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青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析

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食品科学技术学报 2024年第2期42卷 109-119页

作者：于梦怡刘世林黄志远董文明范江平王雪峰云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分... 详细信息

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC 50值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白紧密结合,释放Nrf2进入细胞核,并激活一系列具有抗氧化和细胞保护作用的蛋白质表达,即激活Keap 1-Nrf2/ARE通路而发挥抗氧化作用。因此,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA可作为新型抗氧化剂,研究旨在为青刺果功能性肽的开发利用提供理论参考。

关键词：青刺果抗氧化肽二级结构 Keap 1-Nrf2/ARE 分子对接

微酸性电解水-超声波并行联合处理对鲜切生菜表面大肠杆菌杀菌效果的影响

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食品科学 2024年第11期45卷 210-216页

作者：高晴刘培红冉苒范江平和劲松云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201

为探明微酸性电解水(slightly acidic electrolyzed water,SAEW)与超声波(ultrasonic,US)并行联合处理对鲜切生菜表面大肠杆菌(Escherichia coli)的杀菌效应,本研究在不同料液比(1∶5、1∶10、1∶15(g/mL))和不同温度(25、35、45℃)条件下采用SAEW-US并行联合处理鲜切生菜,并用平板计数法测定生菜表面***菌落数,对菌落数的变化情况进行协同效应分析及动力学分析。采用流式细胞术和双层培养计数法对处理后的***进行亚致死损伤检测。结果表明,SAEW-US并行联合处理的杀灭***效力高于SAEW单一作用时的杀灭***效力,随着处理时间的延长、溶剂用量的增加和温度的提高,杀灭***效果显著增强。SAEW-US并行联合处理对于杀灭***具有“1+1>2”的协同效应,且杀菌过程遵循一级动力学模型。SAEW-US并行联合处理比单独SAEW处理杀灭***效果强,并且能降低***亚致死损伤数量。综上可知,SAEW-US并行联合处理鲜切生菜表面***存在协同效应,相关结果可为鲜食农产品的杀菌提供理论依据。

关键词：微酸性电解水超声波并行联合处理大肠杆菌杀菌动力学协同效应

不同季节云抗10号厌氧加工白茶的品质差异探究

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食品工业科技 2024年第3期45卷 107-113页

作者：马晨阳高畅田迪周小慧任玲李沅达李亚莉周红杰云南农业大学茶学院云南昆明650000

本研究以春、夏、秋三个季节云抗10号一芽二、三叶鲜叶为原料,经过厌氧处理后采用相同工艺加工成白茶,对其进行感官审评、理化成分测定和UHPLC-MS/MS高通量技术检测氨基酸组分含量,以探究三个季节的原料经厌氧处理后制成的白茶品质差异... 详细信息

本研究以春、夏、秋三个季节云抗10号一芽二、三叶鲜叶为原料,经过厌氧处理后采用相同工艺加工成白茶,对其进行感官审评、理化成分测定和UHPLC-MS/MS高通量技术检测氨基酸组分含量,以探究三个季节的原料经厌氧处理后制成的白茶品质差异。结果表明,三个季节的白茶品质差异明显,其中春季白茶干茶色泽翠绿,香气浓郁持久且高扬,并且有花蜜香、毫香、药香以及独特工艺香等多种香气类型,滋味浓鲜甜爽,汤色黄亮,叶底软嫩明亮,感官品质最好。春季白茶的氨基酸、可溶性糖、咖啡碱、水浸出物和黄酮类含量最高,夏季白茶的茶多酚含量最高。氨基酸成分中共检测到20种,其中显著性差异氨基酸有18种(P<0.05)。春季白茶γ-氨基丁酸(GABA)含量最高为1.22 mg/g,有8种氨基酸组分在春季白茶中含量最高;有3种在夏季白茶中含量最高;有6种在秋季白茶中含量最高。通过PCA主成分分析以及差异化合物筛选共得到15种区别三个季节白茶的差异化合物。综合感官审评结果、理化成分以及氨基酸组分来看,春季白茶与夏、秋两季白茶有明显差异,且春季白茶整体品质更优。

关键词： γ-氨基丁酸(GABA) 云抗10号品质差异白茶季节

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*** HPI通过NLRP3/caspase-1信号通路诱导细胞焦亡而促进肠道炎症

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中国病理生理杂志 2024年第10期40卷 1777-1787页

作者：张靖松单春兰王浩潘天灵沈珏肖金龙赵汝肖鹏高洪云南农业大学动物医学院云南昆明650201 云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201

目的:探究大肠埃希菌(Escherichia coli,***)强毒力岛(high-pathogenicity island,HPI)对细胞焦亡及肠道炎症的影响。方法:用含HPI的***株(HPI+)、HPI缺失的***株(△HPI)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分别处理昆明小鼠和IPEC-J2细胞(猪小肠上皮细胞)。测定小鼠肠道乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、IgA表达和分泌性IgA(secretory IgA,SIgA)含量;HE和TUNEL染色观察肠道损伤;RT-qPCR、免疫组织化学染色和Western blot检测小鼠肠组织和IPEC-J2细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/caspase-1信号通路关键调控点的表达;ELISA检测小鼠血清和IPEC-J2细胞培养上清液中白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18含量;共聚焦显微镜观察NLRP3与caspase-1的共定位。siRNA沉默IPEC-J2细胞的NLRP3,验证NLRP3在*** HPI感染中的关键调控功能。结果:相对于△HPI感染,*** HPI显著降低小鼠肠道SOD活性,增加IgA+B细胞,并促进LDH的释放和SIgA的分泌;ELISA、HE染色和TUNEL染色结果显示,*** HPI促进了小鼠肠道上皮细胞DNA断裂、组织损伤和炎症;Western blot结果显示,相对于△HPI,*** HPI感染使得小鼠肠道消皮素D的N端片段(gasdermin D N-terminal fragment,GSDMD-N)蛋白水平显著升高;RT-qPCR和免疫组织化学染色结果显示,*** HPI显著促进了小鼠肠道和IPEC-J2细胞中NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)、caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达,IL-1β和IL-18分泌增加;共聚焦显微镜观察发现,相对于△HPI感染,*** HPI显著促进了NLRP3炎症小体的组装,使得NLRP3与caspase-1发生共定位;此外,在NLRP3沉默的IPEC-J2细胞中观察到*** HPI诱导的细胞炎症、细胞损伤及NLRP3/caspase-1信号通路的激活被缓解。结论:HPI的存在增强了***的毒力水平,促进肠道炎症;NLRP3/caspase-1信号通路调控的细胞焦亡参与了*** HPI诱导的肠道损伤。

关键词：大肠埃希菌强毒力岛细胞焦亡 NLRP3/caspase-1信号通路

Cd胁迫下接种根瘤菌对紫花苜蓿氮代谢的影响

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农业资源与环境学报 2024年第1期41卷 222-229页

作者：孙文君吴基正李元云南农业大学动物科学技术学院昆明650202 云南农业大学资源与环境学院昆明650202

为探讨接种根瘤菌对Cd胁迫下紫花苜蓿氮代谢的影响,采用盆栽试验,以2种紫花苜蓿(维多利亚、WL525HQ)为植物材料,研究Cd(0 mg·kg^(-1)和50 mg·kg^(-1))处理土壤接种根瘤菌对两种紫花苜蓿的氮代谢关键酶活性和含氮化合物的影响。结果表... 详细信息

为探讨接种根瘤菌对Cd胁迫下紫花苜蓿氮代谢的影响,采用盆栽试验,以2种紫花苜蓿(维多利亚、WL525HQ)为植物材料,研究Cd(0 mg·kg^(-1)和50 mg·kg^(-1))处理土壤接种根瘤菌对两种紫花苜蓿的氮代谢关键酶活性和含氮化合物的影响。结果表明,Cd胁迫影响紫花苜蓿氮代谢,50 mg·kg^(-1)Cd胁迫对未接种根瘤菌紫花苜蓿WL525HQ地上部硝酸还原酶(NR)活性的影响最大,NR活性较0 mg·kg^(-1)Cd处理降低85.01%。0 mg·kg^(-1)Cd处理时,WL525HQ接种根瘤菌后地上部谷氨酸合成酶(GOGAT)活性较未接种组提高95.53%,维多利亚接种根瘤菌后地上部天冬酰胺合成酶(AS)活性增加33.30%。50 mg·kg^(-1)Cd胁迫时,与不接种根瘤菌相比,接种根瘤菌的WL525HQ地上部NR活性增幅最大(164.66%),接种根瘤菌后维多利亚地下部NR活性与未接种处理相比提高99.46%。50 mg·kg^(-1)Cd处理中,接种根瘤菌缓解了Cd胁迫对紫花苜蓿含氮物质积累的抑制,维多利亚、WL525HQ的可溶性蛋白含量分别比未接种组显著提高6.24%和5.82%,游离氨基酸含量增加16.10%和18.70%,维多利亚总氮含量显著提高9.48%。研究表明,接种根瘤菌可通过调节氮代谢关键酶活性来促进Cd胁迫下紫花苜蓿的氮素向蛋白质合成的方向转运积累,一定程度上缓解Cd对紫花苜蓿的伤害。

关键词：镉共生体系根瘤菌氮代谢

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基于书理学框架的元宇宙图书馆阅读推广机理研究与模式构建

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图书馆建设 2024年第4期 138-147页

作者：李巍刘博张杨罗盈王寒冰东北农业大学图书馆

书理学作为图书馆学的基本理论之一,研究轴心是“书—人—用”,三个原则是“书是基础”“人是关键”“用是目的”,符合用户核心诉求,能够促进图书馆阅读推广产生良性变化,在新技术的加持下可作为元宇宙图书馆阅读推广的基本指导理论。... 详细信息

书理学作为图书馆学的基本理论之一,研究轴心是“书—人—用”,三个原则是“书是基础”“人是关键”“用是目的”,符合用户核心诉求,能够促进图书馆阅读推广产生良性变化,在新技术的加持下可作为元宇宙图书馆阅读推广的基本指导理论。基于信息技术革新下的图书馆用户阅读需求变化分析、元宇宙环境下图书馆用户阅读行为画像分析,书理学框架下元宇宙图书馆阅读推广模式能够充分揭示“书”“人”“用”三种元素在对应场景中的实践应用情况,利于培养用户生成适用于智能技术下的阅读思维,在生理和心理上对阅读行为产生双重效应。

关键词：书理学元宇宙图书馆阅读推广机理服务模式

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核桃粕酶解物抑制脂质积累的机制

中国食品学报 2024年第7期24卷 193-200页

作者：白玉英解静彭麟杰毛家英李世俊田洋云南农业大学食品科学技术学院昆明650201 云南农业大学云南省生物大数据重点实验室昆明650201 云南农业大学食药同源资源开发与利用教育部工程中心昆明650201

利用分化的3T3-L1脂肪细胞和高脂饮食(HFD)诱导的肥胖C57BL/6小鼠模型,研究核桃粕酶解物的抗肥胖作用。采用油红O脂肪染色法检测脂肪细胞脂质积累情况,采用试剂盒检测细胞甘油三脂(TG)、甘油(Gly)和游离脂肪酸(FFA)含量,采用实时荧光定... 详细信息

利用分化的3T3-L1脂肪细胞和高脂饮食(HFD)诱导的肥胖C57BL/6小鼠模型,研究核桃粕酶解物的抗肥胖作用。采用油红O脂肪染色法检测脂肪细胞脂质积累情况,采用试剂盒检测细胞甘油三脂(TG)、甘油(Gly)和游离脂肪酸(FFA)含量,采用实时荧光定量PCR(PCR RT-qPCR)检测脂肪合成相关基因(mRNA)的表达水平。结果表明,核桃粕酶解物显著降低脂肪细胞内脂滴聚积,显著降低脂肪细胞内TG和FFA的含量,增加细胞上清液中Gly含量,同时核桃粕酶解物显著降低脂肪细胞中脂肪合成相关基因PPAR-γ和C/EBPαmRNA表达水平;当核桃粕酶解物的质量浓度达到50μg/mL时,TG和FFA分别降低了40.14%和39.50%,Gly水平增加了35.12%;PPAR-γ和C/EBPα的mRNA表达水平分别降低了31.42%和55.25%。此外,核桃粕酶解物显著降低HFD小鼠的体质量、脂肪组织质量和食物摄入量。研究表明,核桃粕酶解物可以抑制3T3-L1脂肪细胞脂质积累,其作用机制与抑制脂质合成相关基因表达相关。此外,其还具有抑制HFD脂质积累的作用。

关键词：核桃粕酶解物 3T3-L1脂肪细胞脂质积累高脂饮食小鼠

大学生图书馆求助回避行为的影响因素——基于地方高校的探索性案例研究

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图书馆学研究 2024年第5期 86-95页

作者：郭韫丽江西农业大学图书馆

探究大学生图书馆求助回避行为的影响因素,可为完善高校图书馆参考咨询服务、助力大学生提高学习效率提供有益参考。文章以一所地方高校图书馆为案例,采用扎根理论方法与定量分析方法相结合,借助ROSTCM6、NVivo12和SPSS23.0等软件分析... 详细信息

探究大学生图书馆求助回避行为的影响因素,可为完善高校图书馆参考咨询服务、助力大学生提高学习效率提供有益参考。文章以一所地方高校图书馆为案例,采用扎根理论方法与定量分析方法相结合,借助ROSTCM6、NVivo12和SPSS23.0等软件分析高校图书馆大学生用户的求助回避行为,得到大学生用户能力、大学生用户心理以及高校图书馆服务3个核心影响因素,发现不同性别、年级大学生的图书馆求助回避行为的影响因素存在差异性,并基于自我决定理论构建高校图书馆大学生用户求助回避行为的影响因素模型,最终从推广巡回参考咨询服务、优化新生入馆教育内容和细化馆员服务素养培训3个方面提出激发高校图书馆大学生用户求助行为的建议。

关键词：求助回避行为影响因素大学生高校图书馆

洱海流域不同类型有机肥替代化肥对稻鸭共生系统氨挥发和温室气体排放的影响

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中国生态农业学报(中英文) 2024年

作者：白采禾陈玮李长飞鄢孟琴续勇波云南农业大学资源与环境学院云南农业大学烟草学院

为揭示洱海流域稻鸭共生下有机肥替代化肥稻田氨挥发(NH3)和温室气体(N2O、CH4、CO2)的排放规律及影响因素，本研究通过以等氮量(180 kg·hm-2)投入，以‘云梗37’水稻、旱鸭为试验对象进行随机区组田间试验，共设置4个处理: 不施肥... 详细信息

为揭示洱海流域稻鸭共生下有机肥替代化肥稻田氨挥发(NH3)和温室气体(N2O、CH4、CO2)的排放规律及影响因素，本研究通过以等氮量(180 kg·hm-2)投入，以‘云梗37’水稻、旱鸭为试验对象进行随机区组田间试验，共设置4个处理: 不施肥不养鸭水稻单作（CK）、牛粪替代化肥+稻鸭共生、鸡粪替代化肥+稻鸭共生、单施化肥+稻鸭共生。每次施肥后监测稻田氨挥发和温室气体排放，同时测定土壤及田面水pH、Eh、NH4+-N、NO3--N含量。结果表明，稻田氨挥发主要集中在施肥后两周内，且氨挥发速率均在施肥后1～3 d内达峰;与单施化肥+稻鸭共生相比，有机肥替代化肥+稻鸭共生均能显著降低稻田氨挥发速率56.41%～87.05%，减少氨挥发累积量95.47%～98.65%和挥发损失96.00%～99.22%; 鸡粪和牛粪替代化肥+稻鸭共生处理间无显著差异。与单施化肥+稻鸭共生相比，有机肥替代化肥+稻鸭共生显著减少稻田56.71%～56.93% N2O排放通量和70.36%～70.52% N2O累积排放量，显著增加了稻田136.56%～182.34% CH4排放通量和61.96%～93.33% CH4累积排放量，增加了稻田5.77%～30.83% CO2排放通量。有机肥替代化肥+稻鸭共生与单施化肥+稻鸭共生的全球增温潜势和温室气体强度差异不显著。影响氨挥发的主要因素是田面水总氮、NH4+-N、NO3--N浓度，影响温室气体排放的主要因素是土壤pH、Eh、NH4+-N、NO3--N浓度和降雨量。稻鸭共生下，有机肥替代化肥能显著减少稻田氨挥发和N2O排放，鸡粪替代化肥显著提高水稻产量，是减排增效稳产的可持续发展措施。

关键词：稻鸭共生有机肥替代化肥氨挥发温室气体