抑郁组,10只作为正常组,其中抑郁组大鼠采用慢性不可预见性温和应激刺激结合孤养法建立抑郁模型。采用体质量、糖水偏爱实验和旷场实验评价大鼠的抑郁行为,免疫组织化学染色及Western blot检测大鼠海马组织SYN、PSD95、GAP43蛋白的表达。采用SPSS 17.0软件进行数据统计分析,行为学结果使用重复测量方差分析,蛋白表达数据多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验。结果4组大鼠体质量比较,时间和组别的交互作用显著(F=7.33,P0.05),但时间主效应和组别主效应均显著(垂直站立次数:F时间=4.35,P<0.05,F组间=25.64,P<0.01;水平运动格子数:F时间=12.75,P<0.01,F组间=21.37,P<0.01)。免疫组化结果显示,4组大鼠突触蛋白SYN、PSD95和GAP43阳性表达细胞数比较均差异有统计学意义(F=93.85,58.66,98.84,均P<0.05)。癫痫组SYN[(11.73±4.30)个]、PSD95[(24.47±7.58)个]、GAP43[(9.40±3.50)个]阳性细胞表达数均低于正常组[(51.00±15.39)个、(55.60±13.17)个、(29.53±4.05)个](均P<0.05)。癫痫伴抑郁组SYN[(5.80±3.53)个]、PSD95[(12.87±4.03)个]、GAP43[(5.33±3.50)个]阳性表达细胞数均低于抑郁组[(11.33±3.22)个、(48.13±12.69)个、(15.47±5.21)个](均P<0.05)。Western blot结果显示,4组大鼠突触蛋白SYN、PSD95、GAP43的表达均差异有统计学意义(F=13.19,9.38,16.80,均P<0.05)。癫痫组的SYN、PSD95和GAP43表达水平均低于正常组(均P<0.05)。癫痫伴抑郁组SYN、PSD95和GAP43表达水平均低于癫痫组和抑郁组(均P<0.05)。结论癫痫伴抑郁大鼠海马SYN、PSD95、GAP43蛋白的低表达可能与其发病机制有关。

关键词：癫痫抑郁海马突触可塑性大鼠